水中挥发酚类的测定——4-氨基安替比林分光光度法资料讲解
海水―挥发性酚的测定―4-氨基安替比林分光光度法(精)
FHZDZHS0039 海水挥发性酚的测定 4氨基安替比林分光光度法F-HZ-DZ-HS-0039海水—挥发性酚的测定— 4-氨基安替比林分光光度法1 范围本方法适用于海水及工业排污口水体中低于 10mg/L酚含量的测定。
酚含量超过此值,可用溴化滴定法。
检出限:1.1μg/L。
2 原理被蒸馏出的挥发酚类在 pH10.0±0.2和以铁氰化钾为氧化剂的溶液中,与 4-氨基安替比林反应形成有色的安替比林染料。
此染料的最大吸收波长在 510nm 处,颜色在 30min 内稳定,用三氯甲烷萃取,可稳定 4h 并能提高灵敏度,但最大吸收波长移至 460nm 。
本方法不能区别不同类型的酚,而在每份试样中各种酚类化合物的百分组成是不确定的。
因此,不能提供含有混合酚的通用标准参考物,本方法选用苯酚作为参比标准。
来自水体的干扰可能有分解酚的细菌、氧化及还原物质和样品的强碱性条件。
在分析前除去干扰化合物的处理步骤中可能有一部分挥发酚类被除去或损失。
因此,对一些高污染海水, 为消除干扰和定量回收挥发酚类,需要较严格的操作技术。
干扰物质的消除:氧化剂:水样中的氧化剂能将酚类氧化而使结果偏低。
采样后取一滴酸化了的水样于淀粉 -碘化钾试纸上,若试纸变蓝则说明水中有氧化剂。
采样后应立即加入硫酸亚铁溶液或抗坏血酸溶液以除去所有的氧化性物质。
过剩的硫酸亚铁或抗坏血酸在蒸馏步骤中被除去。
油类和焦油∶如水样中含有石油制品等低沸点污染物,可使蒸馏液浑浊,某些酚类化合物还可能溶于这些物质中。
采样后用分液漏斗分离出浮油,在没有硫酸铜存在的条件下,先用粒状氢氧化钠将 pH 调节至 12~12.5,使酚成为酚钠,以避免萃取酚类化合物。
尽快用四氯化碳从水相中提出杂质 (每升废水用 40mL 四氯化碳萃取两次。
并将 pH 调到 4.0(见 6.1 。
用三氯甲烷萃取时,须用无酚水作一试剂空白,或先用 1g/L氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷, 以除去可能存在的酚。
4-氨基安替比林分光光度法和连续流动分析仪法测定水中挥发酚的比对分析
４ 一 氨基安替比林分光光度法和连续 流动分析仪法测定水中挥发酚的比对分析
孙金玺
一
杨凌茜
李
璐
、
前 言
蒸馏 出的酚类化合物 ， 于ｐ ｌｌ ｉ ０ ． ０ ±０ ． ２ １ ０ ｍ ｉ ｎ 。 然 后 在 分 液 漏 斗 中 准 确 加 人
挥发酚是评价水体有机污染的重 介 质中 ， 在 铁氰化钾存 在下 ， 与４ 一氨 １ ０ ． ０ ｍ Ｌ三氯 甲烷 ， 密塞 ， 剧烈震荡 ２ ｍ ｉ ｎ ，
滴萃取液后 ，将余 下三氯 甲烷直接放人
③测定吸光度
于４ ６ ０ ｎ ｍ 波 长 处 ， 以三 氯 甲烷 为 参
０ ｍｍ的比色皿 中。 此方法 原理 同 ４ 一氨基安替 比林 光 程为 ３
消耗量也大 ， 分析中萃取所用的三氯 甲 线蒸馏代替传统蒸馏 ，蒸馏出的挥发 比 ，测定显色过程所得 三氯 甲烷层的 吸
境及水体造成严重污染 。
连续 流动分 光光 度法 是基 于 ４ 一 达 到节水 、 节 电、 节 约试剂 、 提高分析
④空 白试验 用超纯水代替试样 ， 按前三步的步骤
⑤校准 曲线的绘制 于一组 ８个分液漏斗 中 ，分别加入
度。 该方法对挥发酚实行全 自动检测 ， 测定吸光度值 。空白应与试样同时测定。
绘制吸光度值对酚含 的不足 ， 具有广泛 的推广应用价值 。 但 璃蒸馏瓶 中， 加入 ２ ５ ． ０ ｍＬ水和几颗防 浓度管的吸光度值 ，
校准曲线 回归方程相关系数应 因 目前没有关于连续流动分光光度法 爆沸玻璃珠 ，再加人数滴 甲基橙 指示 量 的曲线 ， 测定挥发酚的 Ｉ Ｓ Ｏ标 准 、国标 和行标 液 ， 摇匀 （ 若试 样未显 红色 ， 则需补加 达 到 ０ ． ９ ９ ９以上 。
水质 水中挥发酚类测定 4-氨基安替比林分光光度法HJ503-2009
水质水中挥发酚类测定4-氨基安替比林分光光度法HJ503-20091.目的通过4-氨基安替比林分光光度法测定水中挥发酚的浓度，分析方法检出限、回收率及精密度，判断本实验室的检测方法是否合格。
2.适用范围2.1.1本标准适用于地表水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法的测定。
1.2检测方法是4-氨基安替比林分光光度法。
1.3检测依据是GB/T5750.4-2006和HJ503-20093.职责3.1检测人员负责按操作规程操作，确保测量过程正常进行，消除各种可能影响试验结果的意外因素，掌握检出限、方法回收率与精密度的计算方法。
3.2复核人员负责检查原始记录、检出限、方法回收率及精密度的计算方法。
3.3技术负责人负责审核检测结果及检出限、方法回收率、精密度分析结果。
4.分析方法4.1．水样预处理4.1.1量取250mL水样置于蒸馏瓶中，加数粒小玻璃珠以防暴沸，再加二滴甲基橙指示液，用磷酸溶液调节至pH4(溶液呈橙红色)，加5.0mL硫酸铜溶液(如采样时已加过硫酸铜，则补加适量)。
如加入硫酸铜溶液后产生较多量的黑色硫化铜沉淀，则应摇匀后放置片刻，待沉淀后，再滴加硫酸铜溶液，至不再产生沉淀为止。
4.1.2连接冷凝器，加热蒸馏，至蒸馏出约225 mL时，停止加热，放冷。
向蒸馏瓶中加入25 mL水，继续蒸馏至馏出液为250 mL为止。
蒸馏过程中，如发现甲基橙的红色褪去，应在蒸馏结束后，再加1滴甲基橙指示液。
如发现蒸馏后残液不呈酸性，则应重新取样，增加磷酸加入量，进行蒸馏。
4.2．标准曲线的绘制：于一组8个分掖漏斗中，分别加入100mL水,依次加入0；0.50；1.00；2.00；3.00；5.00；7.00；10.00mL苯酚标准使用液，再分别加水至至250mL。
加2.0mL 缓冲溶液混匀，此时pH值为10.0±0.2，加1.5mL4-氨基安替比林溶液，混匀。
再加1.5mL铁氰化钾溶液，充分混匀，放置10min。
水中挥发酚的测定ppt课件
4-氨基安替比林直接分光光度法： 适用于工业废水和生活污水
测定 方法
4-氨基安替比林分光光度法
一、实验原理
用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，并 与干扰物质和固定剂分离，由于酚类化合物的 挥发速度是随馏出液体积而变化，因此，镏出 液体积必须与试样体积相等。被蒸馏出的酚类 化合物，于ph10.0±0.2介质中，在铁氰化钾 存在下，与4-氨基安替比林反应生成橙红色的
林溶液 8%(m/v) 铁氰化钾溶液
三、采样及排除干扰
采样及样品
样品应贮于硬质玻璃瓶中。 在样品采集现场，应检测有无游离氯等氧化剂的存
在，若有发现，则应及时加入过量硫酸亚铁去除。 采集后一，样品应及时加磷酸酸化至PH约为4.0，并
加适量硫酸铜，同时应将样品冷藏。 在采集后24小时内进行测定。
试剂和用量，进行平行操作）
（2）校准
校准系列的制备 取8支50ml比色管。 分别加入0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、 10.0、12.5ml酚标准溶液。 加水稀释至标线，按上述规定进行测定。
校准曲线的绘制
▪ 由除零管外的其他校准系列测得的吸光值减去零 管的吸光度。
▪ 绘制吸光度对酚含量(μg)的曲线。
干扰的排除
氧化剂 硫化物
油类
有机或无机 还原性物质 （甲醛）
芳香 胺类
加入过量硫酸亚 铁 用磷酸将水样ph调至4.0，
加入适量硫酸铜溶液生成硫 化铜去除
用NaOH颗粒将ph调至 12~12.5，用四氯化碳萃取 除去
加硫酸，分次加入50、30、 30ml乙醚，合并乙醚层于另一分 液漏斗中，分次加入4、3、 3mlNaOH,使酚类转入NaOH中， 预蒸馏 合并碱溶液萃取液，移入烧杯， 水浴加温
地下水—酚的测定—4-氨基安替吡淋分光光度法
地下水—酚的测定—4-氨基安替吡淋分光光度法FHZDZDXS0092 地下水酚的测定4氨基安替吡淋分光光度法F-HZ-DZ-DXS-0092地下水—酚的测定—4-氨基安替吡淋分光光度法1 范围本方法适用于地下水中挥发酚含量的测定。
最低检测量为0.5μg，若取250mL水样蒸馏，最低检测浓度为0.002mg/L。
测定上限为0.08mg/L。
2 原理水样经蒸馏后，可除去大部分外来因素的干扰。
随水蒸汽蒸馏出的酚类，在pH10.0±2时，酚与4-氨基安替吡啉（4-AAP）反应，然后被铁氰化钾氧化生成安替吡啉红色染料，可为氯仿萃取，其浓度与吸光度呈线性函数关系。
由于各类取代基的酚类化合物，与4-氨基安替吡啉显色的摩尔吸光系数有差异，事实上不能提供混合酚类的标准，只能用苯酚（C6H5OH）作为比色的标准来表示水体挥发酚类的结果，所以给出的只是近似值；一些高于水蒸汽沸点的酚类。
常难以完全挥发馏出，实际测得值为水体中存在酚的最低量。
3 试剂除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，所有试剂溶液均需用无酚无氯的蒸馏水配制。
3.1 氢氧化钠（NaOH）。
3.2 碘化钾（KI）。
3.3 粒状无水硫酸钠（Na2SO4）。
3.4 氯仿（CHCl3）。
3.5 酚（C6H5OH）。
酚的精制：将市售瓶装苯酚（C6H5OH）置温水浴中，融化后取出适量放在蒸馏瓶中加热蒸馏，空气冷凝，收集182℃～184℃的馏出液（开始馏出的带色液弃去）。
冷却后应为无色纯净的结晶，加塞密封贮于暗处。
3.6盐酸（HCl，ρ=1.19g/mL）。
3.7 磷酸溶液（1+9）。
3.8 硫酸溶液（1+5）。
3.9 溴酸钾-溴化钾溶液：称取2.784g溴酸钾（KBrO3）及10g 溴化钾（KBr）溶解于蒸馏水中，移入1000mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
3.10 硫酸铜溶液（100g/L）：10g硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶于水中，稀释至100mL。
水质挥发酚的测定(4-氨基安替比林分光光度法)
水质挥发酚的测定（4- 氨基安替比林分光光度法）酚类定义：苯及其稠环的羟基衍生物。
酚类分类：蒸馏时能与水蒸气一并挥发的酚类称为挥发酚，一般是指沸点低于230℃的酚类。
一、原理方法1 萃取分光光度法用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，被蒸馏出的酚类化合物，于pH （10.0 士0.2）介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林（4-AAP ）反应生成橙红色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460 nm 波长下测定吸光度。
显色反应：酚类化合物，在碱性含氧化剂条件下，与4- 氨基安替比林和，并以苯酚计，测试结果代表了样品中酚类的最低浓度本法包含了苯酚和其他酚类化合物与4-AAP 反应显色的总缩合形成安替比林染料（类似靛酚类染料）方法2 直接分光光度法用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，被蒸馏出的酚类化合物，于pH (10.0 士0.2) 介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林 ( 4-AAP )反应生成橙红色的安替比林染料，在510 nm 波长下测定吸光度。
二、测试流程方法1 萃取分光光度法方法2 直接分光光度法1、水样保存样品应于4 ℃冷藏，24h 内测定2、水样预处理预蒸馏：根据水质标准，挥发酚测试，必须经过蒸馏；蒸馏可除去色度、浊度和重金属离子干扰。
①蒸馏过程，若蒸馏液橙红色退去，停止蒸馏，放冷，加几滴甲基橙。
若发现酸度不够，重新取样蒸馏。
②酚类化合物的挥发速度是随馏出液体积而变化，故馏出液与试样体积需相等。
③馏出液若出现白色浑浊，水样可能存在油类。
加氢氧化钠溶液，再有机萃取（四氯化碳），杂质在油层，酚保留在水层。
④水样中有挥发性酸，随水蒸气馏出，馏出液呈酸性，应用氨水调中性。
3、实验条件：①pH 影响：pH 过低，苯胺会出现显色干扰。
应用氨水控制在pH10 ±0.2。
②显色温度：温度过高易引起空白背景上升，故一般在常温下显色。
③试剂加入顺序：先加缓冲剂，再加氧化剂和显色剂。
④放置时间：水相空白随放置时间而增加，应及时测试；油相3h 内显色稳定，可放置短时间。
水中挥发性酚的测定
水中挥发性酚的测定一、实验目的（1）掌握用4－氨基安替比林直接分光光度法测定水中挥发酚的原理和操作。
（2）掌握722分光光度仪的使用方法。
二、实验原理在测定水中挥发酚类化合物时，一般需要对水样进行预蒸馏处理，这样可以消除颜色、浑浊等的干扰。
在pH值为10.0±0.2介质中，有氧化剂铁氰化钾存在时，酚类化合物与4－氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料，其水溶液在510nm波长处有最大吸收。
该方法可测定苯酚及邻、间位取代的酚，但不能测定对位有取代基的酚，由于样品中各种酚的相对含量不同，因而不能提供一个含混合酚的通用标准。
通常选用苯酚做标准，任何其他酚在反应中产生的颜色都看做是苯酚的结果。
取代酚一般会降低响应值，因此，用该方法测出的最低检出浓度为0.1ng/L，其值仅代表水样中挥发酚的最低浓度。
三、实验仪器、设备与药品（1）722分光光度计。
（2）50mL具塞比色管。
（3）250ml碘量瓶。
（4）10%硫酸铜溶液：称取50g硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶于水，稀释到500mL。
（5）磷酸溶液：量取50mL磷酸(ρ20=1.69g/mL)，用水稀释到500mL。
（6）苯酚标准储备液：称取1.00g无色苯酚(C6H5OH)溶于水，移入1000mL容量瓶中，稀释至标线。
储于棕色瓶中，置4℃冰箱内保存，至少稳定一个月。
（7）苯酚标准储备液的标定：吸取10.00mL酚储备液于250mL碘量瓶中，加水稀释至100mL，加10.0mL0.1000mol/L溴酸钾－溴化钾溶液，立即加入5mL盐酸，盖好瓶盖，轻轻摇匀，于暗处放置10min。
加入1g碘化钾，密塞，再轻轻摇匀，放置暗处5min。
用0.0125mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴至淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续滴至蓝色刚好褪去，记录用量V2。
同时以水代替苯酚储备液做空白试验，记录硫代硫酸钠标准溶液用量V 1。
苯酚储备液浓度由下式计算：苯酚(mg/mL) = Vc V V 68.15)(21⨯⨯- 式中 V 1——空白试验硫代硫酸钠标准溶液用量，mL ；V 2——滴定苯酚储备液时，硫代硫酸钠标准溶液用量，mL ；V ——取用苯酚储备液体积，mL ；C ——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L ；15.68——苯酚(1/6 C 6H 5OH)摩尔质量，g/mol 。
水质 挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法(HJ 503-2009 )
目次前言 (iv)1 适用范围 (1)2 规范性引用文件 (1)3 术语和定义 (1)方法1 萃取分光光度法4 方法原理 (1)5 干扰及消除 (1)6 试剂和材料 (2)7 仪器和设备 (3)8 样品 (3)9 分析步骤 (3)10 结果计算 (4)11 精密度和准确度 (4)12 质量保证和质量控制 (5)方法2 直接分光光度法13 方法原理 (5)14 干扰及消除 (5)15 试剂和材料 (5)16 仪器和设备 (5)17 样品 (5)18 分析步骤 (5)19 结果计算 (6)20 精密度和准确度 (6)21 质量保证和质量控制 (6)附录A（规范性附录）酚贮备液的标定 (7)附录B（资料性附录） 4-氨基安替比林的提纯 (8)水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法警告：乙醚为低沸点、易燃和具麻醉作用的有机溶剂，使用时周围应无明火，并在通风橱内操作，室温较高时，样品和乙醚宜先置冰水浴中降温后，再尽快进行萃取操作；三氯甲烷为具麻醉作用和刺激性的有机溶剂，吸入蒸气有害，操作时应佩戴防毒面具并在通风处使用。
1 适用范围本标准规定了测定地表水、地下水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法。
地表水、地下水和饮用水宜用萃取分光光度法测定，检出限为0.000 3 mg/L，测定下限为0.001 mg/L，测定上限为0.04 mg/L。
工业废水和生活污水宜用直接分光光度法测定，检出限为0.01 mg/L，测定下限为0.04 mg/L，测定上限为2.50 mg/L。
对于质量浓度高于标准测定上限的样品，可适当稀释后进行测定。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB 7489—87 水质溶解氧的测定碘量法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
挥发酚 volatile phenolic compounds随水蒸气蒸馏出并能和4-氨基安替比林反应生成有色化合物的挥发性酚类化合物，结果以苯酚计。
挥发酚-4-氨基安替吡啉分光光度法测定探讨
Term Definition
“ 挥发酚作为水体中有机物污染的评 价指标，是地表水环境质量监测的基本 项目。 其中，4-AAP萃取分光光度法是迄今 为止用的较多、选择性较高且稳定的测 定方法。
术语定义
“ 方法汇总
各个4-氨基
Method 安替比林光度
法在原理、分
Summary 析等方面基本
水质 挥发酚的测定
4-氨基安替比林分光光度法
（ HJ 503-2009 ） 江苏省扬州环境监测中心
主讲人：丁香怡
目录
PART 01 术语定义与方法汇总
PART 02 样品采集、运输与保存
PART 03 分析操作步骤
PART 04 实验关键环节与注意事项
PART 05 干扰与消除
PART 06 拓展与探讨
在上述显色分液漏斗中准确加入10.0mL三氧甲 烷，密塞，剧烈振摇2min，倒置排气，静置分层。用 干脱脂棉或滤纸拭干分液漏斗颈管内壁，于颈管内塞 一小团干脱脂棉或滤纸，将三氯甲烷层通过干脱脂棉 团或滤纸，弃去最初滤出的数滴萃取液后，将余下三 氧甲烷直接放入光程为 30 mm的比色皿中。
HELLO Reagent
Analyze The Operation Steps
分析步骤
Analyze The Operation Steps 1.预蒸馏
量取250mL水样置于500mL玻璃蒸馏烧瓶中( 如酚含量高，可分取适量水样加水至250mL，使酚 含量不超过10.0mg)，加25mL水，加数粒玻璃珠以 防暴沸，再加数滴甲基橙指示液，若试样未显橙红 色，则需继续补加磷酸溶液。
删除
适用范围、规范性引用文 件、部分干扰和消除内容 、样品、精密度和准确度 。
水中挥发酚4-氨基安替比林分光光度测定法
水中挥发酚 4-氨基安替比林分光光度测定法摘要：自然水体含酚量降低，对于人们正常用水产生的影响较小，但当水体中被排放入大量工业废水，酚类性质的化合物含量提升，就会使破环水体结构，造成污染问题。
酚类水体污染不仅会对人们的身体健康状态产生不利影响，引发急性中毒、神经系统紊乱等相应症状，还会对相关渔业、农田种植等产业产生相应的影响，导致水生植物、鱼类等死亡比例提升。
当前，对水体中挥发酚检测方法多样，本文主要对常见的4-氨基安替比林分光光度法（HJ 503-2009）进行分析，并结合测定干扰要素的调查研究，对技术的具体应用形式进行总结。
关键词：干扰因素；水体测定；4-氨基安替比林分光光度法在水体检测中，对水体中酚类化合物的测定实质上是指对挥发酚的检测，具体的技术应用包括连续流动分析、蒸馏后溴化容量以及4-氨基安替比林分光光度法、气相色谱测定法等几种。
按照炼焦、石油、医学、化学、农药生产等不同工业领域废水性质的差异，采用合理的测定技术，对水中酚类化合物的含量、构成等检测，并选择针对性的去除方法，是当前维护水环境生态可持续发展、保障人们用水安全的重要举措。
1.影响水体中挥发酚检测精度的干扰要素分析1.1样品的采集与保存水样中的挥发酚极不稳定，尤其是低浓度的样品，易受到水中的微生物氧化分解。
通过对不同含酚量水样的测试研究实验发现，同处于没加入固定剂状态时，水样中含有的挥发酚在24h内损失率能够达到12%左右。
因此，为确保检测结果的准确度与可靠性，需要特定的控制手段对微生物进行的氧化降解进行控制。
通常情况下，测定单位是通过添加特定固定剂，并将水样放置在4℃温度环境中，进行保存。
添加固定剂的处理方式分为两种，其一是对水样进行酸化处理。
在水样中添加适量磷酸，使水样经过酸化处理后pH值达到4.0，然后加入硫酸铜，调节水样的硫酸铜含量（1g/L）；其二是进行碱化处理。
在水样中添加NaOH，使其发生简化反应，让水样的pH值大于11。
浅谈4-氨基安替比林分光光度法测定高浓度挥发酚
ＶＥ ｌ． ００ １０ｌ． ５０ ． ００１ｏ （Ｕ ００ｌ． ． ３０ ． ７０Ｉ． ５（ ０ ０ Ｉ ０ ０ ０ ０ １０ ． ） Ａ ｆ８００ ８［２００１ ０９ ０８１５０ ．２ Ｉ ｏ ．０．８ ．０ ．０ ．６ ． ７ ） ． ０ ０ ｏ ￣ ２ ２ ３ ２ ０５ １ ０ ＡＡＪ ００ ｌ．８０３ ０１ ００ｌ４ ．２ －， ．０ ０ ｛１ ．０ ．６ ．００７ ， ０ ０４ ．０ ２ ３ ４ ６ ０
接 稀 释 法 之 间 是 否存 在 差 异 进 行 对 照 。
后的试液 ） 为稀释液 ， 作 稀释高浓度样品加 入显色剂后的试 液， 然后加氯仿萃取 ， 再进行分光测 定 ， 该方 法在准确度与 精密度方面是满足要求 的。
４ 结果 与讨论
表 １ 酚 的标 准 曲线
１ 主要 仪器
入显 色剂 后 的 试 液 （ 即加 入 ４ 一氨 基 安 替 比林 和 铁 氰 化 钾
铵缓冲溶液 、一氨基安替 比林 和铁 氰化钾后 的试 液 ）作为 ４ 稀 释液 ，对超 出浓度 范围的高浓度样 品显色后的试液进行
稀释， 然后 用氯仿萃取 ， 即可 比色测定 ； 对稀 释倍 数为 １ 、 ． ０
驻 水质监测技术交流
浅谈４ 氨基安 林 一 替比 分光光 度法测定高 度挥 浓 发酚
赵 剑辉
’
【 摘
（ 山东省枣庄水文水资源勘测局
枣庄 ２ ７０ ） ７１１
要】 用空白加入显 色剂后 的试液（ 即加入 ４ 一氨基安替 比林和铁 氰化钾后 的试液 ） 为稀释液 ， 高浓度酚样品加入 作 稀释
水质-水中挥发酚类测定-4-氨基安替比林分光光度法HJ503-2009
水质水中挥发酚类测定 4-氨基安替比林分光光度法HJ503-20091.目的通过4-氨基安替比林分光光度法测定水中挥发酚的浓度，分析方法检出限、回收率及精密度，判断本实验室的检测方法是否合格。
2.适用范围2.1.1本标准适用于地表水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法的测定。
1.2 检测方法是4-氨基安替比林分光光度法。
1.3 检测依据是GB/T5750.4-2006和HJ503-20093. 职责3.1 检测人员负责按操作规程操作，确保测量过程正常进行，消除各种可能影响试验结果的意外因素，掌握检出限、方法回收率与精密度的计算方法。
3.2 复核人员负责检查原始记录、检出限、方法回收率及精密度的计算方法。
3.3技术负责人负责审核检测结果及检出限、方法回收率、精密度分析结果。
4.分析方法4.1．水样预处理4.1.1 量取250 mL水样置于蒸馏瓶中，加数粒小玻璃珠以防暴沸，再加二滴甲基橙指示液，用磷酸溶液调节至pH4(溶液呈橙红色)，加5.0 mL硫酸铜溶液(如采样时已加过硫酸铜，则补加适量)。
如加入硫酸铜溶液后产生较多量的黑色硫化铜沉淀，则应摇匀后放置片刻，待沉淀后，再滴加硫酸铜溶液，至不再产生沉淀为止。
4.1.2 连接冷凝器，加热蒸馏，至蒸馏出约225 mL时，停止加热，放冷。
向蒸馏瓶中加入25 mL水，继续蒸馏至馏出液为250 mL为止。
蒸馏过程中，如发现甲基橙的红色褪去，应在蒸馏结束后，再加1滴甲基橙指示液。
如发现蒸馏后残液不呈酸性，则应重新取样，增加磷酸加入量，进行蒸馏。
4.2．标准曲线的绘制：于一组8个分掖漏斗中，分别加入100mL水,依次加入0；0.50；1.00；2.00；3.00；5.00；7.00；10.00mL苯酚标准使用液，再分别加水至至250 mL。
加2.0mL缓冲溶液混匀，此时pH值为10.0±0.2，加1.5 mL4-氨基安替比林溶液，混匀。
海水—挥发性酚的测定—4-氨基安替比林分光光度法
FHZDZHS0039 海水挥发性酚的测定4氨基安替比林分光光度法F-HZ-DZ-HS-0039海水—挥发性酚的测定—4-氨基安替比林分光光度法1 范围本方法适用于海水及工业排污口水体中低于10mg/L酚含量的测定。
酚含量超过此值，可用溴化滴定法。
检出限：1.1μg/L。
2 原理被蒸馏出的挥发酚类在pH10.0±0.2和以铁氰化钾为氧化剂的溶液中，与4-氨基安替比林反应形成有色的安替比林染料。
此染料的最大吸收波长在510nm处，颜色在30min内稳定，用三氯甲烷萃取，可稳定4h 并能提高灵敏度，但最大吸收波长移至460nm。
本方法不能区别不同类型的酚，而在每份试样中各种酚类化合物的百分组成是不确定的。
因此，不能提供含有混合酚的通用标准参考物，本方法选用苯酚作为参比标准。
来自水体的干扰可能有分解酚的细菌、氧化及还原物质和样品的强碱性条件。
在分析前除去干扰化合物的处理步骤中可能有一部分挥发酚类被除去或损失。
因此，对一些高污染海水，为消除干扰和定量回收挥发酚类，需要较严格的操作技术。
干扰物质的消除：氧化剂：水样中的氧化剂能将酚类氧化而使结果偏低。
采样后取一滴酸化了的水样于淀粉-碘化钾试纸上，若试纸变蓝则说明水中有氧化剂。
采样后应立即加入硫酸亚铁溶液或抗坏血酸溶液以除去所有的氧化性物质。
过剩的硫酸亚铁或抗坏血酸在蒸馏步骤中被除去。
油类和焦油∶如水样中含有石油制品等低沸点污染物，可使蒸馏液浑浊，某些酚类化合物还可能溶于这些物质中。
采样后用分液漏斗分离出浮油，在没有硫酸铜存在的条件下，先用粒状氢氧化钠将pH调节至12～12.5，使酚成为酚钠，以避免萃取酚类化合物。
尽快用四氯化碳从水相中提出杂质(每升废水用40mL四氯化碳萃取两次)。
并将pH调到4.0（见6.1）。
用三氯甲烷萃取时，须用无酚水作一试剂空白，或先用1g/L氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷，以除去可能存在的酚。
二氯甲烷可代替三氯甲烷，尤其在用氢氧化钠提纯三氯甲烷溶液形成乳浊液时。
海水—挥发性酚的测定—4-氨基安替比林分光光度法
FHZDZHS0039 海水挥发性酚的测定4氨基安替比林分光光度法F-HZ-DZ-HS-0039海水—挥发性酚的测定—4-氨基安替比林分光光度法1 范围本方法适用于海水及工业排污口水体中低于10mg/L酚含量的测定。
酚含量超过此值，可用溴化滴定法。
检出限：1.1μg/L。
2 原理被蒸馏出的挥发酚类在pH10.0±0.2和以铁氰化钾为氧化剂的溶液中，与4-氨基安替比林反应形成有色的安替比林染料。
此染料的最大吸收波长在510nm处，颜色在30min内稳定，用三氯甲烷萃取，可稳定4h 并能提高灵敏度，但最大吸收波长移至460nm。
本方法不能区别不同类型的酚，而在每份试样中各种酚类化合物的百分组成是不确定的。
因此，不能提供含有混合酚的通用标准参考物，本方法选用苯酚作为参比标准。
来自水体的干扰可能有分解酚的细菌、氧化及还原物质和样品的强碱性条件。
在分析前除去干扰化合物的处理步骤中可能有一部分挥发酚类被除去或损失。
因此，对一些高污染海水，为消除干扰和定量回收挥发酚类，需要较严格的操作技术。
干扰物质的消除：氧化剂：水样中的氧化剂能将酚类氧化而使结果偏低。
采样后取一滴酸化了的水样于淀粉-碘化钾试纸上，若试纸变蓝则说明水中有氧化剂。
采样后应立即加入硫酸亚铁溶液或抗坏血酸溶液以除去所有的氧化性物质。
过剩的硫酸亚铁或抗坏血酸在蒸馏步骤中被除去。
油类和焦油∶如水样中含有石油制品等低沸点污染物，可使蒸馏液浑浊，某些酚类化合物还可能溶于这些物质中。
采样后用分液漏斗分离出浮油，在没有硫酸铜存在的条件下，先用粒状氢氧化钠将pH调节至12～12.5，使酚成为酚钠，以避免萃取酚类化合物。
尽快用四氯化碳从水相中提出杂质(每升废水用40mL四氯化碳萃取两次)。
并将pH调到4.0（见6.1）。
用三氯甲烷萃取时，须用无酚水作一试剂空白，或先用1g/L氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷，以除去可能存在的酚。
二氯甲烷可代替三氯甲烷，尤其在用氢氧化钠提纯三氯甲烷溶液形成乳浊液时。
4-氨基安替比林分光光度法
4-氨基安替比林分光光度法
氨基安替比林（Acetanilide）分光光度法是一种用于测定氨基安替比林中可溶性有
机化合物总量的快速分析方法。
含有氨基安替比林的样品首先加入一定量的氯化钠和水，
混合均匀，随后加入溴化钠，使反应物中氨基安替比林与溴结合，形成氯甲基醛。
通过在
恒定温度、压力条件下进行酸化反应后，氯甲基醛产物便会形成稳定的柠檬酸盐[Cl-COOH]，无色晶体状的柠檬酸盐产生后，增加溴继续反应，使柠檬酸盐浓度变化产生可观
测的吸光度峰。
利用恒定温度、压力条件下，柠檬酸盐产物吸光度随柠檬酸盐浓度增加而
增强的特点，来检测氨基安替比林含量。
操作时，需要建立不同浓度，同一质量的样品的
标准曲线，然后依据标准曲线求出未知样品浓度。
氨基安替比林分光光度法具有操作简单、反应快速、准确度高的优势，它的实施不需
要添加特殊的试剂，相比其他分析方法，检测方法较快，无需回收试剂或回用试剂，灵敏
度也较高，在确认样品中氨基安替比林的成分时，可以得到准确可靠的细节证据。
由于氨
基安替比林主要用于制备一些药物，因此，采用此方法对于制药行业的质量控制来说，有
着至关重要的意义。
在氨基安替比林分光光度法中，检测应选择最适当的温度和压力，否则会影响分析结
果准确性，而长时间高温又容易使样品受损、降低样品的质量。
此外，此分析方法也可能
受到其他因素的影响，如样品中含有抑制性物质或者其他有机物，对溶剂及添加剂过敏等，因此需要操作人员进行适当的评估，调整实验条件，以确保声明检测结果的准确性。
实验水样中挥发酚的测定(4—氨基安替比林光度法)
一、实验目的及要求
1、掌握用预蒸馏进行水样预处理的方法； 2、掌握用4—氨基安替比林直接光度法测定挥发酚的原理。
二、实验原理
在值为10.0土0.2介质中，有氧化剂铁氰化钾存在时，酚类化 合物与4—氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料， 其水溶液在510 nm波长处有最大吸收。研究指出：酚类化合物中， 羟基对位的取代基可阻止反应进行，但卤素、羧基、磺酸基、羟基 和甲氧基除外，这些基团多半是能被取代的；邻位硝基阻止反应生 成，而间位硝基不完全地阻止反应；氨基安替比林与酚的偶合在对 位较邻位多见；当对位被烷基、芳基、酯、硝基、苯酰基、亚硝基 或醛基取代，而邻位未被取代时，不呈现颜色反应。若用光程长为 20 mm的比色皿测量时，酚的最低检出浓度为0.1mg/L 。
(9)苯酚标准中间液 取适量苯酚储备液，用水稀释至每毫升含0.010 苯酚。使 用时当天配置。 (10)溴酸钾—溴化钾标准参考溶液0.1000 称取2.7840溴酸钾(KBrO3)溶于水， 加入10 溴化钾(KBr)，使溶解，移入1000容量瓶中，稀释至标线。 (11)碘酸钾标准参考溶液0.0125称取预先经180℃烘干的碘酸钾0.4458 溶于水， 移入1000 mL容量瓶中，稀释至标线。
式中
C(Na2 S2O4 )
0.0125 V3
V4
——代硫酸钠的浓度，；
——硫代硫酸钠标准滴定溶液用量，；
——移取碘酸钾标准参考溶液量，；
0.0125——碘酸钾标准参考溶液浓度，。
(13)淀粉溶液 称取1 可溶性淀粉，用少量水调成糊状，加沸水至100，冷后，
置冰箱内保存。
(14)缓冲溶液(值为10) 称取20 氯化铵()溶于100 氨水中，加塞，置冰箱中保
水中挥发酚类的测定——4-氨基安替比林分光光度法
水中挥发酚类的测定——4-氨基安替比林分光光度法5、4—氨基安替比林直接光度法方法原理酚类化合物于pH10.00±0.2介质中，在铁氰化钾存在下，与4—氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料，其水溶液在510nm波长处有最大吸收。
研究指出：酚类化合物中，羟基对位的取代基可阻止反应进行；但卤素、羧基、磺酸基、羟基和甲氧基除外，这些基团多半是能被取代下的；邻位硝基阻止反应生成，而间位硝基是不完全地阻止反应：氨基安替比林与酚的偶合在对位较邻位多见，当对位被烷基、芳基、酯、硝基、苯酰基、亚硝基或醛基取代，而邻位未被取代时，不呈现颜色反应。
用光程为20mm的比色皿测定，酚的最低检出浓度为0.1mg/L。
6、试剂（1）苯酚标消贮备液：称取1.00g无色苯酚(C6H5OH)溶于水，移入l000ml 容量瓶中，稀释至标线，置于4℃冰箱内保存，至少稳定一个月。
（2）贮备液的标定（标定原理：溴酸钾-溴化钾，酸性，生成溴单质，和苯酚发生定量反应，过量的溴酸钾氧化碘化钾析出碘，用硫代硫酸钠滴定。
硫代硫酸钠用碘酸钾-碘化钾标定）（3）苯酚中间液：将苯酚贮备液用水稀释至10μg/ml的酚标淮个间液。
使用时当天配制。
（4）缓冲溶液（pH为10）：称取20g氯化铵溶于100ml氨水中，加塞，置于冰箱中保存。
（5）2%的4-氨基安替比林溶液：称取2g的4-氨基安替比林溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。
注：固体试剂易潮解、氧化，宜保存于干燥器中。
（6）8%的铁氰化钾溶液：称取8g铁氰化钾溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。
（7）硫酸铜（1g/L）（8）磷酸（9）5%硫酸亚铁：称取5g硫酸亚铁固体，溶入100m l水中。
(完整word版)4-氨基安替比林分光光度法测定废水中酚类
4—氨基安替比林分光光度法测定废水中酚类【点击量】5401 【日期】2014/9/24 17:19:39一、原理酚类化合物于pH10.0±0。
2介质中，在铁氰化钾存在下，与4—氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚氨基安替比林染料，其水溶液在510nm波长处有最大吸收。
用光程长为20mm比色皿测量时，酚的最低检出浓度为0.1mg/L.二、仪器1．500mL全玻璃蒸馏器.2．分光光度计。
三、试剂实验用水应为无酚水.1．无酚水：于1L水中加入0。
2g经200℃活化0。
5h的活性炭粉末，充分振摇后，放置过夜.用双层中速滤纸过滤，或加入氢氧化钠使水呈强碱性，并滴加高锰酸钾溶液至紫红色，移入蒸馏瓶中加热蒸馏，收集馏出液备用。
注：无酚水应贮于玻璃瓶中，取用时应避免与橡胶制品（橡皮塞或乳胶管）接触.2．硫酸铜溶液：称取50g硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶于水,稀释至500mL。
3．磷酸溶液:量取50mL磷酸（密度20℃=1。
69g/mL),用水稀释至500mL。
4．甲基橙指示液：称取0。
05g甲基橙溶于100mL水中.苯酚标准贮备液：称取1.00g无色苯酚溶于水，移入1000mL容量瓶中，稀释至标线.至冰箱内保存，至少稳定一个月。
标定方法：(1）吸10.00mL酚贮备液于250mL碘量瓶中，加水稀释至100mL，加10。
0mL0.1mol/L溴酸钾-溴化钾溶液,立即加入5mL盐酸，盖好瓶盖，轻轻摇匀，于暗处放置10min。
加入1g碘化钾，密塞，再轻轻摇匀，放置暗处5min。
用0.0125mol/L硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定至淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录用量。
（2）同时以水代替苯酚贮备液作空白试验,记录硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液用量。
（3）苯酚贮备液浓度由下式计算:苯酚（mg/mL）=15。
68×c×(V1—V2)/V式中：V1——空白实验中硫代硫酸钠标准滴定溶液用量（mL)；V2—-滴定苯酚贮备液时,硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液用量(mL）;V——取用苯酚贮备液体积（mL）；c——硫代硫酸钠标准滴定溶液浓度(mol/L）；15.68-—1/6C6H5OH摩尔质量(g/mol)。
水中挥发酚类的测定——4-氨基安替比林分光光度法资料讲解
水中挥发酚类的测定——4-氨基安替比林分光光度法5、4—氨基安替比林直接光度法方法原理酚类化合物于pH10.00±0.2介质中，在铁氰化钾存在下，与4—氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料，其水溶液在510nm波长处有最大吸收。
研究指出：酚类化合物中，羟基对位的取代基可阻止反应进行；但卤素、羧基、磺酸基、羟基和甲氧基除外，这些基团多半是能被取代下的；邻位硝基阻止反应生成，而间位硝基是不完全地阻止反应：氨基安替比林与酚的偶合在对位较邻位多见，当对位被烷基、芳基、酯、硝基、苯酰基、亚硝基或醛基取代，而邻位未被取代时，不呈现颜色反应。
用光程为20mm的比色皿测定，酚的最低检出浓度为0.1mg/L。
6、试剂（1）苯酚标消贮备液：称取1.00g无色苯酚(C6H5OH)溶于水，移入l000ml 容量瓶中，稀释至标线，置于4℃冰箱内保存，至少稳定一个月。
（2）贮备液的标定（标定原理：溴酸钾-溴化钾，酸性，生成溴单质，和苯酚发生定量反应，过量的溴酸钾氧化碘化钾析出碘，用硫代硫酸钠滴定。
硫代硫酸钠用碘酸钾-碘化钾标定）（3）苯酚中间液：将苯酚贮备液用水稀释至10μg/ml的酚标淮个间液。
使用时当天配制。
（4）缓冲溶液（pH为10）：称取20g氯化铵溶于100ml氨水中，加塞，置于冰箱中保存。
（5）2%的4-氨基安替比林溶液：称取2g的4-氨基安替比林溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。
注：固体试剂易潮解、氧化，宜保存于干燥器中。
（6）8%的铁氰化钾溶液：称取8g铁氰化钾溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。
（7）硫酸铜（1g/L）（8）磷酸（9）5%硫酸亚铁：称取5g硫酸亚铁固体，溶入100ml水中。
7、分析步骤（1）校准曲线的绘制于8支50ml比色管中，分别加入0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.00、12.50ml、浓度为10μg/ml的苯酚标淮中间液，加水至50m1标线。
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5、4—氨基安替比林直接光度法方法原理
酚类化合物于 pH10.00±0.2 介质中，在铁氰化钾存在下，与 4—氨基安替 比林反应， 生成橙红色的吲哚酚安替比林染料， 其水溶液在 510nm 波长处有最 大吸收。
研究指出：酚类化合物中，羟基对位的取代基可阻止反应进行；但卤素、 羧
基、磺酸基、羟基和甲氧基除外，这些基团多半是能被取代下的；邻位硝基 阻止反应生成，而间位硝基是不完全地阻止反应：氨基安替比林与酚的偶合在 对位较邻位多见，当对位被烷基、芳基、酯、硝基、苯酰基、亚硝基或醛基取 代，而邻位未被取代时，不呈现颜色反应。
用光程为 20mm 的比色皿测定，酚的最低检出浓度为 0.1mg/L 。
6、试剂
(1) 苯酚标消贮备液：称取I.OOg 无色苯酚(C 6H 5OH)溶于水，移入1000ml 容量瓶中，稀释至标线，置于 4C 冰箱内保存，至少稳定一个月。
( 2)贮备液的标定(标定原理：溴酸钾 -溴化钾，酸性，生成溴单质，和 苯酚
发生定量反应，过量的溴酸钾氧化碘化钾析出碘，用硫代硫酸钠滴定。
硫 代硫酸钠用碘酸钾 -碘化钾标定)
(3)苯酚中间液：将苯酚贮备液用水稀释至10卩g/ml 的酚标淮个间液。
使 用时当天配制。
( 4)缓冲溶液( pH 为 10)：称取 20g 氯化铵溶于 100ml 氨水中，加塞， 置于冰箱中保存。
( 5) 2%的 4-氨基安替比林溶液： 称取 2g 的 4-氨基安替比林溶于水， 稀
释 至100ml ，置于冰箱中保存，可使用一周。
注：固体试剂易潮解、氧化，宜保存于干燥器中。
(6) 8%的铁氰化钾溶液：称取8g 铁氰化钾溶于水，稀释至100ml ，置于 冰箱中保存，可使用一周。
( 7)硫酸铜( 1g/L )
( 8)磷酸
(9) 5%硫酸亚铁：称取5g 硫酸亚铁固体，溶入100ml 水中。
7、分析步骤
( 1)校准曲线的绘制
于 8支 50ml 比色管中，分别加入 0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、
10.00、 12.50ml 、浓度为10pg/ml 的苯酚标淮中间液，加水至 50m1标线。
加0.5m1缓 冲溶液，混匀，此时 pH 值为 10.00±0.2，加 4—氨基安替比林溶液 水中挥发酚类的测定 4-氨基安替比林分光光度
法
1.0m1 混匀。
再加1.0m1铁氰化钾溶液，充分混匀，放置10min后，立即于510nm 波长，以光程为20mm 比色皿，以水为参比．测定吸光度。
以水代替水样，经蒸馏后，按水样测定相同步骤进行测定，以其结果作为水样测定的空白校正值。
（2）水样的测定
分取适量的馏出该放入50m1 比色管中，稀释至50ml 标线。
用与绘制校准
曲线相同步骤测定吸光度，最后减去空白试验所得吸光度。
（3）数据处理
吸光度经空白校正后，求出吸光度对苯酚含量（卩g的回归方程，将水样测定吸光度减去空白值后，代入回归方程，得出水样中挥发酚含量，并根据水样体积，计算出水样中挥发酚含量（苯酚，mg/L）；最后，绘制吸光度对苯酚含
量（卩g的校准曲线，并在图中标出测量点及其水样测定结果。
8、4—氨基安替比休萃取光度法原理
酚类化合物在pH=10.00±）.2介质中，在铁氰化钾的存在下，与4—氨基安替比林反应所生成的橙红色安替比林染料可被二氯甲烷所萃取，并在460nm 波长处只有最大吸收。
本方法适用于饮用水、地表水农、地下水和工业废水中挥发酚的测定。
其
最低检出浓度为0.002mg/L;测定上限为0.12mg/L。