食品中常见病原菌微生物检验技术
食品微生物检验内容及检测技术
161综述随着社会的进步与发展，人们生活水平与理念的提升，许多食品安全问题不断被揭露出来，对于食品安全问题的关注度也显著增加。
食品检验是对食品安全的一个重大保障，只有达到标准的食品才能进入市场。
在食品安全问题中，微生物是对食品安全问题造成威胁的主要来源。
微生物是一种肉眼看不见的生物，如果在食品加工或运输过程中，不严格按照标准进行，就很容易被微生物污染，而微生物污染过的食品就会对人体健康安全造成威胁。
因此，做好食品检验工作，为食品安全提供有力保障。
1.食品微生物检验的内容1.1细菌总数的鉴定。
细菌菌落总数是指食品检验经处理，在一定条件下培养后所得1g食品或1ml食品或1cm2食品表面积上所含有的细菌菌落总数。
食品微生物中细菌总数的检验是衡量食品污染程度的指标。
通常是对生活中的食品或水通过特殊的物理、化学和生物的方法进行处理，在特定的培养条件下进行培养，得到细菌总数。
食品中细菌数量越多，腐败速度越快，甚至会对人体健康造成影响。
因此，细菌总数可以作为一个衡量食品安全的标准。
虽然细菌总数的并不能直接反映致病菌的多数量，但在一定程度上，二者是呈现正相关性的。
1.2大肠杆菌群数。
一定范围的大肠杆菌数能够维持人体内的正常菌群，但大肠杆菌菌群包含有多种肠道致病菌，超过范围就会对人造成危害。
在食品微生物检测过程中，待测样品中含有超标的大肠杆菌，很可能表明该待测样品直接或间接接触过粪便感染，当人们食用了这样的食品，其肠道致病菌感染的可能性大大增加。
大肠菌群MPN值是指1g或1ml待测样品中大肠菌群最可能数。
因此，大肠菌群MPN值可以作为粪便污染食品的指示菌。
1.3霉菌和酵母群数。
霉菌和酵母菌也是常见的食品微生物，起初酵母菌用于面包制造，酿酒等生产中，而霉菌也用于酿酒、制酱等一些食品生产中。
但是这一些腐生型酵母菌会使食物腐败变质，对于常见的面包而言，他主要含有淀粉，因此更容易滋生霉菌，霉菌则会分解淀粉，从而产生有毒黄曲霉素，是强致癌物质。
食品中的食源性病原菌检测
食品中的食源性病原菌检测食品安全一直是人们关注的重要问题。
随着食品供应链的延长和国际贸易的增加，食品中的食源性病原菌检测变得尤为重要。
食源性病原菌是指通过食品传播给人类的一类微生物，它们可能引发食物中毒、胃肠道感染等疾病，对人体健康构成潜在威胁。
要保证食品的安全，必须在食品生产和供应环节中进行食源性病原菌的检测。
食品中的病原菌检测主要包括样品采集、分离培养、基因检测等步骤。
首先，样品采集是食品中病原菌检测的第一步。
在收集样品时，要遵循严格的卫生标准，避免交叉污染。
不同食品有不同的采样方法，例如水果和蔬菜可以通过切割表面、冲洗等方式进行采样，而肉类和乳制品需要进行真空袋封装等方法。
采集的样品应该在适当的环境条件下保存，以确保后续的检测能够准确可靠地进行。
其次，分离培养是食源性病原菌检测中的重要环节。
它通过将样品中的病原菌分离出来，并进行纯化培养，以便后续的检测和鉴定。
传统的分离培养方法包括在适当的培养基上进行培养，通过观察菌落形态、生理生化特性等来鉴定病原菌的种类。
然而，传统方法需要较长的时间，通常需要几天到几周才能获得结果，这在一些紧急情况下显得不够迅速。
随着生物技术的发展，基因检测在食源性病原菌检测中得到了广泛应用。
基因检测利用PCR或实时荧光定量PCR等方法，通过检测病原菌的核酸序列来确定其存在。
这种方法不仅速度快、准确性高，还可以同时检测多种病原菌，提高了检测效率。
此外，基因检测还可以应用于食品中的病原菌溯源，帮助追踪和控制食品安全事故。
除了样品采集、分离培养和基因检测，食源性病原菌检测还需要建立完善的质量控制体系。
质量控制包括方法验证、实验室设备校准、人员培训等环节，以确保检测结果的准确性和可靠性。
食品生产企业和监管机构应密切合作，建立检测数据的共享和交流机制，加强对食品中食源性病原菌的监测和防控，保障消费者的食品安全。
总之，食品中的食源性病原菌检测对于保障食品安全至关重要。
通过严格的样品采集、分离培养和基因检测等步骤，我们可以及时准确地检测出食品中的病原菌，保障消费者的身体健康。
食品中志贺氏菌检验
食品微生物检验技术
无色至浅粉红色， 半透明、光滑、湿 润、圆形、边缘整 齐或不齐
白色，不透明、圆形、 边缘不整齐，直径1 mm～3 mm，菌落 周围琼脂颜色变为紫 红色
操作规程
已培养的营养琼脂斜面上生 长的菌苔，进行生化试验
二、志贺氏菌检测
ß-半乳糖苷酶
尿素
选取平板上5个或5个以上可疑菌落接种TSI、葡萄糖半固 体、营养琼脂斜面，36℃1 ℃培养20h～24h，观察结果。
食品微生物检验技术
一、志贺氏菌概况
概述
志贺氏菌属（Shigella） 的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临 床上能引起痢疾症状的病原生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆 菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌 引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性 中毒性菌痢，死亡率甚高。
一、志贺氏菌概况
需氧或兼氧性厌氧，最适温度37℃，PH7.2-7.4； 在普通琼脂和SS平板上，能形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、
在中等大小的菌落； 宋氏志贺氏菌菌落较大，较不透明，粗糙而扁平，在SS平板上可迟发酵乳糖，菌落
呈玫瑰红色； 在肉汤中呈均匀混浊生长，无菌膜。
增菌：用GN增菌液使处于 濒死状态的细菌恢复活力
报告
二、志贺氏菌检测
操作规程
225ml 志贺氏 菌增菌液增菌
选择性增菌
细胞数量增殖 液体 25mL 摇匀
样品
25g 均质
固体 样品
鉴别培养基
寻找可疑典型菌落
穿刺划斜面
TSI、营养琼脂、半固体培养基
41.5±1℃
16~18h 厌氧培养
食品中的微生物检验技术
食品中的微生物检验技术食品安全是人们日常生活中非常重要的一环，而微生物检验技术在保障食品安全方面起着关键作用。
微生物污染可能导致食品中的疾病和食物中毒事件发生。
因此，对于食品中微生物的检验至关重要，以确保食品的质量和安全。
本文将探讨食品中常用的微生物检验技术，以及其在食品行业中的应用。
一、菌落计数法菌落计数法是一种常用的微生物检验技术，用于测量食品中微生物的数量和增长情况。
通常，该方法要求将食品样品制成适当的稀释液，并将其平均均匀地涂布在富营养培养基上，然后在适当的温度下培养一段时间。
随后，通过观察和计数不同菌落的数量来评估食品样品中微生物的数量和种类。
菌落计数法的优点在于操作简单、成本低廉且能获得准确的结果。
然而，它只能提供关于微生物总数的信息，而无法检测特定的病原微生物。
因此，在食品行业中该方法通常用于检测食品中的常见的微生物。
二、PCR技术PCR（聚合酶链式反应）技术在食品微生物检验中得到了广泛应用。
PCR可通过扩增和检测食品中微生物的DNA，从而确认食物是否受到微生物的污染。
此外，PCR还能帮助鉴定特定微生物的存在，包括常见的食源性病原体。
PCR技术的优点在于其高灵敏度、高特异性和快速检测结果。
然而，该方法也存在一些局限性，如对设备要求较高，同时需要针对目标微生物设计和合成特异性引物。
此外，PCR技术还需要进行核酸提取和预处理等繁琐的操作步骤。
三、快速检测方法为了满足食品生产厂商和监管机构对食品微生物检验结果的快速反馈需求，快速检测方法在食品行业中得到了广泛应用。
这些方法通常基于免疫学技术，如ELISA（酶联免疫吸附试验）和免疫层析技术。
快速检测方法的优点在于操作简单、结果快速，并且能够在实验室以外的场所进行。
此外，它们还具有较高的灵敏度和特异性。
然而，这些方法可能对微生物种类有一定的限制，且可能不如传统的培养方法准确。
四、基因测序技术基因测序技术在食品微生物检验中的应用越来越广泛。
通过对食品样品中微生物基因组的测序分析，可以更准确地鉴定微生物的种类和数量，以及评估其对人体健康的潜在威胁。
食品中常见病原微生物检验技术
食品中常见病原微生物检验技术
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食品中常见病原微生物检验技术
第30页
• P150
• （1） A1：经典反应判定为沙门氏菌属。如尿素、氰化钾和赖氨 酸脱羧酶3项中有1项异常，按表可判定为沙门氏菌属。如有2项 异常，为非沙门氏菌属。
（2）A2：补做甘露醇和山梨醇试验，沙门氏菌靛基质阳性变体 两项试验结果均为阳性，但需要结合血清学判定结果进行判定。
菌落；但无混浊带及透明圈。
▪
在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿
润、 金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶
血圈。 食品中常见病原微生物检验技术
第70页
B-P平板
食品中常见病原微生物检验技术
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￥7（90mm)
Baird－Parker(BP培养基/贝尔德帕克平板) 用于凝固酶阳性葡萄球菌分离和菌落计数用。
食品中常见病原微生物检验技术
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金黄色葡萄球菌致病性
致病力强弱主要取决于其产生毒素和侵袭性酶：
a.溶血毒素：外毒素，分甲、乙、丙、丁、戊五种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引 发肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：侵入人体时，该酶使血液或血浆中纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固， 妨碍吞噬细胞吞噬作用。 葡萄球菌形成感染易局部化与此酶相关； d.脱氧核糖核酸酶：产生脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据判定金黄色葡 萄球菌； e.肠毒素：产生数种引发急性胃肠炎蛋白质性肠毒素，现已判定出葡萄球菌肠毒素有 A、B、C1～C3、D、E、G、H共9种。肠毒素A是最常见。
•
表面光滑菌落，菌落色素不稳定，但多数为金黄色。
➢
Baird-Parker琼脂平板（BP平板） 、血平板 、血浆凝固
食品中沙门氏菌检验
食品中沙门氏菌检验
食品微生物检验技术
1885年由Salmon氏等在猪霍乱流行时分离出猪霍乱沙门菌，故定名为沙门菌属。 沙门菌属是肠杆菌科中最重要的病原菌。它是一群抗原结构、生化特性相似的革兰氏阴性杆菌。目前已发现的沙氏菌有2500多个血清型和变种。虽然沙门菌血清型很多，但多数国家从人体、动物和食品中分离出沙门菌仅约40~50 个血清型。而在一个国家中的一定时期只约有10个血清型是比较常见的。分类： •伤寒沙门菌(伤寒、副伤寒)-传染病防治法中规定报告的乙类传染病。 • 非伤寒沙门菌-食品安全标准的检测的主要对象。
一、沙门氏菌概况
培养与生化特性
前增菌
选择性增菌
生物化学筛选
非如上述的各种反应
检样
BS
XLD(或HE ，显色培养基)
挑取可疑菌落
选择性平板筛选
非沙门氏菌
H2S+靛基质-尿素-KCN-赖氨酸+
H2S+靛基质+尿素-KCN-赖氨酸+
H2S-靛基质-尿素-KCN-赖氨酸+/-
甘露醇+ 、山梨醇+
ONPG -
蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；有些菌株为黄色，中心黑色或几乎全黑色
菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑心中心
按照显色培养基的说明进行判定
葡萄糖+H2S
乳糖+ H2S
乳糖+ H2S
葡萄糖+H2S
SC
TTB
结果报告：综合以上生化试验结果，报告25g（mL）样品中检出或未检出沙门氏菌。前增菌：缓冲蛋白胨水（BPW） 肉汤是基础增菌培养基，不含任何抑制成分，有利于受损伤的沙门菌复苏。鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。增菌：① 四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）含有胆盐，抑制革兰氏阳性球菌和部分大肠埃希氏菌的生长，而伤寒与付伤寒沙门菌仍能生长。②亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）可对伤寒及其他沙门菌作选择性增菌，亚硒酸与蛋白胨中的含硫氨基酸结合，形成亚硒酸和硫的复合物，影响细菌硫代谢，从而抑制大肠埃希氏菌、肠球菌和变形杆菌的增殖。
食品中的微生物检测方法
食品中的微生物检测方法食品安全一直备受人们关注，食品中的微生物检测方法是确保食品质量和安全的关键。
微生物检测是指通过检测食品中的微生物存在和数量来评估食品是否安全。
本文将介绍几种常见的食品中的微生物检测方法。
一、传统培养方法传统培养方法是最为常见的微生物检测方法之一，它可以直接检测食品中的细菌和真菌等微生物。
这种方法的原理是将食品样品接种于适当的培养基上，通过培养后的菌落形态和数量来判断微生物的存在和数量。
传统培养方法简单易行，但耗时较长，需要数天甚至数周才能得到结果。
二、荧光定量PCR法荧光定量PCR法是一种基于聚合酶链式反应（PCR）原理的微生物检测方法。
它可以快速准确地检测食品中的微生物，例如大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌。
该方法通过扩增微生物特定基因的DNA，然后使用荧光染料标记，最后通过荧光信号的强度来定量微生物的存在和数量。
荧光定量PCR法具有高效、高灵敏度和高特异性的优点，适用于快速检测大批量样品。
三、基因芯片技术基因芯片技术是一种高通量的微生物检测方法，它可以同时检测多种微生物种类和数量。
该技术利用芯片上的探针与目标微生物的核酸序列发生特异性反应，然后通过荧光标记来检测微生物的存在和数量。
基因芯片技术具有快速、高通量和高灵敏度的特点，可以在较短时间内检测多个微生物。
四、质谱法质谱法是一种高效的微生物检测方法，它可以通过检测微生物代谢产物或特定标记物来判断微生物的存在和数量。
该方法广泛应用于食品中的致病菌检测，如耐药菌的检测和鉴定。
质谱法具有高灵敏度、高选择性和准确性的优势，可以在非常短的时间内完成微生物检测。
五、免疫层析法免疫层析法是一种简便快速的微生物检测方法，它通过检测微生物的抗原或抗体来判断其存在和数量。
该方法常用于食品中常见的细菌检测，如金黄色葡萄球菌和沙门氏菌等。
免疫层析法操作简单、迅速，不需要复杂的设备，适用于野外和实验室环境。
综上所述，食品中的微生物检测方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
第七章食品中常见病原菌微生物检验技术ppt
可在10%-15%氯化钠和40% 胆汁中生长
生物学特性---培养特征
▪
大多数菌株产生类胡萝卜素，使细胞团呈现出深橙色到
浅黄色，色素的产生取决于生长的条件，而且在单个菌株中
可能也有变化
▪
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲
基红反应阳性，VP反应弱阳性。
▪
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化
明胶。
素、红霉素等高度敏感。
致病性
金黄色葡萄球菌是人 类化脓感染中最常见的病 原菌，临床表现多种多样 ，可引起局部化脓感染， 也可引起肺炎、胃肠炎、 心包炎等，甚至败血症、 脓毒症等全身感染。
我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌 落总数、大肠菌群和致病菌三项。
致病菌：能够引起人类发病的细菌。对不同 的食品和不同的场合，应该选择一定的参考 菌群进行检验。
-
第一节 沙门氏菌检验技术
一、生物学特性 是一大群在血清学上相关的革兰氏阴性杆菌，无芽孢、 无荚膜，周身鞭毛，能运动的需氧或兼性厌氧短杆菌。
36± 1℃ 6hr
报告结果
第一法
第二法 Baird-Parker平板法检验程序
定量检测 （平板法）
适用于检测金黄色 葡萄球菌数不小于 10/g（mL）的食品
-
定量
25g样品+ 225ml 生理盐水
检测
梯度稀释
（MPN法）
选三个连续梯度，每个梯度各取3mL加入3管胰酪胨大豆肉汤
36± 1℃ 4548hr
～48 h。
▪ （4）观察菌落形态
▪
Baird-Parker 平板、血平板上挑取可疑菌落。
微生物在食品安全中的检测方法
微生物在食品安全中的检测方法食品安全一直是人们关注的重要问题之一，而微生物检测是确保食品安全的重要环节之一。
微生物在食品中的存在可能导致食物中毒、食品腐败等问题，因此了解食品中的微生物情况，采取相应的控制措施是至关重要的。
本文将介绍常见的微生物检测方法。
一、传统培养方法传统培养方法是最常用的微生物检测方法之一。
这种方法通常基于微生物在特定培养基中生长的能力，并根据微生物的特征形态来进行鉴定。
具体操作包括样品取样、制备培养基、接种、培养、观察等步骤。
传统培养方法可以检测常见的食源性病原菌如沙门氏菌、大肠杆菌等，但是需要较长的培养时间，同时对于某些难以培养的微生物可能存在局限性。
二、PCR方法PCR（聚合酶链式反应）是一种通过复制和扩增目标DNA段的方法。
在微生物检测中，PCR可以通过引物与目标细菌或病毒DNA的特异性结合，通过酶的作用进行不断复制和扩增，最终形成可检测的DNA片段。
PCR方法具有高度灵敏度和特异性，可以检测微生物中极少量的目标核酸，同时具有较短的反应时间。
PCR方法可以用于检测食源性致病菌、真菌和病毒等微生物，被广泛应用于食品安全领域。
三、免疫学方法免疫学方法是利用抗原与抗体的特异性结合来进行微生物检测的方法。
这种方法可以通过特异性抗体与目标微生物相互作用，并通过标记物的检测来确定微生物的存在。
常见的免疫学方法包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）、免疫荧光法、免疫印迹法等。
免疫学方法具有高度的特异性和敏感性，可以检测微生物的种类和数量，广泛应用于食品中病原微生物的检测。
四、质谱分析方法质谱分析方法是一种通过检测微生物中特定代谢产物或特异性质谱图来进行微生物检测的方法。
这种方法可以通过检测微生物产生的挥发性有机物、气体成分或特定代谢产物来鉴定微生物的存在。
常见的质谱分析方法包括气相色谱质谱联用（GC-MS）、液相色谱质谱联用（LC-MS）等。
质谱分析方法具有高灵敏度和高分辨率的优点，可以检测微生物的种类和数量。
第六章病原菌检测
一、
革兰氏阴性菌，无芽孢、无荚膜杆菌，周生鞭毛，兼性厌氧。 最适生长温度37℃.抗寒、耐盐,最适Ph6.8～7.8。 该菌热敏感，抗热性差，60 ℃经20～30min被杀死。 生长的水分活度为0.94。
沙门氏菌属是肠杆菌科中最复杂的菌属。 抗原：
四、检验程序
从食品中分离沙门氏菌样品制备
• 由于食品种类繁多，且每类中包括许多品种。因其加工方 式不同，导致性状各异。故在进行微生物学检验时，应按 不同的形状、加工方式及检验目的合理进行检样处理。
增菌液
缓冲蛋白水
增菌液
选择性琼脂平板
三铁糖琼脂
BPW——缓冲蛋白水
• 用于前增菌:目的是使样品中的沙门氏 菌复苏，故培养时间较短。
第六章 食品中常见病原微生物
检验技术
卫生部：食品中致病菌含量将设底线
卫生部2011年发布通知，就《食品安全国家标准食品中致 病菌限量》征求意见。新标准规定了下列等17类食品中可能出 现的沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌等 8种致病菌的含量。
肉及肉制品 粮食制品
糖果、巧克力类及 可可制品 藻类制品 发酵酒及其配制酒 果冻
多为猪霍乱杆菌引起，甲、乙、丙型副伤寒杆菌和肠 炎杆菌亦可引起败血症。
（4）慢性肠炎
沙门氏杆菌可引起慢性、持久性肠炎。
致病菌浓度：
2×105个/g（mL）
可引起胃肠炎，潜伏期5小时到5天，发病通常自摄取污染食
物后12-36小时开始。症状为腹泻，恶心，腹痛，中等程度 发烧，畏寒等，病程2-5天。
可引起伤寒，潜伏期7-28天，症状为头痛，持续高烧，腹痛
沙门氏菌在HE琼脂上典型特征 在 37 ℃ 培养 18-24 小时后， 沙门氏菌、亚利桑那菌和变形杆菌为蓝 绿色至蓝色、有或无黑色中心的菌落；大肠杆菌和大肠菌群为粉红色菌 落，有沉淀环； ，无色半透明有黑色中心或几乎全为黑色。志贺氏菌 和普罗菲登斯菌为绿色、湿润而隆起菌落。
食品微生物检验内容与检测技术分析
食品微生物检验内容与检测技术分析食品微生物检验是指对食品样品中的微生物进行检测和分析的过程。
食品微生物检验内容包括对食品中常见的致病菌、有害菌和变质菌的检测，以及对食品中的微生物总数、菌落总数、酵母和霉菌等指标的测定。
1. 致病菌的检测：致病菌是指能够引起食物中毒或食源性疾病的微生物。
常见的致病菌有大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌等。
食品中的致病菌检测主要包括样品的预处理、分离培养、形态观察和生化鉴定等步骤。
2. 有害菌的检测：有害菌是指对人体健康有一定危害的微生物，包括产毒菌、过敏原菌等。
常见的有害菌有金黄色葡萄球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、变形杆菌等。
有害菌的检测可以采用PCR技术、酶联免疫吸附法(ELISA)、生物传感技术等。
3. 变质菌的检测：变质菌是指导致食品腐败、变质的微生物。
变质菌的检测常采用菌落总数进行评估，包括总生菌数、大肠杆菌群和金黄色葡萄球菌的测定。
常用的检测方法有平板计数法、过滤法、MPN法等。
4. 微生物总数的测定：微生物总数是指食品样品中各种微生物的总数目，是评价食品卫生质量的重要指标之一。
常用的方法有平板计数法、过滤法、MPN法等。
6. 酵母和霉菌的测定：酵母和霉菌是食品中常见的微生物，对食品的质量和安全有一定影响。
常见的方法有平板计数法、膜过滤法等。
食品微生物检验的技术包括传统培养方法和快速检测方法。
传统培养方法是指通过将食品样品接种于适当的培养基上，经过一定的温度和时间培养，观察和计数微生物菌落来确定食品样品中微生物的种类和数量。
快速检测方法是指利用现代生物技术手段，通过检测微生物的特定基因、代谢产物或抗原，结合分子生物学、免疫学等方法对微生物进行检测和鉴定。
常见的快速检测方法有PCR技术、酶联免疫吸附法(ELISA)、生物传感技术等。
食品中常检病原微生物的检验技术
3. 外毒素：此与霍乱弧菌、ETEC产生的毒素相同。 其作用有三：①肠毒素性：引起早期的水样腹泻；
②细胞毒性，对Vero细胞、Hela细胞、血管内皮细胞、 肾小管内皮细胞、人肝细胞均有毒性；③神经毒性或致 死毒性：注入家兔可使其麻痹、死亡。
整理ppt
二、检验程序
HE琼脂或SS
检样
25g+GN 225mL
整理ppt
5）在鲜血琼脂平板上生长，有些菌株可见β溶血环。 6）在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落 7）在S．S琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌，
也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落； 8）在伊红美兰琼脂上形成紫黑色具有金属光泽的菌
落 9）在麦康凯琼脂上培养24小时后孤立菌落呈红色
整理ppt
埃希氏菌在S．S琼脂平板上形成红色菌落
整理ppt
4
二、沙门菌检验
（一）检验所需器材与培养基
1、器材 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 冰箱（2℃~5℃），恒温培养箱(36±1℃、42±1℃)， 均质器， 振荡器，电子天平（感量0.1g），全自动微生物生化鉴定系统等。 2、培养基 缓冲蛋白胨水（BPW），四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液，亚硒酸 盐胱氨酸（SC）增菌液，亚硫酸铋（BS）琼脂，HE琼脂，木糖赖氨 酸脱氧胆盐（XLD）琼脂，沙门氏菌属显色培养基，三糖铁（TSI） 琼脂等。
整理ppt
第三节志贺菌检验
学习目的与要求
1. 掌握志贺菌的主要生物学特性、 检验程序和检验方法。 2. 了解志贺菌的致病性。 3. 了解其他肠道杆菌。
整理ppt
一、生物学特性
（一）培养特性：
需氧或兼性厌氧菌，最适温度37℃，pH6.4~7.8，在普通琼脂培 养基和SS平板上，形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘 整齐、中等大小的菌落，半透明的光滑型菌落。宋氏致贺菌菌落较 大，较不透明，粗燥而扁平，在SS平板上可迟缓发酵乳糖，菌落呈 玫瑰红色。在肉汤中呈均匀混浊生长，无菌膜。
食品中各类微生物检验-PPT课件
这次集体感染于３月１２日首先在千叶县柏市被发现。 诊断和调查结果表明，患者是由于食用了一些工厂生产的不 洁净的食品而被感染的。
日本曾于５、６年前首次发生病原性大肠杆菌Ｏ１５７ 集体感染事件。患者有发烧、恶心、呕吐等症状。
操作步骤
将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内， 接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐 发酵管；1mL及1mL以下者，用单料乳 糖胆盐发酵管，每一稀释度接种3管，置 36+1℃温箱内，培养24+2小时，如所有 乳糖胆盐发酵管均不产气，则可报告为 大肠菌群阴性。如有产气者，按下列程 序进行。
操作步骤
(二)分离培养
食品中细菌数量越少，食品存放的时间 越长。如：
0℃时菌落数为105cfu/cm2的牛肉，可存 放7d；菌落数为102cfu/cm2时， 可存放 18d。
0℃时菌落数为105cfu/cm2的鱼可存放6d， 菌落数为103cfu/cm2时， 可存放12d。
菌落(colony)：生长在固体 培养基上，来源于一个细胞， 肉眼可见的细胞群体。
待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培 养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀 释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。
计数和报告 选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落
总数测定标准。
我国饮用水卫生标准： ≤ 100个细菌总数/1mL饮水
第二节 食品中大肠菌群的测定
一、大肠菌群与食品卫生质量 大肠菌群系指一群在37℃能发酵乳糖、产酸、
引起中毒的主要是 动物源性食品。
本菌对热、消毒药及 外界环境的的抵抗力 不强。60℃，20-30min
《食品微生物检验》习题库完整
习题库项目一食品中的微生物及其检验一、名词解释1、微生物：2、食品微生物检验：3、食品变质：4、腐败：5、酸败：6、菌落总数：7、大肠菌群：8、MPN：二、填空题1、食品中的微生物的主要来源是、和。
2、引起食品腐败变质的原因主要有、、和等方面，其中，最普遍、最主要的因素是。
3、分解蛋白质的微生物以为主，其次是和。
4、分解糖类的微生物以为主，其次是和。
5、分解脂肪的微生物以为主，其次是和。
6、国家食品卫生标准一般包括三个方面的内容：、和。
7、微生物指标一般分为、和三项。
8、食品微生物检验包括和两个方面。
三、选择题1、下列描述的微生物特征中，不是所有微生物共同特征的是（）A.个体微小B.分布广泛C.种类繁多D.可无致病性E.只能在活细胞内生长繁殖2、土壤中，数量和种类最多的微生物是（）A、细菌B、霉菌C、酵母菌D、放线菌3、我国城市饮用水卫生标准规定（）A、每1000ml水中大肠杆菌＜3个B、每1000ml水中大肠杆菌＜30个C、每100ml水中大肠杆菌＜3个D、每100ml水中大肠杆菌＜30个E、每500ml水中大肠杆菌＜3个4、我国城市饮用水卫生标准规定（ E ）A、每ml水中细菌总数＜1000个B、每ml水中细菌总数＜10个C、每100ml水中细菌总数＜10个D、每500ml水中细菌总数＜10个E、每ml水中细菌总数＜100个四、判断题1、菌落计数以菌落形成单位（CFU）表示。
（）2、MPN是指可能产气的数量。
（）3、食品中病原微生物的检验，可以检验出少量的病原微生物（）五、问答题1、食品微生物检验的特点有哪些？2、食品微生物检验的任务是什么？3、食品微生物检验的内容主要包括哪些方面？每一个方面的检验项目是什么？4、食品质量的评价指标有哪些？并具体解释之。
5、食品微生物检验的意义是什么？6、食品中细菌总数检验的意义是什么？7、食品中大肠菌群检验的意义是什么？项目二食品微生物检验的基本条件与设备一、名词解释1、分辨力：2、相位：3、振幅：二、填空题1、无菌室通常包括和两部分，这两部分的比例一般为，高度一般 m左右。
食品微生物检验和检测技术
食品微生物检验和检测技术食品微生物检验和检测技术是指对食品中的微生物进行检验和检测的技术方法，目的是评估食品卫生质量，保障食品安全。
食品微生物检验和检测技术是食品安全监管和食品行业控制食品安全的重要手段，对保障食品卫生质量具有重要意义。
食品微生物检验和检测技术主要包括微生物计数法、菌落总数检测法、致病菌检测法、微生物快速检测法等。
微生物计数法是对食品中某一种或几种微生物进行定量检验的方法。
常用的微生物计数方法包括平板计数法、滤膜计数法和MPN法（最可能数法）。
平板计数法是将食品样品制备成一定浓度的悬浮液后，均匀涂布在培养基上，培养一定时间后，通过计数菌落的数量来推算出原始样品中微生物的数量。
滤膜计数法是将食品样品过滤到滤膜上，然后将滤膜培养在培养基上，再通过计数菌落数量来推算出微生物的数量。
MPN法是在液体培养基中进行稀释培养，然后通过观察变色管内液体的变化来推算出微生物的数量。
菌落总数检测法是评价食品样品中菌落总数的方法。
该方法是将食品样品稀释加载平板上，并培养一定时间后，根据菌落的数量推算出菌落总数。
菌落总数是衡量食品样品卫生质量的一个重要指标，通常是通过菌落形成单位（CFU）来表示。
致病菌检测法是针对潜在的致病菌进行检测的方法。
常用的致病菌检测方法包括PCR 法、ELISA法和传统的培养法。
PCR法通过特异的引物和酶的作用，扩增致病菌的DNA片段，然后通过凝胶电泳等方法对PCR产物进行检测。
ELISA法是利用抗体和抗原的特异性结合来检测致病菌，通过测定样品中特定抗原和抗体的结合程度来确定致病菌的存在与否。
传统的培养法是将样品在一定培养条件下进行稀释培养，然后通过菌落特征、形态特征和生化反应等来鉴定致病菌。
微生物快速检测技术是近年来发展起来的新型微生物检验和检测技术。
该技术通过基因扩增、同位素标记、光学检测等方法，能够在短时间内快速准确地检测出微生物的存在与否。
常用的微生物快速检测方法包括蛋白质芯片技术、基因芯片技术和同位素标记的光学检测技术等。
食品中的微生物检验方法
食品中的微生物检验方法食品安全一直是人们关心的重要问题，各种微生物的存在往往对食品的质量和安全性产生着巨大的影响。
因此，对食品中微生物的检验方法显得尤为重要。
本文将介绍一些常用的食品微生物检验方法，以及它们的原理和应用。
一、总菌落计数法总菌落计数法是评估食品中微生物总数的一种常用方法。
该方法通过将食品样品制备成适当的稀释液，在特定的寒暖培养条件下培养菌落生长，进而通过数目的计数来评估食品样品中的总菌落数。
这种方法适用于各种食品，如肉类、乳制品、水果蔬菜等。
二、大肠杆菌检测法大肠杆菌是一种常见的致病菌，其存在于食品中可能对人体健康构成较大的威胁。
因此，检测食品中的大肠杆菌也是一项重要的微生物检验方法。
该方法通常使用大肠杆菌培养基，将食品样品接种于培养基上，经过一段时间的培养和生长后，观察培养基上是否有大肠杆菌的产生。
三、霉菌和酵母菌检测法霉菌和酵母菌是常见的食品污染源，它们能够在食品中迅速繁殖和生长，不仅会导致食品变质，还可能产生一些毒素，对人体健康造成威胁。
因此，对食品中的霉菌和酵母菌进行检测也是非常重要的。
该方法通常使用含有特定培养基的琼脂糖平板，将食品样品沉积于琼脂糖平板上，经过一段时间的培养和生长后，观察平板上是否有霉菌和酵母菌的产生。
四、PCR法PCR（聚合酶链反应）是一种常用的分子生物学方法，也可以应用于食品微生物检验。
该方法通过选择适当的引物，将食品样品中的微生物DNA扩增，进行定性和定量分析。
PCR法具有快速、灵敏的优势，能够准确检测食品中微生物的存在和种类，进而评估食品的安全性。
以上介绍的是一些常用的食品微生物检验方法，它们可以帮助我们了解食品中微生物的质量和安全状况。
然而，需要注意的是，不同的食品样品可能需要不同的检验方法，因此在实际操作中需要根据具体情况选择合适的检验方法。
此外，检验过程中的卫生条件、培养基的质量等因素也会对结果产生影响，因此在进行微生物检验时，务必严格控制各项操作条件，以保证检验结果的准确性和可靠性。
食品微生物检验和检测技术
食品微生物检验和检测技术食品微生物检验和检测技术是对食品中微生物的数量、种类及其对人体健康的影响进行评估的一种科学方法。
食物中的微生物包括细菌、真菌、酵母、病毒和寄生虫等，它们可能导致食物中毒、细菌性、真菌性、病毒性和寄生虫性疾病等食品安全问题。
因此，食品加工、贮藏、运输和销售过程中的微生物检验和检测技术，是保障公众健康和食品安全的重要措施。
常规微生物检验和检测技术主要包括细菌计数、潜在致病菌检验和检测、真菌和酵母检验和检测、病毒检验和检测以及寄生虫检验和检测等。
1.1 细菌计数细菌计数通常用于评估食品中的细菌数量。
常用的方法包括平板计数法、过滤法和培养法等。
平板计数法通常采用Tryptic Soy Agar（TSA）培养基，按照相应的操作规程，在平板上布菌。
过滤法和培养法则需要将食品样品的溶液过滤或加入培养基进行培养，然后通过计算培养基上的细菌菌落数量来评估食品中的细菌数量。
1.2 潜在致病菌检验和检测潜在致病菌是指食品中引起人类感染的病原菌，包括沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和产生肉毒杆菌毒素的产气荚膜梭菌等。
潜在致病菌检验和检测主要基于PCR技术、血清学检测、蛋白印迹和细胞培养等方法。
通过检测潜在致病菌的存在和数量，可以评估食品中的病原菌水平，为保障公众健康提供依据。
真菌和酵母的检验和检测方法包括培养法、荧光显微镜检测和PCR技术等。
培养法通常采用Sabouraud培养基，通过形态学特征和生长特性来鉴定真菌和酵母的种类和数量。
荧光显微镜检测可以通过显微镜观察真厌氧菌和酵母的存在和形态。
PCR技术利用特异性引物和适当的分子标记，可以在食品中检测到真菌和酵母的存在。
病毒是一种致病微生物，不可见，因此病毒的检验和检测方法相对更难。
常用的方法包括PCR技术、ELISA技术和核酸杂交技术等。
PCR技术可以检测食品中的病毒的RNA或DNA，ELISA技术和核酸杂交技术则可以检测食品中的病毒抗原或病毒核酸。
食品微生物检验的指标
食品微生物检验的指标食品微生物检验是确保食品安全的重要手段，通过对食品中的微生物进行检测，可以评估食品的卫生质量和预测食品的安全性。
以下是食品微生物检验的主要指标：一、菌落总数菌落总数是指食品中生长的微生物菌落的总数。
菌落总数可以反映食品的卫生状况和污染程度，是评估食品质量的重要指标。
二、大肠菌群大肠菌群是指一群在肠道中常见的细菌，通常作为食品污染的指示菌。
大肠菌群的数量可以反映食品中肠道细菌的污染程度，从而评估食品卫生的状况。
三、霉菌和酵母菌霉菌和酵母菌是常见的食品污染微生物，可在食品中生长繁殖导致食品变质。
检测霉菌和酵母菌的数量可以评估食品的储存条件和新鲜度。
四、致病菌致病菌是指能够引起人类疾病的细菌、病毒和寄生虫等微生物。
在食品微生物检验中，对致病菌的检测是至关重要的，以确保食品不含有害健康的微生物。
常见的致病菌包括沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌等。
五、细菌毒素细菌毒素是由某些细菌产生的有毒物质，可在食品中形成并对人类健康造成危害。
检测细菌毒素可以评估食品中细菌产生的有毒物质含量，以确保食品安全。
六、沙门氏菌沙门氏菌是一种常见的食源性病原菌，可引起食物中毒和肠道疾病。
检测沙门氏菌可以确保食品不含有害健康的微生物。
七、金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性病原菌，可引起食物中毒和葡萄球菌肠炎等疾病。
检测金黄色葡萄球菌可以确保食品不含有害健康的微生物。
八、志贺氏菌志贺氏菌是一种常见的食源性病原菌，可引起细菌性痢疾等疾病。
检测志贺氏菌可以确保食品不含有害健康的微生物。
九、副溶血性弧菌副溶血性弧菌是一种常见的食源性病原菌，可引起食物中毒和腹泻等疾病。
检测副溶血性弧菌可以确保食品不含有害健康的微生物。
总结：食品微生物检验是保障食品安全的重要手段，通过对各种微生物指标的检测，可以全面评估食品的卫生质量和安全性。
在食品安全管理中，应重视食品微生物检验工作，加强食品安全监管，确保公众健康。
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▪ （4）观察菌落形态
▪
Baird-Parker 平板、血平板上挑取可疑菌落。
▪
金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上，菌落直径
为 2 mm～3 mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为 淡色，周
围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌
落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的
▪ 所有这些实验不能作为鉴别其产毒与否的依据。
血浆凝固酶试验：
吸取1:4新鲜兔血浆0.5 mL，放入小试管中， 再加入培养24 h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤培 养物0.5 mL，振荡摇匀，置 36±1℃温箱或水浴 内，每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝块, 即将试管倒置或 倾斜时，呈现凝块者，被认为 阳性结果。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌株及 肉汤作为对照。
宋内氏菌最强，福氏菌次之，志贺氏菌最弱。一
般56-60℃经10分钟即被杀死。在37℃水中存活20
天，在冰块中存活96天，蝇肠内可存活9-10天，
金黄色葡萄球菌的抗原构造和分型
对分型进行简单的了解。 １、血清学分型：
金黄色葡萄球菌水解，获得两种抗原成分：蛋白抗原和 多糖抗原。
蛋白抗原主要为葡萄球菌A蛋白（SPA)，是一种表面抗 原，90%以上金黄色葡萄球菌有此抗原，无特异性。
多糖抗原为半抗原，有型特异性。 ２、噬菌体分型。 ３、根据肠毒素分型。 ４、根据血浆凝固酶分型。
基红反应阳性，VP反应弱阳性。
▪
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化
明胶。
▪
具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉
素、红霉素等高度敏感。
致病性
金黄色葡萄球菌是人 类化脓感染中最常见的 病原菌，临床表现多种 多样，可引起局部化脓 感染，也可引起肺炎、 胃肠炎、心包炎等，甚 至败血症、脓毒症等全 身感染。
急性胃肠炎
猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌 鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌
败血症
二、检验所需器材
三、检验程序
沙门氏菌检验程序2010
四、操作方法
▪ 分五个步骤：
1.前增菌 ▪ 2.选择性增菌 ▪ 3.选择性平板分离 ▪ 4.生化实验 ▪ 5.血清型分型鉴定 ▪
▪ <国标>检测沙门氏菌方法分5个步骤：
▪ 1.前增菌： 在含有营养的非选择性培养基 中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的
生理状态。
▪ 沙门氏菌检测中前增菌的目的是使沙门氏菌 恢复其活力。
▪ 检测经过加工的食品中的沙门氏菌需要前增 菌主要因为加工过程中沙门氏菌受到损伤而处于 濒死状态。
2.选择性增菌
▪ 在含选择性抑制剂的培养基中，样品进 一步增菌。
▪ 沙门沙门氏菌检测中增菌的目的是使沙门氏 菌以外的细菌（主要是艾希氏菌属）受到抑 制，而使沙门氏菌得到一定的增殖，提高沙 门氏菌的检出率。
金黄色葡萄球菌的致病性
致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分甲、乙、丙、丁、戊五种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引 起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固 ，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色 葡萄球菌； e.肠毒素：产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，现已鉴定出葡萄球菌肠毒素 有A、B、C1～C3、D、E、G、H共9种。肠毒素A是最常见的。
适用于检测可能含 有少量金黄色葡萄 球菌，却带有大量 竞争菌的样品
BP平板
36± 1℃ 45-48h
血浆凝固酶 实验
第三法 金黄色葡萄球菌MPN检验程序
查MPN表
报告结果
金黄色葡萄球菌的检测－－测定方法
➢ 国标方法注意事项
• 现象观察：染色镜检（形态、染色）
•
表面光滑的菌落，菌落色素不稳定，但多数gella）是人类细菌性痢疾最
为常见的病原菌，通称痢疾杆菌。 通常志贺氏杆
菌(Bacillus，shigae)仅指I型痢疾志贺氏菌。
▪ 志贺氏杆菌是日本志贺诘在1898年首次分离 得到的，因此而得名。
▪
本属细菌对理化因素的抵抗力较其他肠道杆
菌为弱。对酸敏感，在外界环境中的抵抗力能以
HE琼脂上典型特征
4.生物化学试验筛选
▪ 挑取选择性琼脂平板上的可疑菌落， 接种于三糖铁琼脂培养基中。
▪ 排除大多数非沙门氏菌。也提供了 沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。
TSI(三糖铁)培养基 大肠杆菌和沙门氏菌
沙门菌常用生化试验
尿素酶试验 阴性（黄）阳性（红）
靛基质
对照管 阴性(－) 阳性(＋)
▪ 我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌
落总数、大肠菌群和致病菌三项。 ▪ 致病菌：能够引起人类发病的细菌。对不同
的食品和不同的场合，应该选择一定的参考 菌群进行检验。
第一节 沙门氏菌检验技术
一、生物学特性 是一大群在血清学上相关的革兰氏阴性杆菌，无芽孢、 无荚膜，周身鞭毛，能运动的需氧或兼性厌氧短杆菌。
▪ （2）增菌培养 吸取液体检样5ml，接种于50mL7．5 ％氯化钠肉汤50ml进行增菌。
▪ （3）分离培养 将上述培养物，分别划线接种到 BairdParker 平板和血平板。
▪ 血平板 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。 ▪ Baird-Parker 平板 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h 或 45 h
黄色葡萄球菌的计数； ▪ 第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量
较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数。
第一法
定性 检测
检样
25g样品+ 225ml 7.5%NaCl肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤
36± 1℃ 24hr
血平板
BP平板
36± 1℃ 24hr
镜检 营养肉汤
36± 1℃ 24hr
血浆凝固酶 实验
36± 1℃ 6hr
报告结果
第一法
第二法 Baird-Parker平板法检验程序
定量检测 （平板法）
适用于检测金黄色 葡萄球菌数不小于 10/g（mL）的食品
定量 检测
（MPN法）
25g样品+ 225ml 生理盐水
梯度稀释
选三个连续梯度，每个梯度各取3mL加入3管胰酪胨大豆肉汤
36± 1℃ 45-48hr
类似菌落；但无混浊带及透明圈。
▪
在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿
润、 金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶
血圈。
B-P平板
￥7（90mm)
Baird－Parker(BP培养基/贝尔德帕克平板) 用于凝固酶阳性葡萄球菌的分离和菌落计数用。
▪ 血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素 ，因此在血平板上产生明显的溶血环。
▪ 【方法】 ▪ （1）玻片法 ▪ （2）试管法
▪ 【结果判断】 ▪ （1）玻片法：5～10s内出现凝集者为阳性。 ▪ （2）试管法：如有凝块或整管凝集出现为阳
性。4h后无上述现象出现，则放置过夜后再 观察。 ▪ 【应用】 ▪ 本试验仅用于致病性葡萄球菌的鉴定。
金黄色葡萄球菌肠毒素的检测
一、动物学试验 主要用幼猫和猴。 二、血清学试验 肠毒素作为抗原，可以 和特异性抗体发生结合性反应，产生可见沉淀 用血清学反应检验金黄色葡萄球菌肠毒素 方法主要有： 1.免疫琼脂扩散法 2.反向间接血凝试验 3.免疫荧光法 4.酶联免疫吸附法
葡萄球菌皮肤感染
二、检验所需培养基
▪ 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤 ▪ 7.5 %氯化钠肉汤 ▪ 血琼脂平板 ▪ Baird-Parker 琼脂平板 ▪ 脑心浸出液肉汤(BHI) ▪ 兔血浆 ▪ 磷酸盐缓冲液 ▪ 营养琼脂小斜面 ▪ 革兰氏染色液 ▪ 无菌生理盐水
三、检验程序
▪ GB 4789.10-2010标准 ▪ 第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检验； ▪ 第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金
醇发酵试验
邻硝基酚β－半乳糖苷酶试验（ONPG试验）
阳性（黄） 阴性
5.血清学分型鉴定
提供培养物菌种的鉴定。 用分离出的沙门氏菌与已知A-F多价O 血清及H因子进行玻片凝集试验。 1）抗原的准备 2）O抗原的鉴定 用A—F多价O血清做玻片凝集试验，以生理 盐水做对照。 3）H抗原的鉴定 4）Vi抗原的鉴定
▪ P150 ▪ （1） A1：典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、氰化钾和赖氨
酸脱羧酶3项中有1项异常，按表可判定为沙门氏菌属。如有2项 异常，为非沙门氏菌属。 （2）A2：补做甘露醇和山梨醇试验，沙门氏菌靛基质阳性变体 两项实验结果均为阳性，但需要结合血清学鉴定结果进行判定。 （3）A3：补做ONPG。ONPG阴性为沙门氏菌，同时赖氨酸脱 羧酶阳性，甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。 （4）必要时进行沙门氏菌生化群的鉴别。
第二节 金黄色葡萄球菌检验技术
金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌的流行病学
近年来，美国疾病控制中心报告， 由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位， 仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫 生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素 引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的 33%，加拿大则更多，占45%，我国每年
发生的此类中毒事件也非常多。
金黄色葡萄球 葡萄球菌 表皮葡萄球菌 属分类： 腐生葡萄球菌
金黄色葡萄球菌食物中毒系 毒素型食物中毒。是由于进食 含有一种或多种含葡萄球菌肠 毒素的食物所引起。常见的菌 为金黄色葡萄球菌。
一、生物学特性
▪ 革兰氏阳性需氧或兼性厌氧菌 ，为球菌，排列成葡萄状，无芽 孢、鞭毛，不运动；大多数无荚 膜。