导尿管细菌生物膜的形成与尿管相关性尿路感染的关系

研究对象
基础疾病分布情况：尿道下裂11例、隐匿阴茎8例、肾积水3例、 隐睾1例、尿道口囊肿1例、阴茎扭转1例、会阴撕裂1例、双侧膀 胱输尿管反流1例。
留置导尿原因为：阴茎下弯矫正术后10例、隐匿阴茎矫正术后6 例、尿道形成术后4例、肾盂成形术后2例、膀胱输尿管再植术 后2例、腹腔镜下双侧睾丸固定术后1例、尿道口囊肿切除术后1 例、会阴探查术后1例。
成人留置导尿10天后，76% 的留置导尿患者导尿管内 表面会覆盖融合的不定型基质物，大多基质物周围可 见明显的球状或杆状细菌轮廓。
——Infect Dis Clin North Am. 2012 ——中华医院感染学杂志, 2011
研究背景
但是目前国内尚未开展关于留置导尿 患儿导尿管表面是否存在细菌生物膜 的定植的研究。
导尿管细菌生物膜的形成与 尿管相关性尿路感染的关系
研究背景
留置导尿术是临床各科室中常用的一 项诊疗技术，广泛应用于排尿困难、 尿潴留、引流尿液等，但其极易引发 尿 管 相 关 性 尿 路 感 染 （ catheterassociated urinary tract infections, CAUTI）。
导管培养阳性
1（3 6.80±3.916 ） 天 6，9.2导3 管 B<F0形.00成1 率 为
15.00%。 导管培养阴性 1两4 组 BF 形0成 率 差 异0.0有0 统 计 学 意 义 （
*表示使用Fish精确概率法P<0.001）。
细菌学检测结果
表1.细菌学检测结果尿管BF形成的关系
统计分析方法
资料双轨录入 逻辑核查
分类资料两组间的比较采用 χ2 检验进行或Fish精确概率 法。
BF形成的影响因素分析采用 多因素Logistic回归分析进行 ，并计算OR及95%CI。
统计检验水准为P<0.05。
源自文库
细菌学检测结果
27例患儿,尿培养阳性7例（占25.93%）， 表1.细菌学均检为测C结AU果TI尿s患管者BF，形留成置的导关尿系时间为9~11天
实验方法
中段尿采集方法
拔除或更换导尿管前采集患 者中段尿液。使用0.5% 碘伏 消毒液沿尿管采样口由内而 外消毒，使用无菌注射器在 采样部位抽取10~20ml尿液注 入无菌采样管中送微生物室 进行细菌鉴定与药物敏感试 验。
尿管标本采集方法
拔除或更换导尿管时，使用0.5%碘伏消毒 尿道外口及其与导尿管相联处，使用无菌 镊子缓慢拔出导尿管，放置在无菌盘内。 使用无菌生理盐水冲洗导尿管内外壁，清 除浮游细菌及黏附物。用无菌剪刀剪取距 离气囊远端2~3cm段导尿管1cm，纵向剖 成两半。一半放入无菌试管内送微生物室 进行导尿管培养、鉴定与药敏试验。另一 半放入含有2.5%戊二醛溶液中固定（>3小 时），4℃冰箱内保存。
实验方法
细菌鉴定：布鲁克快速生物质谱监测 系统（德国 布鲁克公司）
细菌药敏实验：全自动微生物鉴定及药 敏分析系统进行（法国 生物梅里埃公 司）
扫描电镜：德国 ZEISS公司
ZEISS公司扫描电镜
诊断标准
CAUTIs诊断标准：患者留置导 尿后，或拔除导尿管48小时内
发生的泌尿系统感染。尿细菌
培养革兰阳性球菌菌落数 ≥104cfu/ml，革兰阴性杆菌菌 落数≥105cfu/ml者判断为尿路 感染。
实验方法
首先将收集到的导尿管用0.1mol/L磷酸盐缓冲液冲 洗3次，每次10-15min；锇酸固定1h；缓冲液冲洗3
SEM标本 次，每次15min；30%、50%、70%、80%、90% 、 制备 100% 叔丁醇梯度脱水（100% 脱水3次）；梯度脱
水完成之后使用真空镀膜仪进行干燥20~30min； 喷金后扫描电镜下（德国 ZEISS公司）逐个观察尿 管表面细菌生物膜形成情况，并拍照。
BF形成例数 BF形成率
例数（N） （n）
（%）
P值*
尿培养阳性
7
7
100.00 <0.001
尿培养阴性
20
3
15.00
导管培养阳性
13
9
69.23
<0.001
导管培养阴性
14
0
0.00
*表示使用Fish精确概率法
细菌学检测结果
初次拔管后导尿管微生物培养阳性13例（48.15%），平均 导尿管留置时间为（8.92±2.64）天。导管培养主要分离到 的病原菌为粪肠球菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶 阴性葡萄球菌、鸟肠球菌、咽峡炎链球菌、溶血葡萄球菌 、大肠埃希菌，其中2例分离出2种混合细菌。导管培养阳 性的导管表面在SEM下均观察到细菌定植，其中69.23%（9 例）的导管表面形成生物膜。
CAUTI一直是全球最常见的医院内感 染，其以高发率、难治性及给治疗带 来的困难而备受关注。
研究背景
细菌生物膜也称生物膜（bacterial biofilm, BF），是由一种或多种细菌粘附于有 生命或无生命物体表面形成的高度结构的膜状复合物。
近年来，研究发现导尿管细菌生物膜的形成是引起感 染的一个重要因素。
因此，本研究研究目的：
了解留置导尿患儿导尿管表 面细菌生物膜形成情况及研 究其与CAUTI的相关关系。
研究对象
选择2016年9月~12月首次插留置导尿管患儿，剔除放置导管前 中段尿培养阳性的患者纳入研究对象。留置导尿管均为Folys导 尿管。
最终选择病例27例，男24例，女3例。年龄3个月~13岁，平均 年龄为（4.10±3.02）岁。留置导尿天数1~11天 ，平均天数为 （7.63±3.07）天。
另外14例导尿管微生物培养为无菌生长，平均留置时间为 （6.43±3.03）天。导管培养阴性的导管表面均未观察到生 物膜。
两组BF形成率差异有统计学意义（P<0.001）。 同时，有5例在导尿管培养和尿培养中分离到同种菌种。
生物膜SEM观察结果
本次SEM下观察的27例导尿管标本中，有9例（占33.33%）导 尿管管壁可观察到细菌生物膜的形成，平均留置导尿时间为（ 9.78±1.20）天。
，平均B留F形置成时例间数 为B（F形1成0±率0.57）天。尿培 例数养（N分）离得（到n）细菌为（粪%肠）球菌、P值表* 皮葡萄
尿培养阳性
球7 菌、凝固7 酶阴性1葡00.萄00球菌<。0.0尿01培养阳
尿培养阴性
2性200的例导患尿者管尿3表培面养S阴EM1性下5.0，均0 平观均察留到置BF形时成间。为