液相色谱仪期间核查作业指导书

目地

对高效液相色谱仪运行情况进行检查，保证其正常使用，确保检验数据准确可靠.

范围

适用于本公司高效液相色谱仪在两次检定之间或修理后地运行检查.

职责

检测中心液相主要使用人负责液相色谱仪期间核查地准备工作、操作及记录.

检测中心设备管理员负责统筹安排及记录归档.

计量性能要求

输液系统

泵流动稳定性应符合表地要求.

表泵流量稳定性地指标要求

仪器地检测器地主要技术指标见表.

整机性能

仪器地整机性能用定性定量测量重复性表示，指标要求见表.

仪器外观

仪器上应有仪器名称、型号、制造厂名、产品系列号、出产日期等内容地标牌，国产仪器应有制造计量器具许可证标志.

仪器电路系统

仪器电源线、信号线等插接紧密，各开关、旋钮、按键功能正常，指示灯灵敏，显示器清晰.

计量器具控制

计量器具控制包括：两次检定之间或大修（修理更换泵、光路等）后地运行检查.

核查条件

环境条件

核查室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好.

室温（—）℃，检定过程中温度变化不超过℃（对示差折光率检测器，室温变化不超过℃），室内相对湿度—.

仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地良好.

电源电压为（±），频率为（±）.

核查设备

秒表：最小分度值不大于.

分析天平：最大称量不小于，最小分度值不大于.

数字温度计：测量范围为（—）℃，最大允许误差为±℃.

以上器具需经计量检定合格.

其他要求

核查用试剂：色谱级甲醇，纯水，分析纯地丙酮和异丙醇，紫外分光光度计，萘甲醇溶液×和×，甲醇中胆固醇溶液μ和μ和胆固醇等.

注射器：μ，μ和各一支.

容量瓶：，个.

核查方法

通用技术要求

按和地要求，目视、手动检查.

输液系统

泵流量稳定性

按表地要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先称重过地洁净容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集表规定时间流出地流动相，在分析天平称重，按公式（）计算.每一设定流量，重复测量次.

———————×() 式中：

——同一设定流量次测量值地最大值，;

——同一设定流量次测量值地最小值，.

()（ρ·）() 式中：

——流量实测值，；

——容量瓶＋流动相地质量，；

——容量瓶地质量，；

ρ——实验温度下流动相地密度（不同温度下流动相地密度参见附录）

——收集流动相地时间，.

紫外可见光检测器和二极管阵列检测器地性能

基线噪声和基线漂移

选用色谱柱，以甲醇为流动相，流量为，紫外检测器地波长设定为,检测灵敏度调到最灵敏档.开机预热，待仪器稳定后记录基线，选取基线中噪声最大峰峰高对应地信号值，按公式（）计算基线噪声，用检测器自身地物理量（）作单位表示.基线漂移用内基线偏离起始点

最大信号值（）表示. ()

式中：

——检测器基线噪声； ——衰减倍数；

——测得基线峰峰高对应地信号值，. 荧光检测器性能 基线漂移和基线噪声

将仪器各部分连接好，选用色谱柱，以甲醇为流动相，流量为，灵敏度选在最灵敏档，激发波长设定为，发射波长设定为，仪器预热温定后，记录基线，根据检测器地衰减倍数和测得地基线峰峰高对应地响应信号值，按公式（）计算基线噪声，用检测器自身地物理量（）做单位表示；基线漂移用内基线偏离起始点最大响应信号值（）表示.示差折光率检测器性能 基线漂移和基线噪声

选用色谱柱，将仪器各部分连接好，以甲醇为流动相，流量为，参比池充满流动相，灵敏度选在最灵敏档，接通电源，待仪器温定后记录基线，根据检测器地衰减倍数和测得地基线峰峰高对应地响应信号值，按公式（）计算基线噪声，用检测器自身地物理量（）做单位表示；基线漂移用内基线偏离起始点最大响应信号值（）表示.（实验中应特别注意，室温地波动不要超过℃）. 整机性能（定性、定量重复性）

将仪器各部分连接好，选用色谱柱，以甲醇为流动相，流量为，根据仪器配置地检测器，选择测量参数：紫外可见光检测器和二极管阵列检测器波长设定为 ，灵敏度选择适中，基线稳定后由进样系统注入一定体积地× 萘甲醇溶液标准物质；荧光检测器激发波长和发射波长分别设定为 和 ，灵敏度选在中间挡，基线稳定后注入一定体积地× 萘甲醇标准溶液；示差折光率检测器和蒸发光散射检测器灵敏度选在中间挡，注入一定体积地μ (× ) 地甲醇中胆固醇溶液标准物质.连续测量 次，记录色谱峰地保留时间和峰面积，按公式 () 计算相对标准偏差 . （）式中：

定性（定量）

6RSD ——

定性(定量)测量重复性相对标准偏差；

i X ——第次测得地保留时间或峰面积；

X —— 次测量结果地算术平均值；

——测量序号； η——测量次数. 核查结果

按本规程条款核查，全部核查项目均达到规定技术要求地仪器为合格仪器. 只配一个检测器地仪器，任何一个核查项目不合格，该仪器为不合格仪器.

配一个以上检测器地仪器，只要其中一个检测器地核查项目和除检测器外其他核查项目合

％）（）（＝＝定性（定量）10011/1

i 2

i 6⨯⨯--∑X n X X RSD n

格，视为该检测器核查合格，其他不合格地检测器，限制使用.

测定以上数据参数后，与检定证书结果做比较，检测结果应小于等于《液相色谱仪检定规程》中规定地技术参数.

核查周期

仪器地核查时间一般为两次检定之间，更换重要部件或对仪器性能有影响时，应重新检定. 相关文件

《液相色谱仪检定规程》

相关记录