5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒

合集下载

5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒

5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒

5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒
磁珠法全血DNA提取试剂盒是什么?
生物磁珠是一种新型的功能化固体载体,其表面包被有活性基团,可以与多种生物活性物质发生偶联,兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点,在外磁场的作用下可以定向移动和集中,当撤去外磁场后,稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体中,从而使固液相的分离变的十分快捷方便,通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶向物质。

磁珠法全血DNA提取试剂盒采用特殊包被的生物磁珠,通过独特分离作用的缓冲液系统,从全血中分离纯化高质量核酸。

磁珠在一定条件下对目的核酸具有很强的亲和力,当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。

整个过程不涉及有毒试剂,操作环境更加便利,提取的核酸纯度高、质量可靠。

使用磁珠法全血DNA提取试剂盒纯化的核酸可适用各种常规模操作,包括酶切、PCR文库建立、分子标记、southern杂交试验。

磁珠法全血DNA提取试剂盒有什么特点?
1.耗时少:全血DNA提取周期在40分钟左右
2.操作简便:提取过程无需离心
3.无毒无害:试剂中不含有氯仿,酚等有毒物质
4.效果稳定:OD260/OD280均在1.7-2.0之间。

基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒及其使用方法[发明专利]

基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒及其使用方法[发明专利]

(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201610036794.6(22)申请日 2016.01.20C12N 15/10(2006.01)(71)申请人苏州英芮诚生化科技有限公司地址215500 江苏省苏州市常熟高新技术产业开发区东南大道68号1幢(72)发明人吴巧 胡馨予 赵青玲 尚春庆曲峰(74)专利代理机构北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369代理人史霞(54)发明名称基于磁珠法提取血液基因组DNA 的试剂盒及其使用方法(57)摘要本案涉及基于磁珠法提取血液基因组DNA 的试剂盒,包括细胞裂解液、蛋白酶k 溶液、磁珠分散液、第一清洗液、第二清洗液和洗脱液;细胞裂解液包括有胍类化合物、氯化钠和吐温20;磁珠分散液中的磁珠采用内核为超顺磁性四氧化三铁,表面包覆有硅羟基,粒径为200-800nm 的磁珠;第一清洗液包括有Tris 碱、EDTA、异丙醇和水;第二清洗液为乙醇溶液;洗脱液为Tris 碱或去离子水。

本案的试剂盒操作简洁,可使血液基因组DNA 提取工作效率得到大幅度提升;无需对红细胞进行预处理,直接采用细胞裂解液裂解血液细胞后,即可加入磁珠分散液结合基因组DNA,提取量高,适用于高通量实验。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书6页 附图1页CN 105524917 A 2016.04.27C N 105524917A1.一种基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒,其特征在于,包括有分别独立分装的细胞裂解液、蛋白酶k溶液、磁珠分散液、第一清洗液、第二清洗液和洗脱液;其中,所述细胞裂解液包括有胍类化合物、氯化钠和吐温20;所述胍类化合物选自盐酸胍、异硫酸氰胍或其组合;所述磁珠分散液中的磁珠采用内核为超顺磁性四氧化三铁,表面包覆有硅羟基,粒径为200-800nm的磁珠;所述第一清洗液包括有Tris碱、EDTA、异丙醇和水;所述第二清洗液为乙醇溶液;所述洗脱液为Tris碱或去离子水。

磁珠法小量全血DNA提取试剂盒简介

磁珠法小量全血DNA提取试剂盒简介

MagDNA TM小量全血DNA提取试剂盒( 磁珠F型)适合:100-200µl新鲜全血Cat. # 145101(50 preps)145102(100 preps)145103(200 preps)Note: for laboratory research use only.MagDNA TM小量全血DNA提取试剂盒( 磁珠F型)适用范围:适用于手动快速提取各种抗凝全血基因组DNA,无需蛋白酶消化,也适用于SPRI-TE;雅培m2000;MagNA Pure LC 2.0 System;BioRobot MDx Workstation;King Fisher(ml);King Fisher 96 process等系列核酸提取仪,适合大规模提取!试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次100次200次10 x ErythrocyteLysis Buffer 室温10ml 20 ml 40 mlLysis Buffer A 室温16ml 35 ml 65 ml Solution AB 室温6ml 12ml 24 ml Binding Buffer PQ 室温20 ml 40 ml 80 mlWash Buffer B 室温10 ml 20ml 35ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇(2倍)Wash Buffer C 室温10 ml 20ml 30ml第一次使用前按说明加指定量乙醇(3倍)Wash Buffer D 室温10 ml 20ml 30ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇(3倍)Elution Buffer E 室温10ml 15ml 25ml MagDNA磁珠室温 1.2ml 1.2ml X 2 1.2ml X 4本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:1.Lysis Buffer A或者Wash Buffer B低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明一、试剂盒组成及存储条件:1.试剂盒包括蛋白酶K、缓冲液、洗涤缓冲液、脱水溶液等。

2.试剂盒应存放在4℃以下避光干燥处,避免冻结。

二、实验前准备:1.准备所需的实验耗材和设备,如离心管、恒温振荡器、离心机等。

2.取出全血样品,可以是新鲜全血或已离心制备的全血细胞。

三、DNA提取步骤:1.取出全血样品,用洗涤液洗涤细胞沉淀并离心收集,去除红细胞。

2.加入蛋白酶K将细胞裂解,释放DNA。

3.加入缓冲液和脱水溶液,沉淀DNA并洗涤。

4.最终稀释DNA并保存在适当的条件下。

四、实验注意事项:1.操作过程中需注意无菌操作,避免污染。

2.加入蛋白酶K的量应准确控制,不要过多或过少。

3.混合溶液时需轻轻摇匀,避免气泡的产生。

4.稀释保存DNA时,需使用无核酸酶的载体溶液,如TE缓冲液。

五、质控及结果分析:1.可以通过琼脂糖凝胶电泳或比色法检测提取的DNA质量。

2.检测DNA浓度和纯度,确保提取的DNA适用于后续实验。

3.可以保存提取好的DNA样品,以备后续实验使用。

六、应用领域:1.该试剂盒适用于从全血样品中提取DNA,可用于基因分析、疾病诊断、遗传研究等领域。

2.可以用于个体基因检测、种群遗传学研究、药物反应性研究等。

总结:全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样品中提取DNA的重要工具,操作简便、提取效率高。

在实验中需注意操作规范,保证提取的DNA质量和纯度。

该试剂盒广泛应用于科研领域,为基因研究和临床诊断提供了有力支持。

希望上述使用说明能够帮助用户正确、高效地使用全血基因组DNA提取试剂盒。

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明DNA提取是生物学、遗传学和分子生物学等领域的一项重要实验操作。

全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样本中提取DNA的试剂盒,本文将详细介绍其使用说明。

一、试剂准备:1.预先将试剂盒从-20℃的冷冻器中转移到4℃的冰箱中解冻,取出所需试剂。

2.将试剂A和试剂B随机摇匀,避免沉淀的产生。

二、样本处理:1.取出需要提取DNA的全血样本,将其加入离心管中。

2.加入适量的蒸馏水和样本量相等体积的10%梳酸混匀,使血细胞溶解。

三、样本裂解:1.准备离心管和4℃的离心机。

2.加入适量的样本处理试剂(试剂A和试剂B),混匀离心管。

4.将裂解后的样本置于冰上放置10分钟。

四、DNA纯化:1.准备离心管和4℃的离心机。

2.将样本离心管中的上清转移至新的离心管中,并加入适量的试剂C,混匀并置于冰上放置5分钟。

4.弃去上清,避免悬浮细胞的干扰。

五、脱脂:1.准备脱脂离心管和4℃的离心机。

2.加入适量的试剂D,混匀离心管,置于冰上放置5分钟。

4.弃去上清,避免沉淀的干扰。

六、洗涤:1.准备洗涤离心管和4℃的离心机。

2.加入适量的试剂E和试剂F,混匀离心管,置于冰上放置5分钟。

4.弃去上清,避免沉淀的干扰。

七、DNA溶解:1.准备离心管和4℃的离心机。

2.加入适量的试剂G,混匀并置于冰上放置5分钟。

八、DNA浓缩:1.准备离心管和4℃的离心机。

2.加入适量的试剂H,混匀离心管,置于冰上放置5分钟。

4.弃去上清,避免纯化后的DNA丢失。

九、DNA溶解:1.加入适量的蒸馏水,混匀使DNA溶解。

十、质检:1.准备质检相关设备和试剂。

2.使用紫外分光光度计检测DNA纯度和浓度。

3.对提取的DNA进行PCR扩增、酶切鉴定等质检步骤。

以上就是全血基因组DNA提取试剂盒的使用说明,希望对您在实验中提取DNA有所帮助。

在操作中,请严格按照试剂盒说明书和实验室操作规范进行操作,确保实验的准确性和可重复性。

磁珠法核酸提取试剂盒说明书

磁珠法核酸提取试剂盒说明书

磁珠法核酸提取试剂盒说明书磁珠法核酸提取试剂盒说明书在科学研究和临床诊断中,核酸提取是至关重要的一步。

随着技术的不断发展,磁珠法核酸提取试剂盒逐渐成为了研究人员和临床医生们的首选。

那么,什么是磁珠法核酸提取试剂盒?它的工作原理是什么?在使用过程中需要注意哪些事项?本文将从广度和深度两方面进行全面评估,带你深入了解磁珠法核酸提取试剂盒。

一、磁珠法核酸提取试剂盒的工作原理磁珠法核酸提取试剂盒是利用磁珠的磁性特性,结合核酸和其他杂质的不同特性,通过磁场的作用将目标核酸分离提取出来的一种试剂盒。

具体步骤包括细胞裂解、磁珠与核酸结合、洗涤和最终洗脱等过程。

通过这一系列步骤,能够快速、高效地从样本中提取出纯度较高的核酸,为后续的分子生物学实验和临床检测打下基础。

磁珠法核酸提取试剂盒本质上是一种高度精密的技术产品,涉及到多方面的知识和技术。

在使用过程中需要严格按照说明书上的操作步骤进行,以确保提取的核酸具有良好的质量。

二、磁珠法核酸提取试剂盒的使用注意事项在使用磁珠法核酸提取试剂盒时,有一些注意事项是需要特别关注的。

首先是样本的处理和裂解步骤,不同样本的裂解条件可能会有所不同,需要根据具体情况进行调整。

其次是磁珠的使用,需要注意磁珠的悬浮情况和使用量,以确保能够有效地结合目标核酸。

在洗涤和洗脱步骤中,也需要注意洗涤缓冲液的温度和使用次数,以及洗脱缓冲液的使用量和温度等细节。

只有严格按照说明书上的要求进行操作,才能够得到高质量的核酸提取物。

三、磁珠法核酸提取试剂盒的个人观点和理解从个人角度来看,磁珠法核酸提取试剂盒无疑是一种高效、便捷的核酸提取工具。

相比传统的有机溶剂提取法和硅基膜法,磁珠法核酸提取试剂盒具有操作简便、提取效率高、纯度好等优点。

在日常的科研工作或临床诊断中,使用磁珠法核酸提取试剂盒能够大大提高工作效率,节约时间和成本。

总结回顾通过本文对磁珠法核酸提取试剂盒的深度评估,相信读者已经对这一产品有了更全面、深刻的理解。

如何选择血液DNA提取试剂

如何选择血液DNA提取试剂

如何选择血液DNA提取试剂目前,主流的血液DNA提取方法有磁珠法和硅胶膜离心柱法,这两种方法各有利弊。

磁珠法可以针对大批量样本的处理,满足自动化工作的需要,但是提取核酸纯度低,提取得率低;硅胶膜离心柱法提取的核酸纯度高,提取效率高,对目标基因或DNA含量较低的样本提取,具有比较明显的优势,但不易自动化操作。

一般来说,科研用户的样本量不会太多,首要的还是提高核酸纯度和提取效率,因而科研用户主要还是选择离心柱法。

大型医疗机构样本量较多,一般都会选择自动化的磁珠法。

但一些样本量不太多的临床医院或检测机构,出于方便和准确诊断的要求,还是会选择离心柱法。

特别地,对一些低丰度样本的检测,最好不要用磁珠法,最好选择离心柱法,否则可能会导致假阴性结果。

就离心柱法来说,目前使用较多的还是商品化试剂盒,面对众多的品牌,如何选择适合自己实验的提取试剂呢?1.血液核酸提取的得率要高。

全血中提取基因组DNA实际上就是从有核的白细胞中提取DNA,通常利用红细胞与白细胞膜结构的差异,先使红细胞裂解,离心后收集白细胞;再裂解白细胞,使膜蛋白和核蛋白变性,释放出DNA,再将DNA提取出来。

血液核酸提取得率的高低,对离心柱法而言,主要取决于离心柱对核酸的吸附能力和洗脱能力以及裂解液的裂解消化能力。

离心柱的硅胶膜DNA吸附性能好、裂解液消化能力强、洗脱液洗脱能力好,血液核酸提取的得率就高。

如果离心柱硅胶膜吸附能力不好,裂解液和洗脱液没有经过很好的优化,血液DNA提取的得率就不高。

至于血液DNA提取得率的确定,我们可以使用紫外分光光度法,但是不能作为判断得率的唯一标准,最好还是要做个PCR或荧光定量。

血液的量与提取的核酸量成正比,如果要提高血液核酸得率,可通过增加血液的量来实现。

一般先提取200ul的全血,如结果不理想可考虑增加血液量。

但如果增加血液量还不能得到满意结果,应及时考虑更换试剂盒。

目前国内常用的血液核酸提取试剂有Qiagen、Biog等。

5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒

5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒

5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒磁珠法全血DNA提取试剂盒是基础实验室中必不可少的实验试剂之一。

它通过使用磁性珠子来分离和纯化DNA,可以广泛应用于分子生物学领域的DNA提取、PCR扩增、测序、基因克隆等实验中。

在使用这种试剂盒进行实验前,你需要了解以下五个问题:问题一:磁性珠是什么?磁性珠是指粒径在1-5 μm之间的超顺磁性珠子,表面带有活性分子,如硅胶、羧基、氨基等。

这些珠子在外加磁场作用下可以迅速聚集和分散,从而实现DNA的分离和纯化。

问题二:为什么选择磁珠法提取DNA?与传统的蛋白酶K法、碱裂解法、盐异相法等DNA提取方法相比,磁珠法提取DNA速度更快、效率更高、质量更好。

另外,磁珠法还可以根据实验需求进行精确控制,比如可以通过更改磁性珠的大小、表面活性分子的种类和浓度来控制DNA的提取效率和纯化程度。

问题三:磁珠法全血DNA提取试剂盒能从哪些样本中提取DNA?磁珠法全血DNA提取试剂盒广泛适用于各种类型的血液样本中DNA的提取和纯化,包括静脉全血、EDTA血、血浆、血清等。

另外,该试剂盒还可以用于提取其他类型的组织样本如生物组织、细胞等。

问题四:磁珠法全血DNA提取试剂盒有哪些优点?1.操作简便:所有的操作步骤都可以在常温下完成,不需要长时间的酶切或蛋白酶消化等特殊步骤,省时省力。

2.提取效率高:磁珠法全血DNA提取试剂盒的提取效率比传统方法高,可以从微量的样本中提取出高质量的DNA。

3.可靠性高:该试剂盒利用磁性珠的特殊性质,提供了可靠高效稳定的DNA提取方法。

4.成本低廉:磁珠法全血DNA提取试剂盒价格相对较低,而且每个试剂盒能提取的DNA量相对较多,节省了实验成本。

问题五:使用磁珠法全血DNA提取试剂盒需要注意哪些问题?1.样本来源和采集:采集样本时需要避免污染,确保样本的稳定性。

2.数据标准化:为确保在不同实验室、不同操作人员的实验数据可靠性,需要制定管理标准化流程。

磁珠法血液DNA提取试剂盒-说明书

磁珠法血液DNA提取试剂盒-说明书

.血液DNA提取试剂盒(磁珠法)【简介】血液DNA提取试剂盒(磁珠法)适用血液的基因组DNA提取,尤其适用于人类以及哺乳动物的血液基因组DNA提取。

配合核酸自动纯化仪(GNT-SI系列),可实现一键式、自动化操作【参数】名血液基因DN提取试剂GNT-B02货号100T 规格2℃—储存条件30℃360保质期天【组分】100T 规格30ml Buffer LB120mg Buffer LB21ml Magnetic Beads80ml Buffer WB I30ml Buffer WB II11mlElution Buffer【血液DNA提取试剂盒(磁珠法)操作说明】(以实际说明书为准)1、取抗凝全血到离心管中,加入Buffer LB1、Buffer LB2,混合均匀后,将离心管置于水浴锅中,水浴30min2、将离心管取出,加入异丙醇,Magnetic Beads。

颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液3、将离心管从磁力架上取下,加入Buffer WB I。

颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液4、将离心管从磁力架上取下,加入Buffer WB II,颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液5、重复步骤5一次,并将废液完全吸弃干净6、将离心管从磁力架上取下,室温下开盖静置5min7、加入Elution Buffer,磁珠完全混匀后,置于水浴锅中,水浴10min8、将离心管置于磁力架,磁分离,小心吸取上清至新的离心管中,进行下游实验【特点】1、得率高:200ul人类抗凝全血的普遍产量可达3-8ug2、纯度高:OD260/280稳定在1.8左右,OD260/230稳定在1.8以上3、操作简便:手工提取过程无需离心4、自动化:具有成熟的自动化方案,可配合核酸自动纯化仪,实现一键式操作【提取效果】1 / 2.2 / 2。

磁珠法提取dna的原理及注意事项

磁珠法提取dna的原理及注意事项

磁珠法提取dna的原理及注意事项以磁珠法提取DNA的原理及注意事项一、引言DNA提取是分子生物学和遗传学研究的基础步骤之一,它是从生物样本中分离纯净的DNA分子。

目前,有多种DNA提取方法可供选择,其中磁珠法是一种常用且高效的方法。

本文将介绍磁珠法提取DNA的原理及注意事项。

二、原理磁珠法提取DNA的原理基于磁性颗粒与DNA的亲和性。

一般情况下,磁珠表面会经过修饰,使其具有特定的亲和性,可以与DNA 分子结合。

DNA提取的主要步骤包括细胞破碎、DNA与磁珠结合、洗涤和DNA的洗脱。

1. 细胞破碎需要将待提取DNA的细胞样本进行破碎。

破碎方法可以是物理方法(如超声波破碎)或化学方法(如蛋白酶消化)。

破碎后,细胞内的DNA被释放到溶液中。

2. DNA与磁珠结合接下来,将磁珠加入到含有DNA的溶液中。

磁性颗粒的表面修饰使其能够与DNA结合。

通过搅拌或磁力的作用,磁珠与DNA结合形成复合物。

此时,DNA会被吸附在磁珠表面。

3. 洗涤为了去除杂质和污染物,需要进行洗涤步骤。

洗涤液的选择和洗涤次数会影响DNA纯度和提取效果。

一般来说,洗涤液中会含有特定浓度的盐和洗涤缓冲液。

4. DNA的洗脱最后一步是将DNA从磁珠上洗脱下来。

这一步通常通过改变溶液的条件来实现,如改变pH值或加入特定的洗脱缓冲液。

洗脱后,可以得到纯净的DNA溶液,可以用于后续的实验或分析。

三、注意事项在进行磁珠法提取DNA时,需要注意以下几个方面:1. 样本的选择和处理样本的选择对提取DNA的效果有重要影响。

首先,应选择新鲜的样本,并尽量避免冷冻和解冻过程。

其次,不同样本的DNA含量和质量也会有所差异,因此在提取之前,需要根据实际情况调整提取试剂盒中的试剂用量。

2. 避免污染在DNA提取过程中,污染是一个常见的问题。

为了避免污染,应使用无酶、无RNase和无DNA的试剂和工具。

此外,实验操作中要注意佩戴手套、使用滤芯和避免气溶胶污染。

3. 操作条件的控制磁珠法对操作条件的控制较为严格,包括温度、离心速度和洗涤缓冲液的配制等。

全血基因组DNA提取试剂(磁珠法、预分装)产品简介

全血基因组DNA提取试剂(磁珠法、预分装)产品简介

全血基因组DNA提取试剂(磁珠法、预分装)产品简介
产品简介:
本产品采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,用于全血基因组DNA、血清/血浆游离DNA、组织匀浆/细胞悬浮液基因组DNA的提取、富集、纯化步骤,其处理后的产物用于临床体外检测使用。

整个过程操作便捷,适合于手工操作和各种自动化核酸提取平台。

尤其在磁棒式提取设备中优势更加突出,不需要仪器外裂解,也不需要中间暂停加液,程序运行完即可提取出基因组DNA。

货号(产品型号):160835
包装:
产品特点:
1.该产品提取效率高,整个提取过程仅仅需要15分钟。

2.该产品提取的基因组DNA得率高、纯度高,可用于下游各种分子生物学实验。

3.该产品灵敏度高、稳定性好,在全血基因组DNA提取应用中受到客户的广泛认可。

4.可应用于各种自动化平台、实现全自动或半自动操作。

5.裂解结合一步进行。

即使是使用磁棒式半自动提取平台,也不需要离心,不需要仪器外裂解,不需要中间暂停加醇,可以真正实现直接加样品上机后程序运行完即可提取出基因组DNA。

储存条件:
室温避光保存,有效期为12个月。

一种磁珠法提取全血DNA的试剂盒及其使用方法[发明专利]

一种磁珠法提取全血DNA的试剂盒及其使用方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011536872.1(22)申请日 2020.12.23(71)申请人 苏州中科先进技术研究院有限公司地址 215123 江苏省苏州市工业园区兴浦路333号1幢201室(72)发明人 王文婧 (74)专利代理机构 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316代理人 魏毅宏(51)Int.Cl.C12N 15/10(2006.01)(54)发明名称一种磁珠法提取全血DNA的试剂盒及其使用方法(57)摘要本发明提供了一种磁珠法提取全血DNA的试剂盒及其使用方法,该试剂盒包括裂解结合液、第一洗涤液、第二洗涤液和洗脱液;其中,所述裂解结合液包括以下原料:盐酸胍、尿素、乙酸钠、氯化钠和曲拉通X ‑100。

本发明的磁珠法提取全血DNA的试剂盒,利用磁珠与核酸结合大大提高核酸纯度,该试剂盒可以高效提取全血中基因组DNA,提取产物可用于下游进一步实验;本发明的磁珠法提取全血DNA的试剂盒的使用方法,无需对全血样本进行预处理,减少提取时间;提取过程中未使用有毒试剂,操作安全。

权利要求书2页 说明书6页CN 112553193 A 2021.03.26C N 112553193A1.一种磁珠法提取全血DNA的试剂盒,其特征在于,包括裂解结合液、第一洗涤液、第二洗涤液和洗脱液;其中,所述裂解结合液包括以下原料:盐酸胍、尿素、乙酸钠、氯化钠和曲拉通X‑100。

2.如权利要求1所述的磁珠法提取全血DNA的试剂盒,其特征在于,所述第一洗涤液包括以下原料:盐酸胍、三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸、盐酸和异丙醇;所述第二洗涤液包括以下原料:乙酸钠、乙酸铵和冰乙酸。

3.如权利要求1所述的磁珠法提取全血DNA的试剂盒,其特征在于,所述洗脱液包括三羟甲基氨基甲烷和乙二胺四乙酸。

4.如权利要求1所述的磁珠法提取全血DNA的试剂盒,其特征在于,所述裂解结合液中盐酸胍的浓度为4~8mol/L、尿素的浓度为5~10mmol/L,乙酸钠的浓度为80~100mmol/L,氯化钠的浓度为800mmol/L,曲拉通X‑100的体积浓度为1%。

全血基因组DNA提取(磁珠法)的常见问题汇总

全血基因组DNA提取(磁珠法)的常见问题汇总

全血基因组DNA提取(磁珠法)的常见问题汇总(一)文章来源:洛阳吉恩特生物科技有限公司随着磁珠法核酸提取技术的不断普及,越来越多的实验室会用到磁珠进行DNA提取,在使用的初期阶段,也会遇到各种各样的问题,近期就有许多老师和我们讨论如何利用磁珠进行全血基因组DNA的提取,我们对其中的常见问题进行了总结,供各位老师参考。

1、上样量与裂解体系上样量是DNA提取的经典问题,无论用什么方法,首先要解决的就是上样量问题,不同的上样量对应不同的试剂体系,上样量过多或多少都会影响裂解的效果。

以GNT-B02的磁珠法全血基因组DNA提取试剂盒为例,标准上样量为200ul,上下浮动不超过100ul,搭配的裂解液用量为400ul,有些老师由于实验要求,需要大体积的上样量,这在实际操作中,就需要对磁珠法的操作流程进行改良,一般的改良思路是按比例放大裂解体系;但有些实验的上样量达到毫升以上,这种情况下,就不能再简单的放大裂解体系了,需要先用红细胞裂解液对样品进行处理,将上样体积浓缩后,再进行磁珠法操作流程的优化。

2、磁珠结团磁珠结团是经常遇到的现象,是由磁珠本身特性和磁珠所处试剂环境两方面造成的,有些磁珠不仅在全血DNA提取过程中会结团,其他的样本也同样会结团,有些老师在初次遇到这种现象的时候会感觉不适应,其实结团现象可以用来提前预判实验结果,结团往往是吸附了大量核酸,如果哪次实验没有结团,本次的实验结果或许会不太好,不过也不能一概而论,杂质太多也是引起磁珠结团的原因。

通过修改试剂配方,优化试剂配置,可以改善磁珠的结团现象,但是该工作较为复杂,需要对各种参数进行调整。

不过对于磁吸速度较慢的磁珠,结团后能明显提高磁吸速度,提高实验效率,只要磁珠在洗脱步骤能够分散,而且结果也在标准范围内,磁珠结团并不会影响整体效果。

3、得率低得率是影响下游实验的最直接因素,根据我们的经验,200ul的全血,得率一般在3ug以上,用GNT-B02的试剂盒,能稳定在5ug以上,有些老师的实验结果只有2ug左右,甚至更低,这就需要重点排查两个环节,一是裂解环节,二是洗脱环节,若是裂解环节的问题,往往会是在结合的时候磁珠不结团,或在洗涤的时候上清液颜色为深黄色或红色,这种情况下,更换全新的裂解液,并且严格按照SOP操作是较为效率的解决办法。

磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法[发明专利]

磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810946624.0(22)申请日 2018.08.20(71)申请人 上海睿璟生物科技有限公司地址 201100 上海市闵行区召楼路3632号2幢5层(72)发明人 包文静 金安娜 高伙妮 龚伟 (51)Int.Cl.C12N 15/10(2006.01)(54)发明名称磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法(57)摘要本发明公开了磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法,包括以下步骤:取100μL血液样品,加入300μL细胞裂解液,混匀后室温孵育5min,12000rpm离心1min,去除上清液;加200μL 裂解液和10μL蛋白酶K,混匀后在56℃、800rpm 的条件下孵育15min;放置5min后离心,转移上清并在其中加入100μL磁珠混匀孵育5min,离心,放置磁力架上至溶液澄清;移除上清后加入乙醇溶液混匀,放在磁力架上离心去除乙醇溶液后静置至磁珠不反光;加入30μL的无核酸酶水低盐缓冲液,静置后置于磁力架上2min,将上清转移至新的样品管中备用。

本方法提取过程不涉及有毒有害试剂,操作安全。

权利要求书1页 说明书2页CN 110846307 A 2020.02.28C N 110846307A1.一种磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取100μL血液样品到样品管中,然后加入300μL细胞裂解液,混匀后室温孵育4-6min,在10000-12000rpm条件下室温离心1-2min,去除上清液;(2)在得到的沉淀物中按顺序加200μL裂解液和10μL蛋白酶K,混合均匀后在温度为55-57℃、转速800-1000rpm的条件下孵育12-15min;(3)室温放置5-8min后,在10000-12000rpm条件下室温离心1-2min,将上清液转移至新的样品管中,在样品管中加入100μL磁珠,使用涡旋混匀器涡旋混匀,室温静置孵育5-7min,经过离心后将样品管于磁力架上至溶液澄清;(4)移除上清液,然后再加入500μL 75%乙醇溶液后继续涡旋混匀,然后放在磁力架上30-40S,重复本步骤一次后进行离心,然后使用移液器将底部残留乙醇溶液去除,室温静置2-5min至磁珠不反光;(5)加入30μL的无核酸酶水/低盐缓冲液,把样品管从磁力架取下重悬磁珠,室温静置4-6min,再将样品管置于磁力架上2-3min,然后用移液器吸取上清液并将其转移至一个新的样品管中,定量质检后备用。

一种磁珠法提取dna的试剂盒及提取方法

一种磁珠法提取dna的试剂盒及提取方法

一种磁珠法提取dna的试剂盒及提取方法下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。

一种磁珠法提取dna的试剂盒及提取方法该文档下载后可定制修改,请根据实际需要进行调整和使用,谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document 一种磁珠法提取dna的试剂盒及提取方法 can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!DNA是生物体遗传信息的载体,对于生物学研究和医学诊断具有重要的意义。

磁珠法dna提取纯化试剂盒检测通则

磁珠法dna提取纯化试剂盒检测通则

磁珠法dna提取纯化试剂盒检测通则
磁珠法DNA提取纯化试剂盒是一种常用的分子生物学实验试剂盒,用于从生物样本中提取和纯化DNA。

下面是该试剂盒的检测通则:
一、试剂盒概述
磁珠法DNA提取纯化试剂盒是一种高效、快速、简便的DNA提取和纯化试剂盒,适用于多种生物样本的DNA提取和纯化。

二、实验步骤
1. 样本裂解:将生物样本加入裂解缓冲液中,经过高温或化学处理使细胞壁破裂,释放DNA。

2. DNA结合:将磁珠加入裂解液中,磁珠表面的DNA结合试剂与DNA结合形成复合物。

3. 磁珠分离:将磁珠复合物通过磁场分离,将未结合的杂质分离出去。

4. 洗涤:用洗涤缓冲液洗涤磁珠复合物,去除杂质。

5. DNA洗脱:用低盐缓冲液或水洗脱DNA。

三、注意事项
1. 样本应该新鲜,保存在-80℃以下。

2. 样本裂解应该充分,避免DNA断裂。

3. 磁珠复合物分离时应该注意磁珠的数量和磁力的强度,避免DNA的损失。

4. 洗涤缓冲液的pH值应该控制在7.5-8.5之间,避免DNA的损失。

5. 洗脱液的温度应该控制在60℃以下,避免DNA的降解。

以上是磁珠法DNA提取纯化试剂盒的检测通则,实验者在使用该试剂盒时应该严格按照实验步骤和注意事项进行操作,以保证实验结果的准确性。

磁珠法病毒DNARNA提取试剂盒使用说明书原理及用途

磁珠法病毒DNARNA提取试剂盒使用说明书原理及用途

磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒使用说明书原理及用途本试剂盒利用磁珠的特殊分离作用,采用独特的缓冲液系统,从组织研磨液、血清、血浆、淋巴液、无细胞体液、细胞培养上清液、尿液或各种病毒保存液中分离纯化高质量病毒DNA或RNA。

特殊包埋的磁珠,在一定条件下对核酸具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。

提取的病毒DNA/RNA得率高、纯度高、质量稳定可靠。

使用本试剂盒纯化的核酸可适用于各种常规操作,包括反转录、PCR、RT-PCR、荧光定量PCR、荧光定量RT-PCR等各种下游实验。

试剂盒组成储存条件1. 所有缓冲液在室在温条件下(15–25℃)保存。

2. 在原始状态下,Carrier RNA冻干粉可在室温条件下储存至有效期;已配好的工作液时必须按照“Carrier RNA工作液的配制”要求进行配制、储存、使用。

3. 有效期:1年样品处理1.组织样品处理:每份组织分别从三个不同的位置称取样品约1g,用手术剪剪碎混匀后取0.05 g于研磨器中研磨,加入1.5 mL生理盐水继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液用于检测。

2.排泄物样品处理:取约0.05g排泄物于1.5 mL灭菌离心管中,加入1mL生理盐水涡旋振荡,8000 rpm离心2 min,取上清液用于检测。

3.其它液体样品:直接取上清液用于检测注意事项(请务必在使用本试剂盒之前仔细阅读)1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的核酸片段较小且提取量降低。

2.若缓冲液RLCK中有沉淀,可于37℃水浴重新溶解,摇匀后使用。

3.需要用户自行准备的试剂:生理盐水、异丙醇、无水乙醇。

4.实验前应仔细阅读说明书,在提取核酸时提前配制缓冲液RLCK、Carrier RNA工作液、漂洗液PWI和漂洗液PWII工作液。

缓冲液的配制1.缓冲液RLCK使用前应加入5 mL异丙醇,并在瓶签上勾选已配制标识,以方便操作时确认。

磁珠法提取dna的原理及注意事项

磁珠法提取dna的原理及注意事项

磁珠法提取dna的原理及注意事项以磁珠法提取DNA的原理及注意事项DNA提取是分子生物学研究中的一项重要技术,它用于从生物样本中分离纯化DNA。

磁珠法是目前常用的一种DNA提取方法,其基本原理是利用磁珠的特性将DNA与其他组分分离。

磁珠法提取DNA的原理主要分为以下几个步骤:1. 细胞破碎:首先,需要将待提取DNA的细胞进行破碎,使细胞内的DNA释放出来。

这一步可以通过机械方法、化学方法或酶解方法来完成。

常用的方法包括机械破碎、冻融、酶解等。

2. DNA结合:将破碎后的细胞溶液与磁珠进行充分混合,使DNA 与磁珠表面上的特定试剂结合。

通常,磁珠表面上会涂上一层特定的试剂,如硅胶或离子交换树脂。

这些试剂能与DNA分子相互作用,使DNA与磁珠发生结合。

3. 分离:通过磁场的作用,将带有结合DNA的磁珠从混合溶液中分离出来。

由于磁珠具有磁性,可以利用外加磁场的力将其吸附到管壁上,然后将上清液去除。

这样就实现了DNA与其他组分的分离。

4. 清洗:将分离出来的磁珠进行洗涤,去除残留的杂质和试剂。

洗涤过程可以使用一系列缓冲溶液,如盐溶液或酒精溶液,以去除杂质和试剂的残留。

5. 解吸:最后,将纯化的DNA从磁珠上解吸下来,得到纯净的DNA溶液。

解吸过程可以使用适当的缓冲溶液或水来完成。

在进行磁珠法提取DNA时,还需要注意以下几个问题:1. 样本的选择:不同类型的样本可能需要不同的提取方法和试剂。

在选择样本时,需要考虑样本的性质和要求,选择合适的提取方法。

2. 试剂的选择:磁珠表面的试剂种类和质量对提取效果有重要影响。

需要选择合适的试剂,并确保其质量可靠。

3. 操作环境的洁净:DNA提取对操作环境的洁净要求较高,避免污染和杂质的干扰。

在提取过程中,需要使用无菌操作的仪器和试剂,并保持操作台面的清洁。

4. 操作步骤的严谨:DNA提取的每一个步骤都需要严格按照操作要求进行,避免操作失误和交叉污染。

5. 保存条件:提取得到的DNA需要在适当的条件下进行保存,以保持其稳定性和完整性。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

5个问题让你彻底了解磁珠法全血DNA提取试剂盒
磁珠法全血DNA提取试剂盒是什么?
生物磁珠是一种新型的功能化固体载体,其表面包被有活性基团,可以与多种生物活性物质发生偶联,兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点,在外磁场的作用下可以定向移动和集中,当撤去外磁场后,稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体中,从而使固液相的分离变的十分快捷方便,通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶向物质。

磁珠法全血DNA提取试剂盒采用特殊包被的生物磁珠,通过独特分离作用的缓冲液系统,从全血中分离纯化高质量核酸。

磁珠在一定条件下对目的核酸具有很强的亲和力,当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。

整个过程不涉及有毒试剂,操作环境更加便利,提取的核酸纯度高、质量可靠。

使用磁珠法全血DNA提取试剂盒纯化的核酸可适用各种常规模操作,包括酶切、PCR文库建立、分子标记、southern杂交试验。

磁珠法全血DNA提取试剂盒有什么特点?
1.耗时少:全血DNA提取周期在40分钟左右
2.操作简便:提取过程无需离心
3.无毒无害:试剂中不含有氯仿,酚等有毒物质
4.效果稳定:OD260/OD280均在1.7-2.0之间
5.自动化:可配合国内外各类磁棒式核酸提取仪或核酸提取工作站,实现高通量提取
磁珠法全血DNA提取试剂盒的具体操作是什么?
1.裂解
取抗凝全血到1.5mLEP管中,加入BufferA、BufferB,混合均匀。

然后把EP管置于恒温水箱中温育15~20min。

2.结合
将EP管从温育设备中取出,离心后取上清,加入振荡混匀的磁珠结合液,颠倒混匀。

将EP管置于磁力架上进行磁分离,弃废液(吸净管盖及管底残液)。

3.洗涤
⑴加入洗涤液Ⅰ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑵加入洗涤液Ⅱ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑶重复步骤⑵一次;
⑷室温下开盖干燥。

4.洗脱
加入洗脱液,放置水浴锅中温育后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。

磁珠法全血DNA提取试剂盒优势是什么?
(1)生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应,能高效提取
DNA,满足微量生物样本DNA提取的要求。

(2)磁珠表面能够进行化学修饰,从而与DNA进行特异性吸附,去除样品DNA溶液中的抑制物质,如:有机溶剂、去污剂、金属离子、燃料等。

(3)生物磁珠表面功能团数量可以控制获得可提取DNA溶液的浓度信息,实现定量的要求。

(4)生物磁珠可以通过特殊的合成工艺使其具有超顺磁特性,因此,能够通过仪器进行自动化操作,满足数据库建设对大批量样本提取的需要,减少人为因素。

(5)用时少,操作简单,适用于大多数生物检材。

(6)低廉,便于广泛应用。

由于纳米生物磁珠合成采用的都是低价无机和有机原料。

无须特殊的仪器设备,使得最终的合成和研发成本都很低,符合我国的基本国情和经济现状。

(7)适应了建立DNA数据库所需的大量生物样本的提取,为我国DNA数据库的建设铺平了道路,打下了基础。

(8) 不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂,安全无毒,绿色环保。

与传统提取DNA法相比速度更快!纯度更高!一般情况下不需离心操作,单一样品多应在1h内提取完毕。

提取结果均能在凝胶电泳中看到明亮、单一的条带。

磁珠法DNA提取试剂盒应用领域是什么?
DNA提取试剂盒应用于以下领域:分子生物学;医学领
域;血站对献血人员的血液筛选;法医学领域;检验检疫领域;农业、林业、畜牧业、海洋生物以及中草药、花卉等领域;生物实验课教学。

磁珠法全血DNA提取试剂盒在国内的形势是什么?
国内外都在投身于磁珠法全血DNA提取试剂盒的研究与生产。

进口产品的价格一般是国内的3-5倍,而效果却与国内产品基本一致。

在国内,磁珠法全血DNA提取试剂盒的首家生产商是河南惠尔纳米科技有限公司,还有天根、金麦格、博坤、易瑞等公司,科研者在选择磁珠法全血DNA提取试剂盒的时候要选择以磁珠为核心产品的公司,这对售后咨询有很大帮助。

一、磁珠法全血DNA提取试剂盒简介
磁珠法全血DNA提取试剂盒采用特殊包被的生物磁珠,通过独特分离作用的缓冲液系统,从全血中分离纯化高质量核酸。

磁珠在一定条件下对目的核酸具有很强的亲和力,当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。

整个过程不涉及有毒试剂,操作环境更加便利,提取的核酸纯度高、质量可靠。

使用磁珠法全血DNA提取试剂盒纯化的核酸可适用各种常规模操作,包括酶切、PCR文库建立、分子标记、southern 杂交试验。

二、磁珠法全血DNA提取试剂盒的特点
1.耗时少:全血DNA提取周期在40分钟左右
2.操作简便:提取过程无需离心
3.无毒无害:试剂中不含有氯仿,酚等有毒物质
4.效果稳定:OD260/OD280均在1.7-2.0之间
5.自动化:可配合国内外各类磁棒式核酸提取仪或核酸提取工作站,实现高通量提取
三、磁珠法全血DNA提取试剂盒操作方法
1.裂解
取抗凝全血到1.5mLEP管中,加入裂解液,混合均匀。

然后把EP管置于恒温水箱中温育15~20min。

2.结合
将EP管从温育设备中取出,离心后取上清,加入振荡混匀的磁珠结合液,颠倒混匀。

将EP管置于磁力架上进行磁分离,弃废液(吸净管盖及管底残液)。

3.洗涤
⑴加入洗涤液Ⅰ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑵加入洗涤液Ⅱ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑶重复步骤⑵一次;
⑷室温下开盖干燥2min。

4.洗脱
加入洗脱液,放置水浴锅中温育后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。

四、磁珠法全血DNA提取试剂盒优势
(1)生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应,能高效提取DNA,满足微量生物样本DNA提取的要求。

(2)磁珠表面能够进行化学修饰,从而与DNA进行特异性吸附,去除样品DNA溶液中的抑制物质,如:有机溶剂、去污剂、金属离子、燃料等。

(3)生物磁珠表面功能团数量可以控制获得可提取DNA溶液的浓度信息,实现定量的要求。

(4)生物磁珠可以通过特殊的合成工艺使其具有超顺磁特性,因此,能够通过仪器进行自动化操作,满足数据库建设对大批量样本提取的需要,减少人为因素。

(5)用时少,操作简单,适用于大多数生物检材。

(6)低廉,便于广泛应用。

由于纳米生物磁珠合成采用的都是低价无机和有机原料。

无须特殊的仪器设备,使得最终的合成和研发成本都很低,符合我国的基本国情和经济现状。

(7)适应了建立DNA数据库所需的大量生物样本的提取,为我国DNA数据库的建设铺平了道路,打下了基础。

(8) 不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂,安全无毒,绿色环保。

与传统提取DNA法相比速度更快!纯度更高!一般情况下不需离心操作,单一样品多应在1h内提取完毕。

提取结果均能在凝胶电泳中看到明亮、单一的条带。

五、磁珠法全血DNA提取试剂盒的提取结果
六、磁珠法全血DNA提取试剂盒应用领域
磁珠法全血DNA提取试剂盒主要应用于大量全血样本的建库工作、血站对献血人员的血液筛选;法医学领域、检验检疫领域、生物实验课教学等。

七、磁珠法全血DNA试剂盒的形势
目前,国内外都在投身于磁珠法全血DNA提取试剂盒的研究与生产。

进口产品的价格一般是国内的3-5倍,而效果却与国内产品基本一致。

在国内,磁珠法全血DNA提取试剂盒的首家生产商是河南惠尔纳米科技有限公司,还有天根、金麦格、博坤、易瑞等公司,科研者在选择磁珠法全血DNA提取试剂盒的时候要选择以磁珠为核心产品的公司,这对售后服务有很大帮助。

相关文档
最新文档