生化复习题参考答案

《临床生化检验》期末复习思考

1 什么是双缩脲反应？双缩脲法测定TP的原理是什么？

血清中蛋白质的两个相邻肽键在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色配合物，称为双缩脲反应。原理：血清中蛋白质的两个相邻肽键在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色配合物，紫色配合物颜色深浅与血清蛋白质的含量成正比。

2 双缩脲试剂的组成及各自的作用.

双缩脲试剂A:氢氧化钠水溶液（提供碱性环境）双缩脲试剂B：硫酸铜水溶液（作为显色剂与蛋白质反应）

3 .Trinder反应的基本原理、色原物质及影响因素是什么？

原理：葡萄糖氧化酶GOD能将葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢，生成的过氧化氢在过氧化物酶POD的作用下，将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合成红色醌类化合物，即Trinder 反应。色原物质：4-氨基安替比林、酚影响因素：维生素C、尿酸、谷胱甘肽及胆红素等还原性物质也与色原性物质竞争H2O2，从而使氧化过程中产生的H2O2被消耗，导致色素形成减少，测定结果偏低。

4.血液标本采集后为什么需要及时分离血清或血浆？.溶血标本对测定结果有何影响？为什么？.不及时分离可发生红细胞与血清之间成分的相互转移，或细胞中的某些酶分解待测物等，而影响检验结果。溶血的影响：AST、ALT,LDH,K离子，TBIL,CKEA,TP等显著升高；GLU等显著降低。（理由：有些物质在红细胞内的浓度比血浆高22-160倍可使测定结果偏高。样品中某些强的酶会促使葡萄糖降解导致测定值降低。）

5.什么是IQC、EQA？两者有什么区别？

IQC:室内质量控制，旨在检测和控制常规工作的精密度和准确度，提高常规工作中天内和天间标本检测的一致性。

EQA：室间质量评价，是指多家实验室分析同一标本，并由外部独立机构收集和反馈实验室上报的结果，以此评价实验室操作的过程。

比较：

6.质控图在控的判断规律是什么？能力对比实验计算公式判断标准是什么？

Levey-Jennings 质控图正常分布规律：95%数据落在x S 2±内，5%的数据可在x s 2±外，但在x s 3±以内；不能有连续5次结果在同一侧；不能有连续5次结果渐升或渐降；不能有连续2点落在x s 2±以外；不应该有落在x s 3±以外的点。

Westgard 多规则质控法：

12s 规则：任意一个质控结果处于x ±2s 至x s 3±之间，仅用作“警告”规则，并启动由其他规则来检验质控数据。

13s 规则：一个质控结果超过x ±3s ，就判断失控，该规则主要对随机误差敏感。

22s 规则：两个连续的质控结果同时超过x ＋2s 或x －2s ，就判断失控，该规则对系统误差敏感。

R 4s 规则：同一批中两个质控结果之差超出4s 范围，一个质控结果超过x ＋2s ，另一个质控结果超过x －2s ，就判断失控，该规则对随机误差敏感。

41s 规则：一份质控血清四个连续的质控结果同时超过x ＋1s 或x －1s ，或2份质控血清的测定结果同时连续两次超过x ＋1s 或x －1s ，就判断失控，该规则对系统误差敏感。 10x 失控规则：10个连续的质控结果落在平均数的一侧（高或低于平均数，对偏离的大小没有要求），就判断失控，（一种为：一个水平的质控品连续10次质控值在均值的同一侧；另一种：两个水平的质控品同时连续各有5次质控值在均值的同一侧），该规则对系统误差敏感。

能力对比试验（PT ）计算公式：某一项目PT 得分S 1=某一项目的测定次数

某一项目可接受结果数x100% 全部项目PT 总的得分S 2=%100x 全部测定项目数

全部项目可接受数 能力比对试验如在可接收范围内PT 得分为100分，在可接受范围外，PT 得分为0分；能力对比室间质评要求：S 1 S 2均高于80%，否则为不满意；S 1 S 2连续两次或以上不满意者则失败，不准开展此项目。

计算变异指数得分法：变异百分率（V)=

%100*T T x -,x 为测定值，T 为靶值 变异指数(VI)=100*CCV

V CCV 为卫生部临床检验中心针对某个项目推荐的变异系数，当VI<400时，VIS=VI;当VI>400时，VIS=400。

WHO 判断标准：VIS<50为优秀；50<=VIS<100为良好；100<=VIS<150为及格

中国判断标准：VIS<=80为优良；80200表明结果中有临床上不允许

8.酶活性测定方法有几种？原理是什么？各有何特点？

9.酶活性单位的计算：

已知速率法测定参数,列出详细计算公式并算出该酶的活性单位（U ／L ） L

v V A L U ⨯⨯⨯⨯∆=ε6^10min / V 为反应体系体积（ml ）、ε为摩尔消光系数（cm.mol ）、v 为样品量（ml ）、L 为比色杯光径（cm ）、∆A 为吸光度变化、10^6为将mol 换算成μmol 。

10.何谓电泳、电泳迁移率？影响电泳的因素有哪些？

电泳：是指带电颗粒在电场力作用下向所带电荷相反电极的泳动。

电泳迁移率：带电粒子在单位时间内移动的距离称为电泳迁移率。电子迁移率)6/(r Q πμ= Q 为粒子所带电荷，r 为粒子的半径

影响因素：1.电泳介质的pH 值 2.缓冲溶液的离子强度：离子强度过低缓冲液的缓冲容量小不易维持pH 值恒定；离子强度过高，则降低蛋白质的，使电泳速度减慢，常用离子强度在0.02-0.2之间 3.电场强度：电场强度与移动距离成正比，电场强度越高，带电粒子移动越

快。4.电渗：当电泳方向与电渗方向相反时，则实际电泳的距离等于电泳距离减去电渗的距离；当两者方向相同时，实际电泳距离等于电泳距离加上电渗距离。5.支持介质的筛孔：在筛孔大的介质中泳动速度快，反之慢。

11.什么是血脂、血浆脂蛋白、载脂蛋白、脂蛋白受体、高脂蛋白血症？

血脂：血浆脂类的简称，包括游离胆固醇FC，胆固醇酯CE，磷脂PL，甘油三酯TG，糖脂GL，游离脂肪酸FFA等。

血浆脂蛋白：指血浆中与蛋白质结合在一起形成的脂质-蛋白质复合物，根据密度不同分为乳糜微粒CM,极低密度脂蛋白VLDL,低密度脂蛋白LDL，高密度脂蛋白HDL

载脂蛋白（Apo)：是脂蛋白中的蛋白部分，具有构成并稳定脂蛋白的结构、修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶活性的作用，并以脂蛋白受体的配体形式参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体结合和代谢过程。（脂蛋白中具有运输脂质作用的蛋白质）

脂蛋白受体：脂蛋白受体是一类跨细胞膜上的糖蛋白，能与相应的脂蛋白配体作用，介导细胞对脂蛋白的摄取与代谢。

高脂蛋白血症：指血浆中CM,VLDL,LDL,HDL等脂蛋白有一类或者几类浓度过高的现象。12.血浆脂蛋白的分类、名称及对应关系。

按密度不同分为：乳糜微粒：运输外源性甘油三酯

极低密度脂蛋白：主要运输内源性甘油三酯

低密度脂蛋白：运输内源性胆固醇的主要形式

高密度脂蛋白：从肝外组织摄取胆固醇至肝脏排泄，对机体有保护作用。

按电泳法分：乳糜微粒β脂蛋白前β脂蛋白ɑ脂蛋白

按密度从低到高CM VLDL LDL HDL(CM β-Lp pre-Lp ɑ-Lp)

13.什么是Jaffe反应？如何消除假肌酐的干扰？

1.在碱性条件下，苦味酸和肌酐发生反应，生成黄红色的苦味酸肌酐复合物称为Jaffe反应。（标本中的维生素C、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸、甲基多巴、高浓度的葡萄糖、蛋白质和一些抗菌素如青霉素G、头孢噻吩、头孢西丁、头孢唑啉等也都能与碱性苦味酸生成红色复

合物。这些不是肌酐但能起显色反应的物质称为“假肌酐”）

2.消除“假肌酐”干扰，主要采取两种办法：

①用吸附剂（硅酸铝或纯化漂白土）吸附或用离子交换树脂除去“假肌酐”。

②在速率法测定中，设置20S延迟期，即在样品与碱性苦味酸试剂混匀后的20—80S之间（此时期中肌肝与苦味酸反应占主导地位，称为“窗口期”进行测定，可得到较准确的测定结果。