铂纳米颗粒增效的电流型L-乳酸生物传感器

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基于Sol-gel膜和多壁碳纳米管/铂纳米颗粒增效的电流型L-乳酸生物传感器

(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)

作者:贺晓蕊于京华葛慎光张秀明林青朱晗封烁袁靓黄加栋

【摘要】构建了基于多壁碳纳米管(Multi-walled carbon

)和铂纳米颗粒(Pt-nano)的电流型L-乳酸生nanotubes,MWCNTs

物传感器。将Sol-gel膜覆盖在L-乳酸氧化酶(L-lactate oxidase,LOD)和MWCNTs/Pt-nano修饰的电极表面。实验结果表明:传感器的

最佳工作条件为:检测电压0.5 V;缓冲液pH 6.4;检测温度25 ℃。此传感器的响应时间为 5 s,灵敏度是 6.36 μA/(mmol/L)。连续检测4星期其活性仍保持90%,线性范围为0.2~2.0 mmol/L,且抗干扰能力强。在实际血样的检测中,此传感器与传统的分光光度法具有

很好的一致性。

【关键词】生物传感器; L-乳酸;溶胶-凝胶;铂纳米颗粒;多壁碳纳米管

Abstract An electrochemical L-lactate biosensor was

fabricated by combining Platinum nanoparticles(Pt-nano) with

multi-walled carbon nanotubes(MWCNTs).L-lactate oxidase(LOD)

was immobilized on the surface of the glassy carbon

and Pt-nano.The surface of electrode(GCE) modified with MWCNTs

resulting LOD/MWCNTs/Pt-nano electrode was covered by a thin

layer of sol-gel to avoid the loss of LOD and to improve the

anti-interference ability.The cyclic voltammetric results indicated that MWCNTs/Pt-nano catalyst displayed a higher performance than MWCNTs.Under the optimized conditions,i.e.,applied potential of 0.5 V,pH 6.4,25 ℃,the proposed biosensor’s determination range was 0.2-2.0 mmol/L,response time was within 5 s,and the sensitivity was 6.36 μA/(mmol/L).It still kept 90% activity after 4 weeks.The fabricated biosensor had practically good selectivity against interferences.The results for whole blood samples analyzed by the present biosensor showed a good agreement with those analyzed by spectrophotometric method.

Keywords Biosensor; L-lactate;Sol-gel;Platinum nanoparticles;Multi-walled carbon nanotubes

1 引言

临床医学、牛奶工业、葡萄酒工业、生物技术和运动医学等领域

都需要灵敏、快速的L-乳酸检测方法。特别是血乳酸水平能够反映

人体的多种病理状态。传统的L-乳酸的检测主要采用分光光度计法

〖1〗。但这种方法过程复杂、成本高。生物传感器因其选择性高、

响应快和重复性好等优点被认为是最适合的生化分析仪器之一。目

前,关于检测乳酸含量的电化学传感器已有报道〖2,3〗。但简便、便宜和选择性高的L-乳酸传感器依然是目前研究的热点。

碳纳米管(Carbon nanotubes,CNTs)拥有许多特殊性质,如高

电导性、高化学稳定性,以及非常高的机械强度和系数〖4,5〗。CNTs包括单壁碳纳米管(Single-walled carbon nanotubes,SWCNTs)

)。当被和多壁碳纳米管(Multi-walled carbon nanotubes,MWCNTs

用作电化学反应的电极材料时,SWCNTs和MWCNTs都有提高电子转移反应的能力。研究表明:MWCNTs可增强电极表面的电催化活性和增

大其表面积〖6〗。文献〖7~9〗表明:CNTs修饰的电极能够显著增强儿茶酚胺神经传递素、细胞色素C、抗坏血酸、NADH和肼复合物的电化学性能。CNTs能够提高NADH和H2O2的电子转移反应,这表明它在基于脱氢酶和氧化酶的电流型生物传感器方面有广阔的应

用前景〖10〗。铂纳米颗粒(Patinum nanoparticles,Pt-nano)是一种有效的酶传感器的构建材料。它具有很好的生物相容性、大的表面积及对H2O2的催化能力强〖11〗。

本研究构建了基于MWCNTs和Pt-nano的电流型L-乳酸生物传感器。为阻止电极表面上的酶分子的丢失和提高传感器的抗干扰能力,

采用Sol-gel膜〖12,13〗覆盖LOD/MWCNTs/Pt-nano电极表面。对构建的生物传感器的检测范围、响应时间、敏感性和稳定性进行了研究。考察了pH值、电位、温度和电活性干扰物对传感器电流的影

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