洁净区微生物基础

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微生物基础知识及洁净室的行为规范

3.1 洁净室（区）的基本要求
YY 0033－2000《无菌医疗器具生产管理规范》对洁净室（区）的基本要求：洁净区应设计合理，能满足生产需要，还应配置与洁净度级别相适应的空气调节净化系统。
对于有要求或者采用无菌操作技术加工的植入型无菌医疗器械（包括医用材料），应当在10000级下的局部100级洁净室（区）内进行生产
直接接触药物的容器、用具、设备表面、天中等毒性花、墙面及人手部的消毒（24小时用完）适用于空间的消毒中等毒性腐蚀性
3% ~5% 容器、用具、设备表面、天花、墙面
消毒剂杀菌原理
• 酒精能使菌体蛋白质脱水变性，常用酒精杀菌浓度为70-75%。 • 氯的消毒作用，即是HCLO作用，HCLO是中性分子，可以扩散至带负电的细菌表面，并穿过细胞膜进入细胞内部，由于氯原子的氧化作用，破坏某些酶系统，最终致细菌死亡。 • 表面活性剂作用：破坏细胞膜，使蛋白质变性。
1、微生物的概念
2、微生物的特点
3、微生物的分类 4、微生物的形态结构
1.1 微生物的概念
微生物是广泛存在于自然界的
体形微小，结构简单，数量多，分布广。
一群体形微小（直径小于1mm）、
结构简单、肉眼看不见，必须藉助光学或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的生物。
1.2 微生物的特点
球菌
杆菌
螺旋状菌
螺旋体
出芽状及柄状菌
各种芽胞的形态及位置
丝状菌
细菌的各种形态示意图及电镜照片（据Madigan等）
乙型肝炎病毒
酵母菌
细菌形态构造
•
细菌形态
细菌的结构与生长
• 细胞壁 • 细胞膜 • 细胞质 • 细胞核

微生物、洁净区基础知识及无菌保证知识培训试卷与答案

微生物、洁净区基础知识及无菌保证知识培训试卷姓名：一、填空题（每空１分,共 20分）1、进入洁净区得工作人员(包括维修、辅助人员)应定期进行卫生、微生物学基础知识与洁净作业等方面得培训及考核。

２、洁净区得设计必须符合相应得洁净度要求，包括达到“静态”与“动态”得标准。

３、无菌药品得生产须满足其质量与预定用途得要求，应当最大限度降低微生物、各种微粒与热原得污染4、常见微生物:细菌、霉菌、酵母菌、病毒。

5、微生物得五大特点：小 ,多,快，强，广.６、传播污染得四大媒介为：空气、水、表面、人 .二、单选题（每空2分,共２０分）1、微生物就是存在于自然界中得个体微小,结构简单、肉眼瞧不见，必须借助于显微镜才能瞧清它们外形得一群低等得、原始得微小生物。

Ａ、个体微小 B、个体庞大 C、结构复杂 D、结构简单２、无菌药品就是指法定药品标准中列有无菌检查项目得制剂与原料药，包括无菌制剂与无菌原料药A、无菌Ｂ、热原 C 细菌内毒 D 微生物限度3、采用湿热灭菌方法进行最终灭菌得，通常标准灭菌时间F0值应大于＿_8＿＿分钟,流通蒸汽灭菌处理不属于最终灭菌。

Ａ、6 B、12 C、10 D、8４、无菌药品按生产工艺可分为两类:采用最终灭菌工艺得为最终灭菌产品;部分或全部工序采用无菌生产工艺得为非最终灭菌产品.Ａ、最终灭菌产品 B、非最终灭菌产品 C、辅助灭菌产品５、内毒素—- 就是革兰氏阴性菌产生得具有强致热效应得脂多糖类物质。

A、霉菌Ｂ、革兰氏阳性菌Ｃ、革兰氏阴性 D酵母菌６、A级洁净区静态环境下≥5、0μm悬浮粒子得最大允许数/立方米为(２０）A、 20B、200C、2９０D、2９7、洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间得压差应当不低于１０帕斯卡。

A、 5 Ｂ、10 Ｃ、1５ D、208、2010版药典规定注射用水细菌内毒素检测限度为:为每1mｌ中含内毒素量应小于0、25EU。

A、０、１2５Ｂ、0、25 C、０、5 D、0、1二、多选题（共５题，每题2分,共10分）1、洁净区防止交叉污染得重要措施：(ABＣD)A、合理布置空间面积B、提高设备水平C、分设空调净化系统D、严格控制人流物流２、洁净区气流组织形式中单向流得特点：（ＡCDE ）A、空气流线呈平行B、具有不规则运动轨迹C、类似活塞作用D、各流线间得尘粒不易相互扩散E、达到净化程度高3、药品污染热原得途径（生产过程):（AＢCDF）A、注射溶媒B、容器与设备、管道、滤器C、原辅料D、制造过程及生产环境E、输液器带入F、由于包装不严密产生热原4、热原得性质: (ABＣDE)A、耐热性B、水溶性C、不挥发性D、滤过性E、能被强酸、强碱、强氧化剂、超声波等破环５、常用物理消毒灭菌方法有：（ＡBCD）A、湿热灭菌法B、干热灭菌法C、辐射杀菌法D、滤过除菌法E、甲醛熏篜三、判断题（正确得打“√"，错误得打“×",每小题２分，共40分)ﻫ1、污染得定义就是当一个产品中存在有不需要得物质时，它即受到污染. （√）2、在A/Ｂ级洁净区,连续或有规律地出现少量≥5、0 µｍ得悬浮粒子时,可以不进行调查.(×)3、未受培训得外部人员（如外部施工人员或维修人员)在生产期间需进入洁净区时，应当对她们进行特别详细得指导与监督。

洁净区基础知识

洁净区基础知识洁净室（区）:对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制(de)房间或区域.其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源(de)介入,产生和滞留(de)功能,其他相关参数诸如：温度、湿度、压力也有必要控制.空气洁净度：是指环境中空气含尘（微粒）量多少(de)程序,含尘浓度高则洁净度低,含尘浓度低则洁净度高.悬浮粒子：可悬浮在空气中(de)尺寸一般在0.001μm－1000μm之间(de)固体、液体或两者(de)混合物质,包括生物性粒子和非生物性粒子 .菌落：细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而成(de)一细菌集落,简称CFU.Air lock（缓冲间）(de)作用控制空气对流,减少外界脏空气中(de)微粒、灰尘进入车间.必须保持缓冲间门(de)关闭,不得同时开启.为什么要净化空气我们所生活(de)环境中,可以说微生物是无处不在,无处不有.微生物种类繁多,有(de)对人有益,有(de)有害,有(de)无益也无害.但在药品生产过程中,不可能对环境中(de)各种微生物加以区别对待,为保证药品(de)安全有效,需要对其进行控制.空气(de)微生物多数附着在灰尘上,或以芽孢形式悬浮中于空气中,1μm以下者处于悬浮状态,10μm以上者会逐渐沉下来而形成菌尘.所以也要对尘粒进行控制.大量临床资料表明,注射剂（尤其是静脉注射剂）如污染了7~12μm(de)尘粒,可导致热原反应、肺动脉炎、微血栓或异物肉芽肿等,严重(de)还会致人死命.而如果污染了细菌,轻则局部红肿化脓,重则引起全身细菌性感染空气净化(de)主要过程一、是利用过滤器有效地控制送入室内(de)全部空气(de)洁净度,由于细菌都会依附在微粒上,微粒过滤同时也滤掉了细菌；空气净化过滤器按其效率可分初效、中效、高效过滤器三类.①粗效过滤器：用于过滤10μm以上大尘粒和异物；一般由粗、中孔泡沫塑料、涤纶无纺布、化纤组合滤料等作为滤材.粗效过滤器主要靠尘粒(de)惯性沉积,过滤效率一般在20％一30％.②中效过滤器：用以滤除1～10μm(de)悬浮尘粒；一般由中、细孔泡沫塑料、无纺布、玻璃纤维作为滤材.过滤效率一般在30％～50％.③高效过滤器（HEPA）：用以滤除1μm以下以控制送风系统含尘量,主要采用超细玻璃纤维滤纸、石棉纤维滤纸作为滤材.二、是利用合理(de)气流组织排除已经发生(de)污染,由送风口送入洁净空气,使室内产生(de)微粒和细菌被洁净空气稀释后强迫其由回风口进入系统(de)回风管路,在空调设备(de)混合段和从室外引入(de)经过过滤(de)新风混合,再经过进一步过滤后又进入室内,通过反复(de)循环就可以把污染控制在一个稳定(de)水平上,这个水平就应该低于相应(de)洁净度级别；三、是通过调整,使不同级别洁净室室内(de)空气静压大于10帕（包括与非洁净区）,与室外大气大于10帕,防止外界污染或交叉污染从门或各种缝隙部位侵入室内.洁净区压差要求洁净区与非洁净区之间、不同等级洁净区之间(de)压差应不低于10帕斯卡,相同洁净度等级不同功能(de)操作间之间应保持适当(de)压差梯度,以防止污染和交叉污染.-----中国新版GMP相邻洁净区房间之间(de)压差应为12.5帕斯卡-------FDA洁净区温湿度要求本规范对洁净室（区）(de)温度和相对湿度要求应与药品生产工艺相适应.无特殊要求时,温度应控制在18～26℃,相对湿度控制在 45～65％.为什么规范人(de)行为颗粒无处不在人眼可见最小颗粒为30微米坐着不动能产生100,000个颗粒（10万）行走能产生5,000,000个颗粒（500万）跑动能产生15,000,000个颗粒（1500万）微生物在空气和人体内外表面包括细菌、病毒、霉菌和酵母人体携带(de)微生物数量惊人,且根据个人卫生习惯(de)不通因人而异人是最大(de)污染源,人(de)行为需规范当人们说话、咳嗽、打喷嚏时,大量(de)尘粒被释放出来,附着在产品表面使产品受到污染.人身上(de)头发、眉毛、胡须等也会释放大量尘粒.卫生管理1.了解污染源对药品生产全过程可能造成污染(de)来源,进行深入(de)了解研究,从而设计一个完好(de)生产工艺,制定规章制度和标准操作规程,从各个环节采取消毒和卫生措施来防止微生物污染,使产品达到所要求(de)卫生学质量,包括稳定性及各种微生物参数.2.进行微生物监测在药品生产过程中,应按GMP要求不断进行各项微生物卫生学监测.例如：对洁净室空气中(de)浮游菌、沉降菌(de)监测；对无菌设备清洁灭菌(de)验证；对非无菌药品进行细菌和活菌数测定和病原菌(de)限制性检查等.3.定期进行环境卫生清洁4.做好生产人员卫生管理新进人员(de)健康检查：药品生产企业在招收新职工时,一定要对新职工进行全面(de)健康检查,要确保新员工不患有急性或慢性传染病.建立生产人员健康档案：药品生产企业应对职工建立个人健康档案,直接接触药品(de)生产人员至少每年体检一次；患有传染病或体表有伤口者不得进入洁净室.洁净区内人员行为规范洁净区生产人员要求：进入洁净室必须更换洁净服；并按照规定程序进出洁净室；在洁净区生产操作动作要准、稳、轻、少,减少不必要(de)谈话和活动；生产人员应定期进行微生物基础知识培训和卫生教育.严格按照相应(de)sop进行各岗位(de)操作规程进行操作.平时大家不注意(de)问题灰尘、微粒具有沉降和粘附在趋势,所以同一区域内,地面是微粒相对集中在地方,也是微生物相对较多(de)地方,墙壁也容易粘附灰尘.空气自净有死角顶送顶回（洁净走廊）,地面.顶送侧回（清洗间,操作间）,对面(de)墙角,顶棚.微粒沉降和粘附.不能用脚踏在垫仓板和料桶上.不得跑跳、大声喧哗.不靠在墙上或其他物体上.缓冲间进料时有人进出.洁净室（区）内人员卫生要求：1、养成良好卫生习惯,勤洗澡、洗头,勤理发、剃胡须,勤剪指甲,勤更衣.2、严格控制进入洁净室人数,只有洁净室工作人员和经授权人员方可进入,并且进出洁净室要进行登记.3、进入洁净室(de)人员,不能患传染病、皮肤病,包括隐形传染病,体表有伤口、感冒、咳嗽、腹泻者不宜进入洁净室.4、不携带个人物品进入生产区,不在生产区内吃东西.5、工作前洗干净手,不涂抹化妆品,上岗时不佩戴饰物、手表.洁净室内随时保证手(de)清洁,注意消毒.手在消毒以后,不再接触与工作无关(de)物品,不裸手直接接触药品.6、工作时,不要快速走动,操作(de)动作要轻、幅度要小,讲话要少、声音要细,避免不必要(de)走动和动作,不要频繁进出洁净室.7、行走时,不要穿过层流罩（层流罩：是能将操作员与产品屏蔽隔离(de)设备之一,其主要用途是避免产品污染；工作原理：洁净层流罩是将空气以一定地风速通过高效过滤器后,形成均流层,使洁净空气呈垂直单向流,从而保证了工作区内达到工艺要求(de)高洁净度.）,不可避免时,应离层流罩外1米以外.8、休息时,若站者,手臂沿身体下垂,不要两臂交叉；若坐着,把手放膝盖上,不要两臂交叉或双腿交叉.9、离开工作场地（包括吃饭、上厕所）,必须脱掉工作服装.精烘包更衣流程：气闸室更鞋→进入一更更衣室→脱外衣→洗手池洗手烘干→进入二更更衣室→带头套→穿洁净工作服和洁净鞋→进入缓冲室→手部用75％乙醇消毒→进入洁净区.GMP知识(Good Manufacture Practice,GMP)是药品生产和质量管理(de)基本准则,适用于药品制剂生产(de)全过程和原料药生产中影响成品质量(de).大力推行药品GMP,是为了最大限度地避免药品生产过程中(de)污染和,降低各种差错(de)发生,是提高药品质量(de)重要措施.1.（区）(de)内表面应平整光滑、无裂缝、接口严密、无颗粒物脱落,并能耐受清洗和消毒,墙壁与地面(de)交界处宜成弧形或采取其他措施,以减少灰尘积聚和便于清洁.2.洁净室(区)应根据生产要求提供足够(de)照明.主要工作室(de)照度宜为300勒.3.进入洁净室(区)(de)空气必须净化,并根据生产工艺要求划分空气洁净级别.洁净室(区)内空气(de)微生物数和尘粒数应定期监测,监测结果应记录存档.4.接部位均应密封.空气洁净级别不同(de)相邻房间之间(de)静压差应大于5帕,洁净室(区)与室外大气(de)静压差应大于10帕,并应有指示压差(de)装置.5.洁净室(区)(de)温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应.无特殊要求时,温度应控制在18～26℃,相对湿度控制在小于65%.6.与设备连接(de)主要固定管道应标明管内物料名称、流向.7.用于生产和检验(de)仪器、仪表、量具、衡器等,其适用范围和精密度应符合生产和检验要求,有明显(de)合格标志,并定期校验.8. 生产设备应有明显(de)状态标志,并定期维修、保养和验证.设备安装、维修、保养(de)操作不得影响产品(de)质量.不合格(de)设备如有可能应搬出生产区,未搬出前应有明显标志.9.工作服(de)选材、式样及穿戴方式应与生产操作和空气洁净度级别要求相适应,并不得混用.洁净工作服(de)质地应光滑、不产生静电、不脱落纤维和颗粒性物质.10. 进入洁净室(区)(de)人员不得化妆和佩带饰物,不得裸手直接接触药品.11.药品生产企业应有生产管理、质量管理(de)各项制度和记录：（1）厂房、设施和设备(de)使用、维护、保养、检修等制度和记录；（2）物料验收、生产操作、检验、发放、成品销售和用户投诉等制度和记录；（3）不合格品管理、物料退库和报废、紧急情况处理等制度和记录.（4）环境、厂房、设备、人员等卫生管理制度和记录；（5）本规范和专业技术培训等制度和记录.12.每一生产操作间或生产用设备、容器应有所生产(de)产品或物料名称、批号、数量等状态标志；13.产品应有批包装记录.批包装记录(de)内容应包括：（1）待包装产品(de)名称、批号、规格；（2）印有批号(de)标签和使用说明书以及产品合格证；（3）待包装产品和包装材料(de)领取数量及发放人、领用人、核对人签名；(4)已包装产品(de)数量；（5）前次包装操作(de)清场记录(副本)及本次包装清场记录(正本)；（6）本次包装操作完成后(de)检验核对结果、核对人签名；（7）生产操作负责人签名.14.批生产记录应字迹清晰、内容真实、数据完整,并由操作人及复核人签名.记录应保持整洁,不得撕毁和任意涂改；更改时,在更改处签名,并使原数据仍可辨认.规范记录：记录填写要求：及时、准确、真实、完整,按规定修改.及时：在操作过程中及时记录.不提前、不滞后,执行到哪步,记录到哪步.准确：按实际执行情况和数据填写,填写数据精度应与工艺要求和显示一致.真实：严禁不真实、不负责地随意记录或捏造数据和记录.按规定修改：填写错误时,将错误内容数据划掉,旁边注明正确内容并签名,修改后原内容应能辨别.。

洁净区卫生管理及微生物基础知识培训试题及答案

洁净区卫生管理及微生物基础知识培训试题一、选择题（每题5分，共25分）1、下列说法正确的是（D ）A、不允许未穿洁净服或剧烈活动人员进入洁净区。

B、万级区使用的消毒剂不可以使用纯化水配制。

C、生产结束后，传递窗内壁必须由高级别洁净区操作人员清洁。

D、传递窗不得随意开、关，不允许作为人流通道。

2、洁净区操作人员的下列哪个行为是正确的（A ）A、按照正确的更衣流程进入洁净区。

B、将铅笔、自来水笔、卫生纸带入洁净区。

C、将记录从更衣间带入洁净区。

D、穿袖口有破损的洁净服进入洁净区。

3、下列说法正确的是（C ）A、物料可随人员从人流通道进入洁净区。

B、纯化水管道不需要定期进行清洗、消毒或灭菌。

C、在产品生产过程中，人是洁净区最大的污染源。

D、生产操作人员可以在洁净区大声喧哗、乱蹦乱跳。

4、洁净区操作人员的下列哪些行为是错误的（D ）A、出入洁净区人员的皮肤不得有炎症、搔痒及可见伤口。

B、患可能对产品生产有危害的疾病时主动向公司报告。

C、直接接触产品的生产人员上岗前不需要接受健康检查。

D、内包操作人员裸手直接接触产品进行内包装。

5、洁净区消毒剂要每月更换使用，是为了避免微生物。

（C ）A、滋生B、增长C、产生耐药性D、以上都不对二、判断题（每题5分，共50分）1、酒精使菌体蛋白质变性而杀菌，浓度越高越好，常用75-80%酒精是为了节约（×）2、外来检查人员、参观人员，只要经车间领导同意，即可进入洁净区。

（×）3、未受培训的外部人员（如外部施工人员或维修人员）在生产期间需进入洁净区时，应当对他们进行特别详细的指导和监督。

（√）4、当洁净区正在进行生产时，应当特别注意减少洁净区内的各种活动。

应当减少人员走动，避免剧烈活动散发过多的微粒和微生物。

（√）5、进入洁净区人员，不得佩戴饰物,但可以化淡妆。

（×）6、操作间内为了方便及时清洁，可存放清洁工具。

（×）7、维修工因设备故障情况紧急可以不用按洁净区操作人员要求进入洁净区。

洁净区环境控制及微生物知识培训

• 步骤：在皿底标记取样点号、取样日期、时间，在取样点打开皿盖，皿底放在平面上，将皿盖斜靠在皿底边缘，保证皿盖不掉下来且尽可能少的覆盖培养基表面。测试结束后，小心盖上培养皿，传出洁净区。
• 30-35℃的培养箱中培养3天。
沉降菌的监测方法
• 沉降菌监测的注意点： • 摆放位置和高度（抑制物质的引入）
洁净区环境控制及微生物知识培训
zwx 2013.10
制药生产洁净控制
主要:
（一）人员控制系统（二）公用工程控制系统（三）设备控制系统（四）物料控制系统（五）生产过程控制系统（六）质量检测控制系统
相关术语
• 洁净室(区)：需要对尘粒及微生物含量进行控制的房间(区域)。
• 悬浮粒子：洁净室内悬浮在空气约在0.1µm至 5µm之间的固体和液体粒子，用于空气洁净度分级。
• 非本岗位人员进入洁净区（包括维修、辅助人员）应定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业等方面的培训及考核。非本岗位人员进入洁净区要严格按规定程序进出、作业，并有登记记录。
洁净区卫生管理规程
工作服应制定清洗周期，工作服包括服装和一切用于包裹头、脸、手臂等的遮护用品。不同空气洁净度级别使用的工作服应分别清洗、整理，必要时消毒或灭菌。
1
＜1 1
＜1 1
＜1
1
1
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1
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3
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10
8
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洁净室环境控制
• 压差的控制：洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差应当不低于10帕斯卡。必要时，相同洁净度级别的不同功能区域（操作间）之间也应保持适当的压差梯度。

《洁净区卫生和微生物学基础知识》测试试卷(五)

《卫生和微生物学基础知识》测试试卷（五）单位：姓名：分数：一、填空题（每空5分，共30分）。

1、GMP洁净厂房设计的实质是防止。

2、霉菌亦称真菌，是真核细胞生物中的一类单细胞和多细胞微生物，具有真正的细胞核结构：、和，细胞浆内有完整的细胞器。

3、洁净室（区）有害物质的来源：、、。

4、供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过小时。

5、取样室或者取样车必须装有紫外灯，抽样前紫外灯消毒分钟。

6、盛装做微生物限度检查的样品的容器应消毒。

二、选择题（每题5分，共30分）1、洁净室（区）人员卫生不包括（）。

A、勤剪指甲B、勤走动C、勤洗澡D、勤洗手2、根据生产需要，公司现有生产车间洁净室（区），空气洁净度等级为（）。

A、百级B、万级C、十万级D、三十万级3、从事洁净生产的员工进入洁净室（区），脱掉的外套应放在（）。

A、一更自己的衣柜B、二更自己的衣柜C、挂在门上D、随意放置4、以下行为中哪个是正确的？（）A、普通拖鞋穿进净化车间B、在洁净车间戴净化手套工作C、穿净化衣走出净化车间D、在净化车间挽起袖子工作5、洁净室（区）与非洁净室（区）之间、不同级别洁净室（区）之间的压差应不低于（）Pa。

A、10B、5C、0D、206、洁净室（区）的以下监测项目中，（）通常不能每天进行监测。

A、尘埃粒子B、温度C、相对湿度D、压差三、简答题（第1、2题每题15分，第3题每题10分，共40分）。

1、请根据进入洁净室操作规程，按照顺序填写进出洁净车间流程。

2、选择消毒剂的原则是什么？3、常用的消毒剂类别有什么？卫生和微生物学基础知识答案（五）单位：** 姓名：三只鱼分数：100分一、填空题（每空5分，共30分）。

1、GMP洁净厂房设计的实质是防止产品污染及质量变化。

2、霉菌亦称真菌，是真核细胞生物中的一类单细胞和多细胞微生物，具有真正的细胞核结构：核膜、核仁和染色体，细胞浆内有完整的细胞器。

3、洁净室（区）有害物质的来源：粉尘、有害蒸汽和气体、余热和余湿。

微生物基础知识及洁净区微生物控制培训

微生物可通过空气、水、食品等途径传播，此处将重点介绍空气中微生物的控制方法。
微生物危害及对人体的影响
1 感染传播
细菌、病毒等微生物会引起感染传播，引起疾病。
2 食品卫生
细菌在食品中繁殖，容易导致食品污染。
3 药物耐受性
细菌、病毒等微生物的药物耐受性会影响治疗效果。
洁净区域的定义与分类
1
洁净区定义
注意事项易燃，对皮肤的刺激性较大。
地面、墙壁等表面消毒消毒率较高，使用范围较广
含氯量不宜过高，会对地面产生腐蚀性。
具有毒性，对人体造成伤害，使用时要注意控制醛气浓度。
环境监测程序
设备选择
选择能满足环境监测数据采集和管理的设备。
软件选择
根据设备类型、使用要求等选择合适的监测软件。
操作流程
温度和湿度控制
要根据不同环境对温度和湿度进行控制，保证洁净区域内的环境舒适。
检测和维护
要对通风系统进行定期监测，发现问题及时维护和处理。
环境相关的质量控制
对于洁净区域的环境质量进行相关的质量控制，包括环境监测、污染控制、物料灭菌、器具消毒等。不断优化过程、提高管理水平和经验，提高洁净区域的质量保障和研究水平。
着装要求
穿戴干净的制服或衣服，佩戴适当的防护用品。
操作流程
对不同操作流程进行操作规程的制定和员工的培训，确保操作的标准化和规范化。
相关法规
员工培训需要对相关法规进行解析，使员工清楚了解洁净操作的相关法律法规。
消毒剂的种类与使用方法
种类酒精类含氯类醛类
使用范围手术器械等器材表面消毒
涉及非常规流程的问题处理技巧
1 问题的分析和定位 2 方案的制定和实施 3 维护和管理

洁净区微生物基础知识

洁净室中最大的微生物污染源
1、人在代谢过程中会释放和分泌污染物。 2、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。 3、人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。
人体内外微生物的分布
1、皮肤：表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八叠球菌属细菌、类白喉棒杆菌、金黄色葡萄球菌等 2、口腔：唾液链球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、类白喉棒杆菌等 3、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等。 4、下呼吸道：包括气管、支气管和肺。健康人的下呼吸道是无菌的。
热力灭菌法：使蛋白质、酶及核酸永久性破环，细胞膜溶解，导致细胞发生不可逆转的死亡。 1、干热灭菌法—采用灼烧或干热空气灭菌，使用方便，适用于玻璃器皿和瓷器等耐高温的固体物的灭菌。 2、湿热灭菌法—利用热蒸汽杀死微生物。高压蒸汽灭菌：利用高温高压蒸汽进行灭菌的方法，蒸汽的穿透力较热空气强可以杀死一切微生物，包括细菌的芽孢，真菌的孢子或休眠体等耐高温的个体。最可靠最适用最广泛的灭菌方法。
• 4、枯草杆菌结膜炎
• 5、酵母菌使糖分解，药液产生有机酸
• 6、霉菌
使制剂霉坏，酸败变质
洁净室内微生物在哪里
• 空气 •水 • 人员 • 器具
空气中的微生物
• 灰尘——微生物的飞行器 • 微生物不是凭空存在，99%的微生物都附在颗粒上。控制空气中的微粒数，就是控制了微生物数量。 • 灰尘、微粒具有沉降和粘附在趋势，所以同一区域内，地面是微粒相对集中在地方，也是微生物相对较多的地方，墙壁也容易粘附灰尘。
消毒注意事项
• 消毒剂浓度合适，针对特定范围内的细菌选择相应的消毒剂 • 消毒剂在一定周期内轮换使用，以防细菌耐药。我公司常用消毒剂为：0.2%新洁尔灭、75%酒精溶液 • 紫外灯消毒时记录使用时间，紫外灯的输出功率随使用时间增加而降低。国产紫外灯的平均寿命（点到70%额定功率的时间）一般为2000h，超过平均寿命时，就达不到预期效果，必须更换。我公司规定紫外灯使用时间为1000h。

洁净区工作人员基础知识培训教材

8、沉降菌——用国家标准收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。
二、概述
9、浮游菌——由内部真空抽气,使含微生物粒子的高速气流从采样器筛孔板吸入,定量空气中的活微生物粒子撞击到专用的培养基平板上,经培养后形成菌落,记数后求得每立方米空气中的浮游菌数。
、污染物质：能使药品生产的原料、半成品、成品改变性质、造成不良影响的物质。
三、卫生管理
④工作服的选材、式样及穿戴方式应与生产操作和空气洁净度级别的要求相适应，并不得混用，且有明显区别。洁净工作服的质地应光滑，不产生静电，不脱落纤维和颗粒性物质，无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物；
⑤工作服应按不同洁净度级别的要求分别清洗整理，必要时消毒或灭菌，应制定清洗周期；
二、概述
3．管理的核心、实质 (1)把人为差错控制在最低程度，直到最终消灭差错。 (2)千方百计防止污染：微生物污染和交叉污染。 (3)建立严密的质量保证体系，对药品生产的全过程进行严格的科学的管理。
二、概述
4．的主要内容 (1)硬件：是基础条件，包括总体布局、厂房、生产环境、设备、设施等。 (2)软件：是管理手段，健全一套切合企业实际的文件管理体系，包括各项制度。 (3)人员：是保证要素，是软、硬件的设计及执行者。
四、洁净区管理
1、洁净室(区)的要求 (1)洁净室(区)的内表面应平整光滑、无裂缝、接口严密、无颗粒物脱落，并能耐受清洗和消毒，墙壁与地面的交界处宜成弧形或采取其他措施，以减少灰尘积聚和便于清洁 (避免藏污纳垢)。洁净室(区)主要工作室的照度宜为300勒克斯(1x)，一般区照度不低于150勒克斯(1x)。
二、概述
15、验证：证明任何程序、生产过程、设备、物料、活动或系统确实能达到预期结果的有文件证明的一系列活动。 16、标准操作规程：经批准用以指示操作的通用性文件或管理办法。

微生物基础知识培训

水产品、蔬菜等。
85℃热水1~3分钟灭菌。
300ppm次氯酸纳溶液
1~3分钟内杀灭本菌。
金黄色葡萄球菌在自然界中分布广泛，空气、水、地面、物体表面、人和动物的体表、粘膜等处均有存在。
食品药品中生长有金黄色葡萄球菌，是食品药品卫生的一种潜在危险，因为金黄色葡萄球菌可以产生肠毒素，食后能引起食品中毒。
水：仅次于土壤的微生物分布、定居的第二场所， 90%为革兰氏阴性菌，主要有假单胞菌、黄杆菌等，水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。
空气：空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空气中的藏身之地，还来源于人和动物，它们大多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，悬浮在大气中。
能形成芽孢的细菌均为 G+ 菌。
芽孢
在条件适宜时，芽孢可形成新的菌体。一个细菌只形成一个芽孢，一个芽孢也只能形成一个菌体。芽孢的形成不是细菌的繁殖方式，而是营养缺乏的一种反应，是细菌的休眠状态。
与芽孢相比，未形成芽孢而具有繁殖能力的菌体称为繁殖体。
芽孢的特征
含水量低（40%）
（一）、细菌
细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构（1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。常见的有双球菌、链球菌、葡萄球菌等。（2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。（3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质是细菌的基本结构。

微生物基础知识及洁净区微生物控制

微生物基础知识及洁净区微生物控制培训内容简介一、微生物简介二、微生物的分布三、微生物的作用及危害四、微生物的形态结构五、微生物污染及消毒灭菌六、洁净区微生物的控制一、微生物简介1、微生物的定义(microorganism, microbe):微生物是存在于自然界中的个体微小，结构简单、肉眼看不见，必须借助于显微镜才能看清它们外形的一群低等的、原始的微小生物，如细菌，病毒等。

2、微生物的分类(按其结构、化学组成可分为)Ø原核生物:细胞核无核膜包裹，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物。

它包括细菌、放线菌、立克次氏体、衣原体、支原体、蓝细菌和古细菌等。

Ø真核生物:细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体, 细胞器完整。

如真菌(酵母菌和霉菌)、原生动物、藻类。

Ø非细胞类:结构最简单和最小的微生物，能通过除菌滤器，没有典型的细胞结构，无产生能量的酶系统，只能在宿主活细胞内生长增殖的微生物。

如病毒和朊病毒。

非细胞细胞生物生物3 .微生物的五大特点：3 .微生物的五大特点：①体积小、比表面积大：微生物的大小以μm计，但比表面积（表面积/体积）大，必然有一个巨大的营养吸收，代谢废物排泄和环境信息接受面。

这一特点也是微生物与一切大型生物相区别的关键所在。

②吸收多、转化快：这一特性为高速生长繁殖和产生大量代谢物提供了充分的物质基础。

③生长旺、繁殖快：生长繁殖率极高，如大肠杆菌在20-30分钟内分裂一次，如果连续分裂，48小时内2.2*10^43个细菌数量增加，营养消耗、代谢积累和限制生长速度。

这种特性可以在短时间内将大量的基板转化为有用的产品，缩短研究周期。

还有一些缺点，如疾病、粮食霉变。

④分布广,种类多（10万多种）：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等，土壤中的数量最多。

⑤适应性强，易变异：在紫外线辐射、生物诱变剂和环境中的一些营养因子的变化中，微生物自觉地、强制性地改变其遗传结构，导致变异。

无菌知识与无菌操作注意事项

无菌知识与无菌操作注意事项目录：1、微生物基本知识2、无菌的基本知识3、GMP中关于洁净区管理的基本要求4、洁净区人员卫生规范5、洁净区人员行为规范6、具体工作中的注意事项具体内容：1、微生物基本知识1.1微生物包括：细菌、真菌、放线菌、蓝线菌、立克次氏体、支原体、衣原体、病毒。

1.2细菌的特点：体积小、面积大；吸收多、转化快；生产旺、繁殖快；适应性强；分布广、种类多1.3细菌的形态：○1球菌○2杆菌○3螺旋菌1.4细菌的结构：○1基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞核、核质体○2特殊构造：鞭毛、菌毛、芽孢、美膜、气泡1.5芽孢：某些细菌在其生产的一定阶段，于营养细胞内形成一个圆形或卵圆形的内生孢子，是细菌的休眼体。

特点：含水量低、壁原而致密，对热、化学剂、辐射、压力、抵抗力强。

1.6常见污染药物的菌体都是一些生命力强的菌体，如葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、枯草杆菌以及一些霉菌等。

2、无菌的基本知识按照无菌的最严格的定义，只有完全没有活微生物的样品才认为是无菌的。

但由于检查有一定的限度，它属于小概率事件，不可能破坏所有的药品，所以对于整批药品而言，实际上不能证明绝对无菌。

因此，声称无菌的一批产品的无菌情况是按照概率来定义的。

所以不能仅靠无菌检查来保证产品的无菌，而应通过全过程的无菌管理来保证产品的无菌。

我公司生产的产品主要用于注射剂的原料，因此要严格控制其无菌和澄明度。

如果使用了染菌的针剂，若是非致病菌，可能回引起局部的炎症，而若是致病菌，就可能会引起相应的疾病，染菌严重的药品若用于输液，会引起脓毒症、败血症甚至死亡。

较大的微粒可造成局部循环障碍，引起血管栓塞；微粒过多，造成局部堵塞和供血不足，组织缺氧而产生水肿和静脉炎；异物侵入组织，由于巨噬细胞的包围和增殖引起的肉芽肿。

此外，威力还可引起过敏反应、热原样反应。

灭菌与消毒灭菌方法：物理灭菌法（干热灭菌、湿热灭菌、辐射灭菌、过滤除菌）；化学灭菌法（化学药剂杀菌法、气体灭菌法）2.1化学消毒：2.2物理灭菌紫外线是一种比可见的紫外光波长还要短的不可见电磁波，它的波长范围是100~380nm，微生物体内都含有核酸，而核酸吸收紫外线照射的辐射能后可引起光化破坏作用，从而杀死微生物。

微生物基础知识及洁净区微生物控制试卷答案

二、是非题：（每题5分，共20分）
1、药品的微生物污染源：空气、水、厂房与设备、药品生产用原辅料、包装材料、昆虫、生产操作人员等。（√）
2、洁净区防污染必须以尘埃粒子和微生物为环境监控对象。（√）
3、在洁净区从事药品生产的人员须2年进行一次身体检查，有皮肤疾病者、传染病者、体表有伤口者不得进入洁净区。（×）
4、洁净区对外界的静压差＞5Pa。（×）
三、简答题：（每题25分，共50分）
1、简述进入净区人员个人卫生要求？
答：进入净区人员个人卫生要求为：不得化妆。不得在洁净区内吃饭、喝水。不得在洁净区内抽烟。不得有可见伤口。不得留长手指甲、戴首饰。传染病患者不得进入洁净区。平时生产工作中，如患有腹泻、感冒、不明原因发热或体表有伤口等疾病，不得进入洁净区。
2、简述正确配制消毒剂要求？
答：正确配制消毒剂要用纯化水配制消毒液。按说明书要求的浓度配制消毒液。不要将剩下的消毒液倒入新配的消毒液中。不要混合不同种类的消毒液。
4、洁净区的污染源为尘埃及细菌污染，其中来自人的尘粒污染占洁净室污染的80%
5、出入洁净区的洁净工作服应尽可能覆盖全身，皮肤暴露部ห้องสมุดไป่ตู้越少越好，以尽量减少产品的污染。
6、操作人员进入洁净区应严格按照SOP程序：存放个人物品→换鞋→穿上洁净拖鞋→脱去外衣→洗手→穿上洁净服→戴上口罩→检查→手消毒→进入洁净区。
7、进入洁净区的维修工具必须为专用工具，存放在专用地点，并有标识。维修用具在使用完后必须马上清洁，并放回指定地点。
8、传递窗使用前先检查传递窗连锁装置是否正常。由非洁净区进入洁净区的物料及物品，通过传递窗，须开启紫外灯照射10--15min。
9、生产完成后应进行清场，对地面、门窗、用具、设备表面、水池、地漏等进行清洁。

新版GMP微生物学基础知识及洁净区管理培训试题(含答案)

新版GMP微生物学基础知识及洁净区管理培训试题姓名部门得分一、填空题（40＊1.5）1.微生物类群十分庞杂,主要包括立克次体、、、、螺旋体、枝原体、衣原体与等,还包括显微藻类和原生动物.2.在药品生产过程中,应按GMP要求不断进行各项微生物卫生学监测.例如:对洁净室空气中的、、的监测;对无菌设备清洁灭菌的验证等。

3.在药品生产中，导致药品的微生物污各种要素包括:厂房环境的、制药用水、、、。

4.在药品生产中,由于操作人员操作不注意或个人卫生情况欠佳，微生物可通过、、以及衣服、、等各种渠道转移给药物制剂。

因此，进入洁净生产区的人员不得、和佩带、严格按操作规程穿戴并。

5.控制微生物的物理因素主要有：、、、、渗透压、、等，对微生物生长能起到抑制作用或杀灭作用.在药品GMP卫生管理上可以归纳为、、。

6.减少空气中微生物数量的方法有多种,其中常用的有3 种方法：、和。

7.对制药用水的消毒方法除应用于水的本身消毒以外,还必须包括水系统中的、的消毒问题。

8.我司对洁净区的地面及清洁设备进行消毒所用的消毒剂为：、及,每月轮换。

9.微生物污染会使药品出现：变色、、、沉淀，产生有毒有害物质，致使药品。

对人体而言可能造成: 、中毒、、甚至死亡。

二、名词解释(3*5)消毒：灭菌:防腐:三、简答题1．简述微生物的五大特征及生长繁殖所需的条件.(10分）2。

人是药厂中最不清洁的成分最大的污染源，请结合以下数据，分析可采取哪些有效措施来降低和控制由人员引发的微生物污染.（15分）➢人的皮肤上平均每平方厘米含有10万个细菌，而且繁殖速度惊人，刚洗过的皮肤，在几小时之内细菌就可恢复到原来的数量。

➢一般人每个喷嚏的飞沫含有4500-150000个细菌；感冒患者一个喷嚏含有多达8500万个细菌。

1.细菌、放线菌、真菌（霉菌、酵母菌）、病毒2.浮游菌、沉降菌3.空气、操作人员、物料、设备4.手、咳嗽、喷嚏、头发、化妆、饰物、洁净服、洗手消毒5.温度、辐射作用、过滤、干燥、超声波、防腐、消毒、灭菌。

微生物、洁净区基础知识及无菌保证知识培训试卷与答案

微生物、洁净区基础知识及无菌保证知识培训试卷姓名:一、填空题（每空1分，共 20分）1、进入洁净区的工作人员（包括维修、辅助人员）应定期进行卫生、微生物学基础知识和洁净作业等方面的培训及考核。

2、洁净区的设计必须符合相应的洁净度要求，包括达到“静态”和“动态”的标准。

3、无菌药品的生产须满足其质量和预定用途的要求，应当最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染4、常见微生物:细菌、霉菌、酵母菌、病毒。

5、微生物的五大特点：小，多，快，强，广。

6、传播污染的四大媒介为：空气、水、表面、人。

二、单选题(每空2分，共20分)1、微生物是存在于自然界中的个体微小，结构简单、肉眼看不见，必须借助于显微镜才能看清它们外形的一群低等的、原始的微小生物。

A、个体微小B、个体庞大C、结构复杂D、结构简单2、无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂和原料药，包括无菌制剂和无菌原料药A、无菌B、热原 C 细菌内毒 D 微生物限度3、采用湿热灭菌方法进行最终灭菌的，通常标准灭菌时间F0值应大于__8__分钟，流通蒸汽灭菌处理不属于最终灭菌。

A、6B、12C、10D、84、无菌药品按生产工艺可分为两类：采用最终灭菌工艺的为最终灭菌产品；部分或全部工序采用无菌生产工艺的为非最终灭菌产品。

A、最终灭菌产品B、非最终灭菌产品C、辅助灭菌产品5、内毒素——是革兰氏阴性菌产生的具有强致热效应的脂多糖类物质。

A、霉菌B、革兰氏阳性菌C、革兰氏阴性 D酵母菌6、A级洁净区静态环境下≥5.0μm悬浮粒子的最大允许数/立方米为(20 )A、 20B、200C、290D、297、洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差应当不低于10帕斯卡。

A、 5B、10C、15D、208、2010版药典规定注射用水细菌内毒素检测限度为：为每1ml中含内毒素量应小于0.25EU。

A、 0.125B、0.25C、0.5D、0.1二、多选题(共5题，每题2分，共10分)1、洁净区防止交叉污染的重要措施：（ABCD）A、合理布置空间面积B、提高设备水平C、分设空调净化系统D、严格控制人流物流2、洁净区气流组织形式中单向流的特点：( ACDE )A、空气流线呈平行B、具有不规则运动轨迹C、类似活塞作用D、各流线间的尘粒不易相互扩散E、达到净化程度高3、药品污染热原的途径（生产过程）：（ABCDF）A、注射溶媒B、容器和设备、管道、滤器C、原辅料D、制造过程及生产环境E、输液器带入F、由于包装不严密产生热原4、热原的性质：（ABCDE）A、耐热性B、水溶性C、不挥发性D、滤过性E、能被强酸、强碱、强氧化剂、超声波等破环5、常用物理消毒灭菌方法有：（ABCD）A、湿热灭菌法B、干热灭菌法C、辐射杀菌法D、滤过除菌法E、甲醛熏篜三、判断题（正确的打“√”，错误的打“×”，每小题2分，共40分）1、污染的定义是当一个产品中存在有不需要的物质时，它即受到污染。