Dbil (4:1,钒酸盐氧化法)
钒酸氧化法和重氮法检测胆红素的方法学评价
钒酸氧化法和重氮法检测胆红素的方法学评价目的:寻找一种精密、准确、使用方便且特异的检测血清总(直接)胆红素的方法。
方法:对钒酸氧化法和重氮法进行方法学评价,包括精密度、线性范围、准确度、方法比较和干扰因素。
结果:两种方法检测总(直接)胆红素的精密度和准确度均符合要求,两种方法检测结果有良好的相关性(TBIL:r=0.997,DBIL:r=0.987,均符合r≥0.975)同时有极显著性差异(P<0.01),钒酸氧化法检测直接胆红素的线性范围略窄于重氮法,但是它的精密度和准确度略优于重氮法,而且抗血红蛋白和三酰甘油干扰的能力明显强于重氮法。
结论:钒酸氧化法是一种精密、准确使用方便且特异的、值得推广的、适用于血清总胆红素和直接胆红素日常测定的方法。
标签:钒酸氧化法;重氮法;胆红素;方法学评价血清胆红素作为肝胆疾患等诊断的重要指标已广泛应用于临床[1-3],但长期以来,标本溶血对测定的干扰影响一直未能得到很好解决[4]。
目前,测定血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的方法包括重氮试剂法(如改良J-G法和M-E法等),胆红素氧化酶法和化学氧化法(如钒酸氧化法)。
重氮试剂法存在反应不专一、易受溶血和脂血干扰的弊端,使检测结果出现偏差,有时甚至出现直接胆红素高于总胆红素的错误结果,而且这种方法存在工作液不够稳定的缺点[5]。
胆红素氧化酶法由于酶试剂成本昂贵,需要有高效热稳定的酶及其促进剂﹑抑制剂,影响了其在实际工作中的应用[6]。
1993年日本学者Tokuda[7]建立了钒酸氧化法测定血清胆红素。
建立一个新的分析方法,或引进新的方法、试剂和仪器,都应对它们的技术性能如精密度、方法比较、线性范围,以及干扰等作出评价[8]。
为了寻找一种精密、准确、使用方便且特异的检测血清总(直接)胆红素的方法,本文对钒酸氧化法和重氮法进行了方法学评价,现总结如下:1 材料与方法1.1 仪器日本日立公司HITACHI 7060型全自动生化分析仪,日本东亚公司Sysmex KX-21型全自动血细胞分析仪。
生化全自动分析仪项目间试剂交叉污染其解决方法
浅谈生化全自动分析仪项目间试剂交叉污染及其解决方法【摘要】目前生化试剂种类繁多,如何正确合理的使用,充分提高检验结果的准确性,以便更好地为临床诊断服务。
【关键词】全自动生化分析仪;试剂;防止污染在生化试剂的应用过程中我们往往会碰到交叉污染的问题,从而导致结果的偏离,影响临床结果的报告和临床病情的诊断。
所以正确认识交叉污染问题及有效排除显得尤为重要。
交叉污染简单分析是生化仪使用过程中永恒的话题,从仪器角度分析交叉污染的来源主要包括样本针携带污染,试剂针携带污染,搅拌棒携带污染,清洗系统携带污染,比色杯污染。
主要原因 1. 样品针,试剂针弯曲,特富龙涂层剥落,针堵塞,冲洗水冲洗不充分。
2,搅拌棒特富龙涂层剥落,搅拌棒表面有顽固性污渍,冲洗水冲洗不完全。
3.比色杯划痕较多,冲洗水冲洗不完全。
4.干燥棒携带污染。
那如何鉴别交叉污染的类型从而及时排除?1. 样品针携带污染:同一血清分为五份,分别测定蛋白项目,重复性差。
2. 试剂针携带污染:①部分试剂极易变质,可通过肉眼观察发现②以蒸馏水为样本,重复测定以下项目组合 10 次以上:ast 、 alt (前)+ ldh (后); tcho(前)+tba(后),后者测定结果偏高但重复性较好。
3. 搅拌棒携带污染:对同一份血清标本重复测定ggt 或 alt或ast 20次以上,结果重复性较差且有走高趋势。
4. 清洗系统携带污染:①在样本测定过程中,加做室内质控,部分项目测定异常或者失控②在样本测定过程中以蒸馏水为样本,多次测定ldh、p、mg、tba,结果重复性不好。
5. 比色杯污染:在每日早晨刚开机时对所有项目做试剂空白测定,试剂空白吸光度或者试剂空白吸光度变化率结果变高,tba(循环酶速率法)经常出现负值,蛋白项目、血脂项目结果偏高,胆红素(钒酸盐法)易出现异常值。
解决办法:①定期进行仪器的维护保养。
②按要求及时更换零部件。
③定期对仪器进行校准。
④全自动生化分析标本和试剂用量少,残存少量即会影响测试结果,每天应用无水乙醇擦洗并定期更换干燥棒,保证比色杯清洗后不留残液,避免比色杯的交叉污染。
rochetbil和dbil项目介绍
Roche TBIL和DBIL项目介绍
TBIL和DBIL检测方法学比较
主要内容
胆红素的代谢 胆红素的分类和临床应用 胆红素的检测方法 罗氏胆红素试剂盒特点 胆红素检测的标准化
胆红素测定的作用
反 映 肝 脏 的 分 泌 与 排 泄 功 能。
• 胆红素是胆汁中的主要色素,呈橙黄色。 • 胆红素具有:脂溶性,难溶于水。
共价键结合白蛋白
主要内容
胆红素的代谢 胆红素的分类和临床应用 胆红素的检测方法 罗氏胆红素试剂盒特点 胆红素检测的标准化
胆红素检测的常用方法分类
1.重氮盐法-diazo reaction
原理:橙黄色的胆红素与重氮盐反应生成有色的偶氮胆红素 (偶氮胆红素在酸性PH值为红色,碱性PH值为蓝色)
一般在酸性环境下,主波长546nm,次波长800nm
↓
尿胆素
少量
↑
不一定
↓
粪便 颜色
黄褐色
加深 变浅或正常 变浅或陶土色
新生儿生理性黄疸
新生儿血液内原来过多的红细胞被破坏,未结合胆红素生成过多。 婴儿出生7周后,体内Y蛋白才会达成人水平,肝细胞内载体蛋
白—Y蛋白少,肝细胞摄取未结合胆红素的能力不足。 肝细胞内胆红素葡萄糖醛酸基转移酶生成不足,结合胆红素生成少。 肝细胞胆汁分泌器发育不完善,对肝胆汁分泌的潜力不大。 母乳中含有孕二醇,对葡萄糖醛酸基转移酶有抑制作用。
过多的游离胆红素可与脑部基底核的脂类结合,并 干扰脑的正常功能,称胆红素脑病或核黄疸。 如:新生儿黄疸/高胆红素血症
胆红素的四种成分
反相HPLC (A436 nm)分离法
δ:Bd 与白蛋白共价结合的胆红素
重氮法与钒酸盐氧化法测定新生儿血清胆红素的比较分析
重氮法与钒酸盐氧化法测定新生儿血清胆红素的比较分析目的:对血清总胆红素重氮法和钒酸盐氧化法的测定结果进行方法比对和偏倚评估,探讨两种方法之间检测结果是否具有可比性。
方法:按照有关文件的要求,以重氮法为比较方法,钒酸盐氧化法为实验方法,分别检测50例患者新鲜血清,记录检验结果,去除离群值,计算回归方程,评估两种方法的CV值。
结果:血清总胆红素重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的相关回归方程为Y=1.092X+4.815,相关系数r为0.9958。
新生儿的直接胆红素测定差异较大,重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的相关回归方程为Y=0.1372X+1.8,相关系数r为0.5831,成年人及大于30 d儿童直接胆红素测定结果相关回归方程为Y=1.1368X—3.818,相关系数r为0.9997。
结论:血清总胆红素重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的预期偏倚在可接受范围内,新生儿直接胆红素测定偏倚不可接受。
标签:重氮法;钒酸盐氧化法;新生儿直接胆红素;总胆红素测定胆红素是血红素代谢的产物,临床上多用于黄疸的诊断和性质鉴别,亦是重要的肝功能试验指标,准确测定具有重要的意义。
目前,我国临床实验室测定血清总胆红素(total TB)的方法主要有3种:重氮法、胆红素氧化酶法和化学氧化法(如钒酸盐氧化法)[1]。
酶法测定胆红素具有准确性高、稳定性好等优势,但由于试剂昂贵,仅为少数临床实验室所接受。
重氮法和钒酸盐氧化法是多数临床实验室首选的检测方法。
目前仍广泛使用的方法是重氮法,而钒酸盐氧化法因其稳定性、精密度、准确度均能满足实验室要求,且试剂简单,能在全自动生化分析仪上面使用,被越来越多的实验室所采用,在使用过程中,本实验室发现重氮法胆红素测定结果稍高于钒酸盐氧化法测定结果,但两者的系统误差均属临床可接受水平[2],与大量的文献报道一致,但新生儿直接胆红素两种方法的测定结果差异较大。
1 资料与方法1.1 试剂和仪器重氮法和钒酸盐氧化法测定结果的相关回归方程为Y=1.092X+4.815,相关系数r为0.9958,T.bil试剂盒(批号:Z109218)、D.bil 试剂盒(批号:Z109218)均为美国贝克曼公司提供的配套试剂;钒酸盐氧化法T.bil试剂盒、D.bil试剂盒均为北京利德曼公司提供,总胆红素试剂盒批号为111011J,直接胆红素试剂批号为111011J。
直接胆红素(DBIL)测定试剂盒(钒酸盐氧化法)产品技术要求ldm
直接胆红素(DBIL)测定试剂盒(钒酸盐氧化法)适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中直接胆红素的含量。
1.1 规格试剂1(R1):5×60mL,试剂2(R2):5×15mL;试剂1(R1):4×80mL,试剂2(R2):4×20mL;试剂1(R1):3×40mL,试剂2(R2):3×10mL;试剂1(R1):2×80mL,试剂2(R2):2×20mL;试剂1(R1):2×400mL,试剂2(R2):2×100mL;试剂1(R1):1×20mL,试剂2(R2):1×6mL;1.2试剂组成表1 试剂组成2.1 外观液体双试剂:试剂1(R1)为无色澄清液体,试剂2(R2)为浅黄绿色澄清液体。
2.2 装量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3空白吸光度在37℃、450nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度<0.1ABS。
2.4分析灵敏度浓度为100umol/L,吸光度变化范围在(0.07-0.2)之间。
2.5线性范围在[1-430]umol/L线性范围内,线性相关系数r2≥0.995。
在(150–430]umol/L,范围内的相对偏差≤15%;测定结果[1-150]umol/L时绝对偏差≤22.5umol/L。
2.6精密度试剂盒测试项目精密度 CV<5%。
2.7批间差不同批号之间测定结果的相对偏差应<10%。
2.8准确度回收率:回收率80%-120%。
2.9稳定性原包装试剂,在(2-8)℃下有效期为18个月,取失效期的试剂盒检测其准确度和线性,试验结果满足2.5、2.8的要求。
钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析评判
钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析评判【摘要】目的:对测定胆红素的钒酸盐氧化法进行分析评判。
方式:用钒酸盐氧化法测定胆红素,并对其的周密度、稳固性、灵敏度及干扰因素进行分析。
结果:钒酸盐氧化法测定胆红素的批内、批间CV<%,可信检测范围可达:钒酸盐总胆红素(TBil)684 μmol/L,直接胆红素(DBil)342 μmol/L,回收率达到%~%。
用1∶8肝素抗凝,测定直接胆红素明显降低,P<;1∶10肝素抗凝,测定直接胆红素,有轻度的负干扰。
维生素C≤ g/L时,无干扰,而溶血及脂质对钒酸盐氧化法干扰小。
结论:钒酸盐氧化法应用方便,重复性好,灵敏度高,抗干扰性强。
【关键词】胆红素;钒酸盐氧化法;肝素抗凝1993年日本学者Tokuda发表了血清胆红素的钒酸盐氧化测定法。
随着商品化钒酸盐胆红素氧化法试剂的推行,目前国内用户众多[1]。
本文对其周密度、稳固性、灵敏度及干扰因素进行评判和分析。
1 材料和方式试剂和仪器试剂钒酸盐总胆红素(TBil)试剂盒、直接胆红素(DBil)试剂盒由东瓯生物工程提供,临床用20%英脱利匹特脂肪乳由华瑞制药提供,维生素C由湖北中天爱白药业提供,12 500 U/2 ml肝素注射液由天津市生物化学制药厂提供。
血红蛋白液的制备:取1份约3 ml 肝素钠抗凝血,反复加入生理盐水洗涤,最后加入蒸馏水离心取上清液,用KX21N血细胞分析仪测Hb为100 g/L。
仪器日立7060全自动生化分析仪,Sysmex KX21N血细胞分析仪。
统计学处置计量资料数据以±s表示,采纳配对t查验。
P<具有统计学意义,利用SPSS 软件进行统计分析。
测定原理在pH 3周围,表面活性剂和钒酸作用于血清TBil,使之氧化成胆绿素,使胆红素所特有的黄色减少,由此测定钒酸作用前后450 nm吸光度的转变求出血清中TBil的浓度。
在pH 3周围,当试剂中缺少表面活性剂时,钒酸只与血清中结合胆红素作用,使之氧化成胆绿素,现在测定450 nm吸光度下降值求出血清中DBil 的浓度。
生化项目介绍
迈瑞目前有50个项目,54个产品肝功(14项)ALT:丙氨酸氨基转移酶AST:天门冬氨酸氨基转移酶ALP:碱性磷酸酶GGT:γ谷氨酰氨基转移酶TP:总白蛋白ALB:白蛋白TBIL:总胆红素,两种方法:钒酸盐氧化法、重氮法,国内95%的客户使用钒酸盐氧化法DBIL:直接胆红素,两种方法:同上TBA:总胆汁酸ADA:腺苷脱氨酶AFU:α-L-岩藻糖苷酶5’NT:5’核苷酸酶PA:前白蛋白CHE:胆碱酯酶肝功计算项目(3个)GLB:球蛋白=TP-ALBA/G:白球比=ALB/GLBIBIL:间接胆红素=TBIL-DBIL肾功能(7项)UA:尿酸UREA:尿素,以前叫BUN(尿酸氮)CREA:肌酐,有两种方法:肌氨酸酶法、苦味酸法(又叫改良JAFF法)CYSC:胱抑素Cβ2MG:β2微球蛋白CO2:二氧化碳GLU:葡萄糖,有两种方法:GOD法(葡萄糖氧化酶法)、HK法(己糖激酶法)放在肾功套餐中使用较多见。
血脂(9项)TC:总胆固醇TG:甘油三脂HDL:高密度脂蛋白胆固醇LDL:低密度脂蛋白胆固醇APOA1:载脂蛋白A1APOB:载脂蛋白BLp(a):脂蛋白aHCY:同型半胱氨酸HS-CRP:全程C-反应蛋白心肌酶(4项)LDH:乳酸脱氢酶α-HBDH:α羟丁酸脱氢酶CK:肌酸激酶CKMB:肌酸激酶同工酶HCY:也可以放在心肌套餐中使用血糖类(2项)HbA1c:糖化血红蛋白FUN:果糖胺,又叫糖化血清蛋白GLU:也可以放在血糖套餐中使用胰腺功能(2项)AMY:α淀粉酶LIP:脂肪酶离子类(4项)Ca:钙Mg:镁P:磷Fe:铁K:钾,ISE项目(电解质项目),可以划为离子类Na:钠,同上Cl:氯,同上免疫系统类(5)IgG:免疫球蛋白GIgA:免疫球蛋白AIgM:免疫球蛋白MC3:补体C3C4:补体C4风湿类(3项)ASO:抗链球菌溶血素ORF:类风湿因子CRP:C-反应蛋白。
总胆红素钒酸盐氧化法试剂盒标准操作程序
总胆红素(钒酸盐氧化法)试剂盒标准操作程序1.摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清样本中总接胆红素的含量。
2.适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清样本中总接胆红素的含量。
3.职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定总接胆红素浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理;本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的总接胆红素(钒酸盐氧化法)试剂盒采用的是钒酸盐氧化法。
5.原理pH3.0左右,在起加速剂作用的表面活性剂的条件下,能够增进未结合胆红素的溶解度,样本中的总胆红素被钒酸盐氧化成胆绿素。
与此同时,胆红素特有的黄色也随之消失。
所以通过测定胆红素氧化前后吸光度的变化,就可以计算出样本中的总胆红素的浓度。
6.仪器AU5811自动生化分析仪7.试剂1.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供1.2试剂瓶内主要成分:R1:枸橼酸盐缓冲液(pH2.6)、表面活性剂;R2:磷酸盐缓冲液、偏钒酸盐1.3试剂稳定性:试剂于2℃-8℃避光保存,有效期为一年2.标准品和质量控制2.1校准程序:使用科华公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
2.2质控品:罗氏公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。
该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。
2.3质控数据管理:按程序对检验后的质控后结果进行转换,及时质控数据进行分析处理,如出现失控值,应及时分析失控原因,并填写好相关失控记录。
2.4质控判断规则:按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》2.5室间质评:分别参加河北省室间质评,对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。
临床生化试剂检测中的各种交叉污染
另外一些文献报道:
ALT、AST、CK、CK-MB、Glu(GOD法和HK法)对TG有影响;
P对UA、CREA、D-bil(钒酸盐法)、D-bil(重氮法)有影响;
Glu(HK)、UA、UREA、CREA(JAFF)、TP对Ca有影响;
第一类:前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。
此时残留的污染物被带入下一测试中,与该测试的试剂反应,可能会导致结果异常。引起这类交叉污染产生的物质明确,并且可以定量分析。主要项目有:
1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。
2. CK-NAC、CK-MB-NAC酶偶联测定试剂含高浓度Glucose,会干扰其后的血糖测定,尤其对HK法干扰严重。
Mg试剂中含有EGTA,对Ca有影响。
CK、CK-MB中含有EDTA,对Ca、Mg有影响。
a-HBDH中含有碳酸盐,对Ca有影响。
CK、CK-MB中含有EDTA能螯合ALP试剂中的Mg离子,从而影响ALP的检测
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5. TC、其后的TBA结果,致假性偏高。
6. 以4NP-G4为底物的AMY试剂含Ca2+浓度高会影响其后测Ca2+的准确性。
7. TG,TC试剂中有LIP,会导致LIP的测试结果不真实。
该种类型的交叉污染单试剂终点法的受污染项目测试结果的抬高或降低反映的是搅拌杆的携带污染。因为试剂针携带进来的上一个测试的干扰物会和下一个试剂发生反应,由于携带量小,一般在试剂空白段(2min)即反应平衡。而双试剂项目的测试结果反映的是试剂针和搅拌杆的综合污染。
直胆红素(dbil)钒酸盐氧化法
项目直胆红素(DBIL)方法钒酸盐氧化法目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理钒酸盐胆红素————胆绿素pH 3.0测定钒酸盐作用前后吸光度差异,可求得样品中的直接胆红素的浓度。
2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂:血浆多主张用EDTANa2(1mg/mL)抗凝。
2.4 标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3.试剂3.1 试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司DBIL试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:组成浓度R1:柠檬酸缓冲液100mM表面活性剂R2:磷酸缓冲液10mM偏钒酸钠3.2 校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次:空白定标:每日需做试剂空白定标。
全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围,需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性:原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
直接胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)产品技术要求北京科美生物
直接胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中直接胆红素(DBiL)的浓度。
1.1 包装规格1)试剂1:2×60mL,试剂2:2×15mL;2)试剂1:5×60mL,试剂2:5×15mL;3)试剂1:2×80mL,试剂2:2×20mL。
1.2 主要组成成分试剂1:酒石酸缓冲液(87mmol/L)试剂2:磷酸缓冲液(4.4mmol/L),偏钒酸纳(2mmol/L)2.1 外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物。
2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度DBiL试剂盒在主波长450nm/副波长546nm处测定试剂的吸光度值,应不大于0.0500。
2.4 分析灵敏度DBiL试剂盒测试样本浓度为30µmol/L时,吸光度差值(△A)应不小于0.0200。
2.5 准确度用本公司DBiL试剂盒和已上市DBiL试剂盒同时测定40个临床样本,相关系数(r2)应不小于0.95,在(0,30]μmol/L区间内,绝对偏差应不超过±3μmol/L;在(30,340]μmol/L区间内,相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1重复性重复测试(4.8±2)μmol/L和(40±5)μmol/L的样本,所得结果的变异系数CV 应不大于5%;2.6.2批间差测试(40±5)μmol/L的样本,所得结果的批间相对极差应不大于10%。
2.7 线性范围DBIL试剂盒在(0,340]μmol/L范围内,线性相关系数(r)应不小于0.990;2.7.1在(0,30]μmol/L区间内,线性绝对偏差应不超过±3μmol/L;2.7.2在(30,340]μmol/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。
综合氧化法与钒酸盐氧化法测定血清胆红素的比较
综合氧化法与钒酸盐氧化法测定血清胆红素的比较作者:杨洁来源:《健康必读·下旬刊》2012年第06期【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2012)06-0286-01【摘要】目的对综合氧化法与钒酸盐氧化法测定血清胆红素进行比较分析。
方法采用综合氧化法和钒酸盐氧化法对血清胆红素进行测定,而后比较两种方法的精密度、准确度,并对相关性和影响因素进行分析。
结果综合氧化法的精密度实验结果为:TBIL的CV%为1.42%,DBIL的CV%为1.58%;钒酸盐氧化法的精密度实验结果为:TBIL的CV%值为1.63%,DBIL 的CV%值为1.51%。
结论两种方法对血清胆红素进行测定时的精密度、准确度等方面均良好,而在抗干扰以及线性范围方面综合氧化法具有一定的优势,因此,在应用过程中,应注意选择。
【关键词】血清胆红素综合氧化法钒酸盐氧化法相关性目前在临床上对于血清胆红素的测定一般有氧化酶法与化学氧化法这两种方法,而对于化学氧化法而言则包括有亚硝酸盐氧化法、钒酸盐氧化法、过硫酸盐氧化法以及综合氧化法等几种方法[1]。
本次研究中出于对综合氧化法与钒酸盐氧化法测定血清胆红素进行比较分析的目的,对这两种方法对血清胆红素进行测定时的精密度、准确度、相关性、影响因素等进行了分析探讨,现汇报结果如下。
1 材料与方法1.1 试剂与仪器试剂:综合氧化法中的试剂包括有:总胆红素试剂盒、直接胆红素试剂盒;钒酸盐氧化法中的试剂包括有:总胆红素试剂盒、直接胆红素试剂盒。
仪器:本次研究中所采用的仪器包括有OLYMPUS AU600 全自动生化分析仪以及XT -2000血球分析仪。
1.2 方法1.2.1 精密度实验两种方法分别对TBIL和DBIL进行重复测定20次,而后对CV值进行计算。
1.2.2 回收实验取0.9ml标本并加入1ml的标准品上机,对TBIL和DBIL进行测定。
TBIL标本的浓度为24.1umol/L,DBIL标本的浓度为8.2 umol/L。
钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价
钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价马荣红;王晖;秦锦屏【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2002(020)002【摘要】目的对钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素进行方法学评价.方法采用钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素,与重氮法测定血清总、直接胆红素进行了比较.结果钒酸盐氧化法(Y)与重氮法(X)相关性良好,相关方程:YTBIL=1.184XTBIL-1.29(r=0.9954),YDBIL=0.982XDBIL+1.43(r=0.9947);总胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.67%、3.02%,平均回收率达98.3%,在0~628μmol/L范围内线性良好.直接胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.72%、3.28%,平均回收率达97.6%,在0~229μmol/L范围内线性良好.标本中甘油三酯含量≤5mmol/L、维生素C含量≤0.5g/L时,对钒酸盐氧化法测定总、直接胆红素均无干扰,但对重氮法有明显干扰;血红蛋白对钒酸盐氧化法和重氮法测定总、直接胆红素均产生正干扰.结论钒酸盐氧化法是一种准确、灵敏、特异性较重氮法高的方法,适用于常规自动化测定血清总、直接胆红素,但在抗血红蛋白干扰方面有待改进.【总页数】3页(P93-94,127)【作者】马荣红;王晖;秦锦屏【作者单位】430022,华中科技大学同济医学院附属协和医院,检验科;430022,华中科技大学同济医学院附属协和医院,检验科;430022,华中科技大学同济医学院附属协和医院,检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.11+2【相关文献】1.改良化学氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的评价2.生理盐水与人血清做稀释剂对钒酸盐氧化法测定直接胆红素的影响3.钒酸盐氧化法测定总胆红素及直接胆红素的实验评价4.血清总胆红素、直接胆红素的钒酸氧化法测定5.钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素的方法比较因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
直接胆红素(DBIL)测定试剂(盒)(钒酸盐氧化法)产品技术要求新产业
直接胆红素(D B IL)测定试剂(盒)(钒酸盐氧化法)
2.性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物。
2.2装量
试剂装量的装量应按表1,液体装量的最大允许负偏差应为5%。
2.3试剂空白吸光度
试剂(盒)测试空白样本,在37 ℃±0.1 ℃ 、450 nm 波长、1 cm 光径条件下,试剂空白吸光度应≤0.100 Abs。
2.4分析灵敏度
试剂(盒)测试18.3 μmol/L 的被测物时,吸光度变化(ΔA)≥0.020 Abs。
2.5线性区间
试剂(盒)线性在(0.00,300.00] μmol/L区间内:
a)线性相关系数r≥0.990;
b) (0.00,50.00]μmol/L区间内,线性绝对偏差应在±5.00μmol/L范围内;(50.00,
300.00]μmol/L 区间内,线性相对偏差应在±10%范围内。
2.6精密度
2.6.1重复性
试剂(盒)测试浓度在(18±4)μmol/L和(29±6)μmol/L范围内的样本时,变异系数CV≤5.0%。
2.6.2批间差
试剂(盒)测试浓度在(18±4)μmol/L和(29±6)μmol/L 范围内的样本时,相对极差R≤10.0%。
2.7准确度
测可溯源性校准品的相对偏差 B 在±10%范围内。
一种由钒酸盐制备含钙钒氧化物的方法[发明专利]
(10)申请公布号 CN 102676817 A(43)申请公布日 2012.09.19C N 102676817 A*CN102676817A*(21)申请号 201110061487.0(22)申请日 2011.03.15C22B 3/46(2006.01)C22B 34/22(2006.01)(71)申请人中国科学院过程工程研究所地址100190 北京市海淀区中关村北二条1号申请人河北钢铁股份有限公司承德分公司(72)发明人杜浩 郑诗礼 张燕 王少娜刘彪 李兰杰 张懿(74)专利代理机构北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280代理人郭广迅(54)发明名称一种由钒酸盐制备含钙钒氧化物的方法(57)摘要本发明提供一种由钒酸盐制备含钙钒氧化物的方法,该方法包括如下步骤:(1)向可溶性钒酸盐水溶液中加入钙源,反应得到钒酸钙沉淀,过滤并洗涤;(2)将步骤(1)得到的钒酸钙加水调浆,在加热条件下向浆液中加入盐酸调节pH 值为1-3,析出沉淀,过滤后得到含钙钒氧化物。
本发明提供的方法能够得到不含钾、钠的钒氧化物,可直接用于生产钒铁合金;可实现沉钒率99%以上,固相含钒量(以五氧化二钒计)为85%左右。
整个工艺流程操作简便、好控制、易掌握。
并且该方法无氨氮废水的排出,减少对环境的污染,具有很好的应用前景。
(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书4页 附图1页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 4 页 附图 1 页1/1页1.一种由钒酸盐制备含钙钒氧化物的方法,该方法包括如下步骤:(1)向可溶性钒酸盐水溶液中加入钙源,反应得到钒酸钙沉淀,过滤并洗涤;(2)将步骤(1)得到的钒酸钙加水调浆,在加热条件下向浆液中加入盐酸调节pH 值为1-3,析出沉淀,过滤后得到含钙钒氧化物。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述钙源选自氧化钙、氢氧化钙、氯化钙和硝酸钙中的一种或多种,优选为氧化钙和/或氢氧化钙。
三种方法测定血浆直接胆红素的方法学比较
三种方法测定血浆直接胆红素的方法学比较仇杭佳;彭健桥【期刊名称】《医学检验与临床》【年(卷),期】2004(0)3【摘要】目的分析改良Malloy-Evelyn法、钒酸盐氧化法和干化学法在测定血浆直接胆红素(DBIL)时的偏倚,为室间评估结果提供参考依据.方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件,分别用三种方法测定样本直接胆红素含量并进行相关回归分析和偏倚估计.结果以干化学法(X)为对比方法,对钒酸盐氧化法(Y)和改良Malloy-Evelyn法(Z)进行评估.钒酸盐氧化法(Y)和干化学法(X)测定DBIL的回归方程式为Y=1.012X+1.992,相关系数r2=0.999;改良Malloy-Evelyn 法(Z)和于化学法(X)测定DBIL的回归方程式为Z=0.725X+2.334,相关系数r2=0.988.DBIL浓度为10μmmol/L、100μmol/L、300μmol/L时,钒酸盐氧化法(Y)的相对偏倚分别为21.1%、3.2%和1.9%,改良Malloy-Evelyn法(Z)的相对偏倚分别为4.2%、25.2%和26.7%.结论钒酸盐氧化法与干化学法在测定血浆DBIL 时,测定结果的相对偏倚随DBIIL浓度增加而降低;改良Malloy-Evelyn法与干化学法在测定血浆DBIL时,测定结果的相对偏倚随DBIL浓度增加而增加;建议临床实验室建立本实验室直接胆红素测定的参考值范围,以保证实验结果判断的准确性.【总页数】3页(P11-13)【作者】仇杭佳;彭健桥【作者单位】佛山市禅城区中心医院检验科,佛山,52800;佛山市禅城区中心医院检验科,佛山,52800【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.凝血酶法与热沉淀比浊法测定血浆纤维蛋白原的方法学比较2.三种方法测定血浆纤维蛋白原的方法学评价3.干湿化学法测定血浆总蛋白的方法学比较4.两种方法测定血浆白蛋白的方法学比较5.三种方法测定血浆中总同型半胱氨酸的比较因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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直接胆红素测定试剂(钒酸盐氧化法)/Dbil 使用说明书
温育3-5分钟,测A1
温育5分钟,测A2 △A=A2-A1
【预期用途】 用于体外测定人血清或血浆中直接胆红素的浓度。
胆红素是由血红蛋白断裂而产生的,它被转运到肝脏同白蛋白结合,这部分胆红素被称作间接或非结合胆红素。
在肝脏,胆红素可在尿苷二磷酸葡萄糖醛转移酶作用下,与葡萄糖醛酸结合为结合胆红素(单葡萄糖苷酸胆红素和二葡萄糖苷酸胆红素)。
总胆红素是结合(直接)胆红素与非结合(间接)胆红素的总称。
总胆红素增加的原因,通常是胆道阻塞、肝炎、肝硬化、溶血性综合症和某些遗传原因的酶缺乏。
间接胆红素增加则常见于溶血性综合症或肝内原因,如肝脏在胆红素摄取运输或结合方面有缺陷。
胆红素监测对于新生儿是极为重要的,因为非结合胆红素极易引起大脑损伤。
【检验原理】 PH 值接近于3时,在氧化剂的作用下,直接胆红素被氧化成胆绿素。
此时,胆红素特有的黄色减少,通过测定钒酸作用前后的的吸光度的差可求得样品中直接胆红素的浓度。
钒酸盐 胆红素 ——→ 胆绿素 【主要组成成份】 DB 试剂盒由两个组分组成,不同批号试剂盒中的组分不可混用。
R1: R2: 柠檬酸缓冲液(PH3.0) 柠檬酸缓冲液(PH3.0)
钒酸盐:10mmol/L
【储存条件及有效期】
本产品应于2—8℃避光存放,严禁冷冻。
原包装效期为15个月;开盖后可稳定2周。
【样本要求】
空腹血清或血浆标本,采血后应尽快测定。
【检验方法】
1. 基本参数(不同仪器可能会略有差别,请根据需要调整) 测定模式 两点终点法 样本量 10μl 反应时间 5分钟 R1 280μl 测定温度 37℃ R2 70μl 光径 1cm 波长 450nm 反应方向 负反应
2. 校准程序
建议使用Randox 复合校准品校准,按其说明书要求进行准备和使用;校准采用线性校准模式。
3. 质量控制程序
建议每天使用与校准品匹配的质控品进行内部质量控制,测定值应在可接受范围内;若出现异常,应查找原因、及时采取纠正措施;各临床实验室可根据需要设计室内质控频次。
4. 测定
双试剂操作:液体双试剂,直接使用。
R1:280μl
样本:10μl R2:70μl
5. 结果计算
ΔA 标本
DB (μmol/L )=—————×标准品浓度
ΔA 标准
【参考值(参考范围)】
0.3—6.8μmol/L (0.02mg/dl —0.40mg/dl )
参考范围参照参考文献并经过大量实验确定;建议各实验室建立自己的参考值范围。
【检验结果的解释】
1. 仪器加样针、比色杯等可能对实验结果产生影响;根据标本不同,可能会发生原因不明干扰反应。
若对测定结果有疑问,应重新测定或用其它测定方法进行确认。
2. 抗坏血酸≤10mg/dl 、血红蛋白≤100mg/dl 、乳糜微粒≤1000浊度单位、葡萄糖≤15mmol/L 、尿素≤17.85mmol/L 、尿酸≤500
umol/L 对测定无影响。
抗凝剂肝素钠≤20mg/dl 、EDTANa 2 ≤200mg/dl 对测定无影响。
【检验方法的局限性】 血清或血浆直接胆红素测定只是临床医生对患者进行诊断的指标之一,其还需根据患者的体征、病史以及其它的诊断项目、
诊断手段进行综合判断。
【产品性能指标】 1. 试剂空白吸光度:<0.250A 。
2.分析灵敏度:DB 含量为100μmol/L 时,测定吸光度差值的绝对值应>0.020△A 。
3. 线性范围0~342μmol/L :线性回归相关系数r>0.990。
4 测量精密度:CV<10%(n =10);批间差:相对极差<10%。
5. 准确度:相对偏差在±10%范围内。