香菇多糖的复合酶法 提取
香菇多糖的提取方法及应用
香菇多糖的提取方法及应用香菇多糖是从香菇中提取的一种多糖类化合物，具有抗肿瘤、抗病毒、降血脂、降血糖等多种药理活性。
提取香菇多糖的方法主要包括水提法、酸提法、碱提法、酶解法等多种方法。
下面将对香菇多糖的提取方法及应用做详细介绍。
1. 水提法水提法是将香菇切碎后用水浸泡，通过水提取的方法获得香菇多糖的一种提取方法。
其优点是提取过程简单，设备要求低，且操作方便。
但缺点是提取率较低，且容易受到微生物污染。
2. 酸提法酸提法是将香菇切碎后用酸性溶液浸泡，通过酸的作用来提取多糖。
酸提取的优点是提取率高，但也会产生废液排放问题，同时酸性溶液容易对蛋白质产生影响。
3. 碱提法碱提法是将香菇切碎后用碱性溶液浸泡，通过碱的作用来提取多糖。
碱提取的优点是提取率高，同时对蛋白质影响较小。
但碱性溶液的使用需要注意对环境的影响，且碱性条件下易使多糖发生降解。
4. 酶解法酶解法是通过加入酶类来促进多糖的提取，能够有效地增加提取率。
但酶类的成本较高，同时酶解条件的控制较为严格。
提取得到的香菇多糖可以通过浓缩、絮凝、沉淀及净化等方法得到纯净的多糖产品。
香菇多糖的应用广泛，主要包括以下几个方面：1. 药品领域香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒的作用，被广泛应用于肿瘤治疗、免疫调节、抗病毒等方面。
临床研究表明，长期服用香菇多糖可以增强人体免疫力，减少感染病毒的风险。
2. 食品工业香菇多糖可作为功能性食品添加剂，提高食品的营养价值，增加食品的功能性。
例如可以将香菇多糖添加到饼干、饮料、果冻等食品中，以增强食品的健康功能。
3. 化妆品领域香菇多糖具有较好的保湿性，被应用于化妆品中具有很好的效果，如护肤乳液、面膜等产品中。
4. 其他领域香菇多糖还可以用于环保领域，例如用于废水处理，其能够起到絮凝剂的作用，帮助去除水中的杂质，达到净化水质的效果。
总而言之，香菇多糖的提取方法多样化，可以根据需要选择适合的提取方法，提取得到的多糖产品应用广泛，涉及药品、食品、化妆品等多个领域，具有很好的开发和利用前景。
香菇多糖的分离提取
香菇多糖的分离提取一、实验目的掌握水溶醇沉法分离多糖类化合物的原理和方法。
二、实验原理在组织中，多糖多与蛋白质以共价相结合，所以在生化产品制备工艺中，往往第一步多用酶降解蛋白质部分或用碱使多糖—蛋白质间的键裂开，以促进多糖在提取时的溶解。
碱性提取可避免多糖中硫酸基团水解而破坏。
现多采用碱性提取的同时用蛋白质水解酶处理组织。
提取液中存在的蛋白质可用普通蛋白质沉淀剂使之沉淀，也可用其他方法使变性沉淀，如适当调pH和加热等。
苯酚试剂可与香菇多糖中的已糖及其糖醛酸起显色反应，生成橙黄色化舍橱，于49Ohm处比色，定量。
三、实验材料1.实验器材循环水式真空泵；旋转蒸发仪；粉碎机；恒温水浴锅；纱布；搪瓷缸；真空干燥器；721型分光光度计；15ml具塞试管。
2．实验试剂（1）95%乙醇；甲醇（化学纯）；乙醚（化学纯）；木瓜蛋白酶（中性）；纤维素酶；0.2 mol/L十六烷基三甲基氢氧化铵水溶液；10 mol/L 氢氧化钠溶液；葡萄糖标准溶液(1mg/ml，10m/m])；苯酚试液。
（2）复合酶液：以PBS缓冲液做溶剂，其中蛋白水解酶浓度为8 %，纤维素酶浓度为4%；（3）苯酚溶液：称取苯酚(AR级)10 g加水190 g溶解后，置于棕色瓶，备用。
四、实验方法步骤（一）香菇多糖的分离1、预处理：取干香菇4 g，用粉碎机粉碎或捣碎。
2、提取：将捣碎的干香菇置于250 ml三角瓶中，在搅拌的条件下加7倍量水混匀, 加热至90℃，搅拌保温60 min，降温至40℃时转移到40℃水浴保温；并加入适量0.45 ml 复合酶（蛋白水解酶浓度为8 %，纤维素酶浓度为4%），pH值为自然(pH 6.4)，搅拌反应60 min，然后迅速升温到90-100 ℃，灭活1min，降温后纱布过滤，收集滤液。
3、浓缩：将以上滤液置于旋转蒸发仪中，然后减压浓缩至l/5体积时，停止浓缩。
4、沉淀：将浓缩液置于搪瓷缸中，在搅拌的条件下，加1 倍量乙醇，然后静置过夜。
香菇多糖的纯化工艺优化
香菇多糖的纯化工艺优化梁敏【摘要】为获得纯度较高的香菇多糖,以香菇为原料,采用复合酶法提取香菇多糖并对其进行纯化,在单因素试验的基础上,对脱色温度、活性炭用量、脱色时间和pH 值4个因素进行正交试验并选取香菇多糖脱色的最佳工艺条件,采用酶法结合Sevage法脱除蛋白质对脱色后的香菇多糖进行纯化.结果表明:在脱色温度20℃,活性炭用量1.0％,脱色时间90 min,pH 3的条件下,香菇多糖脱色率为71.3％,多糖损失较低,为7.8％.脱色纯化后的香菇多糖为白色,蛋白去除率为90.26％.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2013(041)010【总页数】4页(P165-167,171)【关键词】香菇多糖;纯化;工艺优化【作者】梁敏【作者单位】齐齐哈尔大学化学化工学院,黑龙江,齐齐哈尔161006【正文语种】中文【中图分类】S39香菇(Lentinus edodes)是侧耳科(Pleurota ceae)的担子菌，世界名贵食用兼药用菌之一。
香菇子实体中除含有蛋白质、氨基酸、矿物质、维生素和对人体有益的微量元素外还含有一种重要的生物活性高分子多糖。
现代研究表明，香菇多糖具有抑制肿瘤、抗病毒和抗氧化等药理活性，对提高肝炎及艾滋病人的免疫功能等均有较好的作用，且无任何毒副作用[1]。
Chihara等[2-3]从香菇子实体中分离得到一种具有抗肿瘤活性的β-(1-3)-D-葡聚糖，其抑制癌症和抗肿瘤效果不是直接作用于移植性癌细胞，而是通过宿主调节发生作用，其抗肿瘤的药理作用并非直接杀伤细胞或抑制细胞生长，而是表现在增强人体免疫调节作用。
因此，人们常称香菇多糖为生物反应修饰剂[4]。
香菇多糖通常被包裹在细胞壁内，往往和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在，中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质，从而将多糖释放出来，提高多糖的得率，降低多糖中蛋白质的含量，提高多糖的纯度。
传统的浸提法虽然是提取多糖的经典方法，但时间长、能耗大、效率低，酶法处理可以提高多糖的提取率、减少能源消耗、缩短提取时间。
香菇多糖的提取纯化方法
香菇多糖的提取纯化方法吕红常秀莲*（烟台大学生命科学院，烟台264005）摘要：香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能，在保健食品和药品开发方面具有广阔的应用前景。
概括介绍当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法。
并简单比较香菇多糖提取的这几种方法并介绍了超滤-渗滤法和活性炭联合陶瓷膜超滤法这两种香菇多糖的纯化方法。
关键词：香菇多糖; 提取; 纯化; 抗癌;抗病毒Extraction and purification of LentinanLvhong changxiulian*(Yantai university life academy of sciences, Yantai 26005)Abstract: Lentinan was isolated from mushrooms with an important physiological activity of substances with anti-virus, anti-cancer, enhance immunity and other functions. It has broad application prospect s in health food and drug’s development. Give overview of the current formulation used in hot water, enzymatic method, microwave extraction and deep fermentation method 6 kinds of mushroom polysaccharides method, And Introduced theUltrafiltration-filtration method and the Activated carbon ceramic membrane joint ultrafiltration method of Lentinan purification.Keywords: Mushroom polysaccharide ; Separation ; cancer ; antiviral1引言香菇多糖(Lentinan) 是一种β-1,3-葡聚糖, 是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖，能治疗癌症, 抗恶性肿瘤, 抗病毒, 抗感染, 提高人体免疫力等多种生理功能。
香菇多糖的提取方法及其应用
香菇多糖的提取方法及应用姓名：刘文学号：200809102118专业：化学工程与工艺班号：B08091021指导老师：彭湘红摘要:香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质,具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能。
文章系统地综述了香菇多糖的几种制备、提取的方法，以及在各方面的应用, 并展望了其今后研究方向及开发应用前景。
关键词：香菇、多糖、提取方法、应用。
香菇( Lentinula edodesP eg le或 Lenti nu la edodesS ing ) ,又名香覃、冬菇, 是世界上著名的实用真菌之一。
它不仅素以色、香、味俱佳而著称,而且营养丰富,能医治多种疾病。
我国自古以来就把香菇说成是一种肌里玉洁, 芳香韵味, 上至皇帝, 下至百姓,无人不喜!的素食, 有素中之荤!、菇中之王! 蔬菜之魁!等多种美称, 是食用菌家族中的宠儿。
中医认为, 香菇味甘、性平, 具有补气健脾、和胃益肾、滋味助食之功效。
香菇不但含有丰富的营养, 而且还有特殊的药用疗效。
据研究, 香菇体内含有香菇多糖、香菇多糖蛋白等多种生物活性物质, 是理想的免疫促进剂, 且有抑制癌症和抗肿瘤效果。
香菇多糖主要成分是以β1→3键合的 D-葡聚糖, 1968年日本人千原吴郎首先利用热水香菇子实体中浸提出 6种胞外 LNT, 其中二种有明显抗癌作用, 测试表明其平分子量为 100万,是一种带分支侧链的β-葡聚糖结构,并定商品名为 Lenti nan ; 香菇多糖自1969年在日本正式发现以来, 关于其抗恶性肿瘤、抗病毒、抗感染等生理功能的报道已不少。
1970年 Chihard和 Sasak i用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外 4种多糖,药理实验同样表明: Lc- 3和 Lc- 1两种多糖具抗癌作用; 70年代初 Sh i da等用三氯醋酸浸提、甲等沉淀又从香菇中提取到三种水溶性多糖( PSA,B, C) ,其中 PSB由 D -半乳糖, 岩藻糖和 D-甘露糖所构成。
香菇多糖的研究进展
香菇多糖的研究进展摘要香菇多糖（lentinan）是从香菇中提取的一种多糖（又称瘤停能；香菇糖；lentinan vial），它具有很高的药用价值，能防止多种疾病，这与香菇所含的各种药效成分有着密切关系。
本文主要讲述了香菇多糖的提取，含量测定，化学结构及其药理功效。
关键词:香菇多糖、提取、含量测定、化学结构、药理功效AbstractThe lentinan extracted from a mushroom polysaccharides (also called tumor can stop; mushrooms sugar lentinan vial);, it has very high officinal value, can prevent many kinds of disease, and mushrooms contain of various medical effect part has close relation. This paper mainly introduces the lentinan extraction, the content determination, chemical structure and pharmacological effect.Key words: lentinan, extraction, content determination, chemical constitution, pharmacology effect香菇(Lentius edodes)为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第2大食用菌。
香菇是药食两用菌类，作为食用菌，由于其营养丰富，历来受到人们的喜爱；作为药物，由于其含有香菇多糖、香菇嘌呤、氨基酸等多种有效成分而倍受药物研究工作者的关注，特别是其中香菇多糖的抗病毒、抗肿瘤以及调节免疫功能等作用被发现以后，其研究更深入、更多元化。
超声波协同复合酶法提取香菇多糖的工艺优化
超声波协同复合酶法提取香菇多糖的工艺优
化
嘿，朋友们！今天咱来聊聊超声波协同复合酶法提取香菇多糖的工艺优化这档子事儿。
你说这香菇多糖啊，那可真是个宝贝！就好像是隐藏在香菇里的小惊喜。
咱要把它好好地弄出来，就得用对方法。
想象一下，这超声波就像是个神奇的小助手，能帮着我们把香菇里的多糖给震出来一些。
再加上复合酶呢，就像是一把精准的小钥匙，能打开那些紧紧锁住多糖的小机关。
那怎么让这个过程变得更完美呢？这可得好好琢磨琢磨。
温度就是个很重要的因素啊！就跟咱洗澡水的温度似的，太凉了不舒服，太热了也不行。
得找到那个刚刚好的温度，让超声波和复合酶能欢快地工作起来。
还有时间呢，太短了多糖还没出来够，太长了又好像有点浪费。
这就跟煮鸡蛋似的，时间得恰到好处，才能煮出好吃的鸡蛋。
酶的用量也不能马虎呀！用少了效果不好，用多了又好像有点浪费。
这就好像做菜放盐，得适量，多了咸，少了没味道。
那怎么知道我们做的对不对呢？这就得靠实验啦！一次不行就两次，两次不行就三次，总有一次能找到最合适的方法。
这过程就像爬山，虽然累，但是等爬到山顶看到那美丽的风景，就觉得一切都值啦！
咱得不断地尝试，不断地调整，就跟调收音机的频率似的，慢慢找到那个最清晰的频道。
说真的，这超声波协同复合酶法提取香菇多糖的工艺优化可不是一件容易的事儿，但咱不能怕呀！只要用心去做，肯定能做出好结果。
所以啊，大家可别小瞧了这个过程，这里面的学问大着呢！咱得认真对待，就像对待自己最喜欢的宝贝一样。
这样才能把香菇多糖好好地提取出来，让它发挥出最大的作用呀！。
香菇多糖的生产
香菇多糖的生产一、简介多糖（polysaccharide）是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个以上的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（C6H10O5）n表示。
由相同的单糖组成的多糖称为多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以没的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。
多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质的混合物。
多糖类一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象。
多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解过程中，往往产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。
多糖（polysaccharide）是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。
凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。
目前，多糖的临床作用有免疫调节、抗病毒及抗癌、降血糖、治疗肝肾疾病及消炎镇痛、美容、乳化等，除此之外，Sakata Shigenobu等通过对多种单糖、多糖及其衍生化糖类(如醛糖、黏多糖、多糖酵解后的糖)进行发酵或提取，得到一类稳定、安全的试剂，它可减少典型的有害物(如二氧芑、氰基化合物、多氯联苯等)对环境和人体的侵害，是极有意义的环保试剂。
Watanabe Sa J用一种以吸附多糖(如淀粉)的羟磷灰石作载体的培养基质培养造骨细胞。
此载体的特点在于不用加入血清、细胞生长因子等物质就可刺激造骨细胞生长因子受体，而且它可避免在培养某种造骨细胞时，由于血清种类的特异性而必须筛选最适血清所耗费的大量人力、财力，因而此项发明的问世无疑大大地降低了造骨细胞的培养费用，具有极高的经济价值和社会价值。
二、香菇提取物香菇（Lentinus edodes）在日本和中国已有数千年的使用历史。
其同时作为一种食物和药用植物而闻名。
很长时间以来，人们都相信香菇可以增长精力，治疗感冒和去除肠道寄生虫。
香菇含有脂肪，碳水化合物，蛋白质，纤维，维他命和矿物质。
然而，其关键成分则是被称作香菇多糖的多糖。
香菇多糖的提取
香菇多糖的提取技术作者：唐庆菊学号：19摘要：香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能，在保健食品和药品开发方面具有广阔的应用前景，本综述通过对当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法进行概述，具体的阐述了深层发酵液中香菇胞内、胞外多糖的提取、香菇多糖的微波提取法。
并展望了其今后研究方向及其开发应用前景。
关键词：香菇多糖、提取1 引言多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分,广泛存在于动物,植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子.,尤其是一类重要的信息分子.到目前为止,已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来,其中植物提取水溶性多糖最为重要.从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。
香菇多糖的提取方法一般有热水提取法,酸提取法,碱提取法,酶提取法和微波助提法等方法..1．1.香菇多糖的组成及理化性质香菇多糖又称香蕈、椎耳、香信、冬菰、厚菇、花菇，英文名：Lentinan。
香菇是我国传统的著名食用菌，在世界上最早人工驯化栽培。
香菇营养丰富，味道鲜美，被视为“菇中之王。
香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖,是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖.多糖以甘露糖为主,含少量的葡萄糖,微量的岩藻糖,半乳糖,木糖,阿拉伯糖等;肽链由天冬氨酸,组氨酸,丝氨酸,赖氨酸,谷氨酸等18种氨基酸组成.LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链,侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖,平均分子量约为50万道尔顿。
香菇多糖成品为白色粉末状固体，对光和热稳定。
在水中溶解度为3g/L；能溶解于0.5mol/L氢氧化钠，溶解度可达50g/L-100g/L；不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂中。
香菇多糖具有吸湿性，在相对湿度为92.5%，温度为25摄氏度的环境中放置15天，吸水量可达40%。
总结的方法
香菇多糖的提取方法香菇是我国传统的药食两用食品，含有多种有效药用成分尤其是香菇多糖,是一种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能医学研究证明, 它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高, 由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞它的作用是间接的，毒副作用小, 在临床上具有很好的应用前景。
目前香菇多糖制成针剂已在日本生产并外销, 但一直以来工艺复杂,收率低,成本较高。
本文对香菇多糖的提取方法进行了总结比较，旨在为香菇多糖及其他真菌多糖的深入研究和开发利用提供理论参考。
提取方法：1热水浸提法热水浸提法是最主要的传统提取多糖的方法，将香菇子实体或菌丝体破碎, 放于100℃的热水中, 4h后进行过滤, 滤渣再反复提取2 ~ 3次。
取滤液加入3倍体积的95 %乙醇处理4h ,经离心、过滤、去除沉淀物、将滤液浓缩、烘干, 即成为粗多糖。
但是它通常需要更长的时间和更高的温度但是提取效率却很低。
由此分析可知用水提不但工艺比较复杂，多糖得率低，而且纯化过程复杂且纯化精度低，故不宜选用此方法来提取香菇多糖。
2动态高压微流化（DHPM）技术辅助提取香菇多糖（Dynamic high pressure microfluidization-assisted extration）DHPM是一个新兴的动态高压技术。
不同于高的净水压力，此方法联合了高速冲击,高频振动,瞬时压力下降,强烈的剪切、气蚀和达到200 mpa超高压力。
有研究小组第一次用DHPM提取玉米花粉多糖,而且发现DHPM辅助提取可以有效地提高玉米花粉多糖的产量显示了它在提取多糖上巨大的潜力。
动态高压微流化技术(DHPM)已经应用于辅助香菇多糖的提取。
相对于传统的热水浸提法，DHPM辅助提取法对羟基自由基、超氧化物阴离子自由基、DPPH(二苯基苦基苯肼)自由基和亚硝酸盐有着更好的清除能力。
可以得出结论，DHPM是一个很有前景的方法,在提取香菇多糖时可以提高它的抗氧化活性也可以提高产量。
香菇多糖提取工艺详解
复合酶浸提法
复合酶解,酸与热水相结合浸提法
(3)
现在常用的生产方法
以上几种方法均有优点和缺点，而现如今也都在被使用！
3 、生产技术
(1)生产原理: 多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇,也不溶于氯仿正 丁醇.热水浸提时，香菇组织膨胀破裂，多糖成分浸出， 所以用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水 也可以将蛋白类物质提取出来,所以用氯仿正丁醇萃取除 去提取液中的蛋白。 (2) 原料及要求:
(3) 香菇多糖的功能
香菇多糖具有激活细胞免疫、调节多种体液免疫因子、诱导α-干扰素生 成，调节机体免疫应答反应，诱导白细胞对肿瘤浸润，导致肿瘤部位血管扩张、 出血、坏死，阻止病毒与宿主细胞的结合，提高SOD〔超氧化物歧化酶〕活性， 抑制MDA〔丙二醛 〕生成，抗脂质氧化，降低胆固醇，调节糖代谢、改善糖耐 量、扩张胃肠道产生饱腹感而减轻食欲，降低血糖等功能。
(4) 香菇多糖的应用 ①、香菇多糖在医药领域的应用
香菇多糖在治疗胃癌、结肠癌、肺癌等方面具有良好疗效。作为免疫辅 助药物，香菇多糖主要用来抑制肿瘤的发生、发展与转移，提高肿瘤对化疗药 物的敏感性，改善患者的身体状况，延长其寿命。 香菇多糖与化疗剂联合使用，有减毒、增效的作用。 香菇多糖配合其他药物治疗慢性乙型肝炎，可提高乙肝病毒标志物的转阴 作用，减少抗病毒药物的副作用。此外，香菇多糖可用于治疗结核杆菌感染。
香菇多糖提取
张志挺 14生科一班 29号
1、香菇多糖
(1) 香菇多糖结构式
分子式：〔 C42H72O36 〕n
分子量：〔1152.9995〕n
(2) 香菇多糖性质
香菇多糖（lentinan;LNT）是从香菇中分离纯化的一种葡聚糖，是以增强 T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂。 密度：1.88g/cm3；沸点：1472℃ at 760 mmHg。 溶于碱溶液或甲酸，微溶于热水或二甲亚砜，不溶于冷水、醇、乙醚、氯 仿、吡啶或六甲基磷酰胺。对硫酸和盐酸稳定。
复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖的研究
复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖的研究近年来，人们对天然植物提取物的需求不断增加，因为它们可以用于制备保健品、药品和食品等多种领域。
香菇作为一种常见的食用菌，其多糖具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性，是一种重要的天然植物提取物。
然而，传统的提取方法存在提取效率低、操作复杂等问题。
因此，本文研究了一种新的提取方法——复合酶协同高压热水浸提法，以提高香菇多糖的提取效率。
1. 研究背景香菇是一种营养丰富的食用菌，含有丰富的多糖、蛋白质、氨基酸等营养成分。
其中，香菇多糖是一种高分子多糖，具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、降血脂等功效。
因此，香菇多糖在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用前景。
目前，香菇多糖的提取方法主要有水提、酸提、碱提、酶解等多种方法。
其中，水提法是一种简单、易操作的提取方法，但是提取效率较低。
酸提法和碱提法虽然提取效率较高，但是存在环境污染和对多糖分子结构的破坏等问题。
酶解法可以提高多糖的提取效率，但是酶解剂价格较高，成本较高。
因此，研究一种高效、环保、低成本的香菇多糖提取方法具有重要的意义。
2. 研究方法本研究采用复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖，具体步骤如下：（1）香菇干品研磨成粉末。
（2）将香菇粉末加入热水中，加入复合酶，进行高压热水浸提。
（3）离心、过滤、浓缩提取液。
（4）加入醇沉淀，离心、过滤、干燥，得到香菇多糖。
3. 研究结果本研究采用复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖，对提取条件进行了优化。
结果表明，最佳提取条件为：酶解剂质量比为0.2%、浸提温度为120℃、浸提时间为2小时、压力为0.6 MPa。
在此条件下，香菇多糖的提取率为2.48%。
同时，本研究还对提取的香菇多糖进行了理化性质分析。
结果表明，提取的香菇多糖具有较高的分子量和较好的糖原性质，其在水中形成的溶液呈现出较好的粘度和稳定性。
4. 研究意义本研究采用复合酶协同高压热水浸提法提取香菇多糖，提高了提取效率，同时减少了对环境的污染和对多糖分子结构的破坏。
香菇多糖提取工艺
多糖纯化
凝胶柱层析原理：所谓层析，就是利用样品中各组成成分的理化性质的差异，使各组分
以不同程度分布在固定相和流动相两相中，由于各组分随流动相前进的速率不同，从而把 它们分离开来的技术。
操作步骤： Sephadex G-100凝胶充分溶胀后装柱，用蒸馏水平衡48h。取上述香菇 多糖提取物溶于蒸馏水中，离心除去不溶物，上清液上柱分离，用蒸馏水洗脱，洗脱速度 5mL/20min，200nm波长紫外检测，收集主要峰部分，冷冻干燥的白色香菇多糖，并称 重。
称重。
(5) 主要生产设备：
烧杯（若干），玻璃棒，温度计，锥形瓶（若干），漏斗，水浴锅，称量天平，台式恒
温振荡器,台式离心机，紫外线分光光度计
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(6) 关键过程与关键技术
多糖的提取
取香菇10g，于组织捣碎机内粉碎，加入20倍量水，90 ℃水浴加热30min，抽滤，得 滤液，加活性炭（1mg/mL），搅拌吸附1h，抽滤，得滤液，用氯仿萃取（3次）以除尽 蛋白质，萃余液中加无水乙醇，使其乙醇最终浓度为80%，沉淀12h后，于离心机中离心 （4000r/min）30min,沉淀物分别用无水乙醇，丙酮，乙醚洗涤三次，既得香菇多糖提取 物。
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6
(3) 现在常用的生产方法
以上几种方法均有优点和缺点，而现如今也都在被使用！
3 、生产技术
(1)生产原理:
多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇,也不溶于氯仿正丁 醇.热水浸提时，香菇组织膨胀破裂，多糖成分浸出，所以 用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可 以将蛋白类物质提取出来,所以用氯仿正丁醇萃取除去提取 液中的蛋白。
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(4) 工艺流程说明及主要工艺参数：
提取香菇多糖的详细方案
原料：香菇。
NaHCO固体，浓硫酸，95%乙醇稀盐酸，PH试纸，复试剂：蒸馏水，葡萄糖，苯酚，铝片，3合酶（木瓜蛋白酶：纤维素酶=2：1），设备和仪器：100ml容量瓶，6个50ml容量瓶，玻璃棒，蒸馏装置（温度计、沸石、三口烧瓶、冷凝管），烧杯若干，锥形瓶若干，棕色瓶一个，抽滤瓶，1、2、5、10ml吸液管，电子天平，真空干燥箱，恒温水浴锅，紫外分光光度计，粉碎机，40、60、80、100目的筛子，DL700-0.55×1.5超高压等静压机（上海大隆高压设备厂），真空泵，THZ-82A台式恒温振荡器，台式离心机。
1、标准葡萄糖溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100.0mg，加蒸馏水溶解并定容于100ml容量瓶中，摇匀，配成浓度为1mg/ml标准葡萄糖溶液备用。
2、5%苯酚试剂的配制。
苯酚水浴加热溶解后称取100g，加铝片0.1g(先用1：6的盐酸除去铝片表面氧化铝后，再称量使用)，加入碳酸氢钠30g，蒸馏，收集178-182℃的馏分，取馏出液7.5g，加入蒸馏水150mL，得5.0％的苯酚溶液，置于棕色瓶中备用。
3、标准曲线绘制以葡萄糖作为标准品，采用苯酚—硫酸比色法，用紫外分光光度计测定多糖含量。
精密吸取已配制的葡萄糖标准品溶液0.5，1，1.5，2，2.5，3ml置于6个50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度线，摇匀。
精密吸取2ml，分别加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入5ml浓硫酸，振摇5min，置沸水浴上加热15min，然后置冷水浴中冷却30min，以溶剂蒸馏水为空白作对照，在400～600nm内扫描，最大吸收波长为490nm。
在490nm处，测吸光值，以浓度为纵坐标，吸光值为横坐标，绘制标准曲线，得出葡萄糖标准品浓度Y（ug/ml）与吸光值X的回归方程：Y=15.336X-0.0298，R2=0.9997。
在2.5～15.0 ug/ml 范围内呈线性关系。
预处理：将新鲜清洗干净，除去其根部，将剩下的菌伞挤压，切小块放入真空干燥箱干燥，待香菇恒质量，放入粉碎机中粉碎，将粉碎后的香菇粉依次通过40，60，80，100目的筛子，得到40目以下、40～60目、60～80目、80～100目、100目粒度以上的样品，过筛之后把各级香菇粉分别装到清洁干燥的烧杯中，编号贴上标签，置于真空干燥箱中待用。
香菇多糖的复合酶法提取
环保性
复合酶法提取过程不需要使用强酸、强碱或 有机溶剂，对环境友好。
可重复性
复合酶法提取工艺稳定，可重复性强，适合 大规模生产。
复合酶法提取的局限性
成本高
对某些物质提取效果不佳
复合酶的生产成本较高，导致整个提 取过程的成本增加。
对于某些结构特殊的物质，复合酶法 提取效果可能不佳。
酶的来源有限
用于提取香菇多糖的酶主要来源于微 生物发酵，来源有限制。
参考文献
参考文献1
香菇多糖的复合酶法提取工艺研究，探讨了不同酶种类和浓度 对提取效果的影响，为优化提取工艺提供了理论依据。
参考文献2
香菇多糖的生物活性研究，分析了香菇多糖在免疫调节、抗肿 瘤、降血糖等方面的生物活性，为多糖的应用提供了科学依据
。
参考文献3
香菇多糖的化学结构与功能关系，探讨了多糖的分子量、单糖 组成等因素与其生物活性的关系，为多糖的结构改造和功能优
抗肿瘤
香菇多糖对多种肿瘤细胞具有 抑制作用，能够诱导肿瘤细胞 凋亡，抑制肿瘤生长和扩散。
降血糖
香菇多糖能够降低血糖水平， 对糖尿病具有一定的辅助治疗 作用。
抗氧化
香菇多糖具有抗氧化活性，能 够清除自由基，延缓衰老。
香菇多糖的来源和分布
来源
香菇多糖主要来源于香菇的子实体和菌丝体。
分布
香菇多糖主要分布于香菇的细胞壁中，其中子实体和菌丝体中含量较高。
香菇多糖的提取方法
传统提取方法
包括热水提取、酸碱提取等，但提取 效率较低，且容易造成环境污染。
复合酶法提取
利用多种酶分解香菇细胞壁，释放出 香菇多糖，具有提取效率高、环保等 优点。
02 复合酶法提取原理
酶法提取的原理
香菇多糖的复合酶法提取
香菇的复合酶法提取
主要实验试剂及仪器 真空干燥箱，离心机，恒温振 荡器，紫外可见分光光度计，傅里 叶变换红外光谱仪，纤维素酶，木 瓜蛋白酶
香菇的复合酶法提取
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称取80目的香菇粉2g，放入到250mL的三角瓶中， 加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中，水浴 30min，调节pH值。 称取木瓜蛋白酶和纤维素酶按一定比例混 合，加入5mL蒸馏水溶解。 香菇溶液放在水浴中预热至酶解温度，将酶液加入 到香菇溶液中，在恒温振荡器上提取。 反应结束，将三角瓶放到沸水锅中， 10min沸水浴灭酶。 灭酶结束，冷却至室温，将酶提取液放入到离心 管中，调至4000 r/min离心，取上清液，即得到 酶提取多糖清液。
复合酶提取香菇多糖：
复合酶 纤维素酶+木 纤维素酶+中 木瓜蛋白酶+ 中性蛋白酶+
瓜蛋白酶
多糖得率（%）12.90
性蛋白酶
7.02
纤维素酶
9.46
纤维素酶
6.34
香菇多糖的制备工艺
一.原料准备 二.提取 三.分离纯化
香菇的复合酶法提取
原料的准备和处理 香菇→烘干( 50℃) →粉碎→过筛→多 糖提取原材料。
实 验 方 法 与 步 骤
香菇的复合酶法提取
分离纯化 1.分离提取
用0.5%NaOH初步提取，之后取清液，用透析袋透去 除杂离子，透析后去除杂蛋白，用活性炭脱色1 h，加 入95%乙醇，使溶液中乙醇的浓度达到75%进行醇沉．醇 沉过程中要将其保存在4℃冰箱中，保持24 h，离心15 min，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可得到香菇 粗多糖。
香菇多糖的提取方法：
热水浸提法
稀酸(碱)浸提法 微波法提取香菇多糖
酶解法提取在香菇多糖提取中的应用和进展
件进行了研究。木瓜蛋白酶的最佳酶解条件是在
50 C的温度下，pH值在6.0到7.0之间，酶浓度约 为0. 1%时反应60 min左右可以提取到最多的香
糖。
1.3纤维素酶辅助提取法 由于单酶提取法能增加的效率和得率有限，于
是就
了 酶 辅助提 法。 酶 辅助提 法
主要就是在传统的提取方法中加入酶解的步骤，有
收稿 # 期：2018 — 12—10 作者简介：窦雨横，男，1998年出生，主要从事食G加工的研 究。
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1单酶及单酶解辅助提取法
单酶提取法是仅利用一种酶对香菇多糖提取的 方式。这种方法的基本原理就是使用单一酶来破坏 细胞壁或者破坏蛋白质与多糖的结合物，最终达到 释放香菇多糖的目的。一般在单酶法中使用的酶有 木瓜蛋白酶，中性蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。其 中只有中性蛋白酶经常被单一使用，而其他的酶由 于提取多糖的效率不是很高，通常被用在预实验，单 因素对比试验或与其它酶共同作用形成复合酶法 1. 1果胶酶、纤维素酶
Vol. 26,2019,No. 3
粮品工业
CerealandFodIndustry
食品科技
酶解法提取在香菇多糖提取中的应用和进展
萋雨横 扬州大学旅游烹饪•食品科学与工程学院 (扬州 225127)
摘要：本文综述了单酶及单酶解辅助提取法、复合酶法、酶法分段提取法这三大类酶解提取
香菇多糖几种提取方法的比较
香菇多糖几种提取方法的比较
张军霞;胡喜巧
【期刊名称】《河南科技学院学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2008(036)001
【摘要】本文通过对香菇多糖的热水浸提法,酸浸提法,复合酶浸提法,复合酶解、
酸处理结合热水浸提法等几种提取方法进行了研究比较,实验结果表明:提取率高且
浸提效果理想的方法是复合酶解、酸处理结合热水浸提法,此法能显著提高可溶于
热水的多糖及还原性寡糖的浸提率,香菇多糖的浸提率达8.96%.同时,在单因素实验条件的基础上,针对复合酶解时溶液的pH值、复合酶解时间、热水浸提温度、热
水浸提时间进行了四因素三水平的正交实验,并通过极差分析,确定了利用复合酶解、酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的最佳提取条件:复合酶解时溶液的pH值为5.0,复合酶解时间为80min,热水浸提温度为90℃,热水浸提时间为90min.
【总页数】5页(P45-49)
【作者】张军霞;胡喜巧
【作者单位】河南省食品药品检验所,河南,郑州,450000;河南科技学院,河南,新
乡,453003
【正文语种】中文
【中图分类】S646
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2.纯化
将香菇粗多糖水溶解后用色谱仪分离， 干燥获得纯香菇多糖。
影响香菇多糖得率的因素：
1.复酶浓 度大于0.4%后提取增加率趋于平缓，因此，最佳复合酶 的浓度为0.4%。
2.料液比对多糖得率的影响
当料液比在1∶15～l∶25之间多糖提取率增长较快， 继续提高料液比多糖提取率仍有升高，但提高速率 减小．因此最佳料液比为1∶20．
实 验 方 法 与 步 骤
香菇的复合酶法提取
分离纯化 1.分离提取
用0.5%NaOH初步提取，之后取清液，用透析袋透去 除杂离子，透析后去除杂蛋白，用活性炭脱色1 h，加 入95%乙醇，使溶液中乙醇的浓度达到75%进行醇沉．醇 沉过程中要将其保存在4℃冰箱中，保持24 h，离心15 min，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可得到香菇 粗多糖。
3.酶解时间对多糖得率的影响
由图可知,香菇多糖的提取率随酶促反应时 间的延长增加。
局限性：
酶的最佳温度及最佳pH值往往 在一个很小的范围内，为使酶活性 提高到最大值，必须严格控制酶反 应时的温度及pH，反应条件的微小 波动，都可能使酶的活性大大降低 ，因此对实验设备有较高的要求。
酶法提取的应用前景：
香菇多糖的提取方法：
热水浸提法
稀酸(碱)浸提法 微波法提取香菇多糖
超声波提取法 深层发酵培养提取法
酶解法
酶解法：
酶解法就是指在浸提的过程 中加入相应的酶来水解纤维素、 果胶、蛋白质分子等，以使多糖 从细胞中分离出来。
酶法提取较其他方法的优点
1.其作用条件温和。 2.通过酶法破壁去除杂质可以明显提高 提取率，缩短提取时间。 3.可减少能源消耗。 4.有效的保存多糖的生物活性。
复合酶提取香菇多糖：
复合酶 纤维素酶+木 纤维素酶+中 木瓜蛋白酶+ 中性蛋白酶+
瓜蛋白酶
多糖得率（%）12.90
性蛋白酶
7.02
纤维素酶
9.46
纤维素酶
6.34
香菇多糖的制备工艺
一.原料准备 二.提取 三.分离纯化
香菇的复合酶法提取
原料的准备和处理 香菇→烘干( 50℃) →粉碎→过筛→多 糖提取原材料。
香菇的复合酶法提取
主要实验试剂及仪器 真空干燥箱，离心机，恒温振 荡器，紫外可见分光光度计，傅里 叶变换红外光谱仪，纤维素酶，木 瓜蛋白酶
香菇的复合酶法提取
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称取80目的香菇粉2g，放入到250mL的三角瓶中， 加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中，水浴 30min，调节pH值。 称取木瓜蛋白酶和纤维素酶按一定比例混 合，加入5mL蒸馏水溶解。 香菇溶液放在水浴中预热至酶解温度，将酶液加入 到香菇溶液中，在恒温振荡器上提取。 反应结束，将三角瓶放到沸水锅中， 10min沸水浴灭酶。 灭酶结束，冷却至室温，将酶提取液放入到离心 管中，调至4000 r/min离心，取上清液，即得到 酶提取多糖清液。
香菇多糖的复合酶法 提取
• 香菇多糖是香菇中分离出的
一种重要的具有生理活性的物质。
香菇多糖的作用：
香菇多糖具有抗病毒 、抗肿瘤，调节免疫 力、降血糖、抗氧化 等功能。有关香菇多 糖的研究，特别是结 构方面的研究已引起 国内外学者的高度关 注，并有望成为多糖 领域的研究热点。
与其他抗肿瘤药物相 比，香菇多糖几乎无 任何副作用，对胃癌、 鼻咽癌、直肠癌、乳 腺癌和慢性粒细胞白 血病等有抑制和防止 术后微转移的作用， 是目前已知最强的免 疫增强剂之一。