草莓植物组织培养

2．操作技术要点及培养条件
(1)灭菌与接种
预处理
灭菌彻底，常把接种材料先进行湿润处理，使灭菌剂能顺利地渗入材料。可用多种 湿润剂，我们采用的是75％的酒精，湿润的时间为半分钟至1分钟。
灭菌处理
在草莓组织培养中常用灭菌剂的种类很多。用过次氯酸钠10％水溶液(含有
效氯0．4--0．5％)，浸泡接种材料10--15分钟；次氯酸钙(漂白粉)，用其 饱和上清液，浸泡接种材料15--30分钟；过氧化氢10--12％水溶液浸泡 10--20分钟；新洁尔灭5--10％水溶液，浸泡10--15分钟；升汞0．1％水 溶液，浸泡8--10分钟。其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌 时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果。升汞有 很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒。因此，在草莓组 织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂。灭菌后的接种材料， 要用无菌水充分清洗，通常要换水3--5次。
接种
以培养无病毒苗为主要目的的草莓组织培养，所接种的茎尖 材料很小，在接种时首先要求准确熟练地剥取茎尖生长点，并 使用固体培养基比较适宜，接种时应注意不能将整个茎尖埋入 培养基中。培养基须用1--1．1大气压热压灭菌20分钟。 从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在 25±2℃。每日光照12小时，光强发2000Lx为宜。培养室温度 在18--26℃范围内，瓶苗可以正常生长及发根，但在28℃以上 时，绿苗普遍变黄，生根率降低，根尖发黄老化，幼苗易产生 玻璃化现象。
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5--6月于晴天的下午在健壮、无病的草莓刚抽出的匍匐茎上取茎 尖，大小为0．3--0．4mm，作为组织培养的外植体。 用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6-BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L， pH值调至5．8--6．0。 在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA0．5mg/L、 NAA0．01mg/L。 扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5--7株切成一块，转入继代培 养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖 中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。 诱导生根培养基用1／2MS附加不同浓度IBA。
对影响草莓组培繁殖系数的碳源因素进行了探 讨研究。 结果显示:蔗糖和市售白砂糖为草莓组培快繁的 最佳碳源。 恒温培养26天,繁殖系数均能达到15以上,从经济 角度考虑,可以用白砂糖取代蔗糖;用白砂糖作碳源, 当浓度为3％时,草莓脱毒组培苗的繁殖系数最高, 长势最好。
用不同质量的有根或无根组培苗 (285.6mg、201.6mg、153.4mg)在 山皮土和合成土中进行扦插试验结 果表明,苗木质量越大,成活率越高;苗 木质量相同时,在合成土中扦插成活 率高.
提高移栽成活率的关键
选择不定根直接生自茎基，根多且粗壮，叶片在3片以 上，叶大、厚、深绿的生根苗，成活率普遍较高。 栽培基质要用清水冲洗干净，或用多菌灵或甲基托布津 掺拌灭菌，用煤渣作基质时，还要用0．2％冰乙酸中和使 碱性降低。 移栽时采取“深栽浅埋”。深栽就是在移栽时根要栽 得深，浅埋的标准是使小苗的根颈与土表平齐，或略高于 土表。 注意控制光照与温度、湿度。小苗移栽后，放在温室内 或塑料拱棚内培养，温度控制在15--20℃，湿度维持在80 ％左右为宜。同时由于刚移栽的小苗茎杆脆嫩，应尽量采 用喷雾状浇水，水量也不宜过大，落干后再喷。遮光50％， 一周后，可逐渐增强日光照射。
以IBA0．1mg/L的浓度处理的生根率最高， 为100％，平均根条数为2．4条。 不加IBA及IBA浓度超过0．2mg/L，多数 苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织，随后 在愈伤组织上分化生根，致使成活率大大降 低。
使用无土育苗基质，要求基质具有良好的保水保 肥能力，透气性能好，PH5.5~6.5，物理化学性质 稳定，最好经过灭菌。 一般用2~3种基质混合使用，如草炭、蛭石按体 积比2﹕1混合。 在移苗前1d，将混合好、已润湿的基质装入穴 盘，轻压；用1wk.baidu.com00倍的普力克浇透，以杀死基质 中残存的病原菌。第二天移苗时，基质含水量大约 为80%，即适合移苗。
草莓组织培养的影响因素浅析
草莓作为一种经济植物具有较高的应用价值, 利用植物组培得到草莓的脱毒茁,可以大大降低 草莓种植过程中出现的品种老化和品质下降,明 显提高经济效益。 利用组培快繁技术还可从对草莓脱毒苗进行 快速繁殖,出苗整齐,可进行周年生产,不受季节 限制,从而实现新品种的工厂化育苗。
1 ．培养程序和培养基