非灭活型病毒保存液介绍520

合集下载

一次性使用病毒采样管

一次性使用病毒采样管

1.85 101.27 1.8 140.94
1.85 108.21 1.81 130.01
ng/ul ng/ul ng/ul ng/ul
样品类 型
dDNA dDNA dDNA dDNA
百泰克植绒拭子 FAM检测通道 20.29 20.66 20.88
A品牌植绒拭子
阴性对照
Ct值
21.18 20.52 21.50
4.可匹配咽拭子(折断点有3.0cm或7.8cm)或鼻拭子(折断点
5.可匹配咽拭子(折断点有3.0cm或7.8cm)或鼻拭子(折断点 8.0cm)。
8.0cm)。
*5.保存液可装6ml,单只保存管可匹配10个咽拭子。
6.配备的拭子为植绒拭子。
6.配备的拭子为植绒拭子。
*7.分别具有食品药品监督管理局颁发的拭子、保存液及套装产品 7.分别具有食品药品监督管理局颁发的拭子、保存液及套装产品
【适用范围】 用于样本的收集、运输和储存等。
【作用原理】
将采样管灭菌处理后,加入Hank’s基础液等病毒稳定成分,可在较宽的温度 范围内维持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分离的阳性率。
【禁忌症、注意事项、警示 、提示性说明】
1.使用病毒采样管采样应尽快送检,采集立即进行2-8℃低温运输,病毒样本可置2-8℃短期放置48小时;长期保存应放置20℃以下的低温条件,-70℃或-196℃保存。其中H1N1病毒颗粒对于-20℃比较敏感,需要低于-20℃保存,如采样后不立 即低温运送,或未置于规定温度保存,将会影响病毒后期的分离阳性率。
一次性使用病毒采样管
1
一次性使用病毒采样管
2
一次性使用病毒采样管
1非灭活病毒采样管(VTM病毒采样管):Hank's缓冲液、苯酚红为酸碱指示剂、蛋白稳定剂 、广谱抗生素、PP管。可短时间内稳定病原菌结构形态的完整性,病原菌短时间内还具有感染 性(4℃下,可保存7d)。样本采用可靠的方法灭活(样品 56℃孵育至少 45 分钟或更高温度 进行灭活)后可进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等。 2非灭活病毒采样管(UTM病毒采样管):在Hank’s缓冲液、无机盐、氨基酸、苯酚红、蛋白稳 定剂、广谱抗生素、PP管。可较长时间稳定病原菌结构形态的完整性,病原菌较长时间内还具 有感染性(4℃下,可保存14d)。样本采用可靠的方法灭活(样品 56℃孵育至少 45 分钟或更 高温度进行灭活)后可进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等。 3灭活病毒采样管:胍盐、RNA 保护剂、PP管。胍盐能够破坏氢键和氨基酸残基的非极性侧链 之间的疏水键,使病毒蛋白变性,迅速破坏病毒的蛋白外壳,RNA 保护剂能有效提高病毒 RNA 的完整性,达到既灭活病毒又能保护 RNA 的效果(2-8℃短时间保存与运输以及 -80℃冰箱或液 氮环境中的长时间保存)。样本经核酸提取试剂提取后用于核酸检测。

检验科新冠疫情肺炎防控应急演练方案

检验科新冠疫情肺炎防控应急演练方案

检验科新冠疫情肺炎防控应急演练方案一、演练宗旨为进一步做好新型冠状病毒感染预防与控制工作,有效降低新型冠状病毒在医疗机构内的传播风险,实施内外同防、医患同防、人物同防、“三防”融合的防控策略,提升全员疫情应急处置实战能力,结合医院实际,特组织进行检验科、发热门诊等部门进行新冠肺炎疫情应急演练。

重点检验在 PCR 实验室内出现核酸阳性结果时检验科、发热门诊相关应急工作预案和流程(包括操作规范、报告流程、转运流程、个人防护及消杀、标本处理转运前准备等)执行情况。

考核多部门(检验科、发热门诊医生、医务科、感控科、院办、护理部等)联动机制。

二、演练人员组成检验科、发热门诊、医务科、感控科、护理部等工作人员。

三、演练内容(一)情景设置赵某,女,便后肛内肿物脱出,发热 3 天,便血 7 天,到发热门诊就诊。

患者及陪护进入医院发热门诊大厅,预检分诊医务人员给予患者及陪护手部消毒,同时观察口罩是否符合标准佩戴(注意保持距离),在发热预检分诊和发热门诊进行扫行程码和健康码、测腋温38.3℃,对患者及陪护进行流行病学调查并填写流行病调查表。

发热门诊医生结合流调情况、临床表现,医嘱患者做核酸、抗体、血常规、肺 CT检查,对陪护人员开具核酸病毒检测项目并根据消毒规范进行消杀。

发热门诊护士采集核酸检测标本,临床服务科工作人员按照规划路线送标本至检验科 PCR 实验室,核酸检测初筛阳性。

检验科立即启动应急预案,检验师报发热门诊医生,检验科主任核实后第一时间报医务科、感控科。

对实验室按要求实施清洁消毒。

同时,检验工作人员对结果进行复核。

医务科接到新冠病毒核酸检测结果阳性报告 10 分钟内上报区疾控中心和上级主管部门;立即组织新冠专家组会诊,定为院内新冠肺炎疑似病例,上报区卫生健康局和区疾控中心,请相关新冠专家会诊,定为新冠疑似病例后转运患者到定点医院;2 小时内登录中国疾病预防控制信息系统上报相关信息。

(二)演练要求为确保培训演练效果,演练前对参与培训与演练的人员进行桌面推演和培训。

新冠肺炎病毒(CoVID-19)标本的采集及检测详解

新冠肺炎病毒(CoVID-19)标本的采集及检测详解

怎样识别新冠病毒感染者呢?
• 离不开实验室检测
标本采集与实验室检测
• 医疗卫生机构要及时采集实验室检测标本 • 应在12小时内反馈实验室检测结果 • 标本采集、运送、存储和检测严格按照新型冠状病毒肺
炎实验室检测技术指南执行 • 各地区聚集性疫情病例,以及境外输入病例的所有原始
标本应当送至中国疾控中心进行复核 • 各地发生的首例和感染来源不明的病例以及环境监测发
拭子鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用 于后续的核酸等检测实验。 • 不能用于病毒培养分离。 • pH:不要求。
非灭活型病毒保存液
• 低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,保持病 毒完整性;
• 采样液中的抗生素能有效防止细菌和真菌污染; • 采样液添加了牛血清白蛋白,能保护病毒样本,
提高分离率。 • pH要求:7.4-7.6。 • 可用于病毒核酸提取等后续检测,也可用于病
• 上呼吸道标本:包括鼻咽拭子、咽拭子等。 • 下呼吸道标本:深咳痰液、肺泡灌洗液、
支气管灌洗液、呼吸道吸取物等。 • 便标本/肛拭子:留取粪便标本约10g(花生
米大小),或者3-5ml便液。推荐采集肛拭 子。 • 血液标本:尽量釆集发病后7天内的急性期 抗凝血,采 集量5ml,建议使用含有EDTA抗 凝剂的真空釆血管采集血 液。
• 商品化的采样器材:病毒采样管。咽拭子。 真空采血管及采血针等。
咽拭子
• 缠绕式咽拭子,植绒式咽拭子; • 有折断点位的; • 保存期(一般3年); • 长短粗细不同规格。
咽拭子
商品化病毒采样管
• 病毒保存液:病毒样品在采集之后,通常 样品采集处都不能进行及时进行PCR检测, 所以需要对采集的病毒拭子样品进行运输, 而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后 续检测,所以在保存及运输时,就需要加 入养分离。 • 具有操作者被感染的潜在危险。

05生物制品的佐剂保护剂灭活剂

05生物制品的佐剂保护剂灭活剂

(二) 白油Span佐剂
用 轻 质 矿 物 油 ( 白 油 ) 作 油 相 , 用 Span-80( 去 水 山 梨 醇 单 油 酸 酯 ) 或 Span-85(去水山梨醇三油酸酯)及吐温-80(Tween-80)(聚氧乙烯脱水山梨 醇单油酸酯),作为乳化剂制成的油乳佐剂,是当前兽医生物制品中最常 用最有效的佐剂之一。白油佐剂的配制方法很多,比例互有差别,仅举一 例作为参考,即:

化十八烷基三甲铵。

胺及其类似物:癸胺、癸胍及其他。
核酸及类似物:DNA、RNA、低核苷酸、多聚核苷
酸、环磷酸腺苷等。
药物:左旋咪唑及蜂胶等
佐剂的作用机理
各种佐剂的作用机理不尽相同,但概括起来有如下方面
1.对抗原的作用
(1) 增加抗原分子的表面积 某些佐剂颗粒表面可以吸附许多抗原,使抗原表面积明显
这些细胞增殖发挥更大作用。有些佐剂,如短小棒状杆菌、百日咳杆菌和 葡聚糖等,主要作用于巨噬细胞,使之激活,大量增殖分化,释放白细胞 介素-1等细胞因子,再去活化T细胞和B细胞。被激活的T细胞进一步分泌 各种细胞因子,进而促进B细胞和巨噬细胞功能。 对T细胞的作用
一些佐剂的主要作用对象是T细胞,通过T细胞的介导,增强各种免 疫功能。胸腺素、分枝杆菌及其有关成分如卡介苗及MDP等、香菇多糖、 异丙肌昔、左旋咪吐、二乙胺基二硫代甲酸钠(DTC)等均为T细胞增强 剂。它们作用于胸腺细胞系统,诱导T细胞前体细胞的产生,T细胞大量增 殖分化,形成效应淋巴细胞,产生淋巴因子。
被分散的物质称为分散相,承受分散的液体称为连续相,这两相间的 界面活性物质称为乳化剂。当以水为分散相,以加有乳化剂的油为连续相
时,制成的乳剂为油包水型(W/O),反之为水包油型(O/W)。 油包水型油乳佐剂粘稠,在机体内不易分散,抗原从乳剂中缓慢释

病毒保存液和细胞保存液的区别

病毒保存液和细胞保存液的区别

病毒保存液和细胞保存液的区别一、病毒保存液病毒保存液适用于新型冠状病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,是采样管内浸末采样拭子病毒样本一种保护病毒的被检测物质的液体,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。

通常分为两种,一种是非灭活型,能够保护病毒的蛋白和核酸,另一种是灭活型,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸。

1、灭活型:添加有裂解盐的病毒保存液就是灭活型的病毒保存液,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否感染病毒。

核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的最基本物质之一。

病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测除了病毒。

病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。

为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。

2、非灭活型:除了灭活型的病毒保存液,此外还有非灭活型病毒保存液,不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。

灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格,各有各的优势,目前研究的非灭活病毒保存液的成分主要为Hank's液基础,在Hank's液基础之上,还添加了诸如庆大霉素、真菌抗生素、BSA(牛血清白蛋白第五组分)、生物缓冲剂HEPES、氨基酸、冷冻保护剂、甘油等多种组分:3、病毒样本采集方法:a .鼻拭子:将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。

取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法釆集另一侧鼻孔。

上述两根拭子浸入同一含3成釆样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。

非灭活型病毒保存液介绍520

非灭活型病毒保存液介绍520

非灭活型病毒保存液介绍520展开全文非灭活型病毒保存液介绍一、病毒的特征:病毒是一类个体微小,无完整细胞结构,含单一核酸(DNA 或RNA)型来,必须在活细胞内寄生并复制的非细胞型微生物。

1. 含有单一知种核酸(DNA或RNA)的基因组和蛋白质外壳,没有细胞道结构,个体微小、结构简单。

2. 在感染细胞的同时或稍后释放其核酸,然后以核酸复制的方式增殖,而不是以二分裂方式增殖;3. 严格的细胞内寄生性。

病毒自身不能复制,而是将基因侵入宿主细胞内,借助后者的复制系统复制新的病毒。

二、非灭活型病毒保存液特点:1.低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。

2.适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、等3.可以用于H1N1 流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。

4.可以用柱式病毒DNAout 或柱式病毒RNAout 提取病毒核酸。

5.采样液中的抗生素能有效防止细菌和真菌污染。

6.采样液添加了牛血清白蛋白,能保护病毒样本,提高分离率三、德晟非灭活型病毒保存液成分:1.保存液成分为:Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA (V),冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等。

2.多种抗生素联合,具有抗细菌和抗真菌的作用。

3.牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性。

4.Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。

5.用于临床流感、禽流感(如H7N9) 、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集及运送四、使用方法:注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。

咽、鼻拭子最好在发病的头3 天采集。

1. 在安全柜内本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5 mL 旋盖塑料管里(一级容器)。

B 型产品已经在旋盖离心管中,可以跳过此步。

2. 鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。

医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册(试行)

医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册(试行)

一、技术人员基本要求(一)采样人员。

从事新冠病毒核酸检测标本采集的技术人员应当经过生物安全培训(培训合格),熟悉标本种类和采集方法,熟练掌握标本采集操作流程及注意事项,做好标本信息的记录,确保标本质量符合要求、标本及相关信息可追溯。

(二)检测人员。

实验室检测技术人员应当具备相关专业的大专以上学历或具有中级及以上专业技术职务任职资格,并有 2 年以上的实验室工作经历和基因检验相关培训合格证书。

实验室配备的工作人员应当与所开展检测项目及标本量相适宜,以保证及时、熟练地进行实验和报告结果,保证结果的准确性。

二、标本采集基本要求(一)基本原则。

1.各医疗机构的检测能力应当与门急诊就诊人次、住院人次等诊疗量相匹配,并与采集的标本量相适应,避免采集数量明显超出检测能力导致的标本积压、标本失效、检测结果反馈迟缓等问题。

2.各医疗机构在采集标本时,要根据不同采集对象设置不同的采样区域,将发热患者与其他患者、“愿检尽检”人群分区采样,避免交叉感染。

3.标本采集应当在满足本机构发热门诊、住院患者、陪护人员及院内职工的检测需求基础上,进一步保障其他重点人群“应检尽检”和一般人群“愿检尽检”的要求。

(二)采样点设置。

医疗机构设置新冠病毒采样点应当遵循安全、科学、便民的原则。

采样点应当为独立空间,具备通风条件,内部划分相应的清洁区和污染区,配备手卫生设施或装置。

采样点需设立清晰的指引标识,并明确采样流程和注意事项。

设立独立的等候区域,尽可能保证人员单向流动,落实“1米线”间隔要求,严控人员密度。

(三)人员配置及防护要求。

每个采样点应当配备1~2名采样人员。

合理安排采样人员轮替,原则上每2~4小时轮岗休息1次。

采样人员防护装备要求:N95及以上防护口罩、护目镜、防护服、乳胶手套、防水靴套;如果接触患者血液、体液、分泌物或排泄物,戴双层乳胶手套;手套被污染时,及时更换外层乳胶手套。

每采一个人应当进行严格手消毒或更换手套。

(四)采样流程。

一种病毒采样管性能评价

一种病毒采样管性能评价

一种病毒采样管性能评价1.上海申启生物科技有限公司20003312. 2.上海市普陀区疾病预防控制中心 200333【摘要】目的:评价一款病毒采样管产品性能。

方法:通过灭活效果评价试验、病毒保存稳定性试验、抑菌性能试验、检测灵敏度试验、批内精密度和批间重复性试验对产品性能进行评价。

结果:病毒采样管作用10min后对病毒灭活效果显著;实验组和对照组获取的核酸浓度存在显著性差异;于4℃、25℃、37℃下病毒可稳定保存24小时;4℃及25℃条件下病毒可稳定保存48小时;经病毒采样管处理10min后大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母菌生长均被抑制,而对照组上菌落生长正常;在试剂盒最低检测限1.0×103copes/mL浓度下仍可检测出核酸阳性;批内精密度良好(CV值1.19%),批间重复性良好(CV值1.44%)。

结论:该款病毒采样管在灭活病毒、保护人员的同时可以有效保存病毒核酸,同时在低浓度病毒载量下仍可有效检出阳性,灵敏度较好;批内精密度及批间重复性良好,并且与后续核酸扩增兼容,不影响核酸扩增结果。

该产品性能良好,对疫情防控具有重要意义,值得推广。

【关键词】病毒采样管;核酸保存;性能评价;qPCR扩增病毒采样管主要用于临床生物样本,如冠状病毒、流感病毒、腹泻病毒等的采集、保存和运输,从采样现场采集鼻、咽拭子等标本或其他特定部位的组织标本,加入到病毒采样管内,再运送到检测实验室,以用于后期的样本临床检测,如核酸提取与PCR扩增、病毒培养、生化鉴定等。

检测结果的准确性离不开采集样本的质量好坏,病毒采样管的质量对于病毒保存或病毒核酸保存至关重要。

本文针对上海申启生物科技有限公司自主开发的一款病毒采样管(灭活型)开展一系列性能研究试验,对病毒采样管性能进行研究与评价。

1.材料与方法1.1材料1.1.1 主要试剂病毒采样管(灭活型),上海申启生物科技有限公司;D-MEM细胞培养液,胎牛血清,gibco;核酸提取或纯化试剂,西安天隆科技有限公司/江苏硕世生物科技股份有限公司;甲型流感病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法),江苏硕世生物科技股份有限公司;EB病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法),上海之江生物科技有限公司。

生物安全实验室病原微生物菌(毒)种和生物样本的保存(保藏)

生物安全实验室病原微生物菌(毒)种和生物样本的保存(保藏)

生物安全实验室病原微生物菌(毒)种和生物样本的保存(保藏)实验室进行实验活动时,经常需要保存病原微生物菌(毒)种及样本。

无论是短期还是长期保存,都应遵循安全、存活、生物学特性不变以及避免差错等原则。

一、保藏管理《条例》规定:“国务院卫生主管部门或者兽医主管部门指定的病原微生物菌(毒)种保藏中心或者专业实验室(以下称保藏机构),承担集中储存病原微生物菌(毒)种和样本的任务。

”保藏机构应当依照国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定,储存实验室送交的病原微生物菌(毒)种和样本,并向实验室提供病原微生物菌(毒)种和样本。

《传染病防治法实施办法》规定:"一、二类病原微生物菌(毒)种的供应由国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位供应。

三类菌(毒)种由设有专业实验室的单位或者国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位供应。

”2009年7月16日,卫生部颁布了《人间传染的病原微生物菌(毒)种保藏机构管理办法》(原卫生部令第68号),《办法》规定保藏机构是指由原卫生部指定的,按照规定接收、检定、集中储存与管理病原微生物菌(毒)种或样本,并能向合法从事病原微生物实验活动的单位提供病原微生物菌(毒)种或样本的非营利性机构。

病原微生物菌(毒)种保藏机构应具有符合要求的生物安全实验室,包括既符合生物安全要求,又能够保证所保藏病原微生物菌(毒)种质量的设施、设备、技术操作人员和规章制度。

《浙江省病原微生物实验室生物安全管理办法(试行)》规定实验室设立单位应建立病原微生物菌(毒)种和样本保藏保管制度,落实安全责任部门和专人进行管理。

有关机构按照规定从事临床诊疗、疾病控制、检验检疫、教学和科研等工作,在确保安全的基础上,可以保管其工作中经常使用的病原微生物菌(毒)种或样本,其保管的病原微生物菌(毒)种或样本名单应当报当地卫生主管部门备案。

重点落实对高致病性病原微生物菌(毒)种和样本的安全保卫措施,加强安全管理与控制,设立专库专柜,单独储存,做好病原微生物菌(毒)种和样本进出和储存的记录,建立档案制度。

两种病毒保存液的比较:灭活与非灭活

两种病毒保存液的比较:灭活与非灭活

两种病毒保存液的比较:灭活与非灭活简介:病毒保存液适用于新型冠状病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,是采样管内浸末采样拭子病毒样本一种保护病毒的被检测物质的液体,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。

通常分为两种,一种是非灭活型,能够保护病毒的蛋白和核酸,另一种是灭活型,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸,两者有着各自不同的特点,有着不同的应用方向。

一、灭活型病毒保存液:核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的最基本物质之一。

病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测除了病毒。

病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。

为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。

灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,里面添加有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止操作员二次感染,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA 等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否感染病毒。

灭活型保存液能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。

灭活型病毒保存液产品的特点:1.操作使用简单,无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次感染风险,保障运输及检测人员安全;2.病毒DNA/RNA可在常温保存与运输1周不降解,按大多数商业化试剂盒进行提取后,获得的DNA/RNA质量好,得率高,可完成各种基因检测及分析实验,如PCR、qPCR等,同时节省运输成本;3.内含核酸RNA酶抑制剂,最大化程度保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率。

病毒保存液的用途及标本采集方法

病毒保存液的用途及标本采集方法

病毒保存液的用途及标本采集方法本产品用于流感病毒、手足口病毒、麻疹风疹病毒、冠状病毒等各种病毒及相关样本的采集和常温运输。

它可在快速灭活病毒和酶的活性,同时能保护病毒的核酸在常温下 4 天不降解,方便样品的运输。

本产品具有以下特点: 1. 一站式,含有拭子样品采集和保存的所有试剂和耗材。

2. 含病毒快速灭活试剂,可以 1 分钟之内灭活各种DNA 病毒和RNA 病毒,使之失去传染性。

3. 含有高效酶灭活试剂,可以快速灭活包括DNase 和RNase 在内的各种酶,使得病毒蛋白失去活性。

4. 含有特殊的核酸保护和稳定试剂,可以保护释放出来的病毒DNA 和病毒RNA 在常温下 4 天内无明显的降解。

5. 可用于各种拭子样品,包括口腔拭子、咽喉拭子、鼻腔拭子、阴道拭子等等。

6. 保存的样品可以在常温运输,尤其适用于远距离采样和运输。

7. 本试剂盒一次采样可以进行 5 次核酸提取(如果使用柱式病毒RNAout 或柱式病毒DNAout)。

灭活型病毒保存液非灭活型病毒保存液标本采集方法1.咽拭子:用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入含3ml病毒保存液(也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液)的管中,尾部弃去,旋紧管盖。

2.鼻拭子:将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。

取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。

上述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。

3.鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。

将收集器头部插入鼻腔或气管,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出,收集抽取的粘液,并用3ml采样液冲洗收集器1次(亦可用小儿导尿管接在50ml注射器.上来替代收集器)。

本产品适用于新型冠状病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作。

可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。

非灭活型保存液工作原理

非灭活型保存液工作原理

非灭活型保存液工作原理
非灭活型保存液是一种用于保存活性物质的液体,其工作原理主要包括以下几个方面:
1. 抗菌作用:非灭活型保存液中通常含有抗菌剂,如抗生素、抗菌肽等,可以抑制或杀灭细菌、真菌和其他微生物的生长,从而防止微生物污染。

2. 缓冲作用:保存液中的缓冲剂能够稳定液体的pH值,防止
变化过大,从而保护活性物质的稳定性。

3. 渗透压调节作用:非灭活型保存液中含有渗透剂,如甘油、蔗糖等,可以调节液体的渗透浓度,防止细胞膜破裂和组织细胞的流失。

4. 抗氧化作用:保存液中通常添加有抗氧化剂,如维生素C、
E等,可以减少氧气对活性物质的氧化破坏,延长其保存时间。

5. 低温保存:非灭活型保存液常在低温条件下保存,这有助于降低酶活性、代谢反应的速率,从而延缓活性物质的降解过程。

通过以上多种作用的综合发挥,非灭活型保存液能够保持活性物质的稳定性和活性,在一定条件下延长其储存寿命。

生物制品的灭活剂、佐剂及保护剂

生物制品的灭活剂、佐剂及保护剂

⽣物制品的灭活剂、佐剂及保护剂第四章兽医⽣物制品的灭活剂、佐剂及保护剂【知识⽬标】·熟悉兽医⽣物制品⽣产中常⽤的灭活剂、佐剂及保护剂;·理解灭活剂、佐剂及保护剂在兽医⽣物制品⽣产中的作⽤;·掌握·灭活剂、佐刺、保护剂的概念;·影响灭活剂作⽤的因素;·影响保护剂效能的因素。

·了解·佐剂的基本要求及类型;·保护剂的组成、效能。

【能⼒⽬标】·能进⾏⽩油佐剂的乳化。

第⼀节灭活与灭活剂为了提⾼兽医⽣物制品的安全性、防⽌散毒,许多疫苗通常通过灭活制成⽆毒⼒和⽆感染性的制品,灭活乃是兽医⽣物制品中的⼀项基本技术。

⼀、灭活及灭活剂的概念灭活(inanimation),是指破坏微⽣物的⽣物学活性、繁殖能⼒及致病性,但尽可能不影响其免疫原性,⽤以制备灭活疫苗。

⼴义的灭活尚包含灭能(inactivation),即使⼀些活性物质(微⽣物及其代谢产物、激素、酶、⾎清因⼦和抗体等)丧失活⼒的过程。

各种灭活疫苗、诊断抗原等的制造过程均属于灭活;⾎清经56℃加热30min处理,使补体丧失活性、破坏某些抑制因⼦的过程,以及破伤风毒素经甲醛处理后即失去致病性成为类毒素的过程均为灭能。

⽤来灭活的药物称为灭活剂,⼜称化学灭活剂。

化学灭活是制备灭活苗最重要的⼿段。

⼆、灭活的类型按其灭活作⽤的性质可将灭活分为物理灭活和化学灭活两类,尤以化学灭活法效果确实、⽅法简便⽽最为常⽤。

但不同的微⽣物、活性物物质采取灭活⽅法、灭活剂也不尽相同,因此,选择合适的灭活剂和灭活⽅法对研制灭活兽医⽣物制品⼗分重要。

(⼀)物理灭活⼀般常⽤热灭活、超声波灭活、紫外线灭活和γ射线灭活等⽅法杀死微⽣物或消除其毒性。

热灭活最早由Smith等研制猪霍乱灭活菌苗时提出,后来发现热灭括容易发⽣菌体蛋⽩质变性。

过去⽤加热灭活⽅法者较多。

该法简单易⾏,但加热杀死微⽣物的⽅法⽐较粗糙,容易造成菌体蛋⽩质变性,凶⽽免疫原性受到明显影响。

一种有效保存病毒样品的病毒保存液[发明专利]

一种有效保存病毒样品的病毒保存液[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010776891.5(22)申请日 2020.08.05(71)申请人 珠海市丽拓生物科技有限公司地址 519040 广东省珠海市金湾区红旗镇永安三路35号申请人 湖南省丽拓生物科技有限公司(72)发明人 雍学安 (74)专利代理机构 天津三元专利商标代理有限责任公司 12203代理人 胡畹华(51)Int.Cl.C12Q 1/24(2006.01)(54)发明名称一种有效保存病毒样品的病毒保存液(57)摘要本发明一种有效保存病毒样品的病毒保存液,属于医学生物技术领域;包括以下成分:解偶联剂0.5‑6M,氨基酸类表面活性剂0.01‑0.5%,β‑巯基乙醇0.001‑0.15M,两性离子缓冲液10‑30mM ,DTT 0‑10mM ,糖原10‑40μg/mL ,酚红0.004‑0.2g/L,PH为7‑8。

本发明对采集的病毒进行快速的灭活;强烈降解病毒的蛋白,高效保存病毒的核酸;免除检测前的灭活处理,提高检测效率;有助于提取低浓度病毒核酸,提高检测敏感性。

权利要求书1页 说明书5页 附图3页CN 111850090 A 2020.10.30C N 111850090A1.一种有效保存病毒样品的病毒保存液,其特征在于,所述病毒保存液由以下成分组成,且其具体摩尔浓度如下:解偶联剂0.5-6M,氨基酸类表面活性剂0.01-0.5%,β-巯基乙醇0.001-0.15M,两性离子缓冲液10-30mM,DTT 0-10mM,糖原10-40μg/mL,酚红0.004-0.2g/L,PH为7-8。

2.根据权利要求1所述的有效保存病毒样品的病毒保存液,其特征在于,所述解偶联剂0.79M,氨基酸类表面活性剂0.5%,β-巯基乙醇0.1M,两性离子缓冲液20mM,DTT 5mM,糖原20μg/mL,酚红0.0125g/L,PH为7-8。

一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用[发明专利]

一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010559917.0(22)申请日 2020.06.18(71)申请人 合肥铼科生物科技有限公司地址 230000 安徽省合肥市高新区明珠产业园3#厂房4层F区(72)发明人 黄服喜 刘松 李基君 陈香 (74)专利代理机构 广州独角熊知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 44580代理人 张小黎(51)Int.Cl.C12N 15/10(2006.01)C12Q 1/68(2018.01)C12Q 1/70(2006.01)(54)发明名称一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用(57)摘要本发明提供一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用。

该保存液安全无毒,使用简单,无须冷链保存,可常温运输保存病毒样本核酸长达3天,无须进一步灭活处理,保存液配置有病毒裂解组分、核酸酶抑制组分以及缓冲体系组分,病毒裂解组分可使病毒灭活裂解释放出核酸,核酸酶抑制组分可抑制核酸酶活性,有效避免核酸降解,该核酸保存液无须进一步核酸提取纯化操作即可直接进行核酸检测,尤其适用于具有高度感染性的流行病毒的样本核酸采集。

权利要求书1页 说明书6页 附图4页CN 111676216 A 2020.09.18C N 111676216A1.一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液,其特征在于,包括十二烷基硫酸锂、N -十二烷酰肌氨酸、Tween -20、牛血清白蛋白、三(2-羧乙基)膦盐酸盐、氧钒核糖核苷复合物、柠檬酸钠。

2.如权利要求1所述的免提取灭活型病毒样本核酸保存液,其特征在于,包括十二烷基硫酸锂1-150mM、N -十二烷酰肌氨酸1-150mM、Tween -205-15%(V/V)、牛血清白蛋白0.1-2mM、三(2-羧乙基)膦盐酸盐1-10mM、氧钒核糖核苷复合物1-10mM、柠檬酸钠5mM -200mM。

病毒的超低温保存法

病毒的超低温保存法

病毒的超低温保存法大多数微生物可用超低温保存,超低温保存法是适用范围最广的微生物保存法。

需要简单养分的微生物种,如用其他的贮存方法不能保持其活力(如植物的病原性真菌),通常可用超低温的方法保存(ATCC 1983;Halliday,Baker 1985)。

此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至150℃,再将这些小管贮存在150~-196℃的液氮中。

超低温的冷冻爱护剂不同于冻干法所用的冷冻剂。

ATCC 常用一种由甘油(10%)、二甲亚砜(5%)和培育液制成的混合剂保存多数的细胞株。

这些化学试剂进入细胞内可避开内膜的冷冻损伤。

贮存在低温容器内的细胞复苏时必需当心操作。

当小管被加热时,所形成的冰晶会将细胞杀死,正确操作就可避开这种事故。

只要快速将样品解冻就能削减活力的丢失,做法是:将封口的小管快速放入37℃的水中,直至全部的冰溶化,然后打开管口,将内容物移入培育基。

超低温保藏的微生物必需始终贮存在温度特别低的环境中,因此需要液氮罐。

在长期贮存的过程中必需常常留意补充液氮。

这种贮存方式比冻干法需要更多的经费,包括为了维持贮存温度所必要的劳动力和液氮等。

2.2 材料病毒超低温保存所需材料有:热收缩塑料管(Nunc Cryoflex),液氮罐,防护手套和面罩,永久性记号笔,气体喷灯,装液氮的保温瓶。

2.3 方法(1)剪一段两端各超出冷冻管长度2cm 的热收缩塑料管。

(2)将含有澄清病毒悬液(组织培育的上清培育基,或组织培育基内的细胞溶解产物均可)冰浴几分钟,用灭菌移液管将0.2ml 冰浴过的上清悬液分装到冷冻管内,并将盖子拧紧。

(3)将有病毒的冷冻管放入热收缩塑料管中部,插入正确的标签。

(4)用喷灯当心加热热收缩塑料管,并使之包住冷冻管。

留意不要用太高的温度加热热收缩塑料管。

(5)再当心加热热收缩塑料管的两端,用大号镊子夹紧管的端口至完全密封。

(6)将密封好的冷冻管快速在装有液氮的保温瓶中冷冻(操作时要求戴面罩和手套)。

RNA(DNA)保存液

RNA(DNA)保存液

无液氮RNA/DNA样品储存液(RNA/DNA keeper)华越洋无液氮RNA/DNA样品储存液是一种在较高温度下保存RNA/DNA的溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效一直RNA/DNAse的活性尔保存RNA/DNA的完整性。

常温运输组织样品的最佳选择。

保护RNA/DNA不降解,37度一天,25度一周,4度一个月。

广泛用于邮寄,长途运输保存病毒、细菌、果蝇、植物组织、动物组织、培养细胞、悬浮细胞(白细胞、流式细胞仪收集的细胞)等。

●产品说明RNA/DNA样本保存液是一种无毒的可直接使用的样品保存液,其原理是抑制RNA/DNAse活性,保护新鲜组织样本里的 RNA/DNA免受降解。

实验证明,即使对于脾脏等 RNA/DNAse丰富、很难提取到完整 RNA/DNA的组织,也能保证提取效果。

●组分RNA/DNA样本保存液 20 mlRNA/DNA样本保存液 100 ml●形态无色液体●制品保存室温保存●适用范围●RNA/DNAse含量丰富的组织;●需提采集多个样本,且采集时间、空间跨度较大;●不方便马上提取 RNA/DNA而又没有液氮或超低温冰箱保存样品;●室温下或只用冰的条件下长途运输样品。

使用方法组织样本:将组织块切成每边不超过 0.5 cm的小块(如样品为骨头,需打碎成小块),在室温下浸没于 5-10倍体积的 RNA/DNA样本保存液中即可;菌体/培养细胞:离心收集菌体/培养细胞,室温下加入离心后体积的 5-10倍 RNA/DNA样本保存液中即可;血液样本:将血液样本用红细胞裂解液(N9331/N9332)处理后,离心收集白色或淡红色沉淀,室温下加入沉淀体积的 5-10倍 RNA/DNA样本保存液中即可。

§注意事项:●RNA/DNA样本保存液如出现沉淀,37℃加热振荡混匀。

●加入 RNA/DNA样本保存液后,样本不能立即置于-20℃或-80℃,要先 4℃置放过夜,待组织充分浸润后再置于低温保存。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

非灭活型病毒保存液介绍520
展开全文
非灭活型病毒保存液介绍
一、病毒的特征:
病毒是一类个体微小,无完整细胞结构,含单一核酸(DNA 或RNA)型来,必须在活细胞内寄生并复制的非细胞型微生物。

1. 含有单一知种核酸(DNA或RNA)的基因组和蛋白质外壳,没有细胞道结构,个体微小、结构简单。

2. 在感染细胞的同时或稍后释放其核酸,然后以核酸复制的方式增殖,而不是以二分裂方式增殖;
3. 严格的细胞内寄生性。

病毒自身不能复制,而是将基因侵入宿主细胞内,借助后者的复制系统复制新的病毒。

二、非灭活型病毒保存液特点:
1.低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。

2.适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、等
3.可以用于H1N1 流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。

4.可以用柱式病毒DNAout 或柱式病毒RNAout 提取病毒核酸。

5.采样液中的抗生素能有效防止细菌和真菌污染。

6.采样液添加了牛血清白蛋白,能保护病毒样本,提高分离率
三、德晟非灭活型病毒保存液成分:
1.保存液成分为:Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA (V)
,冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等。

2.多种抗生素联合,具有抗细菌和抗真菌的作用。

3.牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性。

4.Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时
间和感染稳定性。

5.用于临床流感、禽流感(如H7N9) 、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集及运送四、使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。

咽、鼻拭子最好在发病的头3 天采集。

1. 在安全柜内本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5 mL 旋盖塑料管里(一级容器)。

B 型产品已经在旋盖离心管中,可以跳过此步。

2. 鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。

以同一拭子拭两侧鼻孔。

将棉签浸入上步得到的、装有 3 mL 本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。

3. 咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有 3 mL 本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。

4. 直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。

5. 将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。

同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。

6. 将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的
塑料容器(二级容器内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。

同一患者 2 份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。

二级容器要承受不少于95 KPa 的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。

所有容器必须印有生物危险标注。

7. 将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2 人)运送,不得邮寄,最好使用专车。

8. 采集的标本若不能在24 小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。

无-70℃条件的需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。

流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。

运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期一年。

相关文档
最新文档