马松三色染色原理masson.
Masson三色染色试剂盒说明书
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书（南京森贝伽生物科技有限公司）【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色，胶原纤维绿色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定；②分化时间短，1～2 分钟；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定：甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片：所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126（7×50ml）SBJ0126（7×100ml）SBJ0126（7×500ml）Storage试剂（A）A1：苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2：三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合，成为试剂（A），不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合，形成不容性沉淀，等量混合后，一般24h 后失去染色力。
试剂（B）: 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂（C）: 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（D）: 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂（E）: 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（F）: 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（G）: 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂（A）染色5min～10min。
3、试剂（B）分化、水洗，试剂（C）返蓝、水洗。
马松三色染色法
马松三色染色法马松三色染色法是一种用于显示组织中纤维的染色技术，特别适用于结缔组织的染色。
该方法使用三种染料：苏木精、酸性品红和丽春红，分别染色细胞核、肌纤维和胶原纤维。
首先，切片需要经过常规脱蜡至水的过程，以确保染色剂能够充分渗透到组织中。
然后，使用配制好的Weigert氏铁苏木素染色液对组织进行染色，以突出显示细胞核。
染色完成后，需要充分水洗，以去除未结合的染料。
接下来是酸性品红染色，用于标记肌纤维。
这个步骤需要在弱酸环境中进行分化处理，以将染色剂与组织中的碱性物质区分开来。
弱酸还能帮助酸性品红更好地渗透到组织中。
最后，使用丽春红品红染色液对胶原纤维进行染色。
在这个步骤中，需要使用弱酸工作液来洗去未结合的染料。
在整个染色过程中，组织固定起着非常重要的作用。
不同的固定液会影响染色时间，因此需要根据具体情况进行调整。
在完成染色后，需要进行常规脱水、透明和封固处理，以便在显微镜下观察。
马松三色染色法的优点在于它能够清晰地显示结缔组织中的胶原纤维和肌纤维，特别是在病理情况下，如器官硬化性疾病和瘢痕组织的鉴别诊断中，该方法能够提供有价值的信息。
此外，该方法具有较高的特异性和灵敏度，能够检测出病理变化中较小的差异。
然而，该方法也有一些局限性。
首先，该方法需要使用多种染料和化学试剂，这使得操作过程相对复杂。
其次，某些组织可能需要特定的处理步骤，例如脱蜡、脱水和固定等。
这需要技术人员具备一定的经验和技术水平。
尽管存在这些局限性，马松三色染色法仍是一种非常重要的病理学技术。
它可以提供关于组织结构和功能的重要信息，有助于病理医生做出准确的诊断和制定治疗方案。
Masson三色法
Masson三色法（根据Masson,1929）一、试剂配制（一）Weigert氏铁苏木素液（可用Herris苏木素代替）甲液：苏木素1g无水酒精（或95％酒精）100ml乙液：29％三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml （30%三氯化铁溶液则为100ml）盐酸1ml临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
（二）丽春红酸性品红液丽春红（Ponceau 2R）0.7g酸性品红（acid fuchsin）0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml（三）1%磷钼酸水溶液磷钼酸（phosphomolybdic acid）1g蒸馏水加至100ml（四）2%苯胺蓝液苯胺蓝（aniline blue）2g冰醋酸（glacial acetic acid ）2ml蒸馏水加至100ml（五）亮绿液亮绿（light green）1g蒸馏水99ml冰醋酸（glacial acetic acid ）1ml（六）Bouin氏液苦味酸饱和液（1.22％）75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制，对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1．组织固定于Bouin氏液，流水冲洗一晚，常规脱水包埋。
2．切片脱蜡至水：（1）二甲苯中脱蜡10分钟×3次，用吸水纸吸干液体；（2）100%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；（3）95%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；；（4）流水2分钟，用吸水纸吸干水分；3．Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
masson三色染色 原理
masson三色染色原理马森三色染色的原理马森三色染色是一种组织学染色技术，用于区分神经组织的不同成分。
它基于通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色，这赋予神经元不同的颜色。
磷钨酸-血红素溶液的染色原理磷钨酸-血红素溶液是一种呈酸性的溶液，含有磷钨酸和血红素。
磷钨酸是一种多价阴离子，对组织中的碱性成分，如细胞核和细胞质，具有亲和力。
血红素是一种铁卟啉分子，与氧气结合形成稳定的络合物。
当磷钨酸-血红素溶液应用于组织时，磷钨酸会与细胞核和细胞质中的碱性成分结合，形成不溶性沉淀。
血红素与氧气结合，形成棕红色的血红素氧络合物，沉积于这些碱性成分上。
因此，细胞核和细胞质被染成深棕色。
靛胭脂溶液的染色原理靛胭脂是一种阳离子染料，对组织中的酸性成分，如细胞外基质和神经胶质纤维，具有亲和力。
当靛胭脂溶液应用于组织时，它会与这些酸性成分结合，形成不溶性蓝紫色沉淀。
神经胶质纤维是神经胶质细胞产生的长而细的纤维，它们包裹着神经元并提供支持。
通过与靛胭脂结合，这些纤维被染成蓝色。
神经元的染色神经元的细胞体主要由细胞核和细胞质组成，它们富含碱性成分。
因此，它们在磷钨酸-血红素溶液中被染成深棕色。
神经元的轴突和树突是神经元的细胞突起，它们由神经胶质细胞包裹。
神经胶质细胞产生的神经胶质纤维含有酸性成分，因此它们在靛胭脂溶液中被染成蓝色。
通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色，马森三色染色可以区分神经元的不同成分：细胞核和细胞质呈深棕色，神经胶质纤维呈蓝色。
这种差异允许在显微镜下对神经组织进行详细的观察和分析。
Masson三色染色
Masson三色染色主要用途：主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
检验原理:由mallory三色染色改造，利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成份显示出来。
主要成份：1.weigert铁苏木素A液2.weigert铁苏木素B液3.丽春红酸性品红染液4.磷钼酸溶液5.苯胺蓝溶液样本要求：组织片充分固定和脱蜡。
检验方法：1.组织固定于bouin氏液或zenker氏液，流水冲洗过夜，常规脱水包埋2.切片脱蜡至水3.weigert铁苏木素（weigert铁苏木素A、B液等比例混和）染5-10分，流水稍洗4. 1%盐酸酒精分化，流水冲洗数分5. 丽春红酸性品红染液染5-10分，流水稍冲洗。
6.磷钼酸溶液处理约5分钟，不用水洗，直接用苯胺蓝人染液复染5分钟7. 1%冰醋酸处理1分钟，95%酒精脱水多次。
.无水酒精脱水、二甲苯透明，中性树胶封固。
检验结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维、纤维素和红细胞染红色、胞核染蓝黑色。
、注意事项：1.weigert铁苏木素分A、B两液，应与临用前将两液等分混合，而不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色能力。
2.组织用bouin氏液或zenker氏液固定为佳，如已用10%甲醛液固定，切片可在脱蜡至水后，再放入bouin氏液作用一晚或置37℃温箱内1-2小时，然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
3.磷钼酸处理时，要镜下控制，见肌纤维呈红色，胶原纤维呈淡红色即可。
Masson三色染色
Masson三色染色：主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
Masson染色是最为常用的结缔组织染色法，此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布，纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。
对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增生程度的差别具有重要价值。
Masson染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存在嗜复红蛋白的沉积，对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
天狼星红染色（Sirius red）：由于胶原呈碱性，与酸性染料起强烈反应。
天狼星红就是一种很强的酸性染料，它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。
天狼星红染色胶原纤维呈红色，胞核呈绿色，余呈黄色。
偏光显微镜可以分辨不同的纤维类型，
HE染色：又称苏木素-伊红染色法，其中苏木素是Hematoxylin，简称H，伊红是Eosin，简称E，这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。
这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色，
油红O脂肪染色法：显示组织内的脂肪，油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色，。
masson染色详细原理
masson染色详细原理Masson染色是一种常用的组织学染色方法，可以用于研究生物组织的形态、结构和功能。
该方法通过染色剂与组织中的特定成分发生反应，从而使组织结构在显微镜下能够清晰可见。
Masson染色的原理基于不同成分在染色过程中的亲和性差异。
该方法主要通过三种染色剂的组合使用，包括酸性染色剂、酸性染色剂与酸性染色剂的混合物、碱性染色剂。
这三种染色剂的性质和使用顺序的不同，使得染色后的组织能够显示出不同的颜色和形态特征。
在Masson染色过程中，使用酸性染色剂染色。
酸性染色剂主要染色胶原纤维，使其呈现红色。
胶原纤维是组织中最主要的结构成分之一，它具有重要的支撑和保护作用。
通过酸性染色剂的染色，可以清晰地显示出胶原纤维的分布和形态。
接着，使用酸性染色剂与酸性染色剂的混合物进行染色。
该混合物主要染色细胞核和肌红蛋白等细胞器。
细胞核是细胞的重要部分，含有遗传信息，参与细胞的生命活动。
肌红蛋白是肌肉组织中的重要蛋白质，参与肌肉的收缩和运动。
通过酸性染色剂与酸性染色剂的混合物的染色，可以使细胞核呈现蓝色，肌红蛋白呈现红色。
使用碱性染色剂进行染色。
碱性染色剂主要染色细胞质和细胞器中的肌肉纤维，使其呈现绿色。
细胞质是细胞内除细胞核外的其他成分的总称，包括细胞质基质、细胞器和溶质等。
肌肉纤维是肌肉组织中的重要结构，参与肌肉的收缩和运动。
通过碱性染色剂的染色，可以清晰地显示出细胞质和肌肉纤维的分布和形态。
总的来说，Masson染色方法通过不同染色剂的组合使用，使组织中的不同成分在显微镜下呈现出不同的颜色，从而能够清晰地观察组织的形态和结构。
该方法在组织学研究中具有重要的应用价值，可以用于研究肿瘤、炎症和纤维化等疾病的组织学改变，为疾病的诊断和治疗提供重要依据。
通过对Masson染色原理的深入理解，可以更好地应用该方法，为生物组织的研究提供更准确和可靠的数据。
马松三色染色原理masson1
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
MASSONS三色
胶原纤维- MASSON'S 三色(TRI)目的：用于鉴别胶原纤维和平滑肌肿瘤，肝硬化的胶原纤维增生。
肝肾活检组织的常规染色。
原理：与名称暗示的一样，三种染料分别着染肌肉、胶原纤维、纤维蛋白和红细胞。
三色染色的基本原理是孔隙较小的组织被最小的染料分子着染。
只要大分子的染料能够穿透组织，而损失的总是较小的染料分子。
建议染色时首先染酸性染料。
比布里希猩红能与嗜酸性组织成分结合。
当用磷酸处理时，只有渗透性较小组织成分能保留红色，胶原纤维组织的红色被冲出。
同样原理使胶原纤维与苯胺蓝结合。
固定：首选Bouin's液，10%甲醛。
技术：石蜡切片4μm。
设备：蒸馏水清洗玻璃器皿，染色缸，60°C 烤箱或水浴箱，微波炉。
试剂：Bouin’s 固定液饱和苦味酸1500.0 ml甲醛500.0 ml冰醋酸100.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期2年。
警告：致癌物质，刺激性。
比布里希猩红：比布里希猩红 2.7 gm酸性品红0.3 gm蒸馏水300.0 ml冰醋酸 3.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
Weigert's铁苏木精原液A：苏木精 5.0 gm95% 酒精500.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期1年。
警告：易燃性，避免接触和吸入。
原液B：29%三氯化铁20.0 ml蒸馏水475.0 ml盐酸 5.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期1年。
Weigert's 苏木精工作液溶液A 25.0 ml溶液B 25.0 ml混合溶解，溶液可保留3-4。
磷钼酸/磷钨酸溶液：磷钼酸25.0 gm磷钨酸25.0 gm蒸馏水1000.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
苯胺蓝：苯胺蓝 2.5 gm蒸馏水100.0 ml冰醋酸 1.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
MASSON三色染色法
因此：在Masson染色法中，酸 性品红和丽春红染肌纤维，而苯 胺蓝或亮丽染胶原纤维。
【试剂配置】：
（1）Masson复合染色液
酸性品红1g ；丽春红2g；橘黄G 2g；0.25%醋酸300ml
（2）亮绿染色液
亮绿SF 0.1g ，0.2%醋酸100ml。
[染色步骤]：
（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水 （2）Masson复合染色液5min （3）0.2%醋酸水溶液稍洗。 （4）5%磷钨酸5-10min （5）0.2%醋酸水溶液浸洗2次 （6）亮绿染色液5min，0.2%醋酸水洗2次 （7）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
染料分子的大小，主要由其分子量来体现。 一般来说小分子量者易于穿透结构致密， 渗透性低的组织，而大分子染料只能进入 结构疏松，渗透性高的组织。 常用胶原纤维染色而几种阴离子染料的分 子量由小到大分别是：
苦味酸（黄色），分子量229.11 橙黄G（橙黄色）分子量452 丽春红（红色）分子量480.42 酸性品红（红色）分子量585.53 苯胺蓝（蓝色）分子量737.72 亮绿（绿色）分子量792.72 甲基蓝（蓝色）分子量799
来源于间胚叶的肿瘤，如纤维瘤，横纹肌 瘤，神经纤维瘤甚至它们的肉瘤等都产生 一定的纤维，这些纤维在HE染色中都染成 红色而难以区别，通过上述方法，一般可 区分出该肿瘤组织是胶原纤维源性，还是 肌源性，或者是神经纤维源性。
如： 1．显示组织，器官的损伤或炎症的修复与纤 维板化程度 2．判断心肌坏死后被除纤维结缔组织所取代 的区域：HE染色时胶原纤维与心肌均为红色， 胶原纤维染色则使胶原纤维呈红色，心肌纤 维呈黄色。 3．鉴别心肌纤维化与心内膜弹纤维增生症。 4．区别胶原纤维透明变性与淀粉样变性。 5. 对肿瘤方面提供诊断和诊断鉴别的依据。
马松三色原理
马松三色原理
马松三色染色，也被称为Masson染色，是一种结缔组织染色中的经典方法，主要用于显示胶原纤维和肌纤维。
该原理主要基于阴离子染料分子的大小和组织的渗透性。
染料的分子大小由分子量来体现。
小分子量染料易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量染料则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。
在马松三色染色中，肌纤维会被苯胺蓝染成红色，而胶原纤维则会被苯胺蓝染成绿色或蓝色。
这种染色方法能够有效地区分胶原纤维和肌纤维，因此被广泛应用于生物学和医学研究。
以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅生物学专业书籍或咨询专业人士。
马松三色染色原理masson.
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
马松三色染色在儿童狼疮性肾炎中的应用比较
马松三色染色在儿童狼疮性肾炎中的应用比较儿童SLE是儿童常见的肾脏病，其病理诊断及其分型对患儿的治疗，预后有着重要意义。
本文通过介绍三种masson染色方法，病在肾穿标本中进行试验摸索，发现加入Bouin 后固定液可显著改善标本的染色效果，而用丽春红，酸性品红混合液染色的标本免疫复合物显示效果较好，但层次稍弱，而用变色酸2R染色的标本，颜色鲜艳，免疫复合物显示清晰，层次分明，是一种效果相对较好的方法，可能更加有助于对狼疮性肾炎的诊断。
标签：儿童肾活检；Masson三色染色；狼疮性肾炎系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种全身性自身免疫性疾病，是一种常见的结缔组织病，累及肾脏则称为狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN）。
儿童肾脏累及率明显高于成人，为40%-90%[1]。
儿童SLE起病大多以肾脏症状为首发表现，临床表现以肾炎肾病为主，病理类型以Ⅳ型最多[2]。
肾穿刺活检组织常规特殊染色有3种染色：过碘酸雪夫反应（PAS）、高碘酸-乌洛托品银（PASM）、Masson染色。
其中M asson三色染色主要是用来观察肾小球嗜复红蛋白沉积物（免疫复合物）及肾脏内胶原纤维增生等，对狼疮性肾炎（LN）的诊断具有重要作用。
我们意识到传统的masson三色染色法[3]操作较繁琐，时间长，对肾小球内免疫复合物显色颜色浅淡，基底膜、系膜、胶原纤维及胞质、红细胞颜色对比不鲜艳。
许多学者也对Masson三色染色法进行了各种各样的探索和改良。
但由于各实验室条件及操作者的水平存在差异，因此改善的方法得不到广泛的认可和推广。
现收集目前常用的几种Masson染色法及改良后的效果进行比较，对各实验条件及可行性进行分析比较，摸索找出一种效果显著又适合推广的方法，希望对儿童肾活检狼疮性肾炎诊断提供更好的诊断素材。
1 材料与方法1.1 材料收集南京市儿童医院临床住院患儿肾活检组织，经10% 福尔马林固定，常规脱水、透明、包埋，选取20例已明确诊断为Ⅲ型和Ⅳ型狼疮性肾炎的患儿肾穿刺标本病理诊断剩下的石蜡块，每块连续切2 μm 切片3张，分别采用三种不同方法进行Masson三色染色。
masson染色结果分析
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号：DC0032套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；2、切片常规脱蜡至水；3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
masson三色染色 原理
masson三色染色原理
Masson三色染色是一种常用于组织学研究中的染色方法，主要用于显示胶原纤维和细胞核等结构。
这种染色方法包括酸性橙G、酸性品红和天蓝三种染色剂，通过它们的染色特性可以清晰显示组织中的不同结构。
首先是酸性橙G染色，它主要用于染色胶原纤维和肌纤维。
酸性橙G是一种酸性染料，能够与碱性结构如胶原纤维反应并染色为橙色。
胶原纤维在组织中起着支持和结构维持的作用，通过酸性橙G染色可以清晰显示出它们的分布和形态。
其次是酸性品红染色，主要用于染色胶原纤维、细胞核和胶原蛋白。
酸性品红是一种酸性染料，能够与细胞核中的核蛋白和胶原蛋白等结构反应并染色为红色。
细胞核是细胞的核心器官，通过酸性品红染色可以清晰显示细胞核的形态和分布。
最后是天蓝染色，主要用于染色细胞核和细胞浆。
天蓝是一种碱性染料，能够与酸性结构如细胞核和细胞浆反应并染色为蓝色。
细胞浆是细胞内除细胞核以外的部分，通过天蓝染色可以清晰显示细胞核和细胞浆的对比。
综合这三种染色方法，Masson三色染色可以全面展示组织中的胶原纤维、细胞核和细胞浆等结构，为组织学研究提供了重要的信息。
通过合理使用这三种染色剂，可以细致地观察细胞和组织的结构，为研究细胞和组织的形态和功能提供有力的支持。
Masson三色染色方法的原理清晰明了，操作简便，是组织学研究中常用的染色方法之一。
Masson 三色染色试剂盒使用说明
Masson三色染色试剂盒使用说明Masson三色染色是结缔组织染色知更鸟最经典的一种方法，是显示组织中纤维的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量容易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构稀松的、渗透性高的组织。
然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson试剂盒的特点：◆染色稳定；◆分化时间短，1-2分钟；◆色彩清楚鲜艳；◆使用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；◆所染切片保存时间长且不易褪色。
产品组成：试剂（A-1）苏木素染色液25ml试剂（A-2）三氯化铁水溶液25ml试剂（B）盐酸乙醇分化液50ml试剂（C）氨水水溶液50ml试剂（D）丽春红酸性品红染色液50ml试剂（E）乙酸水溶液50ml试剂（F）磷钼酸水溶液50ml试剂（G）苯胺蓝染色液50ml注：临用时取A1、A2等量混合，成为试剂A，不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合。
形成不容性沉淀，等量混合后，一般24小时后失去人力。
主要成分：试剂（A）:主要由苏木素和三氯化铁组成。
试剂（B）:主要由乙醇和盐酸水溶液组成。
试剂（C）:主要由稀氨水水溶液组成。
试剂（D）:主要由丽春红和酸性品红组成。
试剂（E）:主要由乙酸水溶液组成。
试剂（F）:主要由磷钼酸水溶液组成。
试剂（G）:主要由苯胺蓝和弱酸组成。
操作步骤：固定液应选用甲醛盐溶液、中性福尔马林试剂（10%，NBF）进行固定。
1、试剂（A）染色5min-10min。
2、试剂（B）分化、水洗。
3、试剂（C）返蓝、水洗。
4、蒸馏水或者去离子水洗1min。
5、试剂（D）染色5-10min。
6、试剂（E）洗1min。
7、试剂（F）洗1-2min8、试剂（E）洗1min。
9、直接放入试剂（G）中染色1-2min。
masson三色法
masson三色法
Masson三色法是一种色彩分离技术，可以用于组织学分析、免疫组织化学及肿瘤学研究等领域。
它由法国医学家Lucien Masson发明并于1923年首次使用，是一种简单而有效的组织学染色技术，已被广泛应用。
首先，Masson三色法是一种组织学分析技术。
它可以用于研究细胞和结构组成，区分不同的细胞类型和分子分布。
这种染色方法涉及多种不同的染色剂，如酸性法尔胺蓝、酸性品红和橙Ⅱ，这些染料能够针对不同的细胞类型和结构成分显示不同的颜色。
通过Masson三色法，研究人员可以更好地了解不同细胞类型和组织结构的组成，并为未来研究提供基础。
其次，Masson三色法还可以用于免疫组织化学研究。
通过该技术，可以识别和可视化在组织切片中的某些特定蛋白质和分子。
这种分析方法广泛应用于癌症和病毒感染等疾病的研究。
研究人员可以通过染色技术分析肿瘤细胞中的不同标记物，从而更好地研究肿瘤的成因，进而探索治疗肿瘤的方法。
此外，Masson三色法还可以用于肿瘤学研究。
该技术对于肿瘤类型的区分和预后的评估非常有用。
由于这种方法可采用多种不同染色剂，可以区分不同类型的肿瘤细胞，并观察不同的细胞亚型和结构。
总之，Masson三色法是一种在组织学分析、免疫组织化学及肿瘤学研
究中广泛应用的技术。
研究人员通过多种染色剂的配合，实现了对细胞和结构成分的高效识别和观察。
在未来的医学和病理学研究中，这种技术将起到越来越重要的作用，成为一种更为准确、简便且可靠的检测手段。
介绍一种Masson三色的微波改良染色法
波技术 ， 染色过 程 中可 以使 固定 液 、 染 接 影 响 染 乜 效 果 。
料 分 子 扩 散 更 快 ． 定 效 果 更 好 ． 色 固 着
实用 医学杂志 ２ １ ０ ０年第 ２ ６卷第 ｌ Ｏ期
ｌ ６５ ８
介 绍 一种 Ｍａ ｓ ｎ三 色 的微 波 改 良染 色 法 ｓｏ
林云恩 许ｎ二 色 染 色 法 仍 是 胶 力 ， 到 了满 意 的效果 ， Ｍ ｓｏ 三 收 现介绍 如下 。 １ 材料与方法 原纤维 、 纤维 染色 的主要 方 法之 一 ， 肌 能 同 时 显 示 胶 原 纤 维 和 肌 纤 维 ．组 织 １１ 材料 ．
胞 核蓝 褐 色
３ 讨 论
图 ４ 肺泡间质增 生的胶原纤 维蓝色 ， 纤 维 、 细胞红色 ， 肌 红 细
异 。Ｍａｓｎ三 色染 色法 中丽春 红 ２ 有所不 同： ｓ ｏ Ｒ一 磷钼酸作用于胶 原纤维 ， 磷钨
微 波 是 一 种 高 频 电磁 波 ，用 于 病 酸 性 品 红 液 不 仅 对 肌 纤 维 等 具 有 染 色 酸作 用 于 纤 维 胶 质 、肌胶 质 等 ，两 者合 理 检 查 中 取 得 了 很 好 的 效 果 ．微 波 抗 能力 ， 时能将 胶原纤 维染 成 红色 ， 同 常 用 ， 促进 组 织 有 选 择 性地 着色 ： 原纤 可 胶 用 磷 铡 酸 分 化 。 以 除 去 胶 原 纤 维 所 染 维 和苯 胺 蓝 结合 更 牢 固 ，肌 纤 维着 色更 原 修 复 技 术 是 一 种 先 进 的 技 术 ， 已 广 泛 用 于 免 疫 病 理 研 究 工 作 中 ，但 用 于 红 色 ， 分 化 的 过 程 中 ， 纤 维 等 也 不 鲜艳 ． 在 肌 还能起到减少背景和核 的染色 ， 使 组 织 化 学 染 色 较 少 。本 方 法 融 入 微 同 程 度 被 褪 色 ， 个 切 片 呈 淡 红 色 ， 背景 更 清 晰 由于 常 规 Ｍａｓｎ三 色染 色 整 直 ｓ ｏ
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Masson染色(2010-09-02 14:43:20
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标签:杂谈分类:实验日志
masson 染色原理
Masson三色法
(根据Masson,1929
试剂配制
(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液
丽春红(Ponceau 2R 0.7g
酸性品红(acid fuchsin 0.3g
蒸馏水 99ml
冰醋酸(glacial acetic acid 1ml
(三 1%磷钼酸水溶液
磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g
蒸馏水加至 100ml
(四 2%苯胺蓝液
苯胺蓝(aniline blue 2g
冰醋酸(glacial acetic acid 2ml
蒸馏水加至 100ml
(五亮绿液
亮绿(light green 1g
蒸馏水 99ml
冰醋酸(glacial acetic acid 1ml
操作方法
1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:
(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗
(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟
3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固
结果:
胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:
1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
2.铁苏木素染核(见苦味酸一酸性品红法。
3.如没有丽春红染料,可把酸性品红加至1克来配制。
4.用1%磷钼酸处理时可在镜下控制.见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。
染色原理:
上面介绍的胶原纤维染色如苦味酸-酸性品红法和三色染色法,都是利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用而完成鉴别染色的。
Van Gieson氏染色中,为什么胶原纤维呈红色(被酸性品红所染,肌纤维呈黄色(被苦味酸所染.而Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所
染,肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染,这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
组织的渗透性(Permeability,取决于组织的结构密度。
如果细致地观察,会发现组织和细胞成分都
是多孔的构造。
不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。
孔隙的大小,决定了组织的渗透性。
如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。
如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。
由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.
染料分子的大小,主要由其分子量来体现。
小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。
一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。
常用作胶原纤维染色的几种阴离子染料的分子量由小到大分别是:
苦味酸(黄色,分子量,229.11
橙黄G(橙黄色,分子量452
丽春红(红色,j女子量,480.42
酸性品红(红色,分子量,585.53
苯胺蓝(蓝色,分子量737.72
亮绿(绿色,分子量792.72
甲基蓝(蓝色,分子量,799
因此,在Van Gieson氏法中,苦味酸染红细胞和肌纤维,酸性品红染胶原纤维,而在Masson氏法中,酸性品红或丽春红染肌纤维,而苯胺蓝或亮绿染胶原纤维。
染色
反应是一个很复杂的过程,胶原纤维染色除上述两个方面外,不排除电子吸附和排斥作用。
在实际染色中,两种阴离子染料的比例也是很重要的。
在Van Gieson氏染色,苦味酸与酸性品红浓的比例若不恰当,如苦味酸的浓度太高,小分子量染料苦味酸占优势,则结构致密的胞浆,肌纤维和结构疏松的胶原纤维都会被苦味酸所着染。
这点是要注意的。
应用:
胶原纤维和肌纤维的鉴别染色是病理组织制片的一个重要方法,它的染色对病理诊断很有帮助。
1.来源于间胚叶的肿瘤,如纤维瘤、平滑肌瘤、横纹肌瘤、神经纤维瘤甚至它们的肉瘤等都产生一定的纤维,这些纤维在H-E染色中都染成红色而难以区别。
通过用上述方法染色,一般可区分出该肿瘤组织是胶原纤维源性,还是肌源性,或者是神经纤维源性。
对于后者,有时还需加染磷
钨酸苏木素来协助诊断。
2.在慢性炎症,机化和瘢痕形成中,可随病理过程的发展而出现胶原纤维。
在早期,H-E染色切片中的这些纤维往往和纤维蛋白很难鉴别,通过胶原纤维染色则可证实。
如慢性肾小球肾炎的肾小球纤维化后,V.G.染色呈红色。
大叶性肺炎或血栓发生机化后,原有的纤维蛋白灶内出现胶原纤维,V.G.染色呈红色。
风湿性肉芽肿已静止时,阿啸夫氏(Aschoff's。
巨细胞消失,病灶内的纤维被胶原纤维取代,V.G.染色也呈红色。
胃、十二指肠溃疡愈复时,在渍疡底部出现胶原纤维构成的疤痕,慢性阑尾炎时阑尾壁出现的纤维化,肝硬化时胶原纤维的增生,这些用V.G。
染色也都染成红色。
3.血管壁的胶原纤维染色对病理诊断也很重要。
良性高血压,小动脉的玻璃样变,V.G.染色阳性。
恶性高血压病时,小动脉管壁为纤维素样坏死,V.G.染色阴性而纤维素染色阳性
4.V.G.染色对是高血压性血管疾患还是淀粉性样变血管损害的鉴别也很重要。
H-E染色的玻璃样变和淀粉样变有时很难区别,用V.G.染色和淀粉样物质染色则可
作出区别。
如高血压性肾固缩其小动脉壁V染色呈红色。
而淀粉样物质沉积的小动脉壁V.G.染色呈黄色。
备注
1 Bouin氏液是常用的混合固定液
配方: 苦味酸饱和液(1.22%75ml 福尔马林25ml 冰醋酸5ml 此液一般在临床用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
2 苦味酸-酸性品红法
一Weigert氏铁苏木素液
甲液苏木素 1g
无水酒精(或 95%酒精 100ml
乙液 29%三氯化铁水溶液 4ml
蒸馏水 95ml (30%三氯化铁溶液则为100ml
盐酸 1ml
临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
二 Van Gieson氏染液
A液:1%酸性品红水溶液
B液:苦味酸饱和水溶液(约1.2%
A、 B两夜分瓶盛放。
临用前取A液1份,B液9份混合后使用
操作方法
1 组织固定于10%甲醛液,常规脱水包埋
2 切片脱蜡至水
3 用Weigert氏铁苏木素染液5~10分钟
4 流水稍洗
5 1%盐酸酒精迅速分化
6 流水冲洗数分钟
7 用Van Gieson氏染液染1~2分钟
8 倾去染液,直接用95%酒精分化和脱水(可放入温箱烤干后,直接透明封片
9 无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固
结果:肌纤维,胞质及红细胞黄色,胞核蓝褐色。