类风湿因子(RF)测试：原理,步骤,解释和临床意义
实验四类风湿因子检测讲解
类风湿因子的检测
•
类风湿因子（RF）是一种抗人或动物IgG分
子Fc片段抗原决定簇的抗体，是以变性IgG为靶
抗原的自身抗体。RF最初由Rose等（1984年）
在类风湿性关节炎（RA）患者血清中发现。RA
患者体内有产生RF的B细胞克隆，在变性IgG或
EB病毒的直接作用下可大量合成RF。RF主要为
混合，用肉眼观察有无凝集。
结果观察和判断
• 有凝集时红细胞相互聚集成团，出现大小不等的 颗粒。
注意事项
• 玻片应洁净、干燥、中性，以防止和减少 非特异性凝集。
• 室温低于10℃时，易出现冷凝集而造成的 结果。
临床意义
• 在美国风湿病协会所规定的类风湿性关节炎诊断标 准中，本试验是诊断标准之一。本试验对类风湿性 疾病的阳性率约80~90﹪。
• IgG型RF：在RA患者血清或滑膜液中IgG型RF的出现 与患者的滑膜炎、血管炎和关节的症状密切相关， 此类RF常伴随高滴度的IgM型RF在同一RA患者血清 或滑膜液中出现。在正常人及非RA患者中很难检测 出IgG型RF．IgG型RF在关节软骨表面的沉积可激活 补体引起关节的炎性损伤，因此滑膜液中检测出 IgG型RF比血清中检出IgM型RF更具病理意义。
胶乳凝集试验检测RF
• 概念：颗粒性抗原与相应抗体，或表面包 被抗原（抗体）的颗粒状物质与相应的抗 体（抗原）在电解质存在的条件下相互结 合，出现肉眼可见的凝集团现象。
正向间接凝集试验—测RF
原理（胶乳凝集试验）
• 类风湿因子（RF）是一组抗变性IgG的自身抗体， 它能与人或动物的变性IgG结合，而不与正常人 IgG发生凝集反应。
操作步骤
（1）在3块载玻片上分别加一滴RF阳性血清、 RF阴性血清及待检血清。
风湿三项PPT医学课件
1、概念及生物学功能
• 生物学功能
Ca 2 + 存在下与磷酸胆碱、 DNA 、 组 蛋白等结合。 CRP 可与凋亡坏死细胞膜脂 质双层结构破坏时暴露的磷脂或外部侵入 的细菌、 真菌、 寄生虫的细胞壁磷酸胆碱 结合 , 激活补体 , 调理吞噬功能 , 促使内源 性或外源性配体物质的清除 。
a、识别外来物质，激活补体系统。
常常是膝、髋、踝等下肢大关节，其次是
肩、肘、腕关节，手足的小关节少见；二
是疼痛游走不定，一段时间是这个关节发
作，一段时间是那个关节不适，但疼痛持
续时间不长，几天就可消退。血化验血沉 加快，抗“O”滴度升高，类风湿因子阴性。 治愈后很少复发，关节不遗留畸形，有的 病人可遗留心脏病变。
• 类风湿性关节炎则属于自身免疫性
（2） 急性风湿热
•a、概述
风湿热是指一种与链球菌感染有关的 自身免疫性结缔组织疾病。其特征为 全身结缔组织呈非化脓性炎症，主要 累及心脏和关节，其次为皮肤，浆膜 和血管，偶可侵犯中枢神经系统。临 床主要表现为心脏炎，关节炎，环形 红斑和舞蹈症等，常伴有发热。
（2） 急性风湿热
b、发病机制 1、分子模拟
疾病，虽不属于遗传性疾病，但可能 与遗传因素有关，多发生于20～40岁 女性。早期症状多为关节疼痛、肿胀、 发僵、活动不便，时轻时重，反复发 作，迁延不愈，常遗留骨关节强直畸 形。虽然少数病人可有心血管疾病，
但绝大多数病人无心脏症状，类风湿 因子阳性。
2、ASO临床意义
• 将类风湿的ASO分为四种血清类型：
1、概念及生物学功能
• 概念
C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是人类 重要的急性期反应蛋白，急性期浓度可升高上千 倍，循环中的CRP半衰期为19小时。
风湿类风湿实验室检查和临床意义
1、类风湿因子（RF）类风湿因子（RF）是由于细菌、病毒等感染因子，引起体内产生的以变性IgG（一种抗体）为抗原的一种自身抗体。
因为这种炕体首先发现于类风湿关节炎病人，并在类风湿关节炎病人血清中滴度较高，且持续时间较长，所以被命名为类风湿因子。
其实，凡是存在变性IgG，并能产生抗变性IgG自身抗体的人，在其血清或病变中均能测出类风湿因子，说明类风湿因子并不是类风湿关节炎的特异性自身抗体。
正常值阴性(＜20kU／L) 阴性 (乳胶凝集试验)临床意义阳性：类风湿性关节炎，Ｓｊｏｇｒｅｎ综合征，Ｗａｌｄｅｎｓｔｒθ－ｍ综合征，结节病，ＳＬＥ等。
偶尔见于传染性单核细胞增多症，急性感染性疾病和老年人（低滴度的ＲＦ）。
2、血沉[ESR]红细胞沉降率：是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称血沉。
在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内。
在许多病理情况下血沉明显增快。
红细胞沉降是多种因素互相作用的结果。
参考值魏氏（Westergren）法：成年男性0-15mm/h 成年女性0-20mm/h。
潘氏法：成年男性0-10mm/h 成年女性0-12mm/h。
临床意义贫血或血液被稀释血沉增快，是红细胞下降逆阻力减低，并不是红细胞聚集增强而增快。
通过红细胞比积的血沉方程Ｋ值，可排除贫血或血液稀释对血沉的影响。
Ｋ值高反映红细胞聚集性增强。
若血沉快，Ｋ值大，血沉一定是快；血沉快，Ｋ值正常，是由于红细胞比积低而引起血沉增快。
3、抗链球菌溶血素“O”抗链球菌溶血素“O”，简称抗“O”或ASO。
正常参考值：成人< 500U，儿童< 250U。
正常值因年龄、季节、气候、链球菌流行情况，尤其地区而有所差别。
类风湿时部分病人ASO升高在400单位以上。
Fichy等将类风湿的ASO分为四种血清类型：（1）抗链球菌溶血素型：ASO升高、RF阴性时，见于风湿病，（2）凝集型：ASO正常、RF阳性时，表示预后不良；（3）混合型：ASO升高，RF阳性，见于类风湿；（4）正常型：ASO阴性、RF阴性，可排除类风湿。
一文科普“类风湿因子”临床意义
一文科普“类风湿因子”临床意义定义类风湿因子(rheumatoid factor,RF)可分为IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型（注：在临床内科学中描述为四型，没有IgD型；但在实验室诊断学中描述为5型），是类风湿关节炎血清中针对IgG FC片段上抗原表位的一类自身抗体，其中IgM-RF是RF主要类型，也是临床上常规开展检测的RF。
类风湿因子阳性类风湿性关节炎（RA）患者较多伴有关节外表现，如皮下结节及血管炎等。
IgM型RF阳性率为60%-78%。
检测方法RF是在RA病人血清中发现，是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体，主要存在于RA患者的血清和关节液中，它是一种抗变性IgG的抗体，属IgM型。
可与IgGFc段结合。
RA病人和约50%的健康人体内都存在有产生RF的B细胞克隆，在变性IgG（或与抗原结合的IgG）或EB病毒直接作用下，可大量合成RF。
健康人产生RF的细胞克隆较少，且单核细胞分泌的可溶性因子可抑制RF的产生，故一般不易测出。
测定IgG、IgA、IgM类RF通常用ELISA间接法，即用热凝集兔IgG 包被反应板微孔，加入检样后，再分别加抗人IgG、IgA、IgM酶标记抗体，使反应后再与底物呈色。
目前许多实验室已开展应用比浊度法或ELISA法定量检测IgM-RF，前者的正常值范围约为>IgM-RF的常用检测方法是半定量的乳胶凝集试验，一般认为RF滴度<20 IU/ml。
类风湿因子临床意义（1）RF是诊断类风湿关节炎的分类标准之一，不是唯一标准，并非RA特有；作为血清阴性脊柱关节病区分标准；正常人2%阳性，老年人可达5%阳性，而且随年龄的增长RF阳性率可增高；RF与其他蛋白、半抗原有交叉反应；病后半年才产生，有关节外表现者如肺间质病变，RF滴度高。
持续高滴度RF提示RA疾病严重，预后差。
（2）RF与多种疾病相关，可概括为“CHRONIC”（见下）：CH (Chronic diseases) 慢性疾病，尤其是肝脏和肺的疾病如肝硬化、慢性活动性肝炎、弥漫性肺间质纤维化、结节病、巨球蛋白血症等；R (Rheumatoid arthritis) RA；O (Other rheumatic diseases) 其它风湿性疾病，如SLE，硬皮病（SSc），混合性结缔组织病（MCTD、干燥综合症（SS），多肌炎/皮肌炎（PM/DM）等；N (Neoplasms) 肿瘤；I (Infections) 感染，如AIDS，单核细胞增多症，寄生虫感染，慢性病毒感染，慢性细菌感染（结核、亚急性细菌性心内膜炎，其它）；C (Cryoglobulinemia) 冷球蛋白血症。
检验科生化类风湿因子RF测定的标准操作规程
检验科生化类风湿因子测定的标准操作规程【目的】体外检测血清类风湿因子(RF)含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理类风湿因子试剂是大小均一的聚苯乙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有抗人γ球蛋白，样本中类风湿因子与之结合后，发生凝聚反应，并产生浊度改变。
该浊度与样本中类风湿因子浓度成正比。
通过测定600nm处吸光度值的变化，即可测得样本中类风湿因子的浓度。
二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司RF试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）叠氮化钠 0.1%磷酸盐缓冲液 13 mmol/L试剂2（R2）叠氮化钠 0.1%抗人γ球蛋白致敏胶乳颗粒抗原2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准。
2.2校准间隔2.2.1试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
2.2.2室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。
风湿五项(抗“0”、RF、CRP、血沉、血尿酸)的
风湿五项（抗“0”、RF、CRP、血沉、血尿酸）的检验学相关知识及临床应用价值博爱生殖医学医院郑丽萍一、抗“O”：本试验是证明病人有无溶血性链球菌感染的一种免疫学检查，常用于急性风湿病的诊断。
是溶血性链球菌感染的指标，如风湿热、急性肾小球肾炎、扁桃体炎等1、原理：链球菌溶血素“O”简称ASO或抗“O”，是A簇溶血性链球菌的代谢产物之一，它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞，如果病人血清中含抗链球菌溶血素“O”抗体，则可使得ASO失去溶血能力。
2、临床意义：（1）、由于A簇溶血性链球菌的感染较常见，故在正常人群血清中也含一定量的ASO抗体，通常为126~166单位，有时高达250单位以上，因此不能单凭一次检查结果作为诊断的依据。
成人一般500单位以上为明确阳性，250~330单位为可疑。
对于可疑患者，要在发病后进行多次检查，如单位上升两倍以上则有意义。
活动性风湿病人不但抗“O”效价高，并有血沉快、CRP阳性及白细胞增多的特点。
急性肾小球肾炎的抗“O”也高。
（2）、确为溶血性链球菌感染，但抗“O”效价不高者见于下列情况：①、病人在发病早期已使用过大量抗菌素或肾上腺皮质激素。
②、部分病人对A簇溶血性链球菌有耐受性，或被“O”抗原性低的菌株感染时，血清中ASO即不高。
这种情况可通过血清中IgM的增高（感染初期）及IgG增高（感染后期）来协助诊断。
（3）非特异性ASO增高：可见于某些肝炎，肾病综合征，结核性胸膜炎，多发性骨髓瘤，原发性良性单株峰性高球蛋白血症等。
二、类风湿因子（RF）测定--（胶乳凝集法）：本度验用于类风湿因子相关疾病的的诊断。
类风湿性关节炎阳性率较高，约80~90﹪，RF阳性支持早期类风湿性关节炎的倾向性诊断，但RF也如ANA（抗核抗体）一样，并不是类风湿性关节炎独有的特异性抗体。
其他疾病如结缔组织病、病毒性肝炎等及60岁以上老年人也有不同程度的阳性率。
1、原理：以胶乳微粒为载体，使其吸附上人类变性Y—球蛋白而作为抗原。
aso和rf的检验及临床意义
A SO和R F的检验及临床意义董良菊(江苏省睢宁县李集中心卫生院，江苏睢宁221221)应用科技喃要】A SO(抗链球菌溶血素‘’了，)是A群溶血性链球菌的代谢产物。
它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞；并具有抗原性，可刺激机体产生相应的抗体，称为A S O R．F(类风湿因子)是—种抗变性IgG的自身抗体。
本文介绍了这两种试剂的使用方法及临床意义。
窗体顶端窗体底端。
拱键溯A SO；t L FA S O(抗链球菌溶血素“0”)是A群溶血性链球菌的代谢产物，它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞：并具有抗原性，可刺激机体产生相应的抗体，称为A Soo抗链球菌溶血紊“O”论SO)的测定可用于链球菌感染的诊断。
R F(类风湿因子)是一种抗变性I gG的自身抗体．主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中，是一种抗人或动物I gG分子Fc片断的抗体。
它最易与人及动物的变性球蛋白或免疫复合物中的IgG结合，也可与自身I gG或异体IgG分子反应，并与其他抗原如核蛋白发生交叉反应，与天然IgG 结合的能力较差。
临床上常用于自身免疫性疾病的诊断。
A SO，RF的检验常用方法为胶乳凝集试验(Ia t e×a ggl ut i nat i ont e st，山m，是一种间接凝集试验，所用载体颗粒为聚苯乙烯胶乳，是～种直径为O．8um 大小的圆形颗粒，带有负电荷，可物理性吸附蛋白质分子，但这种结合牢固性差。
1试剂及方法1．1斌荆：扳链球茵溶血素‘‘o'’测定试剂盒类风湿因子测定试剂盒1．2原理A S O试剂是由溶血素“0”和羧化聚丙乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳A SO灵敏度调整到2001U／m I，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。
R F试剂是由纯化的人I gG和羧化聚丙乙：唏胶乳共价交联而成的抗原胶乳。
R F灵敏度调整到201U／m I，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。
类风湿因子RF测定
类风湿因子RF测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2原理RF是针对自身的变性IgG分子结晶片段的一种自身抗体。
本试剂将人微球蛋白胶合于胶乳微粒，与待测样本中的RF 发生免疫反应，引起微粒的凝集，导致反应体系浊度增加，该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。
与通过同样处理的标准液比较，即可计算出样本中的RF。
3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1试剂：本科使用浙江伊利康生物技术限公司的试剂盒. （浙食药监械（准）字2014第2400384号YZB/浙2314-40-2014）4.1.1试剂盒组成如下:R1三羟甲基氨基缓冲液：20mmol/L叠氮钠：0.95g/LR2：类风湿因子致敏胶乳液：适量叠氮钠：0.95g/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用和毒性，请勿直接接触皮肤及眼睛。
一旦接触，即用大量清水冲洗。
请勿吞服。
4.2 校准品：使用浙江伊利康生物技术限公司提供的RF校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
类风湿因子检验及临床意义
ASO（抗链球菌溶血素“O”）是A群溶血性链球菌的代谢产物，它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞；并具有抗原性，可刺激机体产生相应的抗体，称为ASO。
抗链球菌溶血素“O”(ASO）的测定可用于链球菌感染的诊断。
RF（类风湿因子）是一种抗变性IgG的自身抗体.主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中，是一种抗人或动物IgG分子Fc片断的抗体。
它最易与人及动物的变性球蛋白或免疫复合物中的IgG结合，也可与自身IgG或异体IgG分子反应，并与其他抗原如核蛋白发生交叉反应，与天然IgG 结合的能力较差。
临床上常用于自身免疫性疾病的诊断。
ASO，RF的检验常用方法为胶乳凝集试验（latexagglutinationtest，LAT），是一种间接凝集试验，所用载体颗粒为聚苯乙烯胶乳，是一种直径为0.8um 大小的圆形颗粒，带有负电荷，可物理性吸附蛋白质分子，但这种结合牢固性差。
1试剂及方法1.1试剂：抗链球菌溶血素“O”测定试剂盒类风湿因子测定试剂盒1.2原理ASO试剂是由溶血素“O”和羧化聚丙乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳ASO灵敏度调整到200IU/ml，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。
RF试剂是由纯化的人IgG和羧化聚丙乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。
RF灵敏度调整到20IU/ml，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。
1.3标本采集抽取病人静脉血，经离心获得新鲜血清标本。
1.4方法、定性试验1）试剂使用前，预置达室温2）轻轻混匀胶乳试剂3）核对阴性和阳性对照4）在反应板中分别加一滴未稀释血清（50ml），同时做阴性和阳性对照5）分别在标本血清及阴性阳性对照中加一滴胶乳试剂6）轻轻摇动使其充分混匀，二分钟观察结果2结果判定1）ASO：出现凝集大颗粒的为阳性，ASO>200IU/ml.无凝集出现保持均匀乳状为阴性，ASO<200IU/ml。
半定量试验:血清以生理盐水（0.9克/100ml蒸馏水）倍比稀释。
类风湿因子(RF)测定标准操作程序SOP文件
页码：第2页，共2页
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6操作
见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。
7参考范围
1-14IU/mL。
8线性范围
本法线性范围为7-120IU/mL，不准确度允许范围 ±3SD，不精密度CV=4.25%，灵敏度为2.4IU/ml。
典型的定量检测RF的程序是通过IgG型致敏的羊的红细胞与乳胶颗粒发生凝剂。罗氏RF测定基于加入乳胶后的增强的凝集反应。
3标本
血清及肝素-Li, EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。
稳定性：20－25℃24小时
4－8℃3天
-20℃4周
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
10.4脂血：乳糜指数达到1000时不会有明显干扰。（甘油三酯浓度约为2000mg/dl）
10.5 RF的浓度低于6000mg/dl时不会有HOOK效应。
11临床意义
RF是抗变性IgG-FC片段的自身抗体。在诊断类风湿性关节炎时检测RF是非常关键的，是阳性率最高的指标之一。另外在其它的类风湿炎症及非类风湿疾病中也可见RF，皮肌炎、SLE、其他病毒、细菌感染炎症时也增高。在临床上大于60岁的老人也可查出RF。
4.3质控物
来源：ROCHE配套质控
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
ABCD医院
生化实验室
类风湿因子(RF)测定标准操作程序SOP文件
见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。
7参考范围
1-14IU/mL。
8线性范围
本法线性范围为7-120IU/mL，不准确度允许范围 ±3SD，不精密度CV=4.25%，灵敏度为2.4IU/ml。
9注意事项
9.1胶乳试剂在使用前应摇匀。
9.2血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
血清及肝素-Li, EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。
稳定性：20－25℃24小时
4－8℃3天
-20℃4周
4试剂
4ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
R1：打开后机上稳定90天
R2：打开后机上稳定90天
准备：直接使用。
4.2校准物
免疫比浊法
2测定原理
血清类风湿因子（RF）与试剂中的结合由抗RF抗体的人体γ-球蛋白的胶乳颗粒相结合，与之发生凝集形成不溶性免疫复合物，RF的浓度与胶乳颗粒的凝集形成的浊度成正比。
典型的定量检测RF的程序是通过IgG型致敏的羊的红细胞与乳胶颗粒发生凝剂。罗氏RF测定基于加入乳胶后的增强的凝集反应。
3标本
9.3仅应用于体外诊断。
10抗干扰能力：
10.1标准：回收率在90％－110％之间。
10.2黄疸：黄胆指数达到60时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl）
10.3溶血：溶血指数达到1000时不会有明显干扰。（血红素浓度约1000mg/dl）
10.4脂血：乳糜指数达到1000时不会有明显干扰。（甘油三酯浓度约为2000mg/dl）
来源：ROCHE配套校准物，符合WHO标准64/2,具体如下：
rf医学名词解释
rf医学名词解释
RF在医学上是指类风湿因子，是类风湿关节炎患者自身的抗体之一，临床检测风湿因子用于诊断类风湿关节炎。
类风湿因子主要存在于血清及关节液中，因此患有结缔组织疾病的患者通常会检测出类风湿因子指标为阳性。
引起类风湿因子阳性的原因较多，部分老人或体质较弱者可能类风湿因子阳性的指标较低，多次化验后无太大变化，需定期随访观察，如有不适到正规医院请专业医生给予对症治疗，避免自己随意用药。
在日常生活中，注意调整生活和饮食习惯，避免熬夜、戒烟、戒酒、忌食辛辣刺激食物，注意维生素的摄入。
以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅相关文献或咨询专业医生。
类风湿因子的临床测定
类风湿因子的临床测定摘要】类风湿因子(rheumatoid factor，RF)实际上是血清中一种免疫球蛋白，因于本世纪40年代初发现时，主要见于类风湿关节炎病人，所以至今仍一直沿用这一名称。
目的讨论类风湿因子测定。
方法根据样本检测结果进行诊断。
结论由于RF无明显特异性，因此需要结合临床表现、其他实验室检查和影像学检查结果加以综合分析，才能做出疾病的正确诊断。
【关键词】类风湿因子测定一、概述(一)生理和免疫类风湿因子(rheumatoid factor，RF)实际上是血清中一种免疫球蛋白，因于本世纪40年代初发现时，主要见于类风湿关节炎病人，所以至今仍一直沿用这一名称。
其实，凡是存在变性IgG，并能产生抗变性IgG自身抗体的人，在其血清或病变中均能测出类风湿因子，说明类风湿因子并不是类风湿关节炎的特异性自身抗体。
它是由于细菌、病毒等感染因子，引起体内产生的以变性IgG为抗原的一种自身抗体，是抗人或动物IgG分子Fc片段上抗原决定簇的特异性抗体。
其实，人体内普遍存在着类风湿因子，并具有一定的生理作用：①能调节机体免疫反应；②激活补体，加快清除微生物感染；③清除免疫复合物，使机体免受循环复合物的损伤。
只有当类风湿因子的量超过一定的滴度时才称类风湿因子阳性。
目前已知有四种类风湿因子，即IgM型、IgA型、IgG型、IgE型。
其中的IgM 和 IgA类风湿因子易于检测，而IgG类风湿因子难于测出，约有50%的IgG类风湿因子被漏检，是“隐匿性类风湿因子”的原因之一。
IgA类风湿因子及IgM类风湿因子对类风湿关节炎诊断有较好的参考价值。
RF与其他抗体一样有交叉反应，也就是针对的抗原决定簇不仅存在于正常IgG分子、变性的IgG分子、自身IgG分子、异体IgG分子以及异种 IgG分子上，而且还存在于一些非相关抗原上，这些决定了RF结果的非特异性。
RF的产生原因和机制目前还不十分清楚，一般认为，它的形成可能是由于病毒、支原体等持续感染刺激机体产生了抗体(即免疫球蛋白IgG)，当抗原与抗体形成复合物，使自身的IgG变性，变性的IgG又成为新的抗原，促使机体再产生抗IgG的抗体(即抗抗体)，这种抗变性IgG的抗体(主要为IgM，部分为IgG)就是类风湿因子。
类风湿因子(RF)定量测定试剂盒标准操作程序
类风湿因子（RF）定量测定标准操作程序1.摘要本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中类风湿因子的浓度。
RF的测定对类风湿性关节炎的诊断有一定的参考价值。
2.适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清、血浆中RF的浓度。
3.职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定RF浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物生产的类风湿因子定量测定试剂盒采用的是免疫透射比浊法。
5.原理试剂中的人IgG包被于聚苯乙烯粒子上，样本中RF与试剂中包被于聚苯乙烯粒子上的人IgG结合，形成不溶性免疫复合物，该免疫复合物由于包被的聚苯乙烯粒子而使浊度进一步放大，在人IgG足量的情况下，其浊度与人血清中RF含量成正比，与相同条件下操作的校准品比较，通过剂量/反应曲线求出样品中RF的含量。
6.仪器AU5811自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：MOPSO缓冲液（PH7.4）、0.2M、NaN3、包被人IgG的聚苯乙烯粒子7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
R1、R2：打开后冷藏于分析仪中可稳定28天。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用上海科华生物工程股份有限公司试剂盒内提供的标准品对自动分析仪进行校准。
由a、b、c、d四只组成，浓度见说明书。
按照公司标准品使用要求，使用前用0.5ml的生理盐水复溶，待完全混合均匀后（约30分钟）再使用。
校准后，仪器自动对校准品吸光度通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：使用罗氏公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控，加试剂后做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
大白鼠类风湿因子(RF)说明书
大白鼠大白鼠类风湿因子类风湿因子(RF)酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围检测范围：： 96T0.1 U/L -40 U/L使用目的使用目的：：本试剂盒用于测定大白鼠血清、血浆及相关液体样本中类风湿因子(RF)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大白鼠类风湿因子(RF)水平。
用纯化的大白鼠类风湿因子(RF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入类风湿因子(RF)，再与HRP 标记的类风湿因子(RF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的类风湿因子(RF)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大白鼠类风湿因子(RF)浓度。
试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品（80 U/L ） 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。
操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
40 U/L 5号标准品 150µl 的原倍标准品加入150µl 标准品稀释液 20 U/L 4号标准品 150µl 的5号标准品加入150µl 标准品稀释液 10 U/L 3号标准品 150µl 的4号标准品加入150µl 标准品稀释液 0.5 U/L 2号标准品 150µl 的3号标准品加入150µl 标准品稀释液 0.25 U/L1号标准品150µl 的2号标准品加入150µl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
免疫学rf的实验原理应用
免疫学rf的实验原理应用概述免疫学rf是指人体免疫系统生成的对自身的免疫球蛋白，它在一些自身免疫疾病的诊断和监测中具有重要的作用。
本文将介绍免疫学rf实验的原理和在临床应用中的一些重要方面。
免疫学rf实验原理免疫学rf实验是通过检测血清中的免疫球蛋白（通常是IgM和IgG）结合自身IgG Fc片段的能力来间接检测免疫学rf的存在。
下面是该实验原理的详细步骤：1.准备抗人IgG抗体（通常标记有抗血静脉注射v源）2.提取患者血清，将其与标记有IgG抗体的缓冲液混合–该缓冲液通常含有较低的浓度的胶体金或者量子点探针–混合后的血清和抗体溶液需要在适当的温度下某一时间进行反应3.使用蛋白电泳技术分离反应液中的复合物–该技术利用电场将不同大小和电荷的蛋白质分离出来–通过比较复合物与未结合的抗体的迁移距离来判断是否存在免疫学rf4.使用染色技术或计量技术来检测反应液中的复合物–染色技术使用特定染料为复合物上色，便于观察–计量技术通常使用光学密度来测定复合物的数量免疫学rf实验的应用自身免疫性疾病的诊断免疫学rf实验是自身免疫性疾病的重要诊断方法之一。
以下是一些常见的自身免疫性疾病：•类风湿性关节炎•系统性红斑狼疮•风湿性心脏病•干燥综合征通过免疫学rf实验可以检测这些疾病患者的血清中是否存在免疫学rf，从而辅助临床诊断和监测疾病的进展。
免疫学rf在疾病预后评估中的应用免疫学rf在一些疾病的预后评估中也具有重要的应用价值。
例如，在类风湿性关节炎中，早期发现免疫学rf的存在可能意味着疾病可能更加严重，炎症反应更为强烈，预后相对较差。
因此，免疫学rf的检测可以帮助医生评估疾病的进展和预测患者的预后。
免疫学rf在药物治疗中的应用免疫学rf的存在还可以影响某些药物治疗的效果和副作用。
例如，在使用抗肿瘤坏死因子（TNF）药物治疗类风湿性关节炎时，如果患者血清中存在免疫学rf，可能会导致药物的疗效降低或者不良反应的发生。
因此，通过免疫学rf实验可以评估患者是否适合接受某些特定药物治疗，并指导治疗方案的制定。
类风湿因子(RF)测定试剂盒(胶乳凝集法)
类风湿因子（RF）测定试剂盒（胶乳凝集法）【产品名称】通用名称：类风湿因子（RF）测定试剂盒（胶乳凝集法）商品名称：类风湿因子（RF）测定试剂盒（胶乳凝集法）英文名称：Rheumatoid Factoid Reagent Kit（Slide Latex Agglutination Test）【包装规格】【临床意义】对血清中RF定性或半定量测定，做辅助诊断用。
【检验原理】本试剂胶乳液是由纯化的人IgG和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。
RF胶乳的灵敏度调整到20IU/ml，超过上述滴度即出现肉眼可见凝集颗粒，试用本试剂血清标本不需要稀释即可直接测定。
【主要组成成份】胶乳液成份：类风湿因子胶乳、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液阳性对照成份：羊抗人IgG抗血清、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液阴性对照成份：牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液不同批号试剂盒中的乳胶液、阳性对照和阴性对照不能混用。
【储存条件及有效期】储藏温度2-10℃，切勿冷冻。
有效期一年。
【适用仪器】手工操作【样本要求】经离心获得新鲜血清样本，贮存于2-8℃，48小时内使用，时间过长须冰冻贮存。
【检验方法】定性实验：试剂使用前，预置达室温；轻轻混匀胶乳试剂；核对阴性和阳性对照；在反应板孔中加一滴未稀释血清（20μl）；然后加一滴胶乳试剂在血清中；搅匀、轻轻摇动使其充分混和，二分钟后观察结果。
半定量实验：血清以生理盐水（0.9g氯化钠溶解于蒸馏水中，稀释至100ml）倍比稀释，可参照下法操作。
稀释倍1：2 1：4 1：8 1：16血清100μl生理盐水100μl 100μl 100μl 100μl→100μl→100μl→100μl标本量20μl 20μl20μl20μlmg/L ＞40 ＞80 ＞160 ＞1320【参考值(参考范围)】正常参考范围：成人＜20IU/ml【检验结果的解释】凝集出现可判断样本中RF＞20IU/ml阳性；无凝集出现可判断样本中RF＜20IU/ml阴性。
风湿三项结果解读
风湿三项结果解读风湿性疾病是一类以关节、骨骼、肌肉及其周围软组织病变为主的慢性疾病，其发病机制复杂多样，常涉及免疫功能紊乱。
风湿三项检查，即类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、抗链球菌溶血素O(ASO)的测定，在风湿性疾病的诊断、病情监测及疗效评估中扮演着重要角色。
以下是对这三项指标结果的解读及其临床意义。
1. 类风湿因子(RF)结果解读：▪阴性：RF浓度在正常范围内，通常认为不支持类风湿关节炎的诊断，但也不能完全排除其他自身免疫性疾病。
▪阳性：RF升高可能提示类风湿关节炎或其他自身免疫性疾病的存在，但RF的特异性不高，也可见于健康人群（尤其是老年人）及某些感染性疾病中。
临床意义：RF的阳性结果对类风湿关节炎的诊断具有重要参考价值，尤其是在高滴度或多次检测均为阳性的情况下。
然而，RF的阳性并不等同于类风湿关节炎的诊断，需结合临床表现、影像学检查结果及其他实验室检查综合判断。
2. C-反应蛋白(CRP)结果解读：▪正常：CRP浓度在参考范围内，通常表示体内无明显炎症反应。
▪升高：CRP水平升高提示体内存在炎症反应，可能与风湿性疾病的活动期、感染、创伤等多种因素有关。
临床意义：CRP作为一种急性时相反应蛋白，其敏感性高，但特异性较低。
在风湿性疾病中，CRP的升高常作为疾病活动性的一个指标，可用于评估治疗效果和病情进展。
此外，CRP的监测对于及时发现感染等并发症也具有重要意义。
3. 抗链球菌溶血素O(ASO)结果解读：▪阴性：ASO浓度在正常范围内，通常表示近期未感染A组溶血性链球菌。
▪阳性：ASO升高可能提示近期感染了A组溶血性链球菌，与风湿热、急性肾小球肾炎等疾病的发病有关。
临床意义：ASO的阳性结果对于风湿热的诊断具有重要参考价值，但需注意ASO的升高可能出现在感染后的数周至数月内，且可持续较长时间，因此应结合临床表现和病程综合分析。
此外，ASO的阳性并不等同于风湿热的诊断，还需排除其他链球菌感染性疾病。
血清类风湿因子(RF)的检测
血清类风湿因子(RF)的检测1.目的规范类风湿因子(RF)检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。
3.术语4．测定原理样本中RF与胶乳颗粒超敏化的变性的人IgG抗体反应，出现凝集反应，在波长660nm处检测其吸光度的变化，其变化程度与样本中的RF含量成正比。
5. 标本采集与处理5.1标本类型：标本最好不要溶血。
留取标本后请尽快分离血清/血浆。
5.2标本稳定性：血清标本在2-8℃稳定48天,或-20℃可稳定6个月。
6. 试剂6.1试剂：本科使用金斯尔试剂盒，即用式液体试剂。
试剂内主要成分如下：规格: R1 3×20ml R2 1×20ml6．2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用。
6．3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。
试剂开瓶载机2～8℃稳定28天。
7.仪器参数设定AU2700参数设定：金斯尔试剂仪器参数具体参加试剂厂家提供的相应仪器的参数说明书.8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。
8.1.2仪器经过大保养后。
8.1.3挪动仪器的安装地点。
8.1.4更换试剂批号。
8.1.5室内质控失控。
8．2 AU2700金斯尔试剂系统的校准：8.2.1 准备：金斯尔配套校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存至有效期。
8.2.3保存位置：2号冰箱。
8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的相应位置放定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。
9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体质控品(批号:45612/45613)。
9．2质控物储存条件及准备：-15～-20℃保存至有效期，从低温冰箱取出后室温平衡30分钟。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
类风湿因子（RF）测试：原理，步骤，解释和临床意义
类风湿因子（RF）是与个体自身免疫球蛋白反应的自身抗体。
这些抗体通常针对人IgG的Fc片段。
RF已与三种主要的免疫球蛋白类别相关：IgM，IgG和IgA。
在这些中，最常见的是IgM和IgG。
关节间隙中免疫复合物的形成导致补体的活化和破坏性炎症，从而引起类风湿关节炎（RA）
如其名称所示，RF特别适用于类风湿关节炎的诊断和监测。
类风湿关节炎（RA）是一种慢性炎症性疾病，主要影响关节和关节周围组织。
在诊断出类风湿关节炎的病例中，有60-80％的人检出了类风湿因子。
但是，有时在系统性红斑狼疮（SLE）患者的血清中和某些非风湿性疾病中也可以检测到。
在正常的老年人口中也可以观察到升高的值。
测试原理
有许多方法可用于测试RF。
最常用的血清学方法是基于乳胶凝集试验。
由于RF是针对IgG分子Fc部分的IgM类抗体，因此可以通过其凝集涂有IgG分子的乳胶颗粒的能力来检测。
使用的试剂是聚苯乙烯胶乳颗粒在甘氨酸盐水溶液中的悬浮液，pH值为8.6±0.1，并涂有人丙种球蛋白。
定性方法
程序
1. 将所有试剂和标本置于室温。
2. 将一滴阳性对照和40ul患者血清分别放入幻灯片上的圆圈中。
3. 轻轻地在每个要测试和控制的样品圆上添加一滴RF乳胶试剂。
4. 使用单独的涂药棒/搅拌棒将反应混合物散布在特定区域的整个区域。
5. 在旋转摇床上将载玻片前后倾斜2分钟，使混合物缓慢旋转。
6. 2分钟后在明亮的人造光下观察凝集。
解释
胶乳颗粒的凝集被认为是阳性反应，表明类风湿因子的存在处于可检测的显着水平。
阳性结果：乳胶颗粒悬浮液会在两分钟内发生凝集，表明RF水平超过18 IU / ml。
阴性结果：乳胶颗粒悬浮液在两分钟内没有凝集。
半定量法
1. 使用等渗盐水以定性方法1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128等
方式制备阳性样品的系列稀释液，如下所示：
1. 对于每个要测试的样品，将100 µL的0.9％盐水加入1至5的试管中。
2. 将100 µL样品加到试管1上。
3. 混合混合物。
避免形成气泡。
4. 从管1到2转移100 µL混合样品。
5. 在试管3至4中重复此系列稀释步骤，然后进行5次。
混合后，从试管5中弃置
100 µL。
6.
2.
解释
滴度报告为最高稀释度的倒数，显示阳性测试结果。
在可见的凝集下，读取最后一个稀释步骤中的滴定度，类风湿因子的大致浓度可以如下确定：
RF单位为IU / mL =乳胶γ球蛋白试剂的灵敏度，单位为IU / mL×滴定度。
测试的局限性
1. 在所有诊断为RA的患者中未检测到RF。
2. 患有传染性单核细胞增多症，结节病，系统性红斑狼疮，结核病或麻风病以及其他
急性或慢性免疫反应的患者中，RF的含量可能增加。
3. 积极结果的重要性应谨慎解释。
应进行定量测试以确诊RA。
4. 高度溶血和脂血的血清以及血浆会干扰测试。