多糖体外抗氧化作用及其影响因素

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多糖的化学修饰及抗氧化性变化的研究进展

多糖的化学修饰及抗氧化性变化的研究进展王世越，柯钦豪，周宏福，郑敏*（湖北科技学院，湖北咸宁437100）摘要：多糖是一类广泛存在于自然界的天然大分子物质，包含抗氧化性在内的多种生物活性。

多糖生物活性与其结构密切相关，通过改变多糖的结构和抗氧化性，对研究多糖的构效关系具有重要意义。

本文通过概述常用的化学修饰方法,综述了各种化学修饰的原理、操作方法以及对抗氧化性的影响，为多糖类药物的进一步研究提供依据。

关键词：多糖;化学修饰;抗氧化性中图分类号:0629.12文献标识码:A文章编号：2095-4646（2021）02-0170-04开放科学（资源服务）标识码（OSID）:DOI：10.16751/ki.20954646.2021.02.0170多糖是一类广泛存在于自然界的天然大分子物质,至今大量学者已通过实验证实多糖具有良好的抗氧化活性、抗肿瘤活性、抗病毒活性、免疫活性调节等生物活性⑴。

通过化学手段对天然多糖进行定向的结构修饰，可以增强多糖生物活性。

多糖的结构修饰可以通过化学、生物、物理方法进行实现，目前应用最广的为化学方法。

化学修饰可通过改变多糖的分子量以及取代基种类、位置、数目，以实现改变多糖的生物活性⑵。

目前，对多糖进行化学修饰的化学方法主要为与金属离子络合、硫酸化、磺酰化、乙酰化、烷基化、硒化、竣甲基化、磷酸化、苯甲酰化等。

本文将对以上方法的原理、操作及产物的抗氧化性等方面进行综述。

1与金属离子络合多糖的金属络合物是当前天然产物研究领域的热门方向，主要的研究热点集中于与钙、铁、铜等金属离子络合物研究。

多糖与金属离子络合的常见方法是将多糖调配为适当浓度溶液，加入NaOH溶液调节pH（制备多糖铁的配合物需在多糖溶液中先加入N^COs和柠檬酸钠），再加入提供相应配位离子的化合物,水浴加热数小时后即可得到相应的金属配合物⑶。

王元凤等⑶使用粗老绿茶多糖ATPS制得多糖的钙、铁络合物:ATPS-Ca（H）、ATPS-Fe（皿）,发现茶多糖与两种离子的配位方式不同和配位能力的大小不同:ATPS-Ca（H）清除自由基的能力相比于ATPS减弱,ATPS-Fe（皿）清除自由基的能力与ATPS相近。

几种植物水溶性多糖的体外抗氧化作用

多糖是一类天然高分子化合物，它是由醛糖或酮糖通过苷键连接在一起的多聚物，具有多种生理活性，对机体具有免疫调节作用，在药理活性方面，具有抗肿瘤、抗炎、降血糖等多种药理作用。本文主、鱼腥草（!"#$% 要针对平菇（,-"’#&(’. &.(#"%(’. ）、茶薪菇 -/ 0#&1)$" 1)1-+*6#%1"%. 这三种物 !&’((’)*+%）质的多糖的抗氧化作用进行了研究，为进一步开发和利用外源性自由基清除剂提供理论基础。
步骤进行超氧自由基清除率的测定，具体结果见表 -。表9 茶薪菇多糖对超氧自由基 &% ・的清除率
反应液体系中多糖浓度（"D 4 ./ ）清除率（>）
’22 ’+
)22 %2
+22 %+
C22 )+
G22 +2
由表 - 可以看出，茶薪菇水溶性多糖对超氧自由
9 ・的清除作用较明显，随着多糖浓度的增加，清基 &%
薪菇干样
粉碎备用。 ,01 乙醇、水杨酸、邻 +(/ 的烘箱中烘干，苯三酚、硫酸亚铁 2#3#、 !456)278 、析纯。
%’!
&%#%&
实验方法
#: 水溶性多糖的提取工艺 9&，
新鲜鱼腥草、茶
薪菇、平菇 ! 清洗 ! 干燥 ! 机械粉碎 ! 酶处理 ! 浸提!离心!上清液浓缩!醇析!离心!收集沉淀物 ! 水洗 ! 脱蛋白 ! 醇析 ! 干燥粗多糖

柚子皮多糖体外消化抗氧化活性的变化规律

柚子皮中多糖得率为8.26%,江飞凤等网采用超声-微
1.4柚子皮多糖得率测定
波协同提取柚子皮多糖，在液料比39：l（mL/g）,微波功
多糖得率/%=m/mxl00
（1）
率400 W,提取液pH 9.0,提取时间34 min的条件下制
式中:mi为柚子皮多糖的干重,g; m为柚子皮干
备得到的多糖得率为10.41%,张荔菲等冋采用超声辅
重,g。
助酶法，在加酶量1.73%、酶解时间1.19 h和超声时间
1.5基本营养成分分析
29.17 min的单因素试验基础上采用响应面优化试验
蛋白质测定:GB/T 5009.3—2016«品安全国家标
制备得到的柚子皮多糖的平均提取率为82.4%，得率
准食品中蛋白质的测定》;脂肪测定:GB/T 5009.9—2016
后于517 nm处测吸光度值问。
DPPH•清除率见公式⑵。
基金项目:四川省科技计划项目(2019YFS0095) 作者简介:万刘静(1982-),女(汉)，讲师，硕士，研究方向:天然药物、药物制剂。
应用技术
貪品研究与开发
2021年6月第42卷第"期
83 -—
柚子是芸香科乔木，具有清肠、助消化、利便、润
素酶（400 U/mg）、果胶酶（500 U/mg）:阿拉丁试剂有限
1.3方法柚子皮预处理（冻干后粉碎过80目，取筛下物）-
超声处理一离心（6 500 r/min离心8min）―浓缩一＞■醇
提取柚子皮多糖,结果表明在提取时间80 min、酶用量 2.0%、提取温度60 r.pH值为4.0的最佳工艺条件下
沉（4倍体积的无水乙醇进行醇沉过夜）-取醇沉物冻干后称重即为柚子皮多糖质量。

海带多糖的分离纯化及体外抗氧化作用的研究

ＡｓａｔａｉａｉＪｐｎｃｏｓｃｈｒｅｉｓｐｒｔｎｕｉｅｙｇ】ｈｏｔｒｐｙｉｔｅｅｐｒｅｔｎｄｗｉｂｔｃ：ＬｍｎｒｏｉＰｌａｃａｄｅａａｄａｄｐｒｄｂｅｃｒｏａｈｘｅｍｎ，ａｈｃｉｒａａａｙｉｓｅｉｆｍａｇｎｈｉｈｓ
Ｓｅｔｓｏｙ（）ｏＣｎ２ｈｎｏｉａｔｒｐｒｅｅｕｉｙｓｇｙｒｙｆｅａｉｌｙｔｐｃｏｃｐＩｒＲｆ１ｄＣ，ｔａｔｘｄｎｐｏｅｉｏｔｍｉｓｄｅｂｉｄｏｌｒｄｃｓｍ，ｓｐｒｉｅａｅｉｔｓｆｈｓｔｄｕｎｈｘｅｒａｓｅｕｅｏｄｘ
ａｑｉｄＣｎ２ｔｅｌｃｌｉｈｆｔｅｉｔｓｅ．ｏｒｒｒｎｆｒｉｆｒｄＳｅｔｓｏｙｉｓｄｔｎｙｅｉｆｒｄｃｕｒｆｄＣ，ｈｎｍｏｅｕａｗｅｇｔｍｔｄＦｕｅａｓｏｍ— ｎｒｅｐｃｒｃｐｕｅｏａａｚｎｒｅｅａｒｏｈｓｅｉＴａｏｓｌａ
海带多糖的分离纯化及体外抗氧化作用的研究
贾彦明，闵伟红
（吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林长春１０）３１８１摘要：采用凝胶层析法对海带粗多糖进行分离纯化，获得Ｃ和Ｃ两个组分多糖，并对２组多糖进行相对分子质量的。：测定，采用傅立叶变换近红外线光谱仪对２组分多糖进行红外光谱分析，采用羟基自由基体系，超氧阴离子自由基体系，二苯代苦味肼基自由基体系，对２组分多糖进行抗氧化性能研究。结果表明，经过凝胶层析分离出来２组海带多糖Ｃ和Ｃ，其相对分子质量分别为５．０Ｄ５×１ａ和２．０ａ７×１Ｄ；红外光谱分析２组分多糖都有明显的多糖特征４峰，并且多糖Ｃ糖链中可能含有酮、醛基团，抗氧化试验表明海带多糖Ｃ组分对羟基自由基、超氧阴离子自由基、。二苯代苦味肼基自由基均有良好的清除作用，海带多糖Ｃ组分无抗氧化能力。关键词：海带；多糖；抗氧化性

关白附多糖体外抗氧化性研究

９．０８８ａｄ１０，ｒｓｃｉｅｙｎ０ｅｐｅｔｖｌ．
Ｋｅｒｓ：Ａｃｎｔｍｏｅｕｍｐｌｓｃｈａｉｅ；ａｉｘｉａｉｎｆｅｔａｉａｙｗｏｄｏｉｕｃｒａｎｏｙａｃｒｄｓｎｔｏｄｔｏｅｆｃ；ｒｄｃｌ
ＡｂｔａｔＰｌｓｃｈｒｄｓｗｅｅｅｔａｔｄｆｏＡｃｎｔｍｏｅｎｍｙｍｅｈｄｏｏｌｇｗａｅｎｓｒｃ：ｏｙａｃａｉｅｒｘｒｃｅｒｍｏｉｕｃｒａｕｂｔｏｆｉｎｔｒａｄｂｉｅｈｎｌｄｐｓｔｎＴｈｎｉｘｄｔｎｗａｅｓｒｄｂｈｅｆｏｉａｉｎｍｅｈｄｏｙｏａｌｌｔａｏｅｏｉｏ．ｉｅａｔｏｉａｉｓｍａｕｅｙｔｅｓｌｘｄｔｏｔｏｆｐｒｇｌ，－ｏｏ
中图分类号：Ｓ２１２Ｔ０．文献标识码：Ａ
ＳｕｎｔｅＡｎｔｏｉａｉｅＥｆｅｔｏｏｉｕｃｒａｕｍｌｓｃｈａｉｅｔｄｙｏｈｉｘｄｔｖｆｃｆＡｃｎｔｍｏｅｎＰ０ｙａｃｒｄｓ
ＧＵＯｉｇｊｎＺｎ，ＺＪｎ－ｉｇ，ＨＩＲｕＨＡＮＧ，ＷＡＮＧ，ＴＥＮａＤｉＮＧｉｒｎＬ —ｏｇ
（ｏｌｇｆＬｉｃｅｃ，ＪｌｉｅｓｔＣｌｅｏｆＳｉｎｅｉｎＵｎｖｒｉｅｅｉｙ，Ｃｈｎｅｕ３０３ｈｎ）ａｇｈｎ１０２，Ｃｉａ

3种脱蛋白方法对虎斑乌贼肌肉多糖体外抗氧化活性的影响

3种脱蛋白方法对虎斑乌贼肌肉多糖体外抗氧化活性的影响孙玉林;叶金敏;张银;梁木清;林晓銮;董永清;陈道海【摘要】[目的]比较3种不同脱蛋白方法对虎斑乌贼肌肉多糖体外抗氧化活性的影响.[方法]采用Sevag法、三氯乙酸法和等电点法对经过热水浸提的虎斑乌贼肌肉多糖进行脱蛋白,同时对脱蛋白多糖的体外抗氧化活性进行研究.[结果]3种不同脱蛋白方法得到的多糖均具有一定的抗氧化能力.当多糖浓度为5 mg/mL时,Sevag 法、三氯乙酸法和等电点法得到的脱蛋白多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率分别为87.05％、42.35％和38.54％,相应的IC50值分别为1.96 mg/mL、11.81 mg/mL和9.84 mg/mL;对羟基自由基(·OH)清除率分别为93.67％、70.80％和68.75％,相应的IC50值分别为0.67 mg/mL、1.37 mg/mL 和2.72 mg/mL;对超氧阴离子(O-2)清除率分别为72.33％、62.42％和53.33％,相应的IC50值分别为0.15 mg/mL、1.56 mg/mL和3.81 mg/mL.多糖还原力大小分别为0.183,0.160和0.144.[结论]3种脱蛋白方法所得虎斑乌贼肌肉多糖抗氧化活性大小依次为Sevag法>三氯乙酸法>等电点法.【期刊名称】《广西科学院学报》【年(卷),期】2017(033)003【总页数】7页(P171-177)【关键词】虎斑乌贼;肌肉;脱蛋白;多糖;抗氧化活性【作者】孙玉林;叶金敏;张银;梁木清;林晓銮;董永清;陈道海【作者单位】岭南师范学院生命科学与技术学院,广东湛江 524048;环北部湾海洋药用动物利用与保护研究所,广东湛江 524048;岭南师范学院生命科学与技术学院,广东湛江 524048;岭南师范学院生命科学与技术学院,广东湛江 524048;岭南师范学院生命科学与技术学院,广东湛江 524048;岭南师范学院生命科学与技术学院,广东湛江 524048;岭南师范学院生命科学与技术学院,广东湛江 524048;岭南师范学院生命科学与技术学院,广东湛江 524048;环北部湾海洋药用动物利用与保护研究所,广东湛江 524048【正文语种】中文【中图分类】TS201.2【研究意义】虎斑乌贼(Sepiapharaonis)属于软体动物门(Mollusca)，头足纲(Cephalopoda)鞘亚纲(Coleoidea)，乌贼目(Sepiida)，乌贼科(Sepiidae)，乌贼属(Sepia)，分布于菲律宾群岛，马来群岛，大洋洲东部、北部和西部，印度近海，红海及我国的南海近海海域[1]。

油菜花粉多糖不同级分体外抗氧化作用比较

in
油菜花粉粗多糖：将油菜花粉 ( 购自福建农林大学蜂学
未损伤 ) 以蒸馏水补充体积
，
37 ℃
保温
60
，
m
后以
，
院 ) 超微粉碎破壁后以水提醇沉法提取三氯乙酸法除蛋白
，
，
磷酸盐缓冲液为参比分别测
A
} 女☆
。
5 36
，
m
L
rim
，
邻二氮菲
、
无水乙醇邻苯三酚三羟甲基
、、
、
37 ℃
保温
，
60
m
in
后以同浓度的多糖液作参比测
。
536
氨基甲烷 ( T r is )
Na H 2 P 0
4
2H20
a
，
Na
2
H P O。
。
12 H 2 0
，
以上
处吸光度即得 A 样
重复 3 次以下式计算
，
、
“
全能营养库
”
的美称
…
。
花粉还具有增
。
黄色
收集的各级分溶液用
95 ％乙
醇沉淀
，
再依次用无水
。
强机体免疫力提高机体抗氧化功能等药理作用是花粉中
一一
花粉多糖
乙醇丙酮和无水乙醚脱水洗涤后低温烘干备用
、
，
种重要的生物活性物质是从花粉中提取分离的

219401794_沙棘果多糖的理化特征及其体外抗氧化活性

赵志强，朱叙丞，冯真颖，等. 沙棘果多糖的理化特征及其体外抗氧化活性[J]. 食品工业科技，2023，44（13）：30−38. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022070288ZHAO Zhiqiang, ZHU Xucheng, FENG Zhenying, et al. Physicochemical Characteristic and Antioxidant Activity in Vitro of Seabuckthorn Fruit Polysaccharide[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(13): 30−38. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022070288· 研究与探讨 ·沙棘果多糖的理化特征及其体外抗氧化活性赵志强1，朱叙丞1，冯真颖1，陈海婷1，余佳乐1，闫　笛1，宋松泉2，申迎宾1, *，唐翠芳2,*（1.广州大学生命科学学院，广东广州 510006；2.湘南学院南岭现代种业研究院，湖南郴州 423043）摘　要：本研究通过热水提取法从沙棘果实中提取并初步纯化得到一种精制多糖（Seabuckthorn Berry Polysaccha-ride ，SBP ），对其单糖组成、分子量组成、微观表征、热稳定性、流变学特性等理化特征进行表征，并采用四种体外模型评价其抗氧化活性。

结果表明：该多糖的主要组分是一种大分子的酸性多糖，分子量为37.82×104 Da ，由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、葡萄糖醛酸等单糖构成，其摩尔比为0.244:0.098:0.265:0.075:0.091:0.081:0.103，含有α、β型糖苷键以及羰基、羧基、醛基、羟基等官能团，具有三螺旋结构，微观结构呈片状。

山药多糖的体外抗氧化活性及对正常小鼠的免疫增强作用

山药多糖的体外抗氧化活性及对正常小鼠的免疫增强作用许效群;刘志芳;霍乃蕊;赵媛;田夏;雷婷婷【摘要】In vitro anti - oxidation capacity and immunomodulatory function in normal mice of yam polysaccha-ride were investigated in this study. The results demonstrate that the reducing power was enhanced with the increase ofrnthe concentration. The scavenging rate for DPPH · , · OH and O2- were up to 92. 73% ,84. 72% and 89. 14% respectively and exhibited a linear relationship. Compared with normal mice group, both the medium and high dose group significantly increased the spleen index, the phagocytic index and serum hemolytic IgM level, and high dose groups were especially higher (P < 0. 01). the thickness of foot pad of high dose group were also significantly increased ( P < 0.01) during the induced delayed type hypersensitivity. Therefore yam polysaccharides showed good anti - oxidation and immuno - enhancing capacity, this provides a new source of safe and natural antioxidant and immunomodulatory agents for future food production and also facilitates further comprehensive exploitation and application of Chinese Yam.%从提取淀粉后的山药汁液干粉中提取多糖,探讨其体外抗氧化活性和对正常小鼠的免疫调节活性.结果表明山药多糖的还原力随着浓度的提高显著增强,对DPPH·、·OH及O2具有较强的清除能力,并呈一定的剂量关系,清除率分别可达到92.73％、84.72％、89.14％;与正常对照组小鼠相比,中、高剂量组的免疫脏器指数和吞噬细胞的吞噬指数、血清溶血素水平均显著提高,其中高剂量组均达到极显著水平,高剂量组还极显著增加迟发型变态反应引起的小鼠足跖厚度.因此山药多糖具有较好的抗氧化性和免疫增强活性,为安全天然食品抗氧化剂、免疫增强剂的开发提供了新来源,并为山药的综合开发利用奠定了基础.【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2012(027)007【总页数】6页(P42-46,51)【关键词】山药多糖;抗氧化;免疫增强【作者】许效群;刘志芳;霍乃蕊;赵媛;田夏;雷婷婷【作者单位】山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801;山西农业大学附属医院,太谷030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801【正文语种】中文【中图分类】R151.1山药(Dioscorea opposite Thunb)为薯蓣科多年生宿根蔓生植物薯蓣的块茎，是我国传统的药食同源食物之一［1］。

甘蔗叶片多糖的提取及体外抗氧化作用

摘
要：应用正交试验优选甘蔗叶片多糖的热水浸提工艺，并进行叶片多糖体外抗氧化作用研究。结果显示最优条件为浸提温度
８Ｏ℃ ，料液比１４，：０提取４次，每次浸提３ｈ在ｌ月甘蔗生长后期，；１甘蔗叶片有较高的多糖含量；甘蔗叶片多糖具有较强清除・
ＯＨ的能力，・对ＯＨ致ＤＡ损伤具有良好的保护作用。Ｎ
关键词：甘蔗多糖；提取；羟基自由基；抗氧化作用
中图分类号：５６１￥６．文献标识码：Ａ
ＥｘｒｃｉｎａｄＡｎｉｘｄｎｔｉｙｏｏｓｃｈｒｄｒｍｕａｃｎａｅｔａｔｎｔｏｉａｔＡｃｉｔｆＰｌｙａｃａｉｅｆｏＳｇｒａｅＬｅｖｓｏｖ
多糖广泛存在于生物体内，它不仅作为细胞的结构和能量物质，而且参与了细胞的识别和信号转导过程，控着生物的代谢、长和发育 … 。目前调生
国内外多糖研究主要侧重在中药方面，包括多糖的结构分析和药理作用】已有研究表明多糖可以。
ｐｏｓｃｈｒｄｎｖｔｏＷａｔｄｅ．Ｔｅｏｔｍｏｄｔｎｅｅ：ｅｔａｔｎｔｍｐｒｔｒｆ８ ℃ ，ｔｅｓｌｎｏｖｎｔｎｆ１４，ｌｙａｃａｉｅｉｉＳｓｕｉｒｄｈｐｉｍｕｃｎｉｉｓｗｒｏｘｒｃｏｅｅａｕｅｏ０ｉｈｏｉａｄｓｌｅｔｒｉｓｏ：ｄａｏ０ｅｔｃｉｎｏｕｉｓｘｒｃｉｎｔｍｅｏｈＡｔｔｅｌｔｒｇｏｈｓｇｆｓｇｒａｅｉｖｍｂｒｈｏｔｎｕａｃｅｐｌｓｃｈｒｄｘｒｔｆｆｒｔａｏｏｍｅ，ｅｔｔｉｆ３．ｈａｅｒｗｔｔｅｏｕａｃｎｎＮｏｅｅ，ｔｅｃｎｅｔｏｓｇｒａｏｙａｃａｉｅａｏａｆｎＷａｉｈｒｎｈｃｖｎｉｇｅｅｔｎ・ＯＨｄｉｈｂｔｎＳｈｇｅ，ａｄｔｅｓａｅｇｎｆｃｏｎａｎｉｉｉｇＤＮＡｄｍａｅｇｎｒｔｙ・ＯＨ．ｗｅｅｓｒｎｅ．ａｇｅｅａｅｂｄｒｔｏｇｒＫｅｙｗｏｒｓ：ｕａｃｅｐｌｓｅｈｒｄｄＳｇｒａｏｙａｃａｉｅ；Ｅｘｒｃｉｎ；・ＯＨ；Ａｎｉｏｉａｉｎｎｔａｔｏｔｘｄｔ — ｏ

酵母多糖对蛋鸡机体抗氧化功能的影响

酵母多糖对蛋鸡机体抗氧化功能的影响摘要：本文综述了酵母多糖对蛋鸡机体抗氧化功能的影响。

抗氧化功能是维持蛋鸡健康和生产性能的重要因素，而酵母多糖作为一种天然的抗氧化剂，具有显著的潜力。

本文总结了酵母多糖在提高蛋鸡体内抗氧化酶活性、直接抗氧化作用、保护细胞膜和DNA免受氧化损伤以及调节抗氧化基因表达等方面的作用。

然而，酵母多糖的抗氧化功能受多种因素的影响，包括其来源、化学结构、浓度和剂量、溶解性和稳定性等。

因此，在应用酵母多糖时，需要充分考虑这些因素以实现最佳的抗氧化效果。

本文的研究结果对于酵母多糖在蛋鸡养殖中的应用具有重要的指导意义。

关键词：酵母多糖，蛋鸡，抗氧化功能，抗氧化酶，自由基引言：蛋鸡的健康和生产性能受到氧化应激的影响。

氧化应激是由自由基和其他活性氧物质的过度产生导致的一种状况，会导致细胞膜的氧化损伤、DNA的突变以及酶和其他蛋白质的失活。

为了对抗氧化应激，蛋鸡内部拥有一套复杂而精确的抗氧化防御系统，其中包括抗氧化酶和抗氧化分子。

然而，由于环境压力和生理状态的变化，蛋鸡的抗氧化能力可能会受到一定程度的削弱。

因此，寻找一种有效的抗氧化剂来增强蛋鸡的抗氧化功能具有重要意义。

1酵母多糖的概述酵母多糖是一种天然的多糖类物质，主要由酵母菌类合成。

它是由多个糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物，具有复杂的结构和多样的功能。

酵母多糖在自然界广泛存在于酵母菌、真菌、植物等生物体中，并且可以通过发酵、提取等技术手段获取。

酵母多糖具有许多独特的特性和生物活性，使其在医学、食品、养殖等领域得到广泛应用。

首先，酵母多糖具有良好的生物相容性和生物可降解性，不会对机体产生不良反应。

其次，酵母多糖具有多样的生物活性，包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、抗炎等作用。

这些作用使得酵母多糖成为一种有潜力的功能性物质。

酵母多糖还具有一定的营养价值。

它可以作为一种低热量的碳水化合物供能，为生物体提供能量需求。

此外，酵母多糖还富含多种微量元素和维生素，具有促进营养物质吸收和代谢的作用。

虎奶菇水溶和碱溶多糖的超滤纯化及其体外抗氧化活性研究

虎奶菇水溶和碱溶多糖的超滤纯化及其体外抗氧化活性研究摘要：虎奶菇是一种可药食两用的食用菌种，其活性多糖具有提高机体免疫力等多种生物活性。

通过超滤技术分别对水提取和碱提取得到的虎奶菇多糖进行了除杂和分子量分级，得到纯化的虎奶菇多糖产品。

对水溶和碱溶两种多糖进行了初步的体外抗氧化活性评价，发现碱提虎奶菇多糖的超氧自由基清除活性好于水提多糖，两种多糖的羟基自由基清除活性能力相当，且虎奶菇多糖的抗氧化活性呈现一定的浓度依赖性。

关键词：虎奶菇多糖；超滤纯化；抗氧化活性基金项目：江西省重点研发计划项目（20203BBFL63061，20192BBFL60029）；江西省科学院包干制项目（2021YSBG22014，2022YSBZ22026）。

虎奶菇（pleurotus tuber – regium(Fr.)Sing），又名虎奶菌，虎乳菌等，是担子菌亚门、侧耳科、侧耳属中的一种大型真菌，其成熟菌核比较大，因此又名菌核侧耳。

虎奶菇喜温热环境，在我国南方、非洲、东南亚等地有野生资源。

虎奶菇中具有丰富的蛋白质、多糖、氨基酸、多酚、皂苷等营养和活性成分[1-2]。

研究发现虎奶菇具有治疗哮喘、提高免疫力、降血糖等药理活性，而其中多糖是虎奶菇中一种重要的活性成分。

对虎奶菇多糖的提取、纯化和活性研究有一定的文献报道。

本文主要研究了虎奶菇水溶性和碱溶性多糖的提取和超滤纯化工艺，并对两种虎奶菇多糖的抗氧化活性进行了初步比较。

1材料与仪器虎奶菇菌核（抚州市临川金山生物科技有限公司）；氢氧化钠、乙醇、苯酚、浓硫酸、葡萄糖、双氧水、硫酸亚铁、水杨酸等，均为国产分析纯试剂。

氯化硝基四氮唑蓝(NBT)，还原型辅酶I二钠(β-NADH)，吩嗪硫酸甲酯（PMS），均为国产生物技术级试剂。

紫外可见分光光度计（TU-1810型，北京普析通用仪器有限责任公司），有机超滤膜元件及装置（济南博纳生物技术有限公司）。

其它设备为实验室常用设备。

2方法2.1虎奶菇水溶性多糖提取液的制备虎奶菇首先用中药粉碎机粉碎成80目以上的粉末，然后用85％的乙醇进行脱脂处理。

黄秋葵多糖的体外抗氧化活性研究

黄秋葵多糖的体外抗氧化活性研究作者：张涛来源：《绿色科技》2017年第06期摘要：以遵义黄秋葵为对象，制备了黄秋葵多糖，研究了其多糖成分的体外抗氧化活性。

结果表明：黄秋葵多糖对DPPH、羟基自由基（·OH）和超氧负离子（O-2·）均具有良好的清除作用，与Fe2+有较强的螯合能力，并且黄秋葵多糖的抗氧化作用呈现一定的浓度依赖性。

关键词：黄秋葵；多糖；抗氧化活性中图分类号：R285文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2017）6-0194-021 引言黄秋葵（Abelmoschus esculentus Moench）属锦葵科秋葵属，主要分布于热带、亚热带及温带，在我国贵州、湖北、湖南等地栽培面积较广，有蔬菜王的称呼，经济及食用价值较高[1，2]。

现代药理学研究表明，黄秋葵在养胃、抗疲劳、抗肿瘤、保护心血管及免疫调节等方面具有较好的活性[3～5]。

多糖作为植物中的一种重要生物大分子，具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、抗病毒等多种功能[6～8]，本文联合利用4种方法对黄秋葵多糖的体外抗氧化作用进行了研究，研究结果将为黄秋葵的综合开发利用提供理论支撑。

2 材料与方法2.1 材料和试剂从市场上采购黄秋葵，烘干至恒重；抗坏血酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠等常规化学试剂购于北京化工厂；辣根过氧化物酶（HRPase）、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、氯化硝基四氮唑（NBT）等购于Sigma。

2.2 仪器与设备可见分光光度计（723型），上海光谱；电子分析天平（SL3001N），上海民桥；冷冻干燥器，北京博医康；电热恒温水浴锅，北京泰泽瑞达。

2.3 黄秋葵多糖的制备称取干燥的黄秋葵500 g，置于装有8 L蒸馏水的容器中，100 ℃煮提4 h，过滤；重复煮提一次，过滤，合并二次的滤液。

于65 ℃将多糖提取液浓缩至约700 mL，4500 r/min离心15min，收集上清液并加入4倍体积的95%乙醇，静置过夜。

榆树皮粗多糖组成及体外抗氧化作用

榆树皮粗多糖组成及体外抗氧化作用杨明非【摘要】Cnide polysaccharides extracted from the elm bark with water were identified by UV and IR spectra analysis. GC analysis shows that the crude polysaccharides are composed of arabinose, xylose, mannose, galactose, glucose and mannitol. The concentration of polysaccharides is between 0.6-1. 5 g ? L-1 by the Prussian blue method. The reduction capacity of the polysaccharides is 50% -70% higher than that of the contrast material Vc. Smirnoff method confirms that when the concentra tion of polysaccharide is greater than 0. 211 0 g· L-1 , the hydroxyl radical scavenging capacity is significant, but it is significantly worse than that of Vc. The polysaccharides have some antioxidant properties, which is proved by the pyro-gallol autoxidation method.%以水提取榆树皮中的粗多糖,经紫外和红外光谱分析证明,此提取物为粗多糖.气谱分析结果表明,粗多糖由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖和甘露醇组成.普鲁士蓝法测试粗多糖质量浓度为0.6～1.5g·L-1,其还原能力高出阳性对照物Vc的50％～70％.Smimoff法测试榆树粗多糖对羟自由基有清除能力,当多糖质量浓度大于0.2110g·L-1时,对羟自由基有一定的清除效果,但清除率明显小于Vc.邻苯三酚自氧化法分析粗多糖,证明其具有一定抗氧化性能.【期刊名称】《东北林业大学学报》【年(卷),期】2011(039)009【总页数】3页(P121-122,125)【关键词】榆树皮;粗多糖;羟自由基;超氧自由基【作者】杨明非【作者单位】东北林业大学,哈尔滨,150040【正文语种】中文【中图分类】S972.12;Q539多糖是一类天然大分子化合物，其作为药物始于1943年。

短序落葵薯多糖含量测定及体外抗氧化活性研究

江西农业学报
２１，３１）６６０１２（０：５～７
ＡｔｇｉｕｕａｉｎｘｃａＡｒｃｈｒｅＪａｇｉ
短序落葵薯多糖含量测定及体外抗氧化活性研究
赵金莉，张亚如，娟宋
（河北大学生命科学学院，河北保定０１０）７０２
ｍ加如 ∞ 如
２５回收率的测定．
多糖加样回收率的测定结果见表
驺钙
４。取相同量的样品，加入５种不同量的标准品，经过重
复性实验测定多糖的含量，测定平均回收率为１．２，００％０
ＲＤ：．７，Ｓ０９％表明该方法测定多糖含量的结果准确。
ｍｅｕｅｎｓ１００％ｗｔｓａｒｍｅｔ０．２ｗａｉｈ兄０９％（．７ｎ＝５）Ｔｅｃｎｅｔｏｏｙａｃａｉｅｉｈｕｅｆｒｄｒｃ，．ｈｏｔｎｐｌｓｃｈｒｎｔｅｔｂｒｏｅｅａｓｎ娜ｗｓ１．％ｆｄＡｎａ２８
ＺＨＡ０Ｊｎ—ｌ．ＺｉｉＨＡＮＧＹａ—ｒｕ，ＳＯＮＧＪａｕｎ
（ｏｅｅｆｉｃｎｅ，ＨｂｉｎｅｓｙＢｏｉｇ０１０，ｈａＣｌｇｆＳｉｃｓｅｅＵｉｒｔ，ａｄｎ７０２Ｃｉ）ｌｏＬｅｅｖｉｎ
ＳｕｙｏｎｔｎｔＤｅｅｍｉａｉｎａｄｔｄｎＣｏｅｔｒｎｔｏｎＡｎｔｏｉｎｔｉｙｉｖｔｏｏｉｘｄａｔＡｃｉｔｎｉｒｆｖ
ＰｏｙａｃｒｄｏｕｃｄｂｒｄｅａｓａｄｅｓｌｓｃｈａｉｅＰｒｄｅｙＡｎｅｒｃｎｎ

冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性

冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性闫景坤;马海乐;吴建勇;崔海英【摘要】研究了人工培养冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性。

通过体外抗氧化模型和分光光度法研究了5种胞外多糖级分在不同体系中对超氧阴离子和羟自由基的清除作用、Trolox等价抗氧化能力。

结果表明：胞外多糖各级分均能较好的清除O2-.、.OH和ABTS＋.自由基,且级分EPS-1A-F3的作用效果强于其他各级分,进一步揭示其在膳食和理疗上具有潜在的应用价值。

%The anti-oxidative activity of exopolysacchrides(EPS) isolated from the cultured Cordyceps sinensis in vitro was studied.In vitro trials of antioxidant activities and spectrophotometry were chosen to evaluate the free-radical scavenging activity(O-2·,·OH) and Trolox equivalent antioxida nt capacity(TEAC) of five EPS fractions in different systems.The results revealed that these EPS fractions could moderately scavenge O-2·,·OH,ABTS+· radicals.Among them,EPS-1A-F3 had stronger effects on free radicals than others.It has a great potential to be an effective antioxiant for dietary and therapeutic applications.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2012(038)006【总页数】4页(P110-113)【关键词】冬虫夏草;胞外多糖;自由基;抗氧化活性【作者】闫景坤;马海乐;吴建勇;崔海英【作者单位】江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013;江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013;香港理工大学应用生物与化学科技学系,香港;江苏大学食品与生物工程学院,江苏镇江212013【正文语种】中文【中图分类】TS202.3越来越多的事实表明，肿瘤的发生、辐射致癌、心脑血管疾病、药物中毒、人体衰老等过程都涉及到自由基和活性氧。

硕士论文_糖的分离纯化、结构鉴定及体外抗氧化活性研究

安徽大学硕士学位论文糖的分离纯化、结构鉴定及体外抗氧化活性研究姓名：胡婷婷申请学位级别：硕士专业：生物化学与分子生物学指导教师：王述声2010-04中文摘要本文以海藻裙带菜为原料、对裙带菜硫酸多糖的提取、分离纯化、理化性质、结构分析、体外抗氧化活性等方面进行了较为系统的研究，结果如下：1. 本研究采用酸提醇沉的方法进行提取，先用稀盐酸(pH=2)浸泡，再在60℃中浸提6h, 提取两次，加入90%乙醇，静置过夜，真空干燥，得裙带菜粗多糖。

此条件下粗多糖得率为2.4%。

粗多糖经链酶蛋白酶及Sevag法脱蛋白后，蛋白脱除率88.5%, 脱蛋白后的蛋白含量仅为1.51%。

然后经DEAE-Sephadex A-25离子交换柱分离，用0-2M NaCl溶液进行连续梯度洗脱，分部收集，苯酚-硫酸检测多糖含量，通过该实验来确定适宜的NaCl浓度，再用阶段洗脱方法进行大量制备样品，得到裙带菜硫酸多糖两种组分S1、S2，而后再经Superdex-200、Sephacryl S-300柱层析两种方法进行纯度鉴定，苯酚硫酸法跟踪检测，所得峰形单一、狭窄对称，说明S1、S2已是均一化的多糖。

2. 裙带菜硫酸多糖（S1、S2）的性质研究。

通过苯酚硫酸法、硫酸咔唑法、考马斯亮兰法、凝胶过滤法、玫瑰红酸钠等方法对其理化性质进行分析测定。

结果如下：总糖含量分别为40.54%、33.50%，糖醛酸含量为12.97%、9.98%，蛋白含量为1.39%、1.41%，分子量为150000、94620，硫酸根含量高达34.29%、33.99%，是高度硫酸化的多糖。

本研究采用溶剂解离的方法对其做了脱硫酸化处理得脱硫酸化多糖（DS-1、DS-2），跟踪检测显示其硫酸根含量显著下降，硫酸根脱除率为82%。

3. 裙带菜硫酸多糖的结构研究。

通过气相色谱法，红外光谱法、气质联用等手段对S1、S2的结构进行了初步研究。

结果如下：S1、S2均由鼠李糖（Rha）、半乳糖(Gal)、木糖（Xyl）、葡萄糖醛酸(GlcA)组成，但两者的摩尔比不同，其中鼠李糖(Rha)的含量最大，摩尔比分别达到51.44mol%、40.30mol%，其次还含有半乳糖和木糖，并含有少量葡萄糖醛酸, 故可将S1、S2命名为裙带菜硫酸化异鼠李聚糖。

探究影响黄芪多糖抗氧化活性的因素

食品实验FOOD EXPERIMENT中二氧化硫的残留量=s40mg/kg。

不过，对淀粉糖中的二氧化硫残留量进行分析可知，这200份研究标本的残留量远远高于前两年，并且同一种类的二氧化硫残留检测结果也存在明显的差异。

纵观三年的检测结果，每一年都存在明显的差异，并且需要不断调整检测结果，提升对二氧化硫残留物的过滤，为人们的生产生活保驾护航。

另外，在抽样中需要注意随机性，要分几个厂家、分不同批次，并抽取存在一定时间差的样本，这样才能使检测结果更具有标准性和代表性。

通过研究表明，淀粉糖中的二氧化硫残留物存在的主要原因有以下两个方面，首先是部分种类的原料；其次是有些企业为了提高产品的色泽、延长淀粉糖的保质期、增加企业的利润，在生产过程中会增加含硫的漂白剂。

所以，企业的生产操作流程显得尤为重要，需要相关部门加强监督工作，将监督工作落实到位；同时，要加强内部生产人员的生产流程管理，加强生产人员的安全意识，减少淀粉糖的二氧化硫残留量，确保老百姓能够吃得放心，确保消费安全。

综上所述，食品安全在我国经济的发展中占据着重要作用，生活水平的提高也使得人们对健康的重视度增加，为了确保人们吃得放心，相关监督部门应该从根源查起，减少二氧化硫在淀粉糖中的残留量，提高食品的安全性。

另外，要不断优化生产流程，提高作业人员的安全意识，这样才能提升企业的经济效益^71探究影响黄芪多糖抗氧化活性的因素■文丨劳军i楠楠言杯化工学院生物与食品工程学院为一种常见的中草药，黄芪I(Astragalus membranaceus)是豆科属多年生草本植物，其药用部分为根部，含有多糖、皂苷及酚类等成分。

其中，黄芪多糖可以用来抗氧化自由基、降低血糖和延缓衰老。

黄芪中的多糖可以分为水溶性多糖和水不溶性多糖，本文通过水提醇沉法提取黄芪水溶性多糖，再通过DPPH 法研究其抗氧化活性。

一、材料与方法1.材料(1)实验用黄芪为市售，购自于吉林大药房，烘干后研磨成粉。

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第46卷第4期2018年2月广　州　化　工Guangzhou Chemical IndustryVol.46No.4Feb.2018多糖体外抗氧化作用及其影响因素*吴雅清1,2,冷小鹏1(1华侨大学生物医学学院/分子药物研究院,福建　泉州　362021;2华侨大学分析测试中心,福建　厦门　361021)摘　要:多糖是一类具有抗氧化㊁抗病毒㊁抗肿瘤㊁降血糖㊁降血脂㊁免疫调节等广泛药理活性的天然高分子化合物,其中抗氧化作用是其抗肿瘤㊁降糖降脂的作用机制之一㊂查阅并整理了近年来的文献,对多糖的体外抗氧化作用机理及影响因素作一综述,重点阐述多糖的组成㊁结构㊁分子量等方面对体外抗氧化活性的影响,以期为多糖的深入研究及开发利用提供一定的参考㊂关键词:多糖;抗氧化;自由基　中图分类号:R961.1 　文献标志码:A 文章编号:1001-9677(2018)04-0004-07*基金项目:福建省海洋经济创新发展区域示范项目(2014FJPT08);厦门市海洋经济发展专项资金项目(14CZP043HJ17);厦门市科技局项目(3502Z20141015);华侨大学研究生科研创新能力培育计划资助项目㊂第一作者:吴雅清(1981-),女,博士研究生,实验员,主要从事药物研发㊂Antioxidant Activity and Influencing Factors of Polysaccharides in vitro *WU Ya -qing 1,2,LENG Xiao -peng 1(1Biomedical Sciences School &Institute of Molecular Medicine,Huaqiao University,Fujian Quanzhou 362021;2Instrumentation Analytical Center,Huaqiao University,Fujian Xiamen 361021,China)Abstract :Polysaccharide is a kind of natural macromolecular compounds with various pharmaceutical activities,such as antioxidant,antiviral,antitumor,hypoglycemic,hypolipidemic and immune function.Among these,antioxidant activity is one of mechanisms of antitumor,hypoglycemic and hypolipidemic effects.Antioxidant activity in vitro and its influencing factors were summarized,with emphasis on the polysaccharide composition and structure.It would provide some references for the further research and development of polysaccharides.Key words :polysaccharides;antioxidant activity;free radical多糖(polysaccharides)是一种由10个以上单糖通过糖苷键链接的高分子聚合物,具有广泛的生物活性,例如来自海洋藻类的多糖具有抗凝血㊁抗血栓㊁免疫调节㊁抗肿瘤㊁降血脂㊁降血糖㊁抗炎抑菌抗氧化等多种重要的活性,广泛应用于生物医药材料中[1]㊂对多糖的活性研究表明,部分多糖能够通过清除各种活性氧自由基,提高抗氧化物酶的活性,减少脂质过氧化产物丙二醛的产生,表现出多种途径的抗氧化作用,而抗氧化作用是抗肿瘤㊁抗衰老㊁降血糖㊁降血脂的作用机制之一[2]㊂多糖作为一种来源广泛㊁有效低毒的自由基清除剂和抗氧化剂,在保护机体免受氧化损伤方面起着至关重要的作用㊂尽管多糖具有强大的抗氧化功能,但其作用机理和构效关系尚未被系统阐明㊂本文就多糖体外抗氧化作用机理及可能的影响因素作一综述,为多糖的构效关系研究及进一步开发利用提供前期基础㊂1　多糖的体外抗氧化评价方法[3]多糖的抗氧化活性研究,常采用体外或体内模型,体外抗氧化评价方法有各种不同的体外模型,主要有化学评价方法和生物活性评价方法㊂其中化学评价方法包括氧自由基吸收能力法(ORAC)㊁总自由基捕获抗氧化参数法(TRAP)㊁总氧自由基清除能力检测法(TOSC)㊁Trolox 等效抗氧化剂能力检测法(TEAC)㊁铁离子还原/抗氧化能力检测法(FRAP)㊁DPPH 自由基清除法㊁羟自由基清除法㊁超氧阴离子自由基清除法㊁过氧化氢清除法㊁单线态氧淬灭法;生物活性评价方法包括DNA 氧化损伤㊁脂质过氧化㊁红细胞溶血㊁线粒体肿胀等㊂基于不同评价方法的原理不同,同一种物质用不同的抗氧化方法来评价,其结果往往存在较大差异,故要评价一种物质的抗氧化性,必须采用两种以上的抗氧化评价方法㊂2　多糖的体外抗氧化作用机理[4]目前,对多糖的体外抗氧化作用研究表明,其可能的作用机理主要分为两类:(1)直接清除活性氧自由基㊂活性氧是指化学性质活泼的氧代谢产物,包括超氧阴离子自由基㊁羟自由基㊁单线态氧和过氧化氢㊂过量的活性氧会对人体产生氧化损伤,导致细胞死亡,因此清除人体中过量的活性氧显得尤为重要㊂多糖分子上具有还原性的半缩醛羟基,可与活性氧发生氧化还原反应,因而具有清除活性氧的活性㊂对于羟自由基,多糖碳氢链上的氢第46卷第4期吴雅清,等:多糖体外抗氧化作用及其影响因素5原子可以与之结合生成水,达到清除羟自由基的目的;对于超氧阴离子自由基,多糖可与其发生氧化反应;对于脂质过氧化,多糖能通过捕获脂质过氧化链式反应中产生的活性氧,从而减少脂质过氧化反应链长度㊁阻断或减缓脂质过氧化的进行,达到对活性氧的直接清除作用㊂(2)间接清除活性氧自由基㊂多糖分子能够络合产生活性氧自由基所必需的金属离子,对活性氧起间接清除作用㊂多糖结构中的羟基可与产生羟自由基所必需的金属离子如亚铁离子等络合,使其不能产生启动脂质过氧化的羟自由基或不能分解脂质过氧化产生的脂过氧化物,从而抑制活性氧的产生㊂目前对于多糖抗氧化作用机理的研究还处于起步阶段,构效关系尚不明确,仍有待深入研究㊂3　多糖体外抗氧化作用的影响因素具有抗氧化作用的多糖,从来源上看,主要有植物多糖(尤其藻类多糖)㊁动物多糖和微生物多糖;从组成和结构上看,主要有多糖混合物(含有游离蛋白质㊁多酚等)㊁多糖轭合物(糖蛋白㊁糖脂类等)㊁酸性多糖(硫酸多糖等)及其他修饰后的多糖㊂多糖的抗氧化作用与其结构有关,结构的研究将有助于抗氧化作用机理的深入研究㊂多糖的组成㊁一级结构㊁分子量大小㊁取代基及高级结构等都会影响到活性㊂因此,要了解多糖的抗氧化活性,有必要了解其影响因素,以下主要从多糖的组成㊁结构㊁取代基㊁分子量及处理方法等方面进行阐述㊂3.1　多糖混合物文献显示,多糖中的其他化学成分如色素㊁黄酮㊁蛋白质㊁肽㊁多酚等,会对抗氧化作用有一定的影响㊂Wang等[5]对茶叶粗多糖提取物(TPS)的抗氧化活性是否取决于其中茶多酚(EGCG)进行了研究㊂结果表明,粗的TPS表现出强的抗氧化功能,而进一步纯化的TPS组分几乎没有活性㊂但在EGCG 存在时,TPS的还原力和DPPH自由基清除能力均有明显增强㊂此外,EGCG的存在同样使右旋糖酐的抗氧化能力增强,说明EGCG能引起抗氧化能力的协同增加,表明茶多酚是粗的TPS 的主要抗氧化活性部分㊂Hromadkova等[6]从麦麸中提取到两种阿拉伯糖基木聚糖(其中WB1通过酶解去除了蛋白质,WB2富含蛋白质和多酚类成分),结果显示不含蛋白质成分的WB1显示出最高的羟自由基清除能力,表明多酚类成分具有减少自由基含量的独特作用,能够促进木聚糖的自由基清除㊂Siu等[7]从三种可食用的蘑菇中提取水溶性多糖,经乙醇沉淀得到含15%~30%总蛋白和2%~5%多酚的粗多糖,进一步纯化获得含少量蛋白质和多酚的中性多糖和含20%~70%蛋白和2%~ 13%多酚的离子多糖,结果表明所有多糖的抗氧化活性均和其总多酚和蛋白质的含量具有显著的相关性,蘑菇多糖中主要是其多酚和蛋白含量在起抗氧化性作用㊂Mu等[8]从蘑菇Inonotus obliquus中分离得到水溶性粗多糖IOW和碱溶性粗多糖IOA,除蛋白和除色素后得到IOW-1和IOA-1㊂抗氧化结果显示蛋白质和色素的存在使IOW的DPPH自由基清除率显著性降低,羟自由基清除率和超氧阴离子自由基清除率升高,说明蛋白质和色素的存在会影响水溶性和碱溶性粗多糖的自由基清除作用㊂聂凌鸿等[9]研究广东淮山多糖的粗品和精品的体外抗氧化活性,结果表明两者均对超氧阴离子和羟自由基具有较高的清除作用,但对脂质自由基的清除能力较弱,且纯化后的精品对超氧阴离子和羟自由基的清除作用均小于粗品㊂以上例子推测粗多糖中含有的非糖成分如多酚㊁蛋白质可能是多糖抗氧化的活性物质㊂但是,有的报告指出纯化后的多糖的抗氧化活性比纯化前的好㊂如Ge等[10]来自酸浆果实花萼的粗多糖FCP及其纯化后的四种精多糖(PAVFⅠ,Ⅱ-a,Ⅱ-b和Ⅲ),抗氧化结果表明,PAVFⅠ㊁Ⅱ-a和Ⅱ-b均比FCP表现出强的DPPH㊁超氧阴离子㊁羟自由基清除效果,且PAVF1的效果最强㊂赵玉红等[11]研究表明,鹿茸粗多糖和纯化后多糖均具有抗氧化能力,且纯化后多糖的抗氧化活性和还原能力均大于粗多糖㊂3.2　多糖轭合物天然的多糖并不都是均多糖,也可能是杂多糖,甚至轭合其他成分如蛋白质㊁脂类等,广义的多糖包括糖蛋白㊁糖脂类等多糖轭合物㊂文献表明,糖蛋白中的蛋白质或肽可能是产生自由基清除作用的原因,如茶多糖中轭合的蛋白质或多酚的含量可能是其抗氧化潜力的来源[12]㊂Liu等[13]研究了8种蘑菇多糖提取物对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力,结果表明其中6种多糖提取物具有明显的清除超氧阴离子和羟自由基作用,并且多糖提取物中的蛋白质成分对自由基具有直接的清除作用㊂其中具有高多糖/蛋白质比的Schizophyllum commune和Lentinus edodes(Lentinan)仅含有微量的蛋白质,几乎没有显示出自由基清除作用;而具有低多糖/蛋白比的Ganoderma和Grifola的多糖蛋白复合物表现出最强的自由基清除活性㊂舒媛等[14]对未除蛋白质㊁Sevag法除蛋白和蛋白酶法除蛋白的3种山药多糖的抗氧化性进行比较,结果显示,3种山药粗多糖均具有抗氧化活性,其中Sevag法除蛋白的山药粗多糖抗氧化能力最强,其次是未除蛋白的山药粗多糖,最弱的是蛋白酶法除蛋白的山药粗多糖㊂由此可见,山药多糖结合蛋白质具有较高的体外抗氧化作用,推测原因可能是蛋白酶去除了大量的蛋白质,同时也去除了与山药粗多糖结合的部分蛋白质,使多糖-蛋白质复合物的空间结构发生改变,从而降低了抗氧化活性㊂Huang等[15]研究表明,从真菌Cordyceps sinensis发酵培养基中提取的无蛋白胞外多糖(P1/5和p2/5)没有显示出抗氧化活性,蛋白含量中等的P1和P2表现出中等的抗氧化活性,而高蛋白含量的P5表现出显著的抗氧化活性㊂结果表明胞外多糖的抗氧化活性显著依赖于其蛋白质含量㊂Zhang等[16]研究了提取方法对白鲟(Paddlefish cartilage)提取物的化学结构和抗氧化活性的影响,通过碱提取法㊁微波辅助的碱提取法和微波辅助碱提后Sevag除蛋白三种方法分别得到三种提取物EXT-A㊁EXT-B 和EXT-C,结果表明,EXT-A和EXT-B均含有多糖和蛋白质,其中EXT-B的蛋白含量(87.9%)显著高于EXT-A (22.3%),EXT-C不含蛋白质㊂进一步的氨基酸成分分析表明,EXT-B富含酪氨酸㊁甘氨酸和谷氨酸㊂EXT-B比EXT-A㊁EXT-C显示出明显高的抗氧化活性㊂结果表明,蛋白质含量和组成在抗氧化作用中占有重要的地位㊂以上结果表明,多糖中的蛋白质或多肽与其抗氧化作用有关,推测抗氧化作用与他们的氨基酸组成有关,而酪氨酸和色氨酸因能提供质子给缺电子自由基而具有抗氧化活性㊂3.3　多糖的分子量许多研究表明,多糖的生物活性与其分子量有关㊂分子量越大,体积越大,越不利于多糖跨越多重细胞膜障碍进入生物体内发挥生物学活性,分子量过大的多糖一般没有活性,而分子量过低,无法形成产生活性的聚合结构,因此活性多糖具有一定的分子量范围㊂Qi等[17]从石莼Ulva pertusa Kjellm (Chlorophyta)中得到不同分子量的石莼聚糖,对其抗氧化活性研究的结果表明多糖的抗氧化活性与分子量有关,当多糖的分子量不同时,抗氧化能力也不同,分子量最低的石莼聚糖的抗氧化活性更强,推测低分子量的多糖会有更多数量的还原羟基6　广　州　化　工2018年2月基团末端用于接受和消除自由基因而表现出更强的还原力㊂Xing等[18]报道低分子量壳聚糖(9kDa)比高分子量的(760kDa)具有更强的超氧阴离子和羟自由基的清除效果,机理可能与壳聚糖的结构特性有关,壳聚糖具有大量N2-O6和O3-O5的氢键,高分子量的壳聚糖具有致密结构,分子内氢键更强,使得羟基和氨基活性受限㊂Zha等[19]从米糠热水提取物中通过40%㊁60%㊁80%乙醇逐级纯化得到三种多糖(PW1㊁PW2㊁PW3),分子量依次降低,抗氧化活性实验表明相对低分子量的PW3表现出最强的抗氧化能力㊂Liu等[20]从Ganoderma lucidun得到的两种低分子量多糖GLP L1和GLP L2,分子量分别为5.2kDa和15.4kDa,抗氧化研究显示,GLP L1和GLP L2都是有效的自由基清除剂和铁螯合剂,且GLP L1作用更强㊂Yang等[21]从人参中分离得到五个分子量不同的多糖PP1㊁PP2㊁PP3㊁PP4㊁PP5,低分子量多糖具有强的DPPH和ABTS自由基清除活性,最低分子量的PP5具有最高的抑制活性㊂不同分子量的多糖对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除效果不同㊂综上,以上结果均显示,多糖的分子量在抗氧化活性中起着重要的作用,且低分子量多糖具有更强的抗氧化活性㊂3.4　多糖的取代基除了带有阴离子和阳离子功能基团的多糖,如壳聚糖㊁硫酸或磷酸化的葡聚糖外,大部分碳水化合物都不是有效的抗氧化剂,可溶性淀粉经β-胡萝卜素-亚油酸酯乳化实验没有表现出抗氧化活性,即使浓度2mg/mL[22]㊂Chen等[23]研究低分子量多糖(琼脂LMAG㊁壳聚糖LMCH和淀粉LMST)的不同功能基团(硫酸基㊁氨基㊁羟基和其他离子基团)对体外抗氧化活性的影响,结果表明只具有羟基基团的LMST自由基清除活性非常弱,而具有硫酸基团的琼脂和具有氨基的壳聚糖表现出强的抗氧化活性㊂说明多糖只有以聚合电子形式才能表现出强有力的抗氧化活性㊂3.4.1　糖醛酸Li等[24]指出来自Zizyphus Jujuba cv.Jinsixiaozao果实的多糖组分,其中含有高含量糖醛酸的ZSP3c和ZSP4b比不含糖醛酸的ZSP1b具有更强的自由基清除活性,表明糖醛酸是多糖抗氧化活性的有效指标,可能归因于多糖中醛或酮等亲电基团的存在促进O-H键氢原子的释放[25]㊂Rao等[22]通过三种不同的抗氧化体系(β-胡萝卜素-亚油酸酯乳化㊁DPPH㊁FRAP)评估水溶性feraxans(阿魏酰阿拉伯基木聚糖),结果显示其具有强的抗氧化活性㊂feraxans富含糖醛酸,是带负电荷的分子,推测是糖醛酸在feraxans抗氧化活性中起作用㊂为验证此推测,利用以上三个体系对葡萄醛酸㊁半乳糖醛酸㊁多聚半乳糖醛酸进行评价,结果显示糖醛酸在体外具有强的抗氧化活性,且含有不同-OH取代的半乳糖醛酸比葡萄糖醛酸活性强,而多聚半乳糖醛酸活性更强㊂表明糖醛酸是阿拉伯糖基木聚糖的抗氧化活性部分,糖醛酸如葡萄糖醛酸㊁半乳糖醛酸㊁4-O-甲基糖醛酸能够影响抗氧化活性㊂Chen等[26]用HPLC测定了茶多糖轭合物中糖醛酸的含量,发现高含量糖醛酸的多糖轭合物对活性氧有更强的清除作用,表明糖醛酸含量对多糖的抗氧化活性具有直接的影响㊂Chang等[27]从Zizyphus jujuba中得到一个中性多糖ZJPN和3个酸性多糖(ZJPa1㊁ZJPa2㊁ZJPa3),其中半乳糖醛酸含量顺序为ZJPa3>ZJPa2>ZJPa1>ZJPN,所有的酸性多糖均具有螯合亚铁的能力且呈亚铁螯合率顺序为ZJPa3>ZJPa2> ZJPa1>ZJPN,表明半乳糖醛酸含量越高,其亚铁离子的螯合能力越强㊂3.4.2　硫　酸硫酸多糖或多糖的硫酸化衍生物在体内外均表现出不同程度的抗氧化活性,其部分原因是硫酸基团通常会产生酸性很强的环境,从而削弱多糖之间的氢键作用,硫酸多糖以静电的方式吸附自由基㊂一系列实验表明,硫酸多糖比去硫酸多糖具有更强的体外抗氧化活性,比如相同分子量的壳聚糖和硫酸壳聚糖[18]㊁来自褐藻和红藻的岩藻多糖和角叉菜胶[28]㊁来自海藻Corallina officinalis[29]和Undaria pinnitafida[30]的硫酸多糖和去硫酸多糖㊂来自褐藻Laminaria japonica的低分子量岩藻多糖比天然的岩藻多糖高,且硫酸含量与超氧阴离子清除能力呈正相关,硫酸含量/岩藻糖的比例与羟自由基[31]㊁DPPH自由基[32]的清除能力及还原力有关,且分子量在抗氧化活性中起着重要的作用㊂Qi等[33]研究了孔石莼多糖及其硫酸多糖的抗氧化活性,分析了多糖的超氧自由基和羟自由基清除能力㊁还原力及金属螯合能力,发现高硫酸含量的孔石莼多糖比天然的孔石莼多糖具有更强的自由基清除作用和还原力,且当硫酸根含量达到30.8%以上时,多糖的亚铁离子螯合能力增强㊂以上数据均表明多糖的抗氧化活性与硫酸化程度具有一定的关系,且抗氧化活性和其硫酸含量呈正相关㊂3.4.3　乙酰基Liu等[34]从Aloe barbadensis中得到两个多糖GAPS-1和SAPS-1,其中GAPS-1的乙酰基数量多于SAPS-1,抗氧化实验结果显示GAPS-1的过氧化氢清除活性㊁亚铁螯合能力㊁羟自由基清除活性均强于SAPS-1,推测是由于GAPS-1分子中含有更多的乙酰基基团,表明多糖的乙酰基基团对抗氧化活性具有一定的影响㊂3.5　多糖的分子修饰目前对多糖进行分子修饰的常见方法有硫酸化㊁磷酸化㊁乙酰化㊁烷基化㊁磺酰化㊁羧甲基化㊁苯甲酰化作用等,化学修饰在一定程度对多糖的抗氧化作用有影响㊂例如,来自新鲜柿子(Diospyros Kaki L.)的硫酸多糖[35],来自石莼Ulva pertusa (Clorophyta)的乙酰化和苯甲酰化石莼多糖[36],来自红芪Radix hedysari的磷酸化多糖[37],来自内生菌Paenibacillus polymyxa EJS-3的乙酰化㊁磷酸化㊁苯甲酰化果聚糖[38],均比未修饰的多糖表现出明显增强的自由基清除活性和还原力,说明化学修饰能够改变多糖的抗氧化性㊂可能机制,一是在多糖中引入这些取代基可能会导致氢键的裂解键能变弱,从而提高多糖衍生物的氢键能力;另一种可能是化学修饰有时伴随着分子量的降低,从而提高了多糖的抗氧化潜力㊂3.5.1　取代基类型Wang等[39]采用硫酸化㊁乙酰化㊁苯甲酰化㊁磷酸化和氨基化合成六种低分子量岩藻多糖衍生物,通过超氧阴离子自由基㊁羟自由基㊁DPPH清除实验和还原力实验均显示这些衍生物比未修饰的岩藻多糖具有更强的抗氧化特性,其中苯甲酰化低分子量岩藻多糖具有最强的自由基清除能力,表明岩藻多糖的取代基在其抗氧化活性中起着重要的作用㊂Xu等[40]将灵芝多糖羧甲基化后,研究其水溶性㊁化学特征和体外抗氧化活性,结果显示,其中羧甲基灵芝多糖的水溶解度明显提高,抗氧化活性特别是羟基自由基和过氧化氢自由基的清除能力显著提高,说明水溶性多糖的羧甲基化提高了其溶解度,从而提高了抗氧化活性㊂3.5.2　取代度多糖取代度是指多糖中单糖上的活性羟基被其他集团取代的数量平均值㊂当多糖达到一定的取代度时,才具有生物活性,但并不是取代度越高,活性就越强㊂Chen等[41]研究来自Portulaca oleracea L.的磷酸多糖的合成和抗氧化活性,发现四第46卷第4期吴雅清,等:多糖体外抗氧化作用及其影响因素7种磷酸多糖POP1-p和天然多糖相比具有不同的取代度,且对超氧阴离子具有更强的清除作用,推测磷酸多糖的取代度会影响其抗氧化活性,推测取代度可能是通过破坏分子内和分子间氢键来影响活性㊂Chen等[42]对来自Ganoderma atrum的水溶性多糖进行化学修饰得到乙酰化和苯甲酰化衍生物,发现衍生化后,总糖含量显著降低,且分子量也下降㊂对其构效研究表明,具有一定取代度和低分子量的乙酰化衍生物表现出更强的抗氧化活性,表明取代基类型和取代度对其生物活性起决定性作用㊂Liu等[43]研究了来自Ganoderma lucidum水不溶性多糖的硫酸化对理化性质和功能特性的影响,结果显示硫酸化提高了多糖的水溶性和对羟自由基㊁超氧阴离子自由基㊁过氧化氢的清除能力以及亚铁螯合能力㊁还原力㊁胆酸结合能力㊂具有最低取代度的硫酸多糖具有最高的胆酸结合力,而具有最高取代度的硫酸多糖具有最低的胆酸结合力㊂说明取代度可能影响多糖的理化性质和活性㊂然而,取代度的影响是有争议的,在有些报告中反而是高的取代度能增加抗氧化活性㊂Jung等[44]研究发现来自Pleurotus eryngii的多糖的DPPH自由基清除能力随着硫酸化程度的提高而提高㊂Wang等[45]研究表明来自guar gum的半乳甘露聚糖磷酸化衍生物,C-6取代是主要的,高取代度增强了自由基清除效果㊂Song等[46]研究表明乙酰化南瓜多糖比未修饰的南瓜多糖表现出更强的抗氧化活性,且乙酰化取代程度与DPPH㊁超氧阴离子自由基的清除效果以及还原力呈正相关㊂因此表明,取代度会对多糖的抗氧化活性有一定的影响,但如何影响尚待进一步深入研究㊂3.6　多糖的处理方法不同的提取方法㊁提取条件可能导致提取的多糖的组成和结构产生很大的差异,进而影响多糖的生物活性㊂很多技术和方法(物理的,化学的,酶的)被用来降解多糖,降低分子量,也很多方法(如酶法㊁超声波㊁射线辐射等)用来改变多糖溶解性,一定程度的提高生物活性,甚至增加新的功能㊂比如冷水和热水提取的多糖[47]以及不同乙醇用量提取的多糖[48],在体外对自由基的清除作用具有明显的不同㊂3.6.1　超声处理黄来珍等[49]比较了水浸提㊁盐液浸提及超声辅助盐液浸提的近江牡蛎糖蛋白粗提物对羟自由基㊁DPPH自由基㊁超氧阴离子自由基的清除效果,结果表明,3种方法的糖蛋白提取物均具有一定的自由基清除能力,其中超声辅助盐液浸提的糖蛋白粗提物比水浸提和盐液浸提的能力强㊂Cheung等[50]采用超声辅助提取和热水提取从三种药用蘑菇(Grifola frondosa, Coriolus versicolor和Lentinus edodes)中提取多糖-蛋白复合物(PSP),结果显示三种超声辅助提取的PSP与热水提取的相比,具有较高的蛋白含量㊁较低的多糖含量㊁相对较低的分子量,其表现出的抗氧化活性均高于水提的多糖㊂说明提取方法尤其是超声波辅助提取可能影响了多糖的组成㊁结构及理化性质,进而影响其抗氧化活性㊂Zhou等[51]研究超声降解对来自紫菜Porphyra yezoensis(Rhodophyta)的多糖的体外抗氧化活性的影响,发现超声降解多糖具有更强的抗氧化活性,表明超声降解可能引起分子量的降低和抗氧化必须因素-硫酸基团的增加㊂分子量的降低是增强羟自由基清除能力和还原力的主要原因,硫酸基团含量的增加是清除超氧阴离子和螯合亚铁能力的主要原因㊂表明超声处理是一种提高多糖抗氧化活性的有效方法㊂3.6.2　酶法㊁微波处理Sun等[52]对来自Porphyridum cruentum的多糖进行微波降解,发现微波降解没有明显改变多糖的化学成分,却降低了分子量,且降解前高分子量的多糖没有明显的抗氧化活性,而降解后的低分子量多糖表现出强的抗氧化作用㊂何传波等[53]采用纤维素酶解和微波辅助方法提取海带多糖,考察不同提取方法对海带多糖抗氧化活性的影响,结果表明酶解和微波处理得到的海带多糖比常规水浴提取的多糖抗氧化活性有所提高,且随着酶用量的增加微波萃取时间的延长,抗氧化活性呈现下降趋势㊂说明微波处理会影响多糖的抗氧化活性㊂3.6.3　射线辐射张尔贤等[54]研究了远紫外线UVc照射对鼠尾藻和铜藻多糖清除自由基能力的影响,结果表明,两种多糖经UVc照射24h后,清除超氧阴离子自由基的能力明显下降,但却能显著抑制氧自由基对不饱和脂肪酸的氧化作用,这可能由于多糖的结合蛋白能力受紫外辐射损伤而间接影响到整个多糖分子对自由基清除作用的降低㊂Feng等[55]发现γ-射线处理的壳聚糖具有更显著的抗氧化活性,除了降低分子量外,没有改变其骨架结构㊂同样,γ-射线照射降低了岩藻多糖和海带多糖的分子量,增加了羧基和羰基以及双键的数量,并显著增强其对DPPH自由基的清除能力和还原力[56]㊂Feng等[57]发现没有硫酸盐的香菇多糖几乎检测不到抗氧化能力,但当它通过传统的加热法和新型微波辐射法硫酸化后,其抗氧化作用明显增强,表明抗氧化作用和硫酸基团的引入之间存在积极的正相关㊂3.6.4　冷冻干燥Fan等[58]采用热风干燥㊁真空干燥㊁真空冷冻干燥三种方法从Ganoderma lucidum得到三种多糖GLP-H㊁GLP-V㊁GLP-F,结果显示三种多糖均表现出抗氧化活性,且呈剂量依赖性,三种多糖中,GLP-F㊁GLP-V比GLP-H具有更高的羟自由基㊁超氧阴离子自由基㊁DPPH清除活性和更强的还原力;GLP-F 比GLP-V㊁GLP-H对FRAP体系具有更强的抗氧化能力㊂Wu 等[59]研究表明和热风干燥㊁真空干燥相比,冷冻干燥得到的多糖具有更高的中性糖㊁多糖产率㊁糖醛酸含量和更强的抗氧化活性,结果表明真空冷冻干燥是获得多糖的有效处理方法,不同的干燥方法会影响多糖的抗氧化活性㊂3.7　多糖的金属离子含量硒是人体必需的微量元素,在多糖中可能以硒酸酯的形式存在㊂Malinowska等[60]指出来自Hericium erinaceum的含硒胞外多糖具有更强的抗氧化活性,可以作为硒的日常补充剂或营养剂㊂Wei等[61]采用硝酸-亚硒酸钠方法合成一系列硒化多糖,其中硒的含量从1.04mg/g增加到3.29mg/g,硒多糖的分子量从62.7kDa减少到27.7kDa,硒化修饰主要发生在多糖的C-6位上,硒化多糖比天然多糖表现出更好的体外抗氧化活性㊂同样,Wang等[62]研究显示硒化反应导致分子量的急剧下降,硒化多糖中C-6取代是必须的㊂与天然多糖相比,硒化多糖具有更强的羟自由基和超氧阴离子自由基清除活性㊂机制可能涉及多糖的构象结构改变,产生羟基的数量增加,从而对抗氧化活性产生了影响㊂Guo等[63]报道通过添加硒氯氧化物(SeCl2O)的方法合成的硒胞外多糖显示出更强的抗氧化能力㊂除了硒,铁也与多糖的抗氧化作用有关联㊂Abu等[64]通过不同体系评估来自Ascophyllum nodosum的硫酸多糖鹿角菜蛋白的体外抗氧化活性,结果显示鹿角菜蛋白比岩藻多糖具有更好的清除超氧化物的作用㊂天然的鹿角菜蛋白和岩藻多糖含有一定量的铁和其他金属元素㊂经过EDTA处理和随后的透析,除了镁外的大部分金属元素都从这两个多糖中移除,特别是超过90%的亚铁离子㊂EDTA处理导致两种多糖有不同范围的亚铁离子螯合效率的显著增加,其效果可能取决于多糖内部存在的铁含量㊂说明多糖中的金属离子含量对其抗氧化活性具有一定的影响㊂。