邻菲罗啉分光光度法测定铁(一)

三、仪器和试剂
仪器：
7200型可见分光光度计、pHS-3B型酸度计
试剂： 铁标准溶液（CFe3+=10g/ml）
10%盐酸羟胺水溶液
0.1％邻菲罗啉水溶液 1mol/L NaAc缓冲溶液 C(HCl)=0.1mol/L溶液 C(NaOH)=0.4mol/L溶液
四、实验步骤
（一）条件试验 1、测定波长选择：吸收曲线(A-l曲线)的绘制，选择最大 吸收波长作为测定波长； 2、反应时间选择：邻菲罗啉铁配合物的稳定性，绘制A-t 曲线； 3、显色剂用量：显色剂浓度的影响，绘制A-V曲线；
Lamber-Beer定律
Lambert-Beer定律是说明物质对单色光的吸光度（A）与吸 光物质的浓度（c）和 液层厚度（l）间的关系的定律，是光吸 收的基本定律，是紫外-可见光度法定量的基础。
Sample (conc. C)
吸光系数
入射光 I0
透射光 It
吸光度
Path length l
A＝ Ecl
橙红色
510nm 青绿色
在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 4Fe3++2NH2OH· HCl═4Fe2++N2↑ +H2O+4H+ +2Cl• 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反 应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。通常在 pH值~5的缓冲液介质中测定。 • 本试验中用HAc-NaAc缓冲溶液
参比：蒸馏水；检测波长：510nm
用蒸馏水定容至50mL 静置10分钟，测试
曲线（c-A）
邻菲罗啉0.1% 0.10mL 吸光度A
0.30mL 0.50mL 1.00mL 3.00mL 5.00mL 10.00mL
4、溶液酸度对配合物的影响
试样配制：
铁标液 10μ g/mL 1 2 3 10.00mL 10.00mL 10.00mL 盐酸羟 胺 10% 2mL 2mL 2mL pH调节 溶液 5mL 0.4mol/L NaOH 5mL 0.1mol/L HCl 5mL NaAc 缓冲 邻菲罗啉 0.1% 5mL 5mL 5mL pH值 吸光度
选择模式为吸光度 读取读数
选择模式为透过率 再按0%
模式不变 再按100%
数据处理
用excel作图 电子图表班长收齐后压缩 发送到：ruiting_chen@163.com
另外，实验报告每人一份，将图表打印出来附在末尾。
注意事项：1、整个操作过程中，保持移液管的垂直；2、读数 时视线与凹液面平齐；3、每次移液后，锥形瓶壁用蒸馏水冲 洗（洗瓶的头不要碰到瓶壁）
容量瓶的使用
注意事项： 1、使用前要检漏。加水至刻度， 塞上瓶塞，倒立，检查是否漏水， 瓶塞旋转180°，如上操作。 2、使用过程中，防止瓶塞被混 淆污染，不能随意放置桌上。 3、洗涤时洗至不挂水珠，再用 蒸馏水润洗3次，用铬酸洗液清 洗。 4、读数时要用手前3指轻轻夹起 容量瓶，使之自然垂直，再读数。 5、容量瓶不可烘干，防止体积 变化。
试液
5.00mL
1mL
5mL
5mL
检测波长：510nm
用蒸馏水定容至50mL
曲线（A-t）：
时间t (min) 0 5 2 吸光度A
415 6
10 30
15 60 60 45 90
3、显色剂浓度影响
试样配制：
铁标液 CFe3+=10μ g/mL 试液 10.00mL 盐酸羟胺 10% 1mL NaAc缓冲液 1mol/L 5mL 邻菲罗啉 0.1% x mL
原理：由光源发出的连续光谱，进入单色器经色散元件分光， 获得的单色光分别通过参比溶液和样品溶液，进行光强度（吸 收）的测定。
0.575
光源
单色器
吸收池
ຫໍສະໝຸດ Baidu
检测器
显示
一、实验目的
（一）、掌握分光光度法测定铁的原理及方法
（二）、通过测定铁的条件试验，掌握分光光度法测定铁的条
件及方案的拟定。 （三）、掌握分光光度计的组成部分，操作注意事项和如何使 用它实现对物质的检测。 （四）、掌握7200型分光光度计的使用方法。
波长λ(nm) 吸光度A 波长λ(nm) 吸光度A 520 530 540 450 460 470
用蒸馏水定容至50mL
480 550 490 560 500 570 510
2、邻菲罗啉配合物的稳定性
试样配制：与实验1一样，可共用。
铁标液 CFe3+=10μ g/mL 参比溶液 0.00mL 盐酸羟胺 10% 1mL NaAc缓冲液 1mol/L 5mL 邻菲罗啉 0.1% 5mL
厚度 (朗伯定律）
浓度 （比尔定律）
二、实验原理
显色反应：使得无色物质通过反应生成有色物质，提高 测定灵敏度和选择性。 在pH=2～9的条件下，Fe2+与邻菲罗啉（邻二氮菲）生成很 稳定的橙红色的络合物，其反应如下：
此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。
邻菲罗啉-Fe2+配合物的紫外吸收光谱
仪器分析实验
邻菲罗啉分光光度法测定铁 （一）
陈睿婷
E-mail:ruiting_chen@163.com
紫外-可见分光光度法
紫外-可见分光光度法是研究物质分子在紫外-可见光区分子吸收 光谱的分析方法。
入射光I0 透射光It
吸光度：A lg T lg
I0 It
单光束紫外可见分光光度计主要部件
7200可见分光光度计
1、选择模式：mode 透光率（Transmittance ） 吸光度（Absorbance ） 校正：透光率模式 全黑比色皿：0% 空白溶液：100% 测试：吸光度模式 2、波长选择 转动波长旋钮 每次测量前都要重新校正。
测试从低浓度到高浓度，测 试前比色皿要用待测液润洗。
4、pH选择：溶液酸度对配合物的影响，绘制A-pH曲线。
1、吸收曲线的绘制
试样配制：
铁标液 CFe3+=10μ g/mL 参比溶液 0.00mL 盐酸羟胺 10% 1mL
静置10分钟，测试
邻菲罗啉 0.1% 5mL
NaAc缓冲液 1mol/L 5mL
试液
5.00mL
1mL
5mL
5mL
吸收曲线（A-λ）
参比：蒸馏水作参比；检测波长：510nm
用蒸馏水定容至50mL
溶液反应5分钟后测量，加样顺序从左到右，看溶液pH值对配 合物稳定性和配位反应的速度的影响。
1、移液管的使用
• 常见移液管：标有 温度和容量(注意是 否标有吹) • 用途：准确移取一 定体积的液体 • 操作：洗涤(蒸馏水)、 润洗(3次)、移液、 洗涤干净