邻二氮菲分光光度法测定铁doc
邻二氮菲分光光度法测定微量铁_6
实验二邻二氮菲分光光度法测定微量铁试验目的1.掌握紫外可见分光光度计的基本操作。
2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法。
3.掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长的选择。
4.掌握标准曲线的绘制及应用。
实验原理邻二氮菲（1,10-邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe离子形成红色配位离子：在pH=3~9范围内，该反应迅速完成，生成的红色配位离子在510nm 波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1*104，反应十分灵敏，Fe2+离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液与样品溶液的酸度，采用盐酸羟胺还原标准液及样品溶液中的Fe3+离子并防止测定过程中二价铁离子被空气氧化。
实验仪器与试剂1.V-1100D型可见分光光度计2.标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3.邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4.盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5.醋酸盐缓冲液6.50ml容量瓶7个7.5ml移液管4只8.1cm玻璃比色皿2个9.铁样品溶液实验步骤1.标准系列溶液及样品溶液配制：按照下表配制标准系列溶液及样品溶液。
2.吸收曲线绘制：用1cm的比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在不同波长下的吸光度，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。
3.标准曲线制作：在选定的最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~7号溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线。
实验数据处理与结果1.吸收曲线：2.标准曲线：样品铁溶液中铁含量计算：Cx=C 读取值×50.200.50=9.9×10-4mol/L摩尔系数计算：ε=1212C C A A --=1.219×104 实验思考与讨论1.标准曲线的线性不好的原因：所选标准溶液的浓度可能只有一部分在线性范围内，该实验5、6号之间的线性不是很好，很大的原因可能是它们之间的某一浓度之后便超出了线性的范围。
邻二氮菲吸光光度法测定铁实验操作方法.doc
邻二氮菲吸光光度法测定铁实验操作方法.doc一、实验目的：通过邻二氮菲吸光光度法，测定水样中的铁含量。
二、实验原理：邻二氮菲吸光光度法又称为费-利反应，它是一种测定铁含量的重要方法。
当邻二氮菲的溶液与铁离子溶液混合时，铁离子能够与邻二氮菲形成深色络合物，且该络合物的红外吸收峰较强，因此可以利用紫外可见分光光度计测定吸收强度，从而测定铁离子的浓度。
三、实验步骤：1.样品制备将水样加热至90℃，用去离子水将样品稀释至100mL。
2.制备标准铁溶液取一定质量的氯化铁，精密称量，用去离子水将其稀释至100mL，即得1mg/L的标准铁离子溶液。
3.制备邻二氮菲溶液将下列试剂按照指定比例配制成邻二氮菲溶液。
4.进行反应分别取25mL水样，1mg/L、2mg/L、3mg/L、4mg/L的标准铁溶液，加入滴定管中。
在每个样品管和标准管中加入2mL邻二氮菲溶液和3mL试剂3，加去离子水至刻度线，并用橡胶塞塞紧。
混匀之后，放置于水浴锅中，将水浴锅加热至70℃。
于90℃取出样品管，冷却后，用去离子水洗净吸光度比色皿，用去离子水将样品注入其中，测量吸光度。
在吸光度增加速率最快时，确定所测吸光度。
5.建立标准曲线将标准铁溶液的吸光度测量值用磷酸根校正。
用吸光度与浓度制作标准曲线。
6.测定样品中的铁含量测量待测水样的吸光度，并用标准曲线求得单位体积内铁的含量。
四、实验注意事项：1.实验过程中要避免水样和标准溶液的误差。
2.吸光度比色皿和滴定管等玻璃器皿要清洁干净。
使用前用去离子水洗净并烘干。
在取样时需反复用去离子水进行漂洗，避免残留物影响结果。
3.加入液体试剂时，使用滴管要慢慢滴加，避免气泡产生。
4.实验时应避免阳光直射，室内温度要适宜。
5.对于测量结果不准确的情况，可以重复实验，取多次测量结果的平均值。
6.实验结束后，用去离子水将仪器和器皿彻底洗净，并干燥。
五、实验设备：1.紫外可见分光光度计2.恒温水浴3.取样瓶、铁离子标准溶液、邻氮二菲、试剂3等实验器材和试剂六、实验结果及分析：在标准曲线中，吸光度与铁离子的浓度呈直线关系，从而得出待测水样中铁的含量。
实验十-邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验十邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长3．学会制作标准曲线的方法4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。
在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）2+lgK=21.3，在510nm下，其摩尔吸光系数为1.1104L/moL.cm, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成3兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+：2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-本方法的选择性很高。
相当于含铁量40倍的Sn、AI、Ca、Mg、Zn、Si,20倍的Cr、Mn、V、P和5倍的Co、Ni、Cu不干扰测定。
三、试剂与仪器仪器：1．721型分光光度计2．50mL容量瓶8个（4人/组）,100mL1个,500mL1个3．移液管：2 mL1支，10 mL1支4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支试剂：1．铁标准储备溶液100ug/mL：500 mL（实际用100mL）。
准确称取0.4317g铁盐NH4Fe（SO4）12H2O置于烧杯中，加入6moL/LHCI20mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。
22．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液10.00 mL，置于100 mL容量瓶中，加入6moL/LHCI2.0mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。
3．HCI6moL/L：100mL（实际用30mL）4．盐酸羟胺10%（新鲜配制）：100mL（实际80mL）5．邻二氮菲溶液0.1%（新鲜配制）：200mL（实际160mL）6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL（实际400mL）：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL冰醋酸，加水稀释至500 mL7．水样配制（0.4ug/mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL四、实验步骤1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）0.0、2.0、4.0 mL分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、2.0 mL0.1%邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。
邻二氮菲分光光度法测定铁常用文档
基本操作
1）吸量管的使用 2）容量甁的使用 3）7220型分光光度计计的使用
实验原理
在pH＝2～9 的溶液中，邻二氮菲(phen) 与Fe2+ 生成稳定的红色配合物，其最大吸收峰在508nm波处。
lgK＝，摩尔吸光系κ508 = 1.1×104，其反应式如下：
Fe2+ + 3(phen) = Fe(phen)3
邻二氮菲分光光度法测定铁
• 目的与要求 • 仪器和试剂 • 基本操作 • 实验原理 • 实验内容 • 数据记录和处理 • 思考题 • 注意事项
实验目的
1、掌握邻二氮菲法测定铁的原理； 2、了解7220分光光度计的构造； 3、掌握7220分光光度计的正确使用； 4、学会工作曲线的制作和样品的测定。
1.0
2.0
5
吸光度
实验内容
在508nm波长下，用1cm比色皿，以试剂溶液为空 白，测定其各溶液的吸光度，以含量为横坐标，溶 液相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
实验内容
3、取试液溶液（工业盐酸）1mL，按上述步骤显色后, 在其相同条件下测定吸光度，由标准曲线上查出试样中 相当于铁的毫克数，计算试样中微量铁的含量(g/L)。
2.0
5
在液5相08应nm的波吸4长光下度，为用纵1坐cm标比，0色绘.6皿制0，标以准试曲剂线溶。液为空1.0
Байду номын сангаас
2.0
5
试样（工业盐酸）的相应的浓度值，计算试样中铁的
5g·L－1新配5制的水溶液 0.80
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邻二氮菲分光光度法测定铁
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试样1.00
邻二氮杂菲分光光度法测定铁
分析化学实验报告邻二氮杂菲分光光度法测定铁一．实验目的1.了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法2.掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法3.了解722型分光光度计的构造和使用方法二．实验原理1.光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
2.在PH=2-9的条件下，Fe2+与邻二氮杂菲（o-ph）生成极稳定的橘红色配合物，反应式如下：此配合物的lgK稳=21.3 摩尔吸收系数ε510 =1.1×104在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe2+ 还原成Fe3+.其反应式如下：2Fe 3+ +2NH 2 OH· HC1 ＝2Fe 2+ +N 2↑+2H 2 O+4H + +2C1-测定时，控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜。
酸度过高时，反应进行较慢;酸度太低，则Fe 2+水解，影响显色。
三．实验步骤1.条件实验（1）吸收曲线的测绘准确吸取20 μg·mL-1铁标准溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加入5%盐酸羟胺溶液 1 mL，摇匀，加入 1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%邻二氮杂菲溶液3 mL。
以水稀释至刻度，摇匀。
放置10 min，在722型分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570 nm到430 nm为止，每隔10 nm测定一次吸光度。
如图1所示，其最大吸收波长为510 nm，故该实验选择测定波长为510 nm。
（2）邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性用上面溶液继续进行测定，其方法是在最大吸收波长510 nm处，每隔一定时间测定其吸光度，及再加入显色剂后立即测定一次吸光度，经10、20、30、120 min后，再各测一次吸光度。
邻二氮菲测铁实验报告
邻二氮菲测铁实验报告篇一：邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告实验一、邻二氮菲分光光度法测定微量铁XX级医学检验 3组吴茳铃 XX221885实验目的和要求1、掌握紫外可见分光光度计的基本操作；2、掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；3、掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；4、掌握标准曲线绘制及应用。
实验原理邻二氮菲（1,10—邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe形成红色配位离子2+Fe2+2++3NNFe3在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×104，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。
实验仪器与试剂1. 752S型分光光度计2. 标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3. 邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4. 盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5. NaAC缓冲溶液6. 50ml 容量瓶7个 8.1cm玻璃比色皿2个 9. 铁样品溶液实验步骤1、标准系列溶液及样品溶液配制，按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液。
用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在各个波长处的吸光度，绘制吸收曲线，并找出最大吸收波长。
绘图如下：选择的最大吸收波长为：λmax = 510nm3、标准曲线制作在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2至7号溶液的吸光度，平行测定3次，计算吸光度平均值，绘制标准曲线。
绘制标准曲线：实验数据处理1、样品中铁的计算Cx=C读取值×50.00/2.50=0.05×20=1×10(mol/L)2、摩尔吸光系数计算在标准曲线的直线部分选择量两点，读取对应的坐标值，计算邻二氮菲配位物在最大吸收波长出的摩尔吸光系数：ε=(A2－A1)/(c2－c1)=(0.461—0.233)/(0.04×10-3—0.02×10-3)=1.14×104L/(mol·cm)-3实验讨论1、查资料红色配位物的摩尔吸光系数与实验计算一致，影响成败的关键可能有：标准液和样品液的配置不准、分光光度计使用不当。
实验_邻二氮菲分光光度法测定铁
实验邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1 掌握研究显色反应的一般方法；2 测定未知试样中的铁含量．二、实验原理由于某些无机离子本身没有颜色或者浓度低颜色过浅，其吸光值与浓度的关系不在线形范围内，则需要显色剂与被测物形成有色配合物。
该配合物的浓度与吸光度能够符合朗伯比尔定律。
因而可以间接测定出被测物的浓度。
(1) 显色剂与被测物的λmax应相距60 nm以上(2) 显色剂的用量：a保证显色完全，b用量过多会产生副反应(3) 显色时间：有些反应瞬时完成，溶液颜色很快达到平衡状态，并长时间保持不变．有些能迅速完成，但褪色较快，有些反应则较慢。
(4) pH值的影响：影响显色剂的溶解和金属的离子状态，进而影响有色配合物的生成和稳定性。
HR＝H- + R+酸浓度改变，平衡移动三、实验步骤(一) 绘制吸收曲线取两个25mL容量瓶，其中一个加入0.3mL铁标准溶液，然后在两国容量瓶中各加入0.5mL盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min。
各加入1.0mL邻二氮菲溶液和2.5mL 醋酸钠溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
用水作参比溶液，分别绘制上述两种溶液的吸收曲线。
再用不含铁的试剂溶液作参比溶液，绘制有色配合物的吸收光谱。
比较上述3种吸收光谱，选取合适的测定波长。
（二）显色剂用量实验：在8个50 mL比色管中，加入0.30 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液，然后分别加入邻二氨菲溶液0，0.1，0.3，0.5，0.7，1.0，1.5和2.0 mL。
最后在个瓶中加入2.5 mL醋酸钠溶液，用水稀释至25 mL刻度，摇均，用1 mL比色皿，从不含显色剂的溶液作参比溶液，在508 nm下测定吸光度，记下各个吸光度值。
(三) pH值的影响：在7个50 mL比色管中，加入0.3 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液．静置2 min后，个加入1.0 mL邻二氨菲溶液，然后用滴定管依次加入0，2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0 mL氢氧化钠溶液，用水稀释至25 mL刻度摇均（用pH计测定上列溶液的pH值，记下其数值）．用1 cm比色皿，以水作参比溶液，在508 nm测定吸光度，记下吸光度值。
实验一--邻二氮菲分光光度法测定铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定铁[实验目的]1、了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法。
2、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法。
3、了解721型（或722型）分光光度计的构造和使用方法。
[实验原理]Fe2+与邻二氮菲反应生成红色配合物，在波长510nm（最大吸收波长）处，其吸光度的高低与浓度的关系符合朗伯—比尔定律。
Fe2+与邻二氮菲在PH为2—9范围都能形成稳定的红色配合物，但在5—6时最佳。
铁必须是以Fe2+形式反应，因此显色前要加入还原剂，通常用盐酸羟胺作为还原剂，反应式如下：4Fe3+＋2NH2OH = 4Fe2+＋N2O↑＋4H+＋H2OFe2+与邻二氮菲的反应式如下：[试剂和仪器]1、试剂：0.1mg/mL标准铁溶液：准确称取0.8634g分析纯铁铵矾［NH4Fe（SO4）2·12H2O］置于烧杯中加入20mL6mol·L-1的HCl溶液，溶解后转入1000mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
(或0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。
1mol·L-1NaAc溶液0.1mol·L-1NaOH溶液2、仪器 721（或722）型分光光度计一台（包括比色皿一套）、50mL容量瓶10只、5mL吸量管2支其它辅助器皿[实验步骤]（一）、工作条件试验1、吸收曲线的绘制用吸量管吸取1mL标准铁溶液，注入50mL容量瓶中，依次加入1mL盐酸羟铵溶液（摇匀）、2mL邻二氮菲溶液、5mL1mol/LNaAc溶液，定容至刻度，摇匀。
在721（或722）型分光光度计上，用1cm比色皿，一试剂空白为参比溶液在波长为440～560nm间，间隔10nm测定一次吸光度（在最大吸收波长附近，每隔2nm测定一次）。
以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择吸收峰最高点所对应的波长为工作波长。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
七、思索题 ⒈邻二氮菲分光光度法测定微量铁时 为何要加入盐酸羟胺溶液？ 2参比溶液旳作用是什么？在本试验 中可否用蒸馏水作参比？
3邻二氮菲与铁旳显色反应，其主要 条件有哪些？
参比溶液旳选择应是视详细情况而定。一般 1.当试液、显色剂和所用旳其他试剂在测定波长
都无吸收时，可用纯溶剂作参比溶液； 2.当试液无吸收，而显色剂或其试剂在测定波优
四、试验环节 （一）准备工作 打开仪器电源开关，预热，调解仪 器。 配制20.00μg·mL-1铁原则溶液：移 取100.0μg·mL-1铁原则溶液10.00mL于 100mL旳容量瓶中，并用蒸馏水稀至刻 线，摇匀。
四、试验环节 （二）吸收曲线旳制作 1.在1支50mL容量瓶中，加入 20.00μg/mL铁 原则溶液， 2.再加入1 mL 100g·L-1盐酸羟胺溶液摇匀 3. 5.0 mL pH≈5缓冲溶液 4. 1 mL 1.5g·L-1邻二氮菲溶液， 5.以水稀释至刻度，摇匀。 6.测量：用1cm比色皿，以试剂空白为参比， 在440~560nm处，每隔10nm测量一次吸光度，在峰 值附近每隔 5nm 测量一次吸光度A并统计。以波 长为横坐标，吸光度为纵坐标拟定最大吸收波长。
二、试验原理
邻二氮菲法简介： 邻二氮菲亦称邻菲 咯啉为显色剂，是光度法测定铁旳优良 试剂。在pH=2～9旳范围内，邻二氮菲 与二价铁生成稳定旳橙色配合物 （（Fe(phen)3）2+）。
测定时控制溶液旳酸度为pH≈5较为合适
三、仪器试剂 ⒈仪器：普析T6型分光光度计；1cm 吸收池一套；10mL 吸量管；5mL量筒 50mL 容量瓶或比色管(1＋7个)。 ⒉试剂：100.0μg·mL-1铁原则溶液； 1.5g·L-1邻二氮菲水溶液； 100g·L-1 盐酸羟胺溶液（新配）； pH≈5缓冲溶 液； 20.00μg·mL-1铁原则溶液(自己配)
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1.学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法；2.掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理1.在可见光分光光度法测定无机物时，通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。
2.确定适宜实验条件：改变其中一个影响因素，暂时固定其它影响因素，测吸光度，通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。
其他因素的确定也照此方法。
3.本实验以邻二氮菲（phen）为显色剂，是光度法测定微量铁的优良试剂，pH在2~9时（pH=5~6），Fe2+ + 3phen [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)lgK稳=21.3，λmax=510nm,ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1用盐酸羟胺将Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。
本方法选择性高，杂离子难以干扰。
三、仪器与试剂TU—1901型双光束紫外可见分光光度计，1cm比色皿，10mL吸量管，50mL 比色管。
1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，100μg·mL-1铁标准溶液，0.15%phen水溶液，10%盐酸羟胺溶液，1 mol·L-1醋酸钠溶液，工业盐酸（试样）。
四、实验操作1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液，稀释至刻度线，摇匀。
以蒸馏水为参比液，将上述试液装入1cm比色皿（2/3左右），在440nm~560nm 之间，每隔5nm测一次吸光度，以吸光度A为纵坐标，波长λ为横坐标绘制吸收曲线，选择最适宜波长。
2.确定显色条件⑴显色剂的用量在6支50mL比色管中各加入2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，分别加入0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL0.15%phen 水溶液，再加入5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液,，稀释至刻度线，摇匀。
邻二氮菲分光光度法测定铁
实验十九 分光光度法测定微量铁一.实验目的1.了解分光光度计的构造和使用方法。
2.了解邻二氮菲光度法测定铁的实验条件，掌握和了解实验条件的一般研究方法3.学习邻二氮菲分光光度法测铁的方法。
二.实验原理吸光光度法是根据溶液中物质对光选择性的吸收而进行分析的方法。
它具有较高的灵敏度和一定的准确度，特别适宜于微量组分的测定。
吸光光度法可以分为比色法和分光光度法两大类。
本实验采用分光光度法。
分光光度法测定物质含量时应注意的主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时间、显色时溶液的温度、干扰物质的消除方法等。
测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
光度法测定微量铁的显色剂有邻二氮菲(phen)、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。
目前大都采用邻二氮菲为显色剂测定微量铁。
在pH=2～9的条件下，Fe 2+离子与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，反应如下：++→+232)(phen Fe phen Fe (橘红色)此络合物lgK 稳=21.3，摩尔吸光系数4510101.1⨯=ε。
显色前，要用盐酸羟胺把Fe 3+离子还原为Fe2+离子，反应如下：-++++++↑+→•+Cl HO H N Fe HCl OH NH Fe 24222222223测定时应控制溶液酸度在pH=5左右为宜，酸度太高，反应进行较慢，酸度太低，Fe 2+离子水解，影响显色。
三.仪器及试剂仪器 752型分光光度计（1cm 比色皿）、50ml 容量瓶若干 试剂 1. 1001-•ml g μ铁标准溶液2. 101-•ml g μ铁标准溶液由1001-•ml g μ稀释制得 3.盐酸羟胺10%溶液 4.邻二氮菲溶液0.15% 5.NaAc 溶液1mol/L四.实验步骤1.测量波长的选择在50ml 容量瓶中按次序准确加入以下溶液，101-•ml g μ铁标准溶液5ml ，10%盐酸羟胺1ml ，摇匀，再加入1mol/LNaAc 溶液5ml ，0.15%邻二氮菲3ml 。
邻二氮菲分光光度法测定铁含量
一、实验目的
1. 了解并掌握邻菲罗啉分光光度法测定盐酸中铁含量的方法 及操作。
2. 进一步掌握紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理
1. 邻菲罗啉是测量微量铁的一种优良的显色剂。在 pH=2~9的范围内，Fe2+与邻菲罗啉作用生成稳定的桔红 色配合物，Fe3+与邻菲罗啉生成蓝色配合物且稳定性较 差，因此在实际应用中，常加入还原剂盐酸羟胺使Fe3+ 还原成Fe2+。
四、实验步骤
【操作步骤】 比色皿装样：1号溶液 GOTOλ 输入最大吸收波长 ENTER ZERO START 记录数值 比色皿装样：2号溶液 ZERO START 记录数值 比色皿装样：3号溶液 ZERO START 记录数值。
五、数据记录及处理
1. 绘制工业盐酸的标准曲线。 2. 求出试样含铁量。
5 min 5 ml邻菲罗啉 摇匀 慢慢滴加NaOH至pH
3.8~4.1 5 ml乙酸--乙酸钠缓冲液 摇匀 蒸馏水稀释
至刻度线，摇匀 放置15 min 以空白溶液为参比，测定各
显色液的序吸号光度 绘1制标准2曲线。3
4
5
6
加入铁标准溶液(ml) 0
2
4
6
8
10ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
相当于铁的含量 (mg)
2. 本实验在pH=4~5的条件下，用盐酸羟胺把三价铁Fe3+还 原成二价铁Fe2+，二价铁与邻菲罗啉生成桔红色配合物 ，用分光光度计测定，其反应式如下：
Fe2+ + 3C12H8N2 == [Fe(C12H8N2)3]2+
三、实验仪器及药品
实验仪器：
试纸 实验药品： 钠缓冲液、
邻二氮菲分光光度法测定铁
邻二氮菲分光光度法测定铁一．[实验目的]1、了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法。
2、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法。
3、了解721型（或722型）分光光度计的构造和使用方法。
二、[实验原理]Fe2+与邻二氮菲反应生成红色配合物，在波长510nm （最大吸收波长）处，其吸光度的高低与浓度的关系符合朗伯—比尔定律Fe2+与邻二氮菲在PH 为2—9范围都能形成稳定的红色配合物，但在5—6时最佳。
铁必须是以Fe2+形式反应，因此显色前要加入还原剂，通常用盐酸羟胺作为还原剂，反应式如下：4Fe3+＋2NH2OH = 4Fe2+＋N2O↑＋4H+＋H2O Fe2+与邻二氮菲的反应式如下：三、[试剂和仪器]试剂：0.1mg/mL 标准铁溶液：准确称取0.8634g 分析纯铁铵矾［NH4Fe （SO4）2·12H2O］置于烧杯中加入20mL6mol·L -1的HCl 溶液，溶解后转入1000mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
0.1%邻二氮菲溶液（新配） 10%盐酸羟铵溶液（新配） 1mol·L -1NaAc 溶液0.1mol·L -1NaOH 溶液2、仪器 721（或722）型分光光度计一台（包括比色皿一套）、50mL 容量瓶8只、5mL 吸量管2支其它辅助器皿 [实验步骤] 工作条件试验1、吸收曲线的绘制 用吸量管吸取2mL 标准铁溶液，注入50mL 容量瓶中，依次加入1mL 盐酸羟铵溶液（摇匀）、3mL 邻二氮菲溶液、5mL1mol/LNaAc 溶液，定容至刻度，摇匀。
在721（或722）型分光光度计上，用1cm 比色皿，一试剂空白为参比溶液在波长为440～860nm 间，间隔10nm 测定一次吸光度（在最大吸收波长附近，每隔2nm 测定一次）。
以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择吸收峰最高点所对应的波长为工作波长。
用8个50mL 容量瓶中，分别按下表的用量加入各种试剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
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实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
一、实验目的
1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法;
2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。
》
二、实验原理
邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。
配合物的稳K lg ＝，摩尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。
在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。
4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O
测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。
:
用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂
1．醋酸 钠：l mol·L -1；
2．氢氧化钠： mol·L -1；
3．盐 酸：2 mol·L -1；、
*
4．盐酸羟胺：10％（临时配制）；
5．邻二氮菲（%）：邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。
6．铁标准溶液
(1)10-4mol·L -1铁标准溶液：准确称取0.1961g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·
6H 20于烧杯中，用2 mol·L -1盐酸15 mL 溶解，移至500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀；再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L -l 标准溶液。
(2)10 μg·mL -1（即 mg·mL -1）铁标准溶液：准确称取0.3511g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -l 盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
再准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL -1标准溶液。
)
如以硫酸铁铵NH 4Fe(S04)2·12H 20配制铁标准浴液，则需标定。
7．仪器 分光光度计及l cm 比色皿。
四、实验步骤
1.吸收曲线的绘制 用吸量管准确吸取10-4 mo1·L -l 铁标准溶液10 mL ，置于50 mL 容量瓶中，加人10%盐酸羟胺溶液1 mL ，摇匀后加人1mol·L -l 醋酸钠溶液5 mL 和％邻二氮菲溶液3 mL ，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上，用l cm 比色皿，以水为参比溶液，
用不同的波长，从430～570 nm，每隔20 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长处附近多测定几点。
然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长（即最大吸收波长）。
2.测定条件的选择
<
（1）邻二氮菲与铁的配合物的稳定性用上面溶液继续进行测定，在最大吸收波长510 nm处，从加人显色剂后立即测定一次吸光度，经15min，30 min，45 min，60 min后，各测一次吸光度。
以时间（t）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制A－t曲线，从曲线上判断配合物稳定的情况。
（2）显色剂浓度的影响取25 mL容量瓶7个，用吸量管准确吸取10-4mo1·L-1铁标准溶液5 mL于各容量瓶中，加人10％盐酸羟胺溶液1mL摇匀，再加入l mol·L-1醋酸钠5 mL，然后分别加入％邻二氮菲溶液，，，，，和mL，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上，用适宜波长（510 nm），1 cm比色皿，以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。
然后以邻二氮菲试剂加人毫升数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A一V曲线，由曲线上确定显色剂最佳加人量。
（3）溶液酸度对配合物的影响准确吸取10-4 mol·L-l铁标准溶液10 mL，置于100 mL 容量瓶中，加人2 mol·L-1盐酸5 mL和10％盐酸羟胺溶液10 mL，摇匀经2 min后，再加人％邻二氮菲溶液30 mL，以水稀释至刻度，摇匀后备用。
取25 mL容量瓶7个，用吸量管分别准确吸取上述溶液10 mL于各容量瓶中，然后在各个容量瓶中，依次用吸量管准确吸取加人mol·L-1氢氧化钠溶液，，，，，及mL，以水稀释至刻度，摇匀，使各溶液的pH从小于等于2开始逐步增加至l2以上，测定各溶液的pH值。
先用pH为l～14的广泛试纸确定其粗略pH值，然后进一步用精密pH试纸确定其较准确的pH 值（采用pH计测量溶液的pH值，误差较小）。
同时在分光光度计上，用适当的波长（510 nm）l cm比色皿，以水为参比测定各溶液的吸光度。
最后以pH值为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A－pH曲线，由曲线上确定最适宜的pH范围。
（4）根据上面条件实验的结果，找出邻二氮菲分光光度法测定铁的测定条件并讨论之。
~
3．铁含量的测定
（1）标准曲线的绘制取25 mL容量瓶6个，分别准确吸取的10μg·mL-l铁标准溶液，，，，和mL于各容量瓶中，各加10％盐酸羟胺溶l mL，摇匀，经2 min后再各加1mol·L-l 醋酸钠溶液5 mL和％邻二氮菲溶液3 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上用l cm 比色皿，在最大吸收波长（510 nm）处以水为参比测定各溶液的吸光度，以含铁总量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
（2）吸取未知液5 mL，按上述标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度。
根据未知液吸光度，在标准曲线上查出未知液相对应铁的量，然后计算试样中微量铁的含量，以每升未知液中含铁多少克表示（g·L-1）。
五、数据记录与处理
1．记录分光光度计型号，比色皿厚度，绘制吸收曲线和标准曲线；
$
2．计算未知液中铁的含量，以每升未知液中含铁多少克表示（g·L-1）。
六、问题与讨论
1.三价铁离子溶液在显色前加盐酸羟胺的目的是什么
2.根据自己的实验结果数据，计算在最适宜波长下邻二氮菲与铁配合物的摩尔吸光系数，
计算时注意单位换算（实验中所配制溶液的浓度单位为mg·mL-1）。
3.所绘制曲线图均应有结论（即找出最佳值或最佳区间）。
4.注意工作曲线法定量的方式，未知物的定量应用虚线表示。