生化检验项目校准ppt
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生化检验项目校准—盐城市第一人民医院左月媛
可将校准品作为控制品分析，每日测量2次，共10日，绘制
控制图；如需要我室可以做，但有的项目每天都校准怎么做？ 质控靶值变化大于1.0的SD，可认为有统计显著差异，并必
须对校准品值是否真正正确做出决定。？
校准过程需要讨论的其他问题
试剂因素 应该维持在日常工作状态这样才 能与患者样本同步
贮存稳定性„有效期标准， --10% ？ ‟ 开瓶稳定性„标准， K值cv±2% ？ ！ ‟ 新旧混合使用 不同批号使用
系统，有助于开放系统对测试结果进行追
溯，保证测试结果的准确和可靠。
校准品的浓度 ——校准需哪几个浓度水平？
ISO 11095:1996标准——3个（对于初次校准应该增加校准水平的数量） EURACHEM “分析方法的目标适用性”指南——包括空白至少6个浓度水平 Commission Decision 2002/657/EC规定：包括零浓度至少5个浓度水平 ISO 15302:2007标准规定了4个校准水平 LGC/VAM “校准曲线的制备” 指南规定7个校准水平（包括空白） ISO 8466-1:1990甚至要求10个浓度水平
115(89U/L)
总
4942.04
4983.12
17
354
ALP不同批号校准品
校准品批号 111(109U/L) 112(206U/L) 113(205U/L) 114(216U/L) 115(212U/L) 总 均值 5446.9 5477.8 5398.1 5836.0 5631.2 5545.7 次数 171 89 55 102 17 434 CV 5.13 4.05 2.89 3.97 4.21 3.21
生化检验项目校准
盐城市第一人民医院
2012.12
【2024版】生化检验基础知识-PPT课件
2. 血液标本的采集
生化检验用的血液标本可来自于静脉、 动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本， 静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采 血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。
（1） 采血前准备
为了使实验室结果有效地用于临床，实验室 应了解在收集标本前和收集标本时，所有会 影响实验室的非患者内在疾病因素。采取各 种措施，提出对患者采集标本前以及采集时 的要求，称之为患者准备。
（2） 注意事项 收集尿液标本的容器必须清洁干燥， 最
好是一次性使用的容器。若容器反复使用， 则须用洗涤液和自来水清洗， 再用蒸馏水冲 洗。尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、 精液、前列腺液、粪便等异物。尿标本收集 后应 12 时内送检，以免细菌作用和化学成分 分解。若不能及时检验（如收集 24 小时尿 液），将标本置冰箱保存，若加入防腐剂， 保存效果更佳。
对不是因操作不当引起的溶血、脂血或胆红 素血，应在检验报告上注明，供医生参考。
尿液、脑脊液和胸腹水等标本常需离心，取 上清液进行分析
Байду номын сангаас
分离后的标本若不能及时检测或需保留以备 复查时，一般应放于4℃冰箱，某些检测项 目的标本存放于-20℃冰箱更稳定。标本存 放时需加塞，以免水分挥发而使标本浓缩。
3.尿液标本的采集
尿液标本的采集 （1） 采集方法 尿液标本有随机新鲜尿、定时尿及 24 小时尿， 根据检查项目选择标本的采集类型。定量生化分析 多收集 24 小时尿液， 24 小时尿标本采集方法如 下：
嘱病人在早晨 8 时排尿弃去，以后每次排尿均 收集于一大容器内，至次日早晨 8 时最后一次尿亦 收集于容器内。测量并记录 24 小时尿液总量，然 后混匀尿液，取适量尿液送检。
通常用量为0．5 ～1．0ml 浓盐酸／100 ml 尿液，适用于24 小时尿儿茶酚胺、秀草 扁桃酸（V M A）、17 －羟皮质类固醇和 17 －酮类固醇等定量测定。
临床生化检查PPT课件
元素 1、增高：FBG > 7.0mmol/L---高血糖症
心肌 标志
生理性↑：餐后1/2～1h, 摄糖过多 病理性↑：糖尿病，内分泌疾病，应激性
高血糖，药物影响，其他。
甲功 检查
2、降低：FBG < 2.8mmol/L---低血糖症
生理性↓：饥饿，长期剧烈运动，妊娠期 病理性↓：胰岛素过多,缺乏抗胰岛素激素
血脂
体恒定供能来源，存在于β脂蛋白和
检查
乳糜微粒中，血中TG直接参与CHO及
无机 元素
CE形成，是动脉粥样硬化的危险因素 【参考值】 ≤1.7mmol/L
心肌 【临床意义】 标志 1.升高:冠心病、原发性高脂血症、肥胖症等
甲功 检查
2.降低:甲亢、严重肝病、肾上腺皮质功能 降低、低（无）β脂蛋白血症等。
无机 【参考值】 ＜5.2mmol/L
元素 【临床意义】
心肌 标志
1.增高:动脉粥样硬化、高脂血症、胆道梗阻、 肾病综合征、糖尿病、甲减等
甲功 2.降低:严重肝病（肝黄，门脉性肝硬化） 、贫
检查 血、营养不良、甲亢、恶性肿瘤。
Chapter7 临床常用生化检查
血糖 (二)血清甘油三脂测定
代谢 【原理】 TG由肠道摄取入血，肝脏也合成。机
检查 温开水中,5min内服完并计时,于30min,1h,2h,
3h抽静脉血1ml,每次抽血后留尿标本送检。
血糖 代谢 血脂 检查 无机 元素 心肌 标志 甲功 检查
(二)口服葡萄糖耐量试验(OGTT) 葡萄糖耐量曲线
Chapter7 临床常用生化检查
血糖 (二)口服葡萄糖耐量试验 代谢 【临床意义】
无机 ④妊娠期,复摄甲糖正亢常后,肝，病为血时耐糖出糖浓现现度糖象急尿。剧者升；高，短时
医学生化临床检验精品PPT课件
清(白)蛋白（A） 溴甲酚绿法 40-55 g/l
球蛋白（G） G=STP-A 20-30 g/l
原理：在PH8.6的碱性环境中， 清蛋白带负电荷，向阳极泳动， 球蛋白带正电荷，但因等电点和 相对分子量的差异，泳动速度不 一而得以分离从阳极依次……..
血 清 蛋 白 质
血 清 蛋 白 电 泳
白/球比值 (A/G) 1.5-2.5:1
血清总胆红素（STB）
应用J-G方法，使用茶碱和甲醇作为溶
剂，以保证血清中结合胆红素与非结
合胆红素完全被溶解，并与重氮盐试
剂起快速反应，即为STB。
参考值
新生儿 0～1天 34～103μmol/L
可溶性结合胆红素
1～2天 103～171μmol/L 不溶性非结合胆红素
CB
3～5天 68 ～137μmol/L
升高程度判断黄疸类型
STB ↑UCB ↑ ↑溶血性黄疸 STB ↑CB ↑ ↑胆汁淤积性黄疸 STB ↑UCB ↑ CB ↑ 肝细胞性黄疸
判断有无黄疸、黄疸程度（STBμmol/L）
隐形黄疸 轻度黄疸 中度黄疸 重度黄疸
17.1-34.2 34.2-171 172-342 >342
① ③ 胆红素
临床意义
急性肝炎，GGT中度升高， 慢性肝炎、肝硬化的非活动 期时，酶活性正常，若GGT 持续升高，提示病情恶化。
非病毒非性肝病 如酒精性肝炎、药物性肝炎、脂肪肝和肝癌等，转氨酶轻度上 升或正常，ALT/AST<1;酒精性肝病时AST可显著升高,ALT几乎 接近正常.
14
ALT、AST的临床意义
血清氨基转移酶测定（3）
肝硬化 转氨酶活性取决于肝细胞坏死程度，终末期转氨酶正常或 降低
球蛋白（G） G=STP-A 20-30 g/l
原理：在PH8.6的碱性环境中， 清蛋白带负电荷，向阳极泳动， 球蛋白带正电荷，但因等电点和 相对分子量的差异，泳动速度不 一而得以分离从阳极依次……..
血 清 蛋 白 质
血 清 蛋 白 电 泳
白/球比值 (A/G) 1.5-2.5:1
血清总胆红素（STB）
应用J-G方法，使用茶碱和甲醇作为溶
剂，以保证血清中结合胆红素与非结
合胆红素完全被溶解，并与重氮盐试
剂起快速反应，即为STB。
参考值
新生儿 0～1天 34～103μmol/L
可溶性结合胆红素
1～2天 103～171μmol/L 不溶性非结合胆红素
CB
3～5天 68 ～137μmol/L
升高程度判断黄疸类型
STB ↑UCB ↑ ↑溶血性黄疸 STB ↑CB ↑ ↑胆汁淤积性黄疸 STB ↑UCB ↑ CB ↑ 肝细胞性黄疸
判断有无黄疸、黄疸程度（STBμmol/L）
隐形黄疸 轻度黄疸 中度黄疸 重度黄疸
17.1-34.2 34.2-171 172-342 >342
① ③ 胆红素
临床意义
急性肝炎，GGT中度升高， 慢性肝炎、肝硬化的非活动 期时，酶活性正常，若GGT 持续升高，提示病情恶化。
非病毒非性肝病 如酒精性肝炎、药物性肝炎、脂肪肝和肝癌等，转氨酶轻度上 升或正常，ALT/AST<1;酒精性肝病时AST可显著升高,ALT几乎 接近正常.
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ALT、AST的临床意义
血清氨基转移酶测定（3）
肝硬化 转氨酶活性取决于肝细胞坏死程度，终末期转氨酶正常或 降低
生化检验室内质控 PPT
质控品的使用与保存应注意
❖ 严格按照说明书操作。 ❖ 冻干质控品复溶要确保所用溶剂的质量。 ❖ 冻干质控品复溶时所加溶剂的量要准确，并尽量保持
每次加入量的一致性。 ❖ 冻干质控品复溶时应轻轻摇匀，使内溶物完全溶解，
切记剧烈振摇。 ❖ 质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定。 ❖ 质控品应严格按照使用说明书规定的方法保存，不使
液体试剂与干粉试剂
1.液体试剂 ❖ 不需加水复溶，使用方便 ❖ 批间误差小，重复性好 ❖ 杜绝干粉试剂复溶时因水质不好引起试剂变质 ❖ 有利于急诊标本
2.干粉试剂 ❖ 有效期长（18个月），有利于保存 ❖ 复溶的操作、蒸镏水质等都应符合说明书要求，
否则会影响测量结果 ❖ 批间误差大 ❖ 价格稍贵
试剂的使用及保存
一 制定室内质量控制程序文件
❖ 对仪器、试剂、质控品、校准品等的使用进行 详细规定，参与质量控制的工作人员必须严格 执行。
❖ 对相关人员进行培训，充分了解质量控制的理 论、方法和技术操作。
购置论证书、仪器说明书、使用说明书。 建立相关的安装调试、仪器维护、使用、惟一标识、用途、工作条 件、工作状态、适用范围等记录。
操作者：
按规定做质控并记录 发报告前检查有无失控 无失控，签字发出报告 失控，报告质量负责人 按规定程序检查失控原因
三 建立标准操作规程与仪器维护程序
❖标准操作规程(SOP):
是指与实验相关的操作过程文件。最 有可操作性，也是使用频率最高的文件， 如仪器的操作使用、校准及维护；检验项 目的操作程序等。
❖ 概念 由实验室工作人员采用一系列的方法，连
续的评价本实验室工作的可靠程度，确立报 告能否发出的过程。一般通过检测质控品来 实行。
室内质量控制的意义
生物化学检验ppt课件
酶类CK-MB,α-AMY等。
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA， UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，NH4+,CO2 等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波，称为紫外光，波长从400nm-760nm 的电磁波，称为可见光。以波长(λ)为横坐标，以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线，在一段波长范围内，有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin，在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种，适用于酶活性测 定和代谢物检测，多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是：在酶反应的最适 条件下，用物理、化学或酶促反应的分析方法，在反 应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化，以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有：1） 绝对法：酶活力（U/L）=△A×（反应液体积/样品体 积）×（1000/消光系数）；2）相对法：酶活力 （U/L）=〔 △A （测定）/ △A （标准） 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法，它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来，可加双试剂的生化分析 仪问世后，才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度，以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是：加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2，其中要读取两次吸光度值，第一次相当于读出样 品空白的值，加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应，因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法，不过 是一种浊度测定，而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法，免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定，如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA， UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，NH4+,CO2 等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波，称为紫外光，波长从400nm-760nm 的电磁波，称为可见光。以波长(λ)为横坐标，以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线，在一段波长范围内，有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin，在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种，适用于酶活性测 定和代谢物检测，多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是：在酶反应的最适 条件下，用物理、化学或酶促反应的分析方法，在反 应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化，以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有：1） 绝对法：酶活力（U/L）=△A×（反应液体积/样品体 积）×（1000/消光系数）；2）相对法：酶活力 （U/L）=〔 △A （测定）/ △A （标准） 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法，它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来，可加双试剂的生化分析 仪问世后，才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度，以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是：加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2，其中要读取两次吸光度值，第一次相当于读出样 品空白的值，加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应，因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法，不过 是一种浊度测定，而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法，免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定，如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
生化检测系统性能验证PPT课件
基本概念
误差（error）指对于真值或对于可接受 的、预期真值或参考值的偏离，分为随 机误差和系统误差。
总误差（total error）指某实验室用某方 法在多次独立检验中分析某样品所得各 个结果值与靶值之差在一定置信区间内 的最大值。包括随机误差和系统误差， 是不准确度的估计值。
文件依据
CLSI 颁布的EP15-A文件《用户对精密度 和准确度性能的核实指南》
通常是生产厂家完成。
什么是性能验证？
对他人或厂商的评价资料中的几个主 要性能进行证实。
通常由实验室自己完成。
性能验证试验
对配套系统，一般验证下列指标： ―准确度(accuracy)---EP15 -A ―精密度(precision)---EP5-A2 ―线性范围（linear range )---EP-6 ―可报告范围(reportable range)---EP-6 ―参考区间(reference interval)---C28-A2
基本概念
3. 不同测量系统可使用不同测量程序。 4. 应在实际程度上给出改变或不改变条 件的说明。
基本概念
中间精密度
在一组测量条件下的测量精密度，这些 条件包括相同的测量程序、相同地点并且对 相同或相似的被测对象在一长时间段内重复 测量，但可包含其它相关条件的改变。
1. 应在实际程度规定改变和未改变的条件， 特别是如校准物、试剂批号、设备系统、操 作者和环境条件等变量。
文件依据
CLSI 颁布的EP-17A文件进行灵敏度 性能评价。
功能灵敏度实验程序
将校准品或质控品稀释后，在仪器上分 别对不同浓度的样品连续测定20次，
计算均值、标准差和变异系数， 以不精密度（CV）≤ 20%时对应检测
检验科讲课—生化(PPT精选课件)
正常人 溶血性黄疸
DBIL 0~6.8 轻度增高
肝细胞性黄疸 中度增高
阻塞性黄疸 明显增高
IBIL 1.7~10.2 明显增高
中度增高
轻度增高
DBIL/TBIL >35% <20%
>35%
>35%
14
-谷氨酰转移酶（-GT）
• -GT广泛分布于肝、肾、胰、脾、脑、肺、骨骼肌、心肌等处。 在肝脏的活性强度居第三位，分布于肝细胞毛细血管一侧和整个 胆管系统，在胆汁淤滞，肝内-GT合成亢进。酒精性肝损害时此 酶亦升高。
• 血清胆红素分为结合与非结合胆红素，二者合称总胆红素。 TBIL=DBIL+IBIL
• TBIL:<34为隐性黄疸， <170为轻度黄疸， <340为中度黄疸， >340为高度黄疸，完全阻塞性黄疸为340~510；不完全阻塞者为 170~265，肝细胞性黄疸17~200；溶血性黄疸<85
13
三种黄疸的胆红素变化比较
• 影响ALT活力的生理因素，饮酒和剧烈运动后其轻度升高，但很 少超过100 IU
6
谷丙转氨酶GPT、ALAT
• ALT增高常在肝炎早期症状出现之前，约经4~8周后多数降至正常。 特别是乙型肝炎，此酶持续时间较长，且恢复正常较慢。但轻型 无黄疸肝炎仅有短暂或一时性升高，且程度不显著，甚至2~3天 后降至正常。如果此酶长期波动在较高水平，持续半年以上，应 考虑迁延型或慢性肝炎的活动期，至肝炎静止期或代偿期的肝硬 变，常不增加。
• AST/ALT<1 ，见于一般急、慢性肝炎； AST/ALT >2，则有肝硬变可能；12% 的肝硬化患者
>3 AST/ALT >3 ，则有肝癌变可能性，或应进行相关检
生化分析仪的校准
二O一一年一月北京九强姜永君实验结果的可靠性精密度准确性可比性校准的重要性和必要性临床实验室（定量测定）室内质控工作指南“对测定标本的仪器一定要求进行校准，校准时要选择合适的（配套的）标准品/校准品；如有可能，校准品应能溯源到参考方法或/和参考物质；对不同的分析项目要根据其特性确立各自的校准频率。
”卫生部临床检验中心测定系统❖操作程序❖试剂❖仪器❖校准品校准品的定义充分均匀并具有一个或多个良好确定的特性值的材料或物质，用来校准仪器设备、评估测定方法或给其它物质赋值。
标准品值的读取❖测定方法（试剂）❖生化分析仪（仪器）定值质控血清是否可以校准仪器？不同厂家定值质控对TP、ALB、UREA、AST、ALP结果与靶值比较TP ALB UREA AST ALP T偏差%T偏差%T偏差%T偏差%T偏差%汽巴康宁157 4.39290 5.0 4.543-10.596 4.2汽巴康宁246 4.8924 2.0819.3-5.76184-11.72650.2宝灵曼150 2.034.8-5.178.960.4558.3-11.2-242 2.7宝灵曼248.6 2.8833.7-5.0424-6.77140-12.3384 2.7 RANDOX159.7 6.3640.8 3.887.67 4.362-17.7214-16.1 RANDOX2398.3326.9 5.9821.6-5.67144-12.7394-17.1 Human172 4.1846.7-4.18 3.78 5.1633.5-7.5168-2.2 Human229.8-2.6829.8-2.7625.1-5.08151-11.7287-9.1 Bio-Red163039 1.287.1024-14.62522 Bio-Red242 1.7927018.0-4.44201-14.32980.84上述结果比较的结论❖不同厂家生产的定值质控血清靶值之间有的相差较大，提示我们决不能用定值质控血清代替校准品作校准用酶活性测定校准问题❖酶活力（u/l）=△A/min×TV×106/(ε×Sv×1)令k=TV×106/（ε×Sv）则酶活力（u/l）=△A/min×k常用K值❖理论K值：根据理论摩尔消光系数（ε）来计算，如NADH为6.22×103❖实测K值：由于仪器波长的精密及半宽度不同，而应根据实测ε值来设定K值❖厂家给的K值：厂家生产试剂盒说明书上提供的K值（有的厂家提供6.3×103）❖校准K值：通过校准物直接校准得到的K值日立7170A全自动生化分析仪上用不同方法得到几种酶的K值指示物波长理论K值实测K值校准K值ALT NADH340nm24442642（8.1%）3026（23.8%）AST NADH340mm24442642（8.1%）2775（13.5%）CK NADPH340mm38783878（8.1%）3886（8.3%）GGT4NA405mm14181539（8.5%）1612（13.7%）GGT4NB405mm14751739（17.9%）——ALP4NA（PH10）405mm757825（8.9%）——建立校准方法确定校准的频度，至少每六个月进行一次校准。
生化检验实验室基本知识PPT医学课件
三、生化检验项目
（二）急诊生化检验项目
急诊项目：指对临床危急、重症病人的诊断、 抢救和治疗有重要指导意义的检验项目。一 般要求从“标本采取”到“检验报告”发出 控制在2h内。如血气分析、肾功、电解质、 心功等
急 诊 项 目
危 急 值
常 规 项 目
检验项目
三、生化检验项目
（三）特殊项目 指标本采集技术高，或标本数量少，或含有
转动后，方可打开离心机盖，取出样品
(二)电解质分析仪
溶液中被测离子接触电极时 ，在离子选择电极基质的含 水层内发生离子迁移，迁移 离子的电荷改变存在电势， 使膜面间的电位发生变化， 在测量电极与参比电极间产 生一个电位差，测量电位差 大小可求得待测离子浓度
(三)血气分析仪
血气分析仪不仅能在几分钟 内检测出病人血液中的氧气、 二氧化碳等气体的含量和血 液酸碱度及相关指标的变化， 还能快速反映血液中钾、钠、 钙的含量，为危重病人抢救 中快速、准确的检测提供了 有利的保障。
2.饮食因素： 下降：Alb、铁、钾、总胆
3.药物因素： 4.溶血因素： 5.储存因素：
受饮食影响的项目
项目：GLU、TG、ALP、血酯、丙酮酸、乳酸、 BUN、UA、转氨酶等
原则：空腹6-12h后采血
受药物影响的项目
药物影响检验结果途径： 1.药物本身对检验方法的影响 2.药物代谢产物对检验方法的影响 3.药物对代谢器官功能的影响 原则：检验受某种药物影响的项目之前3天，
固定相具有离子交换性能。主要用于分离氨基酸、多肽、蛋 白质、核酸、同工酶等
高效液相层 分离能力强、测定灵敏度高、可室温下进行。主要用于分离
析法
蛋白质、核酸、氨基酸等
操作简单、快速、分离效率高，但必须针对某一分离对象， 亲和层析法 制备专一配基和寻求层析的稳定条件，应用范围受到限制。
临床生化检验校准与检验结果溯源性ppt课件
A
18
ISO 15189
5.6 检验程序质量保证 ... ... 5.6.3 应设计并实施测量系统校准和正确性验证程序，以保证结 果可溯源至SI单位，或可参比一个自然常数或其它规定的标准。 如果以上都无法实现或不适用，应采用其他可提供结果可信性 的方法，包括但不限于下列方法： a) 参加适当的实验室间比对计划； b) 使用合适的有证书说明其特性的参考物质； c) 以其它程序进行检验或校准； d) 进行比率型或互易型的测量； e) 使用明确规定的各方接受的协议标准或方法； f) 供应商或制造商提供的溯源性文件。
A
19
欧洲指令与ISO 15189
欧盟指令：
校准物和/或质控物定值的溯源性必须通过已有的较高级 的参考测量程序和/或参考物质予以保证
ISO 15189：
5.6 检验程序质量保证 …… 5.6.3 应设计并实施测量系统校准和正确性验证程序，以 保证... ...
A
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临床检验项目分类
A 类检验项目
A
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溯源的作用
溯源理论上解决的是准确性问题(校准问题)
准确性不足是重要的临床检验质量问题
影响结果“临床准确性”的因素是多方面的
方法：校准、特异性、线性、精密度、灵敏度等 样品采集与处理，病人准备，(生物变异)，人为错误
许多检验指标尚难实现真正意义的溯源
A
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几点思考：
“理想”与“现实” “善待”我们的行业(临床实验室和厂家 我国临床检验参考系统
化学定义明确 有完整溯源链，结果可溯源至SI单位 电解质、代谢物、非肽激素、多数药物/维生素、少数 蛋白质；酶催化浓度
B 类检验项目
化学定义不明确或很难明确 用约定单位表示量值，不可溯源至SI单位 多数蛋白质、核酸
医学检验之生化篇 ppt课件
（ 2 ）.系统控制中心的标准配置有：触摸式彩色显示 屏，PⅢ以上的显示屏，1.44MM软盘驱动器，CDRW可读写式光盘驱动器，标准键盘，鼠标，网络 HUB,各类以太网接口。另可选打印机、条码阅读器、 UPS等。
一.生化仪的概况 2.全自动生化分析仪的组成（ Abbott accelerator C16000 ） （ 3 ）.运行模块（PM）
（四）.检测项目 3.糖代谢系列
一.生化仪的概况
果糖胺（FMN）
糖化白蛋白（GA） 甘油三酯（TRIG）
葡萄糖（GLU）
糖化血红蛋白（HbA1c） 4.血脂系列 胆固醇（CHOL）
高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）（高密度）
低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）（低密度）
载脂蛋白A-1（APO A-1） 载脂蛋白B（APO-B）
（2）缺点：处理样品量不大、存在误差
2.全自动生化仪的优缺点
（1）优点：大批量的测试、支持多水平质控、支持 LIS系统 、 杜绝项目间干扰等
（2）缺点：价格昂贵等
（三） .生化分析仪的组成 一.生化仪的概况 1.半自动生化分析仪的组成
原理：检测样品对某单色光的吸收程度以及反应过程 中吸光度的变化，连续流动式的原理。
1.肝功能系列：
总蛋白（TP） 白蛋白（ALB） 胆碱酯酶（CHE） 前白蛋白（PALB）
甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（GPDA）
腺苷脱氨酶（ADA） α-L-岩藻糖苷酶（AFU）
一.生化仪的概况
（四）.检测项目
2.肾功能系列
尿酸（UA）
尿素氮（尿素）（BUN）（UREA）
肌酐（CREA） 胱抑素C（Cystatin C） N-乙酰-ß-D-氨基葡萄糖苷酶 ß2微球蛋白（BMG）
第二章--生物化学检验基本知识PPT课件
2024/10/16
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二、生物化学检验报告单的发放
即使是临床医护人员能够通过“医院信息系统（HIS）”在医生 工作站直接读取检验结果的临床科室或医疗单位，实验室也 应该用电话向临床报告，这是考虑到临床一线医护人员可能 会忙于抢救而不能及时观察到检测结果需要提醒的缘故。
“危急值”报告不同于“急诊检验”报告，是两个完全不同
4．技术要求高的检测项目 检测系统本身的不稳定因素，影响检验结果可靠性的检
验项目，或者检测系统本身存在着影响检验质量的诸多人
为环节，对检验人员的理论和技能要求较高的检验项目。
（三）急诊生化检验
急诊检验是实验室为了配合临床对危、急、重症患者的诊 断和抢救而实施的一种特需检验。如血气分析、电解质、 淀粉酶、心肌标志物、血糖等。
2．标本难以获得的检测项目
某些检验项目的标本获得比较困难，或者因为标本数 量极少，对标本的处理和保存都不能按规定要求和程序 进行，甚至不能进行复检的检验项目。
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一、生物化学检验的项目
3．发病率低或成本高的检测项目 由于某疾病的发病率很低造成标本数量过少或检验成 本过高的检验项目。
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第二节 生物化学检验的标本
一、标本的采集
生物化学检验最常用的标本是血液，其次是尿液，此外还有 脑脊液、浆膜腔积液、羊水等各种体液。 正确采集标本是获得准确、可靠检验结果的关键。
标本采集时应尽可能避免一切干扰因素，选择最佳的采集时 间，减少饮食和药物影响，减少昼夜节律带来的干扰。对于 有创伤性的操作，操作前应先与患者沟通建立互信，消除患 者的恐惧和紧张情绪。
剂及抗凝原理；尿液标本的采集方法；标本收检、分离、储存和转运；生物 化学检验项目类型；危急值、危急值报告的概念；检验报告单的发放方式。
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浓度分别设置为：0、10、33umol/L。
二、了解情况： 查看校准结果，发现其每个浓度的吸光度实
际在该仪器上已做出测定，分别为：0：-0.0027 10：-0.0344 33：-0.0738，但参与最终结果 计算的Cal Factor（校准因数）却显示为0，说 明该仪器并未通过所测定的吸光度进行曲线拟合 ，故出现“校准失败”报警。
logit-log4p对数函数法中的一种，适用于浓度升 高而吸光度表现为收束的工作曲线。
样条函数法（spline）：是将每一标准液测定的 吸光度连接起来（点对点），形成一个完整曲线 ，即为曲线拟合。该曲线拟合优于折线法校准。
•logit-logXp与样条函数法
•抛物线型(左下图)，则多考虑用logic方法拟合。 •曲线类型不确定时，或校准曲线类型如图12-37所示 的S型非线性校准类型，则多考虑Splain方法拟合。
冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出 样本，置室温（18-25）℃下平衡，使之完全融化 ，温和混匀。
冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室 温（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，轻 拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该小瓶底部，小 心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确 加入规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温 下使之完全溶解，温和混匀。
生化检验项目校准
泸州市人民医院
校准：在规定条件下，为确定测量仪器(或 测量系统)所指示的量值，或实物量具(或参考 物质)所代表的值，与对应的由标准所复现的量 值之间关系的一组操作。
仪器的性能验证：
• 零点漂移 • 波长准确度及重复性 • 杂散光 • 吸光度正确度 • 吸光度重复性 • 吸光度线性误差 • 交叉污染率 • 温度正确度 • 比色杯间差距
Cal Factor 吸光度
0 umol/L 5 umol/L 10 umol/L
-87.2
-213.5
16.5 umol/L -279.6
33 umol/L -365.3
-0.0032 -0.0195 -0.0366 -0.0558 -0.0744
5、之后校准显示通过，质控在控，证明校准成功
四、分析： 1. 全自动生化分析仪的校准模式设置中均有线性或
非线性的选择。当我们对其进行设置时，会根据 试剂盒的反应原理选择合适的校准模式。 2. 通常情况下，常规的生化项目我们会选择线性模 式校准，而免疫比浊项目我们会选择非线性模式 校准。 3. 若选择线性校准，往往我们只需带一个校准品进 行两点校准即可。 4. 若选择非线性校准时，我们会带多个浓度校准品 进行多点校准。
应按厂家提供说明书操作。
校准品浓度水平及个数选择 • 校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。 • 校准范围也定义为分析方法的工作范围。 • 个数要与仪器要求相匹配
案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），avelength：340nm；
Secondary wavelength：700nm； Main read time：31-33； Blank read time：26-28； Sample volume：10ul； R1 reagent volume：185ul； R2 reagent volume：50ul； Calibration method：Spline； 校准品个数设置：3；
三、处理： 1. 分别对10umol/L、33umol/L的校准品进行对倍
稀释，得到5umol/L、16.5umol/L浓度的校准； 2. 把参数中校准品个数修改为：5； 3. 浓度设置修改为0、5、10、16.5、33umol/L。 4. 仍采用Spline定标模式重新进行校准，后校准
顺利通过，结果如下：
检测项目校准
校准目的是准确度的传递
一级标准品
决定性方法
参考方法
溯
二级标准品
校
源
厂家方法
准
校准品
常规分析
项目校准主要涉及内容
• 校准方法的选择 • 校准品的选择及准备 • 校准频率的选择 • 校准后的验证 • 问题讨论
校准方法的选择
线性
• 线性校准方法需选用1个或多个已知浓度的标准物 质或校准品，1点线性校准通常被定义为K因子校 准，仅空白溶液用于校准；在生化分析仪上最常
5.不同的仪器，在做非线性校准时所要求的校准品 个数是不同的。 例如： ① 日立、奥林巴斯等仪器，要求至少带三个浓度的
校准品即可进行非线性拟合； ② 贝克曼、东芝等仪器，则要求至少带四个浓度的
用的2点线性校准等同于分析化学中的外标2点法， 需使用空白溶液和1个已知浓度的校准品。
非线 性
• 如果测量方法的反应信号与被测量浓度不成线性反 应（如免疫分析方法），则应选用非线性校准模式，
需涉及3至6个校准品，采用曲线拟合、多项式、对 数等方式建立非线性函数。
K因子法（+ -）： 理论k值：根据理论摩尔消光系数来计算。通常试 剂生产厂家给出的k值都属于。 实测K值：是根据仪器实测的摩尔消光系数来设置K 值 校准k值：是根据仪器当前的实际状态，试剂的稳 定性等通过校准品校准后得到的K值。
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点 终点法，两点速率法，多点速率法。
线性校准（Linear）：其反应为线性（直线） ，一般只需一个校准品进行校准。
非线性法：又称非直线性校准法 非线性法包 括logit-log法、指数函数法、样条函数法等 方法 Logit-log3p对数函数法中的一种，适用于浓 度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。P表 示参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参与 计算。S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜 率，a表示近似常数。
校准品的选择及准备
校准品：含有已知量的欲测物，用以校准该测定 方法的数值，它与该方法、试剂、仪器是相关联 的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂 等造成的系统性误差。
最好为人血清基质，减少基质效应 仪器、试剂、校准品的配套性 如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质 要有明确的不确定度
二、了解情况： 查看校准结果，发现其每个浓度的吸光度实
际在该仪器上已做出测定，分别为：0：-0.0027 10：-0.0344 33：-0.0738，但参与最终结果 计算的Cal Factor（校准因数）却显示为0，说 明该仪器并未通过所测定的吸光度进行曲线拟合 ，故出现“校准失败”报警。
logit-log4p对数函数法中的一种，适用于浓度升 高而吸光度表现为收束的工作曲线。
样条函数法（spline）：是将每一标准液测定的 吸光度连接起来（点对点），形成一个完整曲线 ，即为曲线拟合。该曲线拟合优于折线法校准。
•logit-logXp与样条函数法
•抛物线型(左下图)，则多考虑用logic方法拟合。 •曲线类型不确定时，或校准曲线类型如图12-37所示 的S型非线性校准类型，则多考虑Splain方法拟合。
冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出 样本，置室温（18-25）℃下平衡，使之完全融化 ，温和混匀。
冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室 温（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，轻 拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该小瓶底部，小 心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确 加入规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温 下使之完全溶解，温和混匀。
生化检验项目校准
泸州市人民医院
校准：在规定条件下，为确定测量仪器(或 测量系统)所指示的量值，或实物量具(或参考 物质)所代表的值，与对应的由标准所复现的量 值之间关系的一组操作。
仪器的性能验证：
• 零点漂移 • 波长准确度及重复性 • 杂散光 • 吸光度正确度 • 吸光度重复性 • 吸光度线性误差 • 交叉污染率 • 温度正确度 • 比色杯间差距
Cal Factor 吸光度
0 umol/L 5 umol/L 10 umol/L
-87.2
-213.5
16.5 umol/L -279.6
33 umol/L -365.3
-0.0032 -0.0195 -0.0366 -0.0558 -0.0744
5、之后校准显示通过，质控在控，证明校准成功
四、分析： 1. 全自动生化分析仪的校准模式设置中均有线性或
非线性的选择。当我们对其进行设置时，会根据 试剂盒的反应原理选择合适的校准模式。 2. 通常情况下，常规的生化项目我们会选择线性模 式校准，而免疫比浊项目我们会选择非线性模式 校准。 3. 若选择线性校准，往往我们只需带一个校准品进 行两点校准即可。 4. 若选择非线性校准时，我们会带多个浓度校准品 进行多点校准。
应按厂家提供说明书操作。
校准品浓度水平及个数选择 • 校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。 • 校准范围也定义为分析方法的工作范围。 • 个数要与仪器要求相匹配
案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），avelength：340nm；
Secondary wavelength：700nm； Main read time：31-33； Blank read time：26-28； Sample volume：10ul； R1 reagent volume：185ul； R2 reagent volume：50ul； Calibration method：Spline； 校准品个数设置：3；
三、处理： 1. 分别对10umol/L、33umol/L的校准品进行对倍
稀释，得到5umol/L、16.5umol/L浓度的校准； 2. 把参数中校准品个数修改为：5； 3. 浓度设置修改为0、5、10、16.5、33umol/L。 4. 仍采用Spline定标模式重新进行校准，后校准
顺利通过，结果如下：
检测项目校准
校准目的是准确度的传递
一级标准品
决定性方法
参考方法
溯
二级标准品
校
源
厂家方法
准
校准品
常规分析
项目校准主要涉及内容
• 校准方法的选择 • 校准品的选择及准备 • 校准频率的选择 • 校准后的验证 • 问题讨论
校准方法的选择
线性
• 线性校准方法需选用1个或多个已知浓度的标准物 质或校准品，1点线性校准通常被定义为K因子校 准，仅空白溶液用于校准；在生化分析仪上最常
5.不同的仪器，在做非线性校准时所要求的校准品 个数是不同的。 例如： ① 日立、奥林巴斯等仪器，要求至少带三个浓度的
校准品即可进行非线性拟合； ② 贝克曼、东芝等仪器，则要求至少带四个浓度的
用的2点线性校准等同于分析化学中的外标2点法， 需使用空白溶液和1个已知浓度的校准品。
非线 性
• 如果测量方法的反应信号与被测量浓度不成线性反 应（如免疫分析方法），则应选用非线性校准模式，
需涉及3至6个校准品，采用曲线拟合、多项式、对 数等方式建立非线性函数。
K因子法（+ -）： 理论k值：根据理论摩尔消光系数来计算。通常试 剂生产厂家给出的k值都属于。 实测K值：是根据仪器实测的摩尔消光系数来设置K 值 校准k值：是根据仪器当前的实际状态，试剂的稳 定性等通过校准品校准后得到的K值。
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点 终点法，两点速率法，多点速率法。
线性校准（Linear）：其反应为线性（直线） ，一般只需一个校准品进行校准。
非线性法：又称非直线性校准法 非线性法包 括logit-log法、指数函数法、样条函数法等 方法 Logit-log3p对数函数法中的一种，适用于浓 度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。P表 示参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参与 计算。S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜 率，a表示近似常数。
校准品的选择及准备
校准品：含有已知量的欲测物，用以校准该测定 方法的数值，它与该方法、试剂、仪器是相关联 的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂 等造成的系统性误差。
最好为人血清基质，减少基质效应 仪器、试剂、校准品的配套性 如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质 要有明确的不确定度