糖化血红蛋白定量检测标准操作规程(SOP)
PDQ PLus糖化血红蛋白标准操作程序
1 目的PDQ PLus TM用于体外诊断，定量检测全血中糖化血红蛋白含量。
2 范围糖化血红蛋白的含量检测。
3 职责3.1 生化实验室的检测人员负责糖化血红蛋白含量检测。
3.2质量监督员负责监督检测是否按照程序文件和作业指导书中检验过程的要求进行。
4 原理高压液相亲和层析：PDQ PLusTM采用了高压液相亲和层析将糖化血红蛋白分离出来，然后根据415nm 波长的吸光度的变化生成层析图，并记录和保存在内置的计算机里，仪器内置的软件程序会自动分析层析图并通过打印机输出结果。
5 标本采集、运输、保存静脉血或末梢血，推荐使用EDTA钾盐或肝素氨做抗凝剂。
在-20℃保存稳定6个月，5℃保存稳定2周，25℃保存稳定1周。
冷藏标本应放置至室温，混匀后操作，避免反复冻融。
注意：所有全血标本在分析前要完全混匀。
6 标本拒收标准6.1 不合格标签，包括没有标签，或标本信息不全，或编号错误。
6.2 未使用正确的容器。
6.3 凝结（如EDTA采血管）。
6.4 容量不足。
6.5 未能正确运送。
6.6 受污染。
6.7 检测申请不完全。
7 试剂及仪器设备普莱默斯糖化血红蛋白检测试剂，PDQ PLus TM糖化血红蛋白检测仪。
7.1 包装规格7.2 试剂成份试剂成份：5%酒精、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、清洗液、0.001%叠氮化钠、羟基盐等。
7.3 试剂准备标本预处理：稀释模式：30μl的全血与3000μl稀释液混合（1：100），避免起泡沫。
室温孵育5分钟。
全血模式：标本不凝血、足量7.4 试剂储藏和稳定期未处理的标本：密闭保存2-4℃，稳定7天7.5 仪器设备PDQ PLus TM糖化血红蛋白检测仪8 操作步骤按仪器操作说明书输入正确的实验参数和试剂使用通道代号。
具体操作步骤参照PDQ 日常操作规程。
9 结果判断与分析对超出可报告范围的结果,可用稀释液稀释样品，再重新测定，结果乘以稀释倍数。
报告发出时必须经过双重审核，一人测试结果，另一人负责复核结果。
糖化血红蛋白定量测定试剂盒标准操作程序
糖化血红蛋白定量测定试剂盒标准操作程序1.摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人全血中的糖化血红蛋白的百分含量。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测人全血中的糖化血红蛋白含量。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定总蛋白浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的糖化血红蛋白定量测定试剂盒采用的是酶法。
5.原理本试剂盒测定人全血糖化血红蛋白（HbA1c）的含量采用百分含量表示。
采用酶法测定，全血样本中血红蛋白（THb）被特定的蛋白酶裂解，其中糖化血红蛋白（HbA1c）裂解产生果糖氨基酸，然后果糖氨基酸在果糖氨基酸氧化酶（FAOD）作用下产生H2O2，H2O2经POD与发色剂偶联Trinder反应，在700nm测定其吸光度。
通过使用合适的校准品建立校准曲线，在一定浓度范围内糖化血红蛋白（HbA1c）百分含量与吸光度变化成正比。
6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1a：MES缓冲液、蛋白酶R1b：MES缓冲液、NaClR2：FAOD、POD、发色剂溶血剂：MOPS缓冲液、表面活性剂糖化血红蛋白校准品a、b：由新鲜人EDTA或肝素抗凝全血（HBsAg，抗HIV1/2、抗HCV、TP抗体均为阴性）冷冻干燥制备而成，冻干品。
不同批号试剂盒各组分请勿混用。
7.3试剂稳定性：未打开试剂在2-8℃避光保存可至失效期。
校准品使用后应密封保存，以免液体挥发。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
Bio-Rad DiaSTAT糖化血红蛋白A1c测定仪SOP文件
Bio-Rad DiaSTAT糖化血红蛋白A1c测定仪SOP文件1．目的：Bio-Rad DiaSTAT糖化血红蛋白A1c测定仪可体外测定正常人和糖尿病人的糖化血红蛋白，用于糖尿病的辅助诊断和诊疗监控。
2．原理：DiaSTAT 使用低压离子交换液相色谱法，在梯度洗涤液的作用下，从人全血中分离出各种血红蛋白成分，分离出的血红蛋白经415 nm光谱吸收分析后，结果记录和存储在计算机上。
DiaSTAT软件随后对结果进行分析并打印结果报告。
DIASTAT血红蛋白A1c测定仪可从样品管中自动吸取标本，随后进行稀释和分析，每个样本在10分钟内即可完成测定。
3．仪器使用环境：1．无尘、换气良好的环境。
2．避免阳光直接照射。
3．室内相对湿度20~80%4．电源电压变动在220V±10V之内5．有保护性接地4．安全条款：1．使用对人体有危险或发生感染的样品时，请使用橡胶手套，不要直接接触。
如操作人员直接被污染时，用大量的水冲洗、消毒，必要时应及时看医生。
仪器污染时应随时清洗干净且消毒。
2．仪器上面和周围不要放置或使用易燃、易爆物品，避免引起火灾、爆炸。
3．仪器的操作、保养按规定程序进行。
5．标准操作过程5.1开机程序：1)确认试剂量和打印纸充足，废液桶倒空2)打开仪器后侧左下部的电源开关仪器自检后自动进入主菜单5.2关机程序如系统处于主菜单时，可直接关掉电源开关注: 尽量避免在Running状态突然关机5.3常规样本实验5.3.1 样本准备1）全血样本准备（EDTA抗凝全血）a. 将Diastat Dispenser 打开，预热15分钟以上。
b.注意溶血试剂是否用完。
c.将Dispenser对准溶血试剂瓶（注意防止污染），按住拇指开关，喷射四次，使管路通畅。
无气泡。
d.三灯齐亮状态下，可以吸取样本。
e.将Dispenser加样尖置入混匀好的样本管中，没入血样中一些，按住拇指开关一次，自动吸取20 ul样本。
单通道糖化血红蛋白 SOP文件
糖化血红蛋白项目没有经过稀释，不用修改稀释倍数，
6. 样本处理：10L 新鲜末梢血或者静脉全血，加入 1mL 溶血液中溶血；
7. 在测量杯中放入一粒搅拌子，加入 10ul 溶血后的样品，然后将测量杯置入测量室中，
加入 300L 的乳胶，开始自动计时 3 分钟； 注意：将样品加入测量杯时，要将样品置入测量杯的底部，不要将液体碰到测量杯的
在整个检测过程中，按[BACK]键，将回到前一检测步骤；按[ESC]键，将重新开始，
如需开始检测新的项目，按[ESC]键。 【仪器相关参数】：
光源：650 nm 红色激光
功率：0.5Mw
工作环境温度：15-30℃
电源要求：220V±10% AC 50Hz
测量杯：NEPHSTAR®特定蛋白分析仪专用测量杯 【参考范围】：
确保电源接通及仪器电源开关已打开 检查保险丝。如果保险丝熔断请更换保险丝
显示屏蓝屏,无文 字显示 将测量杯放入测量 室中,无“请加入试 剂”信息
加入试剂前就开始 测量空白
加入试剂后不读取 空白
5 分钟没有操作,仪器 进入屏保状态
测量杯未完全放入测 量室中
测量杯侧壁上粘有液 体或有大量气泡
仪器没有感应到试剂 的加入
壁上。否则，仪器可能会感应到液体的流动而自动进入测量程序。
版本:A0-201204
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8. 计时结束后，仪器将报警，并再次提示“请加入试剂”时，用电子移液器将 100L HbA1c
抗体 B 和 40L 抗体 A 一起加入测量杯中；
仪器将按程序进行空白测量和样品测量。测量时间以倒计时显示，倒计时结束后，仪器
病人准备：无特殊要求 样本要求：采用新鲜手指血，或者 EDTA 或肝素抗凝血进行测定，抗凝血在 2-8℃储存最长 不超过 72 小时，冷冻在-20℃或更低温度则可贮存更长时间。测试当天使用样品处理液处理 样品和检测。
HA-8180-校准SOP
有 效 期：1 年，见外包装上的标签内容。
5.2 溶离液 80B
用 途：本溶液用于 ARKRAY Factory, Inc.公司生产的 HA-8180 型全自动糖化血红
蛋白分析仪及 AH-8280 型全自动血糖/糖化血红蛋白分析仪的洗脱及缓
冲。
规 格：600mL×2 袋/盒
贮存方式：本溶液应在3～30℃之间密封保存。
4．标本的采集、收集与处理 4.1.样本采集 用 EDTA抗凝全血，肝素抗凝全血，不推荐草酸类，以及枸橼酸类抗凝剂。 4.2.样本保存 在2-8 °C下全血样本可保存7天；在室温下样本可保存3天。 -70°C下全血样本可保存一年，只允许1次复溶。 4.3.标本丢弃注意事项 丢弃使用后的样本时，需和一般的垃圾区别开，并按照当地废弃物相关管理规定来 处理。 4.4.样本准备 ①. 关于全血样本 请使用下列之一的抗凝剂：肝素、EDTA-2Na、EDTA-2K、EDTA-3K、NaF。为防止 层析柱的劣化，请勿使用含有碘醋酸抗凝剂的样本。 ②. 关于溶血样本 若溶血样本放置于室温下会慢慢变性，从而导致检测值的变化。请勿长时间放 置于室温下，要尽快检测。检测溶血样本时，请将血红蛋白的浓度调整在75～ 225 mg/dL（标准150 mg/dL）。超过此浓度范围时，会产生故障或导致仪器的 重复性变差。适当的改变稀释率或调整浓度后再进行检测（本仪器一般将全血 稀释101倍）。 ③. 关于去除血浆的样本 去除血浆后的样本不能放置于全血样本用试管架上检测。去除血浆的样本不能 稀释到适合的血红蛋白浓度，因此得不到正确的检测结果。需用专用的稀释液 溶血稀释，看作溶血样本来检测。
糖化血红蛋白仪SOP文件
AC6600型糖化血红蛋白分析仪使用说明简明操作规程一、准备1、将A、B、C、D洗脱液加满。
2、开机预热半小时、自检、进入系统清洗。
二、测量1、预处理样本：用EDTA抗凝全血，取出1只装有300ul溶血剂的冷冻管，然后加入IOILI的全血稀释并放入AC60电子预温器中预温5min（或37℃预温lOmin）。
2、，单个分析：放入ST位测量。
3、批量分析：设置盘号，开始位号，结束位号，按顺序将处理好的样本放在样品盘上。
三、结束l、倒空废液瓶。
2、检查层析柱剩余个数。
注意事项一、仪器的工作环境温度为15℃～30℃，最佳温度为20℃～25℃，如超出此温度范围将对测量值造成影响。
二、需每日工作前检查A、B、C、D洗脱液是否加满，以防在批量测量过程中因为试剂用完导致测试中止，延误报告时间。
三、只能使用本公司提供的废液管，不得剪短和加长或更换废液管。
四、样本只能选用EDTA二钾或二钠抗凝，应放入AC60电子预温器中预温5min(或37℃)预温lOmin)后方可测定。
五、注意全血取样时勿将移液嘴插入样本管过深，以防造成血样挂壁。
六、在测试过程中，如果A、B、C、D任何一种洗脱液用完，本次报告不打印，加人洗脱液后重新测量此样本，造成时间和试剂的浪费，切记每日工作前将洗脱液加满。
七、如遇图谱出现异常，此样本不能报告，需重做。
八、在更换预处理柱或层析柱时，恒温筒盖要拧紧，以防漏液。
九、更换预处理柱时切莫将层析柱的密封圈带走，以防漏液。
十、更换预处理柱和层析柱时，先将A洗脱液和IC卡拿出，否则液体会不慎滴入IC卡。
十一、换上层析柱后，需预测同一个样本2～3次，稳定后正常启用C1和C2校正后测量。
十二、不能在仪器运行过程中强行关机。
十三、关机间隔超过15分钟后再开机，需预热半小时，必须进入仪器自检和系统清洗程序。
十四、工作完成后，应每日检查层析柱剩余数，及时订货。
十五、每日工作后将废液瓶倒空，以防废液溢出，影响工作环境。
糖化血红蛋白的SOP
糖化血红蛋白检测的SOP预期用途适用于体外定量检测人手指末梢血、静脉全血样本中的糖化血红蛋白的浓度。
检验原理糖化血红蛋白检测试剂盒是硼酸亲和色谱层析法。
试剂盒由层析器、R1试剂、R2试剂组成。
R1试剂包括专门裂解红细胞和沉淀血红蛋白及一种结合糖化血红蛋白的蓝色硼酸共轭物。
当血液加至R1试剂中时，红细胞裂解，并且所有的血红蛋白沉淀，硼酸共轭物与糖化血红蛋白的顺式二醇配合物相结合。
一定量的反应混合物加入到层析器，所有沉淀的血红蛋白与糖化血红蛋白结合或未结合的硼酸共轭物残留到层析器膜上。
任何未结合的硼化物通过R2试剂移除。
该沉淀通过使用分析仪分别检测蓝色（糖化血红蛋白）和红色（总血红蛋白）的颜色强度进行定量分析，从而测定血液样本中糖化血红蛋白的百分比。
样本要求：加了抗凝剂（EDTA、肝素、柠檬酸钠）的样本可在2-8℃保存7天，不能用血红蛋白裂解的样本。
不能冻融。
没有添加抗凝剂的手指末梢血和静脉全血样本采样后要立即检测。
检验方法在检测之前所有的检测试剂应平衡至室温。
分析仪内置定标曲线，测试前不需要定标。
A采集5ul的全血样本至R1试管中，混合均匀，至少反应2分钟，最多不能超过3分钟。
B待全血样本与R1反应完毕后，再次摇晃该试管以便组分充分混合。
打开试管吸取25ul的混合物，加入到层析器中。
注意过程中不要触碰到层析器中的滤膜，也不能让样本有气泡产生。
C当步骤2中的混合物被层析器完全吸收后，再取25ul的R2试剂滴到层吸器上，反应大约10秒。
D待R2试剂被完全吸收后，把层析器放到托盘上，用分析仪进行分析。
E分析仪在每次开机时有自动校准功能，校准成功才能开展上述试验。
参考区间参考区间为：4.3-6.0％检验结果的解释血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物是糖化血红蛋白，血糖和血红蛋白的结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应，并与血糖浓度成正比，且保持120天左右，所以可以观测到120天之前的血糖浓度。
糖化血红蛋白测试通常可以反应患者近8至12周的血糖控制情况。
PDQ糖化血红蛋白分析仪SOP
二、检验目的1. 测定Hba1c数值三、实验原理高压液相。
四、样本要求EDTA-K2全血（2ml）1.五、操作过程2.启动仪器6分钟注：完成开机程序后, ’’Run sample”画面( 若未离开SYSTEM READY画面,仪器不会进入睡眠, 会不停以每分钟2mL速度消耗药水，浪费试剂！！！)3.标本测定全血稀释样本（1：100稀释）或者注：洗针专用试管放至转盘0的位置并且条形码朝内，机器会自动侦测试管、确认条形码，并自动清洗针及管路并做Shutdown。
整个流程约需15分钟。
7.更换层析柱更换层析柱需要做以下步骤：1. 更换柱子时，插盘前在主界面按7（Auxiliary）→5(Cycle Count)→1(Display Column Cycles)后在键盘上按打印按钮，会打印出Column Cycles以及Instrument Cycles(仪器测量记录)2. 更换柱子时必须复位柱子计数，即插入软盘，将柱子计数复位至9000，并打印记录提供给厂家。
步骤: 在主界面按7（Auxiliary）→4(Prime)→4(Change Column)后输入密码“1379”按回车后，输入操作者ID：01按回车，此时软驱灯呈绿色大概10秒后灯熄灭，此时按面板上的红色打印键会打印出以往更换柱子的记录，及每根柱子做的个数。
3. 更换下来的旧柱子，更换的新柱子的批号（手工写在层析图上面即可）；需打印的层析图，包括定标未通过的空白、高、低定标液的层析图；以及更换了柱子后的高低定标液的层析图；试剂批号（4个试剂的批号，手工写在层析图上面即可）；4. 维护记录（在主菜单下按[9]，输入密码：1379后即可打印）；5. 所有的图形,报告及更换下来的柱子需在一星期内邮寄到我公司。
注意：1.如果不用马上安装色谱柱，请将其储存在2°- 8°C 的冰箱中。
2.在安装到系统中前，请让色谱柱恢复至室温。
3.如果预计设备将停用7 天或更长时间，在关闭设备后将色谱柱取出。
HbA1C操作SOP
A3:糖化血红蛋白（HbA1c）测定(免疫荧光干式定量法) A3.1首页内容XX医院检验科操作规程文件号：XXXX第1版共4页20XX年X月X日起实施本规程每2年复审一次复审日期：20XX年XX月XX日复审人：XXX(签名)规程编写者：XXX，XXX审批者：XXX批准日期：20XX年X月X日文件分发部门和/或个人：医务科：保管者：XXX(签名)院长办公室：保管者：XXX(签名)院档案室：保管者：XXX(签名)检验科：主任：XXX(签名)检验科XX检验室：XXX(签名)A3．2检测原理糖化血红蛋白检测试剂盒采用的是免疫荧光定量测试技术，干化学层析法。
即将检测缓冲液与加入了溶血缓冲液后的全血混匀，荧光标记的抗HbA1c抗体与血样中的HbA1c结合，当该样本混合液加入到反应板的加样孔后，检测抗体（荧光标记抗体）与样本中的HbA1c和固相在反应板上的糖化血红蛋白竞争性地结合。
荧光信号强度与HbA1c的量成反比。
A3.3标本要求A3.3.1 使用人的全血样本来进行测定。
A3.3.2 所有的血液样本在使用之前必须放在常温下，并且要保证样本均质性。
A3.3.3 新鲜血样本必须在收集后的24小时内使用。
A3.4试剂A3.4.1 每个试剂均购自XX公司。
1) 反应板 25T/盒2) ID芯片 1个/盒3) 溶血缓冲液 25管/盒4）检测缓冲液 1瓶/盒A3.4.2 试剂准备从冰箱中取出溶血缓冲液和检测缓冲液后需要在室温环境中放置10分钟，使其恢复至室温后方可使用。
糖化血红蛋白（HbAlc）检测试剂盒的反应板在密封情况下存放在4～30℃的密封袋内，可稳定15个月（如果存放在2～8℃环境中的反应板，需要在室温环境中放置10分钟，使其恢复至室温后方可使用）。
A3.4.3 试剂性能可接受性按测定项目资料手册中质量控制章节所规定内容进行质量控制。
结果必须在实验室规定的可接受范围内。
A3.4.4 超过失效期的试剂不可使用。
A3.5仪器A3.5.1 使用韩国BODITECH MED Inc.公司的i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪。
血红蛋白测定标准操作程序SOP文件
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
[计算结果]
1，血红蛋白(g/L)=测定管吸光度×64458×251/44000
=测定管吸光度×367.7
2，血红蛋白(g/L)=（测定管吸光度/标准管吸光度）×标准浓度（g/L）
[质量控制]
1．每天检测工作前后，清洁仪器表面，确保仪正常进行。
[试剂及仪器]
1，试剂：
HiCN试剂的配法:
氰化钾50mg
高铁氰化钾200mg
无水磷酸二氢钾140mg
Triton X-100 1.0ml
蒸馏水加至1000ml
纠正pH至7.0-7.4
此液为淡黄色透明溶液,用蒸馏水调零,比色杯光径1.000cm，波长540nm处的吸光度应为零。贮存在棕色有塞玻璃瓶中，放4°C冰箱保存.一般可用数月。
2，仪器：
（1）一次性微量吸管。
（2）721型分光光度计。
[标准品]
人标准血红蛋白液（卫生部临床检验中心）
[质控品]
COULTER ACT4CPLUS全血质控品。（血液细胞自动化分析仪介绍）
[标本采集]
未梢血或静脉血用EDTA-K2抗凝。
凝集，血量小于0.4 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。
男:120-160g/L
女:110-150g/L
[临床意义]
血红蛋白浓度测定（HGB）临床意义与红细胞的基本相同，一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系，但在部份贫血患者，二者数值的比值与正常人的比值有一定的差异，这些差异对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。
2．每天利用三水平质控品与标本同步进行室内质控一次，及时查找失控原因并纠正。
3．在工作中，当发现标本某些检测结果项出现倾向性结果时，必须重新进行一次室内质控制，找出和排除原因。
糖化血红蛋白操作程序
糖化血红蛋白操作程序一、检测方法离子交换层析法二、方法学原理H50采用基于离子交换的高效液相色谱检测原理，测量血红蛋白色谱图，计算相关参数。
基于高效离子交换的液相色谱检测原理，测量时先将含有各种血红蛋白的血液样本载入层析柱，在选定的低离子强度缓冲液及pH条件下，血液样本中的HbA1c几乎不带正电荷，首先被洗脱；血液样本中的HbA0带正电荷，用高离子强度的洗脱液最后洗脱出来，得到相应的血红蛋白层析谱，然后算出HbA1c峰值和总Hb的比值。
三、试剂品牌、包装规格、内含物3.1试剂品牌：迈瑞3.2试剂成分和规格3.2.1：离子交换层析柱：规格：1*13.2.2糖化血红蛋白溶血剂：磷酸缓冲液规格：2L*33.2.3糖化血红蛋白洗脱液A：琥珀酸缓冲液规格：900ml*43.2.4糖化血红蛋白洗脱液B：磷酸缓冲液规格100ml*23.3储存温度：2℃—30℃3.4开瓶有效期：100day。
四、仪器品牌、型号品牌型号：迈瑞H-50五、操作程序5.1开机程序5.1.1按主机上的电源开关，接通电源；5.1.2仪器自动执行一项自检操作，包括系统检查、关机检查和机械初始化。
整个过程约持续15分钟；5.1.3系统自检完成后，弹出登录对话框。
在对话框中输入用户名和密码后，点击“登陆”；5.1.4“液路初始化”完成后进入主界面，进行样本分析；5.2质控程序5.2.1容器类型1.使用离心管或微量杯，分别使用各自的适配器，放入质控品试管架，试管架上部有CRL标贴。
2.仪器会自动识别试管架，采用预稀释模式测量。
5.2.2质控品样本液的制备5.2.2.1厂家质控1.对于新开瓶质控品，首先将其自2~8℃冰箱中取出；2.轻敲瓶盖，确保冻干样品全部散落在瓶底，小心地打开瓶盖和橡皮塞，使瓶盖朝上，当心瓶盖上黏附的冰冻粉末被风吹下造成内容物的损失；3.获取2mL糖化血红蛋白溶血剂，缓慢注入两个水平的质控品瓶中，仔细盖上橡皮塞后，轻缓翻转小瓶10秒进行混匀，然后避光放置约2-3分钟（期间轻缓翻转小瓶，确保内容物完全溶解，翻转过程避免产生泡沫）；4.待其完全复溶后混匀，可用移液器分别取两个水平的质控品各200ul置于两个预稀释样本杯或1.5ml EP管中（剩余的质控品可置于2～8℃低温下保存14天，使用前从低温环境下取出即可直接使用），每一瓶质控品开瓶后均需在瓶身上记录开瓶日期，5.每一批质控品开瓶后第一次使用时均需在仪器上录入质控品试剂的参考值、批号和有效期：点击“质控”菜单→“设定”→选择新的文件号→点击“编辑”→选择质控水平、参考值类型，偏差限格式，输入批号、有效期、参考值和偏差限，每个水平质控建立一个相对应的文件夹并勾选“在用”列，仪器后续质控测试将默认保存在该文件夹中直到有效期失效。
糖化血红蛋白检测的SOP
糖化血红蛋白检测的SOP【目的】：用于评定糖尿病的控制程度【该SOP变动程序】：本标准操作程序的改动可有任一使用本sop的工作人员提出，并报告经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。
【检验的适用证】：本试验适用于糖尿病病人【仪器与试剂】1. 仪器：离子交换层析柱2. 试剂：2.1阳离子交换树脂缓冲液：PH6.9，8mg/dl;2.2GHB溶血试剂：氰化钾（含表面活性剂）10Mm；2.3GHB标准液：冻干2.4血清分离器：40枚【操作程序】实验温度：21-24C测定波长：415nm1、操作方法（1）收集静脉血、加入EDTA抗凝。
（2）根据样品数取试管若干，分别吸取400μl溶血剂加入各试管中。
（3）分别吸取80μl标准或样本放入上述各试管中，混合均匀。
（4）放置5～10min，则制成了血红蛋白样本A3。
2、糖化血红蛋白的制备及测定（1）根据样品的数量，取干净的试管若干，分别吸取3.0ml阳离子树脂，放入各管中。
（2）向上述试管中分别加入已预备的100μl血红蛋白样本（A3）。
将层析柱插入试管中，使得橡皮塞高于液面至少1cm。
（3）充分摇荡试管混合5～10min（最好使用涡旋摇荡器，如果没有则需剧烈摇荡20min。
（4）然后慢慢推动层析柱进入试管，直到糖化血红蛋白提取完全。
（5）上清液倒入另一支试管或直接倒入比色杯进行比色。
（6）以蒸馏水作空白在415nm调零。
（7）读取并记录标准，样品吸光度值。
3、总血红蛋白测定（1）根据样品数量取试管若干，分别加入5.0ml蒸馏水。
（2）加入20μl血红蛋白样本（A3）。
混合均匀。
（3）以蒸馏水作空白在415nm调零。
（4）读取并记录各管吸光度值。
4、参考值范围及报告单糖化血红蛋白GHB（%）=糖化血红蛋白吸光度/总血红蛋白吸光度×10（正常值范围4.0%～6%）。
【糖化血红蛋白测定注意事项】1.树脂缓冲液在使用前至少振摇10次加以混匀，每加5管反应摇匀一次；2.全血标本的血红蛋白大于18g/dl时，应将标本用蒸馏水按1：1稀释，结果乘以2；3.请勿使用塑料试管4.请使用13X100mm玻璃试管，以免因试管太小，血清分离器无法插入或因试管内劲太大，上清液无法进入血清分离器。
糖化血红蛋白仪SOP(标准操作流程)
NycoCard ReaderⅡ糖化血红蛋白检测仪SOP第一步：取下检测笔（Pen）的盖帽，将其插入笔架中。
第二步：按下ON/Select键开机，屏幕显示“Adjusting……（自行调整）”，此过程不要触动笔。
发出一声鸣叫表示调整正确，然后出现“Calibrate（校正）”；两声鸣叫表示调整错误并显示“Adjust error”。
该过程约需要30秒左右的时间，请等待。
第三步：按下 Enter 键，当显示信息“Place pen…”时将笔从插孔中取下，放在白板上进行校正，发出一声鸣叫并出现“Enter test”字样说明校正完毕。
第四步：按下 Enter 键，会出现“Test：D-Dimer New”。
[ 此时按下Select键，会依次出现“CRP wholeblood （全血CRP）”、“CRP serum/plasma（血清CRP）”、“HbA1c（糖化血红蛋白）”等项目。
]第五步：选定所检测的项目后，按下Enter键，即可进行测试。
第六步：测试完毕，同时按下Enter＋Quit 键关机。
或10分钟之内不进行任何操作，仪器将自动关机。
糖化血红蛋白SOP第一步：沉淀血红蛋白：将5μl 全血添加到装有R 1 / 试剂的离心管内，混匀。
静置2 分钟，最多3 分钟。
第二步：加样本：再次混匀以便得到均匀的悬浮液, 用加样器准确向检测卡孔内添加2 5μl 悬浮液，让反应混合物充分浸润薄膜约10 秒钟。
第三步：加R2/ 洗液：向反应孔内添加25μl R 2/ 洗液。
让洗液充分浸润薄膜10 秒钟。
第四步：读数：5 分钟之内，利用读数仪读取结果。
参考值：4.5%——6.3%D - 二聚体SOP第一步：预清洗：吸取5 0μl R 2/ 洗涤液加入T D / 检测卡反应孔内，让洗涤液充分浸润孔内薄膜，注意勿使加样头触及反应孔膜。
第二步：加样本：向反应孔内加入5 0μl 柠檬酸盐抗凝的无血小板血浆样本质控品，样本应在5 0 秒内渗入孔内。
糖化血红蛋白(HbA1c)测定标准操作程序SOP文件
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
免疫抑制比浊法
2测定原理
标本中的HbA1c与anti- HbA1c抗体发生反应，形成可溶性的抗原-抗体复合物。因为在HBA1C分子上只有一个特异性的HbA1c抗体的结合位点，所以不能形成凝集反应。过量的抗HbA1c抗体与试剂中的多半抗原反应形成不可溶的抗体-多半抗原复合物，可以通过浊度进行检测，然后在另外一个通道中检测血红蛋白的浓度。
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第3页，共3页
9注意事项
9.1血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.2仅应用于体外诊断。
9.3计算公式：
公式1：糖化血红蛋白的浓度以%形式报告。
%HBA1C=HbA1c(g/dl)÷Hb(g/dl)×100
公式2：经DCCT研究与HPLC相关好。
3标本
3.1标本收集：
毛细血管血及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：15－25℃3天
2-8℃7天
-20℃6月
3.2标本准备：
3.2.1毛细血管血：
使用一次性的毛细血管采取毛细血管血液，将该血液与溶血剂进行1：100倍配比（例如20ul毛细血管血液配比2000ul溶血剂）。小心混匀后使用。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。
溶血后的稳定时间：2-8℃24小时
-20℃6月
再使用前将溶血剂放入室温稳定15分钟。
3.2.2 EDTA/肝素抗凝血：
将抗凝全血混匀避免形成泡沫。取血液10ul，加入溶血剂1000ul。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。
SOP-DM-01 糖尿病监查
SOP-DM-01 糖尿病监查目的此标准操作程序(SOP)旨在规范和标准化糖尿病监查流程，以确保数据的准确性和患者的安全。
适用范围此SOP适用于所有进行糖尿病监查的医护人员。
定义- 糖尿病：糖尿病是一种慢性代谢性疾病，是由于胰岛素分泌不足或胰岛素作用不良导致的高血糖状态。
糖尿病：糖尿病是一种慢性代谢性疾病，是由于胰岛素分泌不足或胰岛素作用不良导致的高血糖状态。
- 糖化血红蛋白(HbA1c)：是血红蛋白与葡萄糖非酶性结合的产物，其浓度与过去3个月内的平均血糖水平相关。
糖化血红蛋白(HbA1c)：是血红蛋白与葡萄糖非酶性结合的产物，其浓度与过去3个月内的平均血糖水平相关。
- 空腹血糖(FPG)：即空腹时的血糖水平，建议在每天早上测量。
空腹血糖(FPG)：即空腹时的血糖水平，建议在每天早上测量。
操作步骤1. 安排糖尿病监查时间：对于首次糖尿病监查，应安排在早上，并告知患者需要空腹。
对于随访糖尿病监查，应在稳定的时间和空腹状态下进行。
2. 测量空腹血糖(FPG)：使用血糖仪测量患者的空腹血糖水平，并记录数据。
3. 测量糖化血红蛋白(HbA1c)：将患者的血液样本送至实验室进行HbA1c检测，并记录数据。
4. 分析和解读数据：将FPG和HbA1c的结果与糖尿病标准进行比对，判断患者是否符合诊断标准或治疗目标。
5. 就诊和跟踪：根据监测结果，医生应制定相应的治疗计划，并进行随访和跟踪。
注意事项- 在进行糖尿病监查时，请咨询患者是否有任何特殊情况或服药。
- 请在测量空腹血糖(FPG)前告知患者不要进食。
- 根据需要，可以对操作步骤进行调整。
引用- 《糖尿病防治指南》- 《糖化血红蛋白检测指南》。
糖化血红蛋白测定SOP_HA1C临床意义_检验科生化项目SOP
文件编号：
版本号：
页码：第 页 共 页
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司糖化血红蛋白（HA1C）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：347~351。
编写： 审核： 批准：
糖化血红蛋白水平低于确定的参考范围，可能标明最近有低血糖发作、Hb变异体存在或红细胞寿命短。
任何原因使红细胞生存期缩短，将减少红细胞暴露到葡萄糖中的期间，随之糖化血红蛋白就会降低，即使这一时间平均血液葡萄糖水平可能是升高的。红细胞寿命缩短的原因，可能是溶血性贫血或其他溶血性疾病、镰状细胞特征、妊娠等，当解释这些患者的糖化血红蛋白结果时应当小心。
5.2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准
糖化血红蛋白测定
文件编号：
版本号：
页码：第 页 共 页
周期为3个月。
5.3校准程序
主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator
4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter，在Sample No处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。
血红蛋白检验操作SOP
1.目的
建立血红蛋白测定的操作步骤，以保证试验的顺利进行和结果的真实可靠。
2.适用范围
适用于血清制品血红蛋白的测定（分光光度计法）
3.职责
检验人员。
4.定义
无
5.引用标准
《中国药典》2015版四部通则3604
6.材料及设备
6.1 751分光光度计
6.21・cm光路的比色杯
6.3蒸偏水
7.流程图
无
8.内容
8. 1. 以蒸储水为空白对照。
8.2使用I-Cm光路的比色杯，直接测定牛血清样品在576nm、623nm及70Onm
波长下的吸光值。
8.3每个样品至少测定2次。
8.4计算平均测定值
8.5 按照下式计算样品中血红蛋白含量：
血红蛋白含量(mg∕d1)=[(A576×115)-(A623×102)-(A700×39.1)]×1Oo
8.6其中；A576、A623、A700是样品在576nm、623nm及70Onm波长下的平均吸光值。
9.注意事项
9.1.严格按照仪器说明书进行操作。
9. 2. 比色杯要保持清洁，定期在盐酸液中进行浸泡。
9.3. 试验完毕将所有物品放归原处。
10.附录及派生记录
10.1. 血红蛋白检测记录F-S0P-Z1004-01
11.相关文件
无
12.修订记录。
MQ-2000PT 糖化血红蛋白SOP文件
MQ-2000PT糖化血红蛋白分析仪 SOP 文件1.检验申请单独检验项目申请：HbA1c（糖化血红蛋白）测定。
组合项目申请：糖尿病测定组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2.标本采集与处理2.1采血前受检者保持安静、放松状态、环境温暖、防止静脉挛缩。
一般采用坐姿采血。
2.2用一次性无菌注射器或抗凝真空采血管采静脉血2.0ml，置于含150g/L EDTA-K2（或肝素）小溶液10ul的塑料试管或硅化玻璃试管中，加盖后颠倒混匀抗凝，及时送检。
2.3检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.4采血后一般4小时内完成检测，检测前标本置室温即可。
3.方法原理：MQ-2000PT糖化血红蛋白分析仪采用高效液相色谱法，根据HbAlc与非糖化血红蛋白带电量不同进行分离。
非糖化血红蛋白带正电荷，而糖化血红蛋白几乎不带电，根据他们带电性质的不同，利用弱酸性阳离子交换法将其分离。
使用的固定相为弱酸性阳离子交换固定相，该固定相带有可交换阳离子的基团，能与带正电荷的非糖化血红蛋白通过静电作用相结合，而糖化血红蛋白不带电，故不能与固定相结合，在选定低浓度洗脱液条件下洗脱，糖化血红蛋白首先被洗脱；再用高浓度洗脱液洗出非糖化血红蛋白。
被分离出来的血红蛋白洗脱液通过415nm波长的紫外光检测吸光度，得到相应的血红蛋白层析色谱。
HbAlc值以色谱图中HbAlc的峰面积占全部血红蛋白面积的百分率来表示。
然后在显示屏上显示结果并在热敏打印机上打印出结果4.试剂：每试剂包中含有下列试剂：试剂A：2000ml×2瓶；试剂B：2000ml×1瓶；溶血素 H：2000ml×4瓶；打印纸6卷；样品杯100只；5.分析柱：高压液相层析柱，可检测样本量800人份/根层析柱批号应与试剂批号保持一致，不同批号不可混用6.适用仪器生产商：上海惠中科技有限公司仪器名称：MQ-2000PT糖化血红蛋白分析仪7.标准与质控标准：可使用厂方配套的1、2号定标品。
糖化血红蛋白测定的标准操作程序
糖化血红蛋白（GHb ）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆及糖化血红蛋白（GHb）测定。
【适用仪器】Olympus AU-27全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】本法是利用抗原抗体反应直接测定总Hb中HbA1c的百分含量的方法。
样品中总Hb中HbA1c与胶乳有相同的非特异性吸附而固相化，当加入HbA1c的特异性单克隆抗体后形成胶乳HbA1c-鼠抗人HbA1c单克隆抗体的复合物，此复合物由于羊抗鼠IgG抗体而形成凝集，凝集量因胶乳表面固相化的HbA1c量的不同而不同。
通过测定其吸光度并与HbA1c百分浓度的标准曲线比较后，可求出样品的HbA1c占总Hb的百分含量。
【试剂】1.成份：R1胶乳液：胶乳、甘氨酸缓冲液R-2A抗体1：羊抗鼠IgG抗体、甘氨酸缓冲液R-2B抗体2:鼠抗人HbA1c单克隆抗体、甘氨酸缓冲液溶血液：H2OHbA1c参比液：含5个浓度，分别约为0%，4%，8%，11%，14% （详见标示量）另售。
2.校准品：Electrollyte CAL 1、Electrollyte CAL 2.3.质控品：Randox Assayed Multiseral Level 2 and Level 3.【标本收集与准备】血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天,冷藏7天，冷冻保存6个月。
血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。
【操作步骤】1. 仪器测定参数设置2. 试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8C ）。
3. 校准建议使用复合校准品对自动分析仪进行校准。
每批样品检测时，建议使用质量控制品进行内部质量控制。
校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。
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糖化血红蛋白定量检测标准操作规程（SOP）
1．项目名称、检验方法名称
●糖化血红蛋白
●微粒色谱法
2．方法学原理
本试剂盒包含多孔性滤膜装置，含试剂的试管和洗涤溶液。
试剂能溶解红细胞并特异性沉淀血红蛋白因子，其中蓝色的硼酸缀合物能和糖化血红蛋白上的Cis-diols相结合。
血液加入试剂中，红细胞立即溶解，使全部的血红蛋白都沉淀，硼酸缀合物就和糖化血红蛋白中的cis-diol结构相结合。
血液和试剂混合后加入滤膜装置，所有沉淀的血红蛋白，不管是和缀合物结合的或未结合的都保留在滤膜的顶部。
过量的显色缀合物就被洗涤液洗掉。
通过NycoCard READERⅡ金标定量仪测定蓝色（糖化血红蛋白）和红色（总血红蛋白）的强度，可以计算样品中的HbAlc的百分比。
3．试剂品牌、规格、内含物
●挪威Nycocard
●规格及内含物
1)反应板（含滤膜）1×24块
2)试剂R1 1×24×0.2ml 含有锌的甘氨酰胺缓冲液，染料硼酸缀合物及表面活性剂。
3)洗涤液R2 1×2.0ml 吗啉缓冲液及表面活性剂。
4)未提供的材料
〃5μl吸管或毛细管，用于加样品
〃25μl吸管，用于加反应混合物及洗涤液
4．仪器品牌、型号
●挪威Nycocard
●Reader II
5．操作步骤
1)分离血红蛋白和糖化血红蛋白加5μl全血于含R1的试管中，混匀，放置3分钟。
（注意：保证在混合后毛细管是完全空的。
）
2)样品的使用再混匀，得到均匀的悬液，用吸管加25μl悬液到反应板中，吸管头离反应孔0.5cm，将吸管内的液体快速加入反应孔的中部。
让悬液渗入滤膜，等候15－20秒。
（注意：避免气泡。
）
3)洗涤加25μl洗涤液R2于反应板，让洗涤液完全渗入滤膜。
等待10秒钟。
（注意：避免气泡。
）
4)结果测定在5分钟内用仪器NycoCard READER II读取结果。
6．参考范围
测量值范围：3 －18％HbAlc 正常值范围：4.5－6.3 % HbAlc 7．临床意义
1）糖尿病的诊断
2）有助于糖尿病并发症的发现和预防,降低并发症的危险性。
8．病人准备、标本要求
加抗凝剂或不加抗凝剂（EDTA、肝素和NaF）的毛细管血和静脉血均可应用。
9．注意事项
10．编写者
11．主任签名
12．日期。