免疫球蛋白IgM测定

免疫球蛋白IgM测定

1检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2原理

免疫透射比浊法

抗免疫球蛋白M抗体和样本中的抗原形成抗原抗体复合物，出现凝集，进行透射比浊检测。通过加入PEG可促使反应迅速达到终点，可增加灵敏度，降低样本中抗原过剩导致假阴性的风险。

3标本要求

3.1使用新鲜血清,不使用血浆.

3.2在采集血液后2h分离血清.

3.3 8h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置―150C――200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.

3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.

4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司IgM试剂盒,国械注进20142405056

YZB/GER 5724-2014）

4.1.1 试剂组成

R1:TRIS 缓冲液：20 mmol/l，pH 8.0；氯化钠：200 mmol/L；PEG：3.6%；防腐剂和稳定剂。

R2:抗人免疫球蛋白M抗体（羊）：取决于滴度；TRIS缓冲液：20 mmol/l；氯化钠：150 mmol/L；防腐剂

4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8°C下保存期限：见试剂标签上的有效期。机上稳定期：90天。

4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。

4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的IgM校准品对自动分析仪进行校准

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪

6 操作步骤

6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法

以IgM复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/l报告。

9 参考值

10 临床意义:

正常的IgM由10个重μ链和10 个κ或λ轻链组成，IgM 分子中的κ或λ轻链总是相等的。还有1个J 链将所有的μ链连接在一起，简言之，IgM与IgG相比，是五聚体的结构。IgM的相对分子量为900000，在免疫球蛋白中最大，但其只占血浆免疫球蛋白的6％。

在感染后，IgM是最早出现的特异性抗体，能激活补体系统协助杀灭细菌。但是和IgG 相比，在感染控制后IgM水平

就会较快地下降。临床上比较IgG及IgM的滴度来鉴别急性与慢性感染。如以IgM为主，感染是急性的；以IgG为主，感染为慢性的（如：风疹、病毒性肝炎）。

多克隆IgM水平升高见于病毒、细菌、和寄生虫感染，肝病，类风湿性关节炎，硬皮病，胆囊纤维化，和海洛因吸毒等。单克隆IgM水平升高见于Waldenstrom 巨球蛋白血症。IgM流失增加见于肠道病和烧伤的蛋白流失。IgM的合成减低见于获得性及先天性免疫缺陷综合征。

11 操作性能

11.1 线性范围：0.25-6.5 g/l

11.2精密度

采用内部协议重复检测人样本和质控品（n=21），结果如下：

标准应用（IGM-2）

样本批内精密度批间精密度

均值变异系均值变异系