药物的抗菌试验

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抗菌药物临床实验方案

抗菌药物临床实验方案

抗菌药物临床实验方案1. 研究目的本次临床实验的目的是评估某种抗菌药物的疗效和安全性,为其进一步的临床应用提供可靠的数据支持。

2. 研究背景抗菌药物在临床上起着至关重要的作用,然而,随着细菌抗药性的逐渐增强,新型抗菌药物的研发变得尤为迫切。

因此,本次实验旨在通过临床试验评估该新药物的治疗效果和安全性。

3. 研究对象本次实验的研究对象为40例确诊患有特定感染疾病的患者,年龄范围在18-60岁之间。

患者需满足相关的入选和排除标准。

4. 研究设计4.1 随机分组参与本次实验的患者将被随机分为两组:实验组和对照组。

4.2 实验组实验组患者将接受新型抗菌药物治疗,并按照医生的指导完成用药过程。

4.3 对照组对照组患者将接受目前常用的标准治疗方案,以作为比较的基准。

4.4 观察指标主要观察指标包括疗效评估、安全性评估等。

5. 数据收集与分析本次实验将使用标准的数据收集工具,包括病历记录、生理指标监测等。

收集到的数据将进行统计学分析,以评估药物的疗效和安全性。

6. 研究伦理本次实验将严格遵守相关伦理原则和法规,确保研究对象的知情同意,并保护他们的权益与隐私。

7. 风险与利益评估在本次实验中,患者可能面临一定的风险,包括未知的药物副作用和治疗效果不佳等。

然而,潜在的利益是为他们提供一种新的治疗选择,有可能改善疗效并减轻疾病对他们生活的影响。

8. 实验计划与预算本次实验计划将持续十二个月,预计需要X万元的经费用于药物采购、实验室检测、数据分析等。

9. 结论通过本次临床实验,我们期望得到有关该抗菌药物疗效和安全性的实证数据,为该药物的进一步研发和临床应用提供有力支持。

10. 参考文献[这里列出参考文献,按照相关规范格式书写]以上是针对抗菌药物临床实验方案的简要描述。

请参考实际需要对内容进行修改和适配,以满足具体的要求和情境。

抗菌药物的临床试验与监测方法

抗菌药物的临床试验与监测方法

抗菌药物的临床试验与监测方法随着抗菌药物的广泛应用,耐药性问题日益严重。

为了确保抗菌药物的有效性和安全性,以及防止耐药性的发展,临床试验和监测方法变得至关重要。

本文将介绍抗菌药物的临床试验流程和监测方法,以期提高人们对抗菌药物的认识和使用。

一、抗菌药物临床试验流程临床试验是评估新的抗菌药物有效性和安全性的重要手段。

以下是抗菌药物临床试验的一般流程:1. 实验设计:确定试验目的、研究人群以及治疗组与对照组的设置。

2. 受试者招募:通过广告、医生推荐等方式招募符合条件的受试者参与试验。

3. 随机分组:将符合条件的受试者随机分配到治疗组和对照组,以减少实验结果的偏差。

4. 药物给药:根据实验设计,给予治疗组患者抗菌药物,对照组则给予安慰剂或标准治疗。

5. 实验观察:监测患者的临床疗效和不良反应,并记录相关数据。

6. 实验终点评估:根据研究目的,评估治疗组和对照组的差异,并对试验结果进行统计学分析。

7. 实验报告:将试验结果进行整理和分析,并撰写实验报告,发表在相关学术期刊上。

二、抗菌药物的监测方法除了临床试验外,抗菌药物的监测方法对于了解药物的疗效、耐药性发展以及合理应用也至关重要。

以下是常用的抗菌药物监测方法:1. 最小抑菌浓度(MIC)测定:利用体外培养方法确定抗菌药物能够抑制菌株生长的最低浓度,用于评估药物的抗菌活性。

2. 药物敏感性测试:常用的方法有纸片扩散法和肉汤稀释法。

通过测试菌株对抗菌药物的敏感性,确定药物的有效浓度范围。

3. 耐药基因检测:通过PCR等方法检测耐药基因的存在,预测不同细菌株对抗菌药物的耐药性。

4. 药物浓度监测:通过测定患者体内药物的浓度,评估抗菌药物的合理用药程度,避免用药不足或过量。

5. 细菌感染监测:监测细菌感染的种类和耐药性规律,为临床医生提供合理用药建议。

三、抗菌药物的临床试验与监测中的挑战与展望抗菌药物的临床试验和监测面临着一些挑战。

首先,临床试验周期长且费用高昂,需要更好的合作机制和研究经费支持。

第十九章药物的体外抗菌试验

第十九章药物的体外抗菌试验

抑菌圈的大小反映待测菌对该药物的敏感程度并与 该待测菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈 越大,最低抑菌浓度就越小。
最低抑菌浓度(MIC):指抗菌药物能够抑制细菌生长 所需要的最低浓度,单位是ug/ml或u/ml。
如庆大霉素对铜绿假单胞菌的MIC为1.56ug/ml,青 霉素G的MIC>128ug/ml,由此可判定庆大霉素对铜绿 假单胞菌的抑菌效力大于青霉素。
5、影响结果的因素
(1)培养基:除在M-H培养基上无法生长的细菌外,一 般都固定使用M-H培养基。
(2)抗菌药物:原则上采用标准粉剂,不用口服药物,配 好的原液应在有效期内使用。
(3)结果观察:应在12-18小时之间。培养时间过长,轻 度抑制的细菌可重新生长;或抗菌活性降低,甚至消失, 从而使MIC值增高。
(3)接种菌液的准备:从纯培养的平板上挑取形态相同 的4-5个菌落,接种于 3-5mlM-H液体培养基内, 35℃培养4-6小时,营养要求高的则培养过夜,然后校 正菌液浓度至0. 5麦氏比浊标准,再用M-H液体培养基 作1:200稀释,并在15分钟内接种。
3、试验步骤
(1)排列10-15支试管,除第1支外,各管加入M-H液 体培养基1ml。
(三)实验步骤
(1)菌液接种:用灭菌过的棉拭蘸取已制备的菌液涂抹 在M-H平板培养基的表面,均匀涂抹3次,每涂一次,平 板应转动60度,最后将棉拭绕平板内缘涂沫一圈,盖上平 皿盖,放置室温干燥数分钟。
(2)药物纸片的贴放:以无菌镊子取各种抗菌药物纸 片,贴放于已接种过试验菌的平板培养基表面,纸片贴后 不能再移动,因为有些药物可立即扩散。各纸片中心间距 不小于24mm,距平板边缘不小于15mm。直径为90mm的 平板可贴放6张纸片。贴后15分钟内倒置35℃培养箱16- 18小时后阅读结果。

抗菌药物药敏试验判断标准

抗菌药物药敏试验判断标准

抗菌药物药敏试验判断标准
抗菌药物药敏试验判断标准主要采用三级划分制度:
1. 敏感:当使用常规剂量的抗菌药物治疗细菌感染有效时,称该细菌对该抗菌药物具有高度敏感性。

说明在常规剂量下,药物在血液中的平均浓度超过该细菌MIC的5倍以上。

2. 中敏或中介:仅当使用大剂量的抗菌药物治疗细菌感染才有效,或者细菌仅在体内抗菌药物浓缩的体液(如尿液、胆汁)中被抑制时,表示这种细菌对该抗菌药物敏感性低,这种药可用于生理性浓集部位的感染。

3. 耐药:表示某种抗菌药物对该细菌的MIC等于或高于常规剂量下可获得的抗生素的血液或组织浓度,因此细菌不能被抑制。

thweek药学实验四药物的体外抗菌试验

thweek药学实验四药物的体外抗菌试验

结果观察与记录
观察抑菌圈
通过观察抑菌圈的大小,初步判断药物的抗菌 效果。
数据记录
详细记录实验过程中的数据,如菌种名称、药 物名称、稀释比例、抑菌圈大小等。
结果分析
根据记录的数据,进行结果分析,计算药物的抑菌率或最小抑菌浓度等指标。
04
数据分析与结论
数据整理与处理
数据收集
收集实验过程中获得的药物抗菌数据,包括不同 药物浓度下的抑菌圈直径、细菌生长曲线等。
展望未来研究方向
根据实验结果和数据分析,展知
实验操作注意事项
实验前应仔细阅读相关文 献,了解实验原理、操作 步骤及注意事项。
在实验过程中,应保持实 验室整洁,避免交叉污染。
确保实验操作符合实验室 安全规定,遵循正确的操 作流程。
实验结束后,应按照实验 室规定正确处理废弃物。
纸片扩散法
将含有不同浓度抗菌药物的纸片贴在接种了细菌的琼脂平板上,观察 抑菌圈的大小,判断药物的抗菌效果。
时间-杀菌曲线法
记录抗菌药物在不同时间对细菌数量的影响,了解药物的杀菌速率和 杀菌效果。
了解抗菌药物的作用机制
大环内酯类
主要抑制细菌蛋白质的合成。
氨基糖苷类
与细菌核糖体结合,抑制蛋白 质合成。
thweek药学实验四药物的 体外抗菌试验
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 数据分析与结论 • 实验注意事项与安全须知
01
实验目的
理解药物体外抗菌试验的原理
药物体外抗菌试验是指在体外条件下,通过实验室方法测试抗菌药物对病原微生 物的抑制或杀灭作用。其原理基于药物对微生物细胞膜、细胞壁、核酸或蛋白质 等生物大分子的影响,从而干扰或破坏微生物的正常生长和繁殖。

实验六抗菌药物的体外药效试验

实验六抗菌药物的体外药效试验

实验六抗菌药物的体外药效试验文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-实验六、抗菌药物的体外药效试验(药敏试验)各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同,同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异,检测细菌对抗菌药物的敏感性,可筛选最有疗效的药物,用于临床对控制细菌性传染病的流行至关重要。

此外,通过药物敏感试验可为新抗菌药物的筛选提供依据。

药敏试验的方法很多,普遍使用的有滤纸片扩散试验(Kirby-Baueer Dice Diffusion);最低抑菌浓度试验(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)和最低杀菌浓度试验(Minimum Bactericidal Concentration, MBC)。

[目的要求]1、熟悉体外抗菌试验操作技术。

2、掌握药物抗菌能力体外测定的常用方法及其用途。

[实验原理]常用的体外测定药物抑菌能力的方法有两大类:琼脂渗透法与浓度系列稀释法。

琼脂渗透法时利用药物能够渗透至琼脂培养基的性能,将实验菌混入琼脂培养基后倾注成平板;或将试验菌均匀涂于琼脂平板的表面,然后用不同的方法将药物置于已含试验菌的琼脂平板上。

根据加药的操作方法不同而有滤纸片法、打洞法、管碟法及挖沟法等。

经适宜温度培养后观察药物的抑菌能力。

浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度,混入培养基内,加入一定量的试验菌,经适宜温度培养后观察结果,求得药物的最低抑菌浓度(MIC)。

1、细菌:所用细菌应包括主要致病菌。

革兰氏阳性球菌包括金黄色葡萄球菌(产酶与不产酶菌株)、表皮葡萄球菌,链球菌、肠球菌等。

革兰氏阴性球菌如淋球菌等。

革兰氏阴性杆菌包括流感杆菌、肠杆菌科细菌8~10种,绿脓杆菌与其它假单孢菌属及不动杆菌属等,厌氧菌包括脆弱类杆菌、消化球菌和消化链球菌等。

对临床应用有代表性的菌株数量,创新药应不小于1000株。

其它类新药根据新药抗菌谱宽窄可作200-500株。

抗菌药物敏感性试验执行标准

抗菌药物敏感性试验执行标准

抗菌药物敏感性试验执行标准抗菌药物敏感性试验是临床微生物学中非常重要的一项实验,它可以帮助医生选择最有效的抗菌药物来治疗感染性疾病。

执行标准的严格性和准确性对于试验结果的可靠性至关重要。

下面将介绍抗菌药物敏感性试验执行标准的相关内容。

首先,进行抗菌药物敏感性试验前,需要准备好所需的培养基、试验材料和各种试剂。

同时,要做好实验室的消毒和无菌操作,以确保试验的准确性和可靠性。

在进行试验时,需要按照严格的操作规程进行。

首先,要准备好待测菌株的悬浮液,然后按照一定比例将其接种到含有不同浓度抗菌药物的琼脂平板上。

接种后,要在恒温培养箱中进行培养,培养时间一般为16-18小时。

培养结束后,需要观察菌落的生长情况,并进行相关的数据记录和分析。

根据菌落的生长情况和抗菌药物的浓度,可以判断出菌株对抗菌药物的敏感性。

在记录和分析数据时,要注意细致入微,确保数据的准确性和可靠性。

在执行标准中,对试验结果的解释和判定也非常重要。

根据试验结果,可以判断出菌株对抗菌药物的敏感性、耐药性或者中间敏感性。

这些判定对于临床治疗具有指导意义,可以帮助医生选择最合适的抗菌药物来治疗感染性疾病。

此外,在执行标准中,还需要对试验过程中可能出现的干扰因素进行控制和排除。

比如,培养条件、试剂质量、操作技术等都可能对试验结果产生影响,需要在试验过程中进行严格的控制和调节。

总的来说,抗菌药物敏感性试验执行标准的严格性和准确性对于试验结果的可靠性至关重要。

在实验过程中,需要严格按照操作规程进行,确保试验过程的准确性和可靠性。

同时,对试验结果的解释和判定也非常重要,可以帮助医生选择最合适的抗菌药物来治疗感染性疾病。

在执行标准中,还需要对试验过程中可能出现的干扰因素进行控制和排除,以确保试验结果的准确性和可靠性。

抗菌药物敏感试验实验

抗菌药物敏感试验实验
阿米卡星(AMK)、环丙沙星(CIP) 4.庆大霉素稀释液:1支/桌(256U/ml) 5. 其它:MH肉汤、无菌刻度管、无菌棉签、镊子、
无菌试管、刻稀释法
K-B法操作方法
操作注意事项:
菌液应在15分钟内接种完毕 接种后,平板放置时间不要超过5min 注意纸片距离
肉汤稀释法操作方法
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
M-H肉汤(ml)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
抗生素(ml) 菌液(ml)
2
2
2
2
2
2
2
2
2弃 -

0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
35℃孵育16~18h,观察结果
实验内容
第二次 1.观察K-B法的结果 2.观察肉汤稀释法的结果
K-B法结果解释
测量抑菌圈直径,参照CLSI的标准解释结果。
20mm
金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验结果判断
大肠埃希菌抗菌药物敏感性试验结果判断
实验目的 1.掌握纸片扩散法(K-B法)和肉汤稀释法
的原理、操作方法、结果的判读及其临床 意义。 2.掌握纸片扩散法和肉汤稀释法的质量控制。
实验内容 纸片琼脂扩散法(K-B法) 肉汤稀释法
实验器材
1. 菌种: 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌 2. 培养基:水解酪蛋白琼脂(MH琼脂)、MH肉汤 3. 抗菌纸片:青霉素(PEN)、庆大霉素(GEN)、

药物的体外抗菌试验

药物的体外抗菌试验
后,将滤纸片蘸取药液置
于平板上,培养后观察结果,量取抑菌圈直 径以此判断试验药物抑菌作用的强弱。
❖ 用于新药的初筛及临床的药敏试验。
❖ 挖沟法: ❖ 1、在琼脂平板上挖沟,沟两边垂直划线接种
各种试验菌,沟内加入药液。 ❖ 2、培养后,根据沟两边所生长的试验菌离沟
❖ 2、再于各管中加入等量的实验菌,经 16~ 24 h培养后,与阴性及阳性对照管进行对照 观察。
❖ 3、将未长细菌的培养液取出,分别转种琼脂 平皿。如培养后重新长出试验菌,说明该药 仅有抑菌作用。如无菌生长则可以认为该药 物有杀菌作用。
❖ 在测定中草药煎剂时,由于有些煎剂颜色 较深,肉眼不易分辨是否有效;需再于每管 中取数环移种于适当的培养基上,经培养后 观察有无细菌生长而决定之。
药物的体外抗菌试验
❖ 用途: ❖ 抗菌药物的筛选、药物的抗菌谱测定及
临床药物敏感性试验等方面。
常用的体外抑菌试验
琼脂扩散法 滤纸片法

挖沟法
连续稀释法
琼脂扩散法
❖ 原理: 药物可以在琼脂培养基中自由扩散,形成一定浓度的含药
区域。 由于各种微生物对不同药物或同一药物不同浓度的敏感性
不同,因而形成一定大小的抑菌圈或抑菌距离,根据其大小, 可以了解药物的抗菌作用大小或是微生物对试验药物的敏感性。
的距离来判断药物对试验菌的抗菌作用强弱。
❖ 适用于在一个平板上试验一种药物对几种不 同试验菌的抗菌作用。
❖ 琼脂扩散法具有方法简便,技术要求不 高,易掌握操作的特点。但精确度不高,一 般能用于定性或初步判断其作用的强弱。
❖ 液体稀释法是一种测定药物的抗菌作用 定量方法,较琼脂扩散法精确,因而运用较 普遍 。
❖ 凡能抑制试验菌生长的最高药物稀释度为该 药的最低抑菌浓度 (Minimal inhibitory concentration,MIC)。

抗菌药物临床实验总结报告

抗菌药物临床实验总结报告

抗菌药物临床实验总结报告一、引言抗菌药物的临床实验是评估其安全性、有效性及药物特性的重要环节。

本报告旨在总结对抗菌药物的临床实验所获得的结果,并提供基于实验数据的分析和结论。

二、研究设计与方法1. 研究目的本次临床实验的目的是评估新开发的抗菌药物在人体中的疗效和耐受性。

2. 研究对象实验对象为18岁以上被诊断患有细菌感染的患者。

3. 实验组与对照组实验组接受抗菌药物的治疗,对照组接受常规治疗。

4. 实验过程根据患者的条件,将其随机分为实验组和对照组。

实验组患者在医生的监管下接受抗菌药物的治疗,对照组患者接受常规治疗。

在实验过程中,监测患者的疗效、不良反应和治疗期间的生理指标。

5. 数据统计与分析采集实验组和对照组的临床数据,经过统计学方法进行数据分析和结果比较。

三、实验结果1. 抗菌药物的疗效通过对实验组和对照组的临床数据进行对比分析,发现实验组的治疗效果明显优于对照组。

实验组的细菌感染症状明显减轻,症状消失所需时间也较短。

2. 抗菌药物的耐受性实验组患者对抗菌药物的耐受性良好,只有个别患者出现轻度的不良反应,但对治疗效果没有明显影响。

而对照组在治疗过程中出现了较多的不适反应,需要调整或停用药物。

3. 患者生理指标实验组和对照组在实验开始和结束时的生理指标进行了比较分析。

结果显示,实验组的生理指标有所改善,而对照组的生理指标则没有明显变化。

四、讨论与结论1. 讨论通过本次临床实验,我们证实了新开发的抗菌药物在治疗细菌感染中的优势。

其疗效显著,耐受性良好,并且对患者生理指标有积极影响。

2. 结论基于本次临床实验的结果,我们得出结论:新开发的抗菌药物在治疗细菌感染方面具有良好的临床效果。

它不仅有效地缓解了患者的症状,还提高了患者的生活质量。

因此,该药物有望成为治疗细菌感染的首选药物之一。

五、结尾通过本次临床实验的结果,我们对抗菌药物的安全性和有效性有了更深入的了解。

这对于进一步改善细菌感染患者的治疗方案和提高临床护理水平具有重要意义。

项目7药物体外抗菌试验技术

项目7药物体外抗菌试验技术

• 厌氧菌阳性对照菌:生孢梭状芽胞杆菌 CMCC(B)64941
• 真菌阳性对照菌:白色念珠菌 CMCC(F)98001或曲霉菌ATCC16404
需要进行无菌检查的药品、敷料、灭菌器具的范围:
(药品、敷料按《中国药典》收载的无菌检查法的规定进行, 生物制品应按照《生物制品制造及检定规程》中有关规定进行)
选择性培养基
❖ 阴性对照及阳性对照
1.
阴性对照
2.
阳性对照
阴性对照应不长细菌,说明培养基本身是无 菌可靠的;阳性对照试验必须长菌,说明应 用的细菌是可以在该试验条件下正常生长的。
❖ 抑菌试验
❖ 无菌检查法

无菌检验结果判断

需氧菌阳性对照菌:金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003或藤黄八叠球菌
CMCC(B)28001
绿脓杆菌 4. 用创伤、溃疡、止血、深部组织的药材药粉制剂不
得检出破伤风杆菌。
活螨的检验
用于口服、创伤、粘膜和 腔道的药品均不得检出活 螨
01
直接观察法:用肉眼直接 观察被检药物上有无白点 移动,再用放大镜或解剖 镜观察。
02
04
分离法:将药物放在特制分离器或附 有筛网的漏斗内,离药物6cm上放置 60~100W的灯泡,照射1~2h. 螨有避光怕热的习性,便沿漏斗细颈 向下爬,在漏斗下口处置一装有甘油 水的烧杯,收集爬出的螨,然后在显 微镜下观察,根据其形态特征、足肢 游动情况判断是否为活螨。
1. 目的
▪ 细菌数测定我们是为了考察每克或每毫升供试品所 污染的活细菌数,来判明供试品被细菌污染的程度。
▪ 霉菌的测定是考察每克或每毫升供试品所污染的活 的霉菌数,以此来判明供试品被真菌污染的程度。

抗菌药物敏感性试验

抗菌药物敏感性试验

方法:
菌液制备:生理盐水校正测试菌和质控菌至 0.5麦氏比浊标准,再用MH肉汤稀释到 107CFU/ml;
加菌液:用微量加样器取0.1ml稀释菌液由低 到高加于各排试管中,其最终的接种量为 5×105 CFU/ml。测试菌排、测试菌生长对照 管加测试菌液;质控菌排、质控菌生长对照 管加质控菌液。
实验内容
常用抗菌药物敏感性试验与耐药检测 方法介绍。
纸片扩散法。 肉汤稀释法。
一、常用抗菌药物敏感性试验与耐药 检测方法介绍
纸片扩散法(Kirby-Bauer test) 稀释法(dilution test) E试验法(E test) 联合药物敏感试验 特殊耐药菌及耐药酶的表型检测
耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检测 β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶检测等
二、纸片扩散法(K-B法)
原理:
含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上, 纸片所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断向纸片周 围区域扩散,形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度 范围内的细菌生长被抑制,形成透明的抑菌圈。
抗菌药物
青霉素 苯唑西林 万古霉素 庆大霉素 红霉素 克林霉素 磺胺药
纸片含药量
10U 1μg 30μg 10μg 15μg 2μg 1.25/23.75μg
耐药 ≤28 ≤10 — ≤12 ≤13 ≤14 ≤10
抑菌圈直径(mm)
中介
敏感

≥29
11~12
≥13

≥15
13~14
≥15
14~22
≥23
涂布接种:无菌棉拭蘸取菌液,在试管壁旋转挤去多 余菌液后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转 平板60º,最后沿平板内缘涂抹1周;

药物的体外抗菌试验-第十九章

药物的体外抗菌试验-第十九章

药物的体外抗菌试验-第十九章第十九章药物的体外抗菌试验教学要求.(一)掌握常用的体外抑菌试验(连续稀释法、琼脂扩散法)。

.(二)熟悉杀菌试验(最低杀菌浓度、最低致死浓度的含义及测定的方法,活菌计数法,石碳酸系数测定法);联合抗菌试验(纸条试验、梯度平板纸条试验、棋盘格法),协同、拮抗、无关、累加的概念。

.(三)了解体外抗菌试验的影响因素。

第一节常用的体外抑菌试验一、药物的体外抗菌试验.又称药敏试验,主要用于筛选抗菌药物或测定细菌对药物的敏感性。

.最低抑菌浓度(MIC):指药物完全抑制某种微生物生长的最低浓度。

.优点:方法简便、需时短、用药量少,不需要动物。

.缺点:不能根据体外试验结果肯定或否定一个药物的抗菌作用。

试验菌.细菌、霉菌和酵母菌常用.标准菌株:来自专门机构,我国是卫生部生物制品检定所菌种保藏中心提供。

.临床分离株:经形态、生化及血清学等方面鉴定。

不得有杂菌污染,不宜用传代多次的菌种,最好是重新活化的。

控制培养时间。

.接种菌量的多少的计算培养基.根据试验菌的营养要求进行选择.培养基质量控制供试药物.药物的浓度和总量要精确配制.供试药物用适宜溶剂溶解并稀释至所需浓度,难溶药物加助溶剂。

.中草药或某些生药原粉的样品,应先提取,再浓缩至所需浓度对照试验.试验菌对照:在无药情况下,应能在培养基内正常生长.已知药物对照:已知抗菌药对标准的敏感菌株应出现预期的抗菌效应,对已知的抗药菌应不出现抗菌效应。

.溶剂及稀释剂对照:抗菌药物配制时所用的溶剂及稀释剂应无抗菌作用(一)连续稀释法.方法:液体法和固体法。

.用于测定药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。

.抑菌:药物可抑制微生物生长繁殖,但不杀死它,在药物除去后,微生物又可恢复生长.杀菌:药物能杀死微生物,当药物去除后,微生物不再继续生长。

1、液体培养基稀释法.方法:两倍稀释法.步骤:液体培养基稀释药物成系列递减的浓度每管加入一定量试验菌24-48小时后肉眼观察试管浑浊情况,记录能抑制细菌生长的最低浓度(MIC)将未见细菌生长的各试管内的培养液(各吸取0.1ml)移种到新鲜的琼脂培养基上重新长出细菌的只具有抑菌作用,无菌生长(菌落数﹤5个)具有杀菌作用,记录最低杀菌浓度(MBC)。

实验4药物体外抗菌试验PPT课件

实验4药物体外抗菌试验PPT课件
考虑药物浓度的影响
在解读结果时,需要考虑药物浓度对抑菌效果的影响。一般来说,药物浓度越高,抑菌效 果越好。因此,在比较不同药物或不同浓度时,需要确保实验条件的一致性。
结合临床实际
在解读结果时,需要结合临床实际考虑药物的抗菌效果。例如,对于某些临床常见细菌, 如果实验结果显示药物具有较好的抗菌作用,那么该药物可能对治疗该细菌感染具有一定 的应用价值。
头孢菌素类
具有广谱抗菌作用,对革 兰氏阳性菌和阴性菌均有 较强抗菌活性。
碳青霉烯类
具有非常强的抗菌作用, 对大多数细菌均有较好的 抗菌效果。
大环内酯类
红霉素
主要对革兰氏阳性菌有抗菌作用 ,对部分革兰氏阴性菌和支原体 也有效。
阿奇霉素
具有广谱抗菌作用,对革兰氏阳 性菌、革兰氏阴性菌和支原体均 有较好抗菌效果。
避免不良反应
联合用药可能会增加不良反应的风险,因此应谨 慎选择药物组合。
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稀释法
总结词
稀释法是通过连续稀释抗菌药物浓度, 观察细菌生长情况,从而判断细菌对 抗菌药物的敏感程度。
详细描述
稀释法是将抗菌药物稀释成不同浓度, 然后将不同浓度的抗菌药物与细菌混 合培养。通过观察细菌的生长情况, 可以判断细菌对抗菌药物的敏感程度。
E-test法
总结词
E-test法是一种基于纸片扩散法的改良方法,通过在平板上涂布抗菌药物的纤维棒,测量抑菌圈的大小判断细菌 对抗菌药物的敏感程度。
测定药物能够抑制细菌生长的最低浓 度,是衡量药物抗菌效果的重要指标。 MIC值越低,说明药物抗菌效果越好。
细菌生长情况
观察细菌在药物作用下的生长情况, 可以评估药物的抗菌效果。如果细菌 生长受到明显抑制,说明药物具有较 好的抗菌作用。
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≤12 ≤13 ≤14 ≤13
13-17 14-17 15-18 14-17
≥18 ≥18 ≥19 ≥18
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1. 打洞法
在含菌琼脂平板上打洞(一般打6个孔,4个小孔加不同浓 度标准溶液,另外2个小孔加血清样品,放在37℃,1218小时,测定其抑菌圈直径。所以说微量法适于药物血浓 度的监测。优点是微量(血清用量少)敏感,操作简便。 除此之外还有管碟法、直接滴加法和挖沟法:适用于测试 一种药物对几种细菌的抗菌作用。方法是先制备普通琼脂 平板,并在平板上挖直沟,在沟内滴加药液,在沟侧接种 细菌。经过培养以后观察家细菌生长的情况。我们可以根 据沟和细菌间的抑菌距离的长短,来判断该药物对这些细 菌的抗菌能力。
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2.纸条试验 在含菌平板上垂直放两条浸有不同药液的滤纸 条,培养后观察两药形成的抑菌区的图形来判 断两药联合应用时,是无关、协同还是拮抗作 用。
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3. 纸条梯度平板试验 将琼脂培养基倒入平皿,平皿斜放凝固后制成斜
面培养基。将平皿放平加入含抗菌药物的琼脂培养 基,这样在制成的双层琼脂平板中含有梯度浓度的 抗菌药物。要求其最小抑菌浓度的位置约处于平板 的一半。然后将试验菌液均匀涂布在平板表面。取 纸条浸透另一待检药液,按梯度中药物浓度递减的 方向置于平板表面,培养后观察形成的抑菌区的图 形以判断两种药物之间的相互作用。
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二、药物的体内抗菌试验
药物的体内抗菌试验又称为动物实验治疗试验或保护 力试验。当抗菌药物进入机体后,其效力的发挥要受体 内各种因素的影响。如血液及组织内的蛋白质或磷脂、 脓汁内的核酸均与药物结合,降低药物的活性;坏死组 织内的酸性环境也能影响药物的活性。机体内的微生物, 代谢活动较低,对药物的敏感性降低,有时还可形成细 胞壁缺陷型细菌,对某些药物不敏感。机体内各组织中 药物的吸收,分布不同,使药物的浓度难以恒定。因此 在评定新药的药效时除做体外抗菌试验外还需要做体内 的抗菌试验。
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1. 酚系数测定(石炭酸系数测定) 酚系数是以酚为标准,将待测的化学消毒剂与杀菌效力 相比较,所得的就是杀菌效力的比值。 由于各种化学消毒剂杀菌原理各不相同,因而这种方法 仅仅适用于酚类消毒剂杀菌效力的测定。 具体的测定方法说是分别将酚及待测化学消毒剂按不同 比例稀释,各取5ml放到试管中,再加入经24小时培养 后的菌悬液各0.5ml,混匀后放入 20℃水浴中,5、10、 15分钟分别取一接种环混合液移种到另一支5 ml的肉 汤培养基中,37℃培养24小时记录生长情况。
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第8章 药物制剂的微生物学检查
1.掌握药物的体外试菌试验方法(琼脂扩散法和系列稀释法), 了解药物的体内抗菌实验。 2.掌握一般灭菌制剂的无菌检查方法和原理,熟悉特殊药品的 无菌检查法。 3.掌握非灭菌药物的微生物总数测定方法,熟悉药品的大肠杆菌 检查方法。 4.了解一般药品的沙门菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和破 伤风杆菌的检查方法。
单独抗菌活性; ③累加作用,两种药物联合作用时的活性
等于两种单独抗菌活性之和; ④协同作用,两种药物联合作用显著大于
其单独作用的总和。
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1. 棋盘格法
棋盘稀释法是常用的定量方法,首先 分别测定拟联合的抗菌药物对检测菌 的MIC。药物最高浓度为MIC的2倍,对 倍稀释。两种药物的稀释分别在方阵的 纵列和横列进行,这样在每管(孔)中 可得到不同浓度组合的两种药物混合液。 接种菌量为5×105CUF/ml,35℃孵育 18h后观察结果。计算部分抑菌浓度 (FIC)指数。
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复习题: 1. 药物体外抑菌试验常用的方法有哪几种?具体的试 验操作方法? 2. 如何测定药物的最小致死浓度? 3. 联合抗菌试验常用的方法有哪些? 4. 药物体内抗菌试验的方法? 5. 抗菌试验的影响因素有哪些?
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微生物与药学 实验 细菌对药物敏感性的实验 (药敏片扩散法)
目的意义: 掌握药敏片扩散法进行药敏实验的一般方法 体会药敏实验在临床用药上的指导意义
基本原理:
药敏片是含有抗生素的滤纸片,将其置于涂满待 测菌的固体培养基上,抗菌药物通过向培养基内扩 散,抑制细菌生长,从而出现抑菌环。根据抑菌环 的大小可以判定细胞对此药物的敏感度。
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FIC指数 0 . 5为协同作用;0.5-1为相加 作用; 1~2为无关作用;>2为拮抗 作用。
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[棋盘法的设计] 棋盘法的主要优点在于甲、乙两药的每个药物浓度都 有单独的和与另一个药物不同浓度的联合,因此能精 确测定两种抗菌药物在适当浓度的比例下所产生的相 互作用。 在进行棋盘法之前应先测定两种抗菌药物单独对受试 菌的MIC,然后以两药MIC的8倍、4倍、2倍、1倍以 及MIC的1/2、1/4、1/8浓度(或4倍、2倍、1倍、1/2、 1/4浓度)分别进行联合。可见举例,如表—1的青霉 素G与链霉素联合药敏实验和表2的TMP+SMZ的联合 作用。
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药物的抑菌作用或杀菌作用是在一定条件下相对 而言的。在我们检测时,药物的作用受到用药时 培养基的组成、温度、PH值及所用的菌种、菌量 等各个因素有关。 虽然说体外抗菌试验有很多优点,但是由于体外 抗菌试验没有复杂的体内因素影响,因此药物体 外抗菌试验和体内抗菌试验可能会出现不一致的 结果。所以,一般我们在体外对药物进行测试后, 有效的药再要进行体内试验,如果体内试验再次 证实此药有效的话,才能推荐应用到临床。
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1. 抗菌药物 药物的物理状态、浓度、稀释方法等都会直接影响抗菌试 验的结果,必需精确配制。如果是固体药物,必需使药物 溶解或使药物呈均匀悬液。PH值应调至中性,以确保药物 的稳定性和不影响细菌的生长。中草药因为有颜色和含有 鞣质,结果的判断,应特别注意。 2. 对照试验 为确保试验结果的科学性和准确性,试验时应同时进行各 种对照试验。 试验菌对照:在无药情况下,应能在培养基内正常生长。 溶剂及稀释液对照:配制抗菌药物时所用的溶剂及稀释液 均应无抗菌作用。 已知药物对照:应使已知抗菌药物对标准菌株出现抗菌效 应。
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药物及浓度
链霉素 (µg/ml)
64 32 16 8 4
青霉素G单药对照
青霉素G(IU/m1) 4 2 1 0.5 0.25
-- -- -- -- -- -- -
---++ ++ ++
链霉素单药对照
+ + 细菌对照
-:无细菌生长 +:有细菌生长 FIC指数=1/1+16/16=2——无关
固体培养基连续稀释法,又可分为平板法和斜面法。
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2. 2.琼脂扩散法 利用药物在琼脂培养基中扩散,并在一定浓度范围内抑制细菌 生长的原理进行的。一般用于细菌和酵母菌的药敏试验。
1. 滤纸片法(纸碟法)
滤纸片法是最常用的方法,适用于新药的初筛试验(初步 药物是否有抗菌作用)及临床的药敏试验(细菌药物第三 性试验、以便选择用药)。滤纸片分湿、干两种,可以在 试验时用无菌纸片沾取药物溶液放在含菌的平板表面,也 以预先做成一定浓度的干燥纸片。一般来说预先做成的干 燥纸片实用一些而且准确一些。
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至于干燥纸片的制备方法:选用吸水力强而且质地均匀的 滤纸,用打洞机制成6mm直径的圆纸片,120℃干燥灭菌 2小时。然后把配制好的各种适宜浓度的抗生素溶液,每 100张纸片加入0.5ml药液,使它均匀浸润,放在无菌平皿 中,37℃,使它干燥,分装小瓶中,封口,4℃保存。如 果是β-内酰胺类抗生素还要放在-20℃保存。这就制成了 干燥的含药液的纸片。
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第1节 药物的抗菌试验
药物的体外抗菌试验包括用于区别药物是抑菌或 杀菌药物的抑菌试验;测定药物杀菌活性的杀菌试验; 以及检查两种药物联合作用的联合抗菌试验等。一般 抑菌药物只能抑制微生物生长,不能杀死微生物,抑 菌药物被除去,微生物又可以恢复继续生长。杀菌药 物能杀死微生物,杀菌药物除去后,微生物仍然不能 生长。
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一)、 体外杀菌试验 杀菌试验是用来评价药物对微生物的致死活性的。 1. 最低杀菌浓度(MBC)(最小致死浓度 MLC)的测定 按液体培养基稀释法的操作方法测了药物的MIC。 然后把未长出菌的各个试管培养液分别移种到无 菌平板上,培养后凡是平板上无菌生长的药物最 低浓度就是最小致死浓度(MLC)。如果是细菌 的话可以称为最小杀菌浓度(MBC)。
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(三)、 联合抗菌试验 联合抗菌试验主要用于测定两种抗菌药物联合 应用时的相互影响。两种抗菌药联合应用时抗 菌作用加强的称为协同作用;抗菌作用减弱的 称为拮抗作用;相互无影响的称为无关。常用 的联合抗菌试验的方法有以下几种。
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辽阳职业技术学院制药微生物来自微生物与药学三、影响抗菌试验的因素
1. 菌种 在抗菌试验中所用到的菌种,必需是国家
卫生部生物制品检定所菌各保藏中心专门提供 的标准菌株。在特殊情况下,也可以采用临床 新分离的并经过鉴定、纯化及合理保藏的菌株。 而且我们要用到的试验菌种应该选择是对数期 生长的菌。因为那时菌种生命力最旺盛,这对 于我试验测定的结果也会准确些。
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