青海省部分地区藏獒及草地鼠类弓形虫抗体间接血凝试验检测

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犬弓形虫病的临床症状、实验室诊断、类症鉴别及防治措施

犬弓形虫病的临床症状、实验室诊断、类症鉴别及防治措施

犬弓形虫病的临床症状、实验室诊断、类症鉴别及防治措施作者:刘春雨来源:《现代畜牧科技》 2017年第12期摘要:弓形虫病也叫做弓浆虫病、弓形体病,是由于感染刚地弓形虫而导致的一种人畜共患原虫病。

犬感染该病后通常呈现隐性感染,只有机体免疫力降低时才会出现发病。

病犬主要临床症状是高热稽留、食欲不振、呕吐、呼吸困难、眼鼻存在脓性分泌物、血性下痢以及体表淋巴结肿大等,最终由于败血症死亡。

关键词:犬;弓形虫病;病原生活史;发病机理;临床症状;实验室检查;类症鉴别;药物治疗1 病原生活史自然界中广泛分布弓形虫,中间宿主为多种动物和人,终末宿主是猫科动物,即整个生活史都在中间宿主和终末宿主体内完成。

弓形虫的发育可分成五个阶段,即滋养体、包囊、裂殖体、配子体和卵囊,其中前两个阶段是在中间宿主内进行,而后三个阶段只在终末宿主也就是猫科动物的肠道和体表上。

虫体发育过程是猫科动物食入发育成熟的卵囊或者包含弓形虫包囊的动物组织,卵囊内的子孢子或者包囊内的滋养体就会侵入机体消化道,且逐渐移动到肠上皮细胞,并在细胞内呈现球虫型的发育和繁殖。

也就是先以裂殖方式生出大量裂殖子,在一段时间之后有些裂殖子会通过配子生殖发育为配子体以及大小配子,最终发育为卵囊。

卵囊通过猫科动物的粪便排出体外,当外界环境适宜时,2~4天之后就会发育成感染性卵囊。

另外,猫科动物摄入的滋养体中有些会进入血液和淋巴循环,从而运送到机体各个脏器和组织,并侵入有核细胞,之后在有核细胞内以二分法或者内出芽法进行繁殖。

在这个繁殖过程中,猫科动物会自然形成免疫力及抵抗力来抑制滋养体繁殖,有些滋养体会被消灭,另外一些滋养体会侵入机体脑和骨骼肌等,并在该处形成包囊。

2 发病机理犬感染弓形体病通常是由于吞食含有滋养体及包囊的肉、内脏或者食入孢子化的卵囊等,还能够通过损伤的皮肤、眼、呼吸道以及胎盘等途径发生感染。

另外,该病的发生还与犬具有的食粪恶习或者捕食鼠类等相关。

当犬食入猫排出的卵囊后,里面的子孢子会通过淋巴液和血液循环侵入肠道组织以外的细胞中,并进行双芽方式繁殖,生成很多速殖子,此时为急性感染期。

动物疫病控制—实验室检测

动物疫病控制—实验室检测
动物防疫技术
项目五:动物疫病控制
如何进行寄生虫学检测?
2.虫体检查--2:
• 蛛形纲虫虫体检查法:通常采用煤油浸泡法,将病料置于载 玻片上,滴加数滴煤油,上覆另一载玻片,用手搓动两玻片使 皮屑粉碎,镜检。对蜱等其他蛛形纲虫,常采用肉眼检查法。
动物防疫技术
项目五:动物疫病控制
如何进行寄生虫学检测?
定、酶免疫技术等,如猪瘟荧光抗体染色法检测猪瘟病毒。 • 检测病毒核酸:主要针对不同病原微生物具有特异性核酸序
列和结构进行检测。如核酸杂交技术、核酸扩增技术和基因 芯片技术等已研制出多种商品化试剂盒,
动物防疫技术
项目五:动物疫病控制
如何进行病毒学检测?
2.病毒的分离培养:
• 病料处理:主要作除菌处理,方法有滤器除菌、高速离心除 菌和利用抗生素处理3种。
猪 瘟 NY/SY 156-2000
正向间接血凝试验(IHA)
动物防疫技术
项目五:动物疫病控制
什么是动物疫病分子生物学监测?
分子生物学监测又称基因监测。主要是针对不同病原 微生物所具有的特异性核酸序列和结构进行测定。如PCR 技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等。
动物防疫技术
一次性静脉 采血管
猪前腔静脉采血
动物防疫技术
项目五:动物疫病控制
免疫抗体监测的程序是什么?
鸡翅静脉采血
猪耳静脉采血
猪前腔静脉采血
牛颈静脉采血
动物防疫技术
项目五:动物疫病控制
免疫抗体监测的程序是什么?
3.抗体检测方法 :常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法, 如下表:
分类
国家 强制 免疫 的重 大动 物疫
• 显微镜检查:制片干澡后,滴加香柏油,用油浸镜观察细菌 的形态结构和染色特性。

血凝及血凝抑制试验应注意的一些小问题

血凝及血凝抑制试验应注意的一些小问题

犬瘟热是 由犬 瘟热病毒 引起 犬 的一种急性 、 热性 、 高度
脱水 。
接触性传染性疾病。 其特征是双相体温升高 , 白细胞减少 , 急
性卡他性呼吸道炎 、 严重 的胃肠炎 、 皮肤湿疹 和神经症状 。 犬 瘟热病毒 属副粘病毒科 麻疹病毒属 , 在 自然 条件 下 , 犬科 动 物( 犬、 貉、 狐、 豺、 狼等 ) 最易感 , 幼犬 ( 貂) 发病率可达 9 0 %以 上, 病死 率为 3 0 %一8 0 %, 传 染来源 主要是病犬 和病兽及 带 毒动物 , 经消化道传染 , 也可经呼吸道传染 , 还 可通过阴道分 泌物传染 。
经 济 动 物
犬瘟 热病 的产地检 疫及 防制
马德平 , 道 东兰 , 毛航 平
( 宁夏 同心县预旺镇畜牧兽医工作站 ,同心 7 5 1 3 0 0)
DO I : 1 0. 3 9 6 9 / J . 1 SSN. 1 6 7 1 — 6 0 2 7. 2 0 1 4. O 9 . 0 7 7
1 P B S液 体 的配 置 止 擅 自更 改反 应 时 间 。
4 反应 器 皿 的选 择
的反应 时 间进 行 试 验 , 禁
尽量 选择一 次性 消毒 用 品 , 如, 微量 移液 器枪 头 , 盛 放 P B S液的移液槽 等 , 以降低外界污染 物对 实验结果 的影响 。 5 鸡 蛋样 品的检测 在对鸡蛋 进行抗体 检测时 , 可 以如 下处理样 品 : 将鸡 蛋 去壳 打在 平皿 内 ,用一次性 注射器去 针头后迅 速插 入蛋 黄 内,吸取 l mL 蛋黄放在试 管 内 ,再 在试管 内添加 l mL P B S 液, 混合均 匀。在读取该 样 品效 价时 , 结果扩大 一个单位 即

青海省互助县藏羊弓形虫血清学调查

青海省互助县藏羊弓形虫血清学调查

10 2
动 物 医学 进 展
21 0 0年
第 3 1卷
第 7 ( 第 2 5期 ) 期 总 0
表 1 不 同地 区藏 羊 弓形 虫血 清学 调 查 结 果
Ta l Thers lso x pls o di sr lgc ls v yi b tn s e n dfe e trgo be 1 e ut fTo o a ma g n i eoo ia ure nTie a he pi i r n e ins
中 图分 类 号 : 8 2 7 3 ¥ 5 . 2 文献标识码 : B 文 章 编 号 : 0 75 3 ( O O O 一 l 9 0 1 0 —O 8 2 1 ) 7 O l— 3
刚地 弓形 虫 ( o o ls o d i T x pa mag n i)是 一 种广 泛
量加 样器 , 量振 荡器 。 微
兽 医研 究所 。
阳 性 率 为 4 1 , 羊 血 清 2 .7 公 8份 , 阳 性 率 为 其
3 5 ( 2 。 . 7 表 )
1 1 3 器械 . .
9 6孔“ 型有 机玻 璃 微 量反 应 板 , V” 微

收 稿 日期 :0 91 -6 2 0 -11 作者简介 : 李 英 (9 7 ) 女 ,青 海 西 宁人 , 士 , 要 从 事 动 物 寄 生 虫教 学 和 研 究 工作 。 17一 , 硕 主
区的养殖 户在 兽 医卫生 管理 工作 做得较 好有 关 。
助县藏羊对 弓形虫病的感染率有所下降 。
E i 陈为 民 . 兽 共 患 病 [ ] 湖 北 武 汉 : 北 科 学 技 术 出 版 社 , l 人 M . 湖
2 0 5 5 . 0 6: 0 4

衣原体病,弓形虫间接血凝(IHA)试验操作方法

衣原体病,弓形虫间接血凝(IHA)试验操作方法

十一、衣原体病间接血凝(IHA)试验操作方法衣原体属的三个种都存在共同的属特异性抗原。

衣原体病间接血凝试验,则是用已知的属抗原检测人、畜、禽血清或分泌物中的抗体。

具有特异、敏感、简便、快速之优点。

(一)试剂盒内容包括衣原体属抗原致敏绵羊红细胞、阳性和阴性对照血清。

(二)试验方法1.将生理盐水滴于V型反应板也孔中,每孔50微升。

2.取被检样品(血清或分泌物)50微升于第1孔中,与生理盐水混匀后吸50微升加于第2孔,依次作对倍稀释至所要求的稀释度。

3.每孔加抗原25微升,作定性检查时只需加两孔。

人血清只加1:4和1:8两孔。

阴道分泌物只加1:2和1:46。

孔哺乳动物血清只加1:32和1:64两孔,禽类血清只加1:8和1:18两孔。

如作定量试验则可根据实际需要自行决定。

试验:设阳性血清+抗原、阴性血清+抗原、生理盐水+抗原各1孔。

(三)结果判定1.判定标准“++++”红细胞全部凝集,形成一层均匀的膜,布满整个孔底“+++”红细胞在孔底形成一层薄膜,面积比前者稍小“++”红细胞在孔底形成薄层凝集,边缘松散或呈锯齿状“+”红细胞在孔底呈稀薄、、散在、少量凝集,孔底有小圆点“±”红细胞沉于孔底,但周围不光滑或中心有空斑“-”红细胞完全沉于孔底,呈光滑的圆点“++”经上的凝集判为阳性凝集2.对照试验出现如下结果试验方可成立,否则应重试,阳性血清+抗原呈“++++”;阴性血清+抗原呈“—”,抗原+生理盐水呈“—”。

3.被检样品判定标准:人群血清效价≥1:8(++)者判为阳性;效价≤1:2者判为阴性;介于二者之间判为可疑。

人群阴道分泌效价≥1:2(++)者判为阳性;效价≤1:2(++)者判为阴性。

哺乳动物血清效价≥1:64(++)者判为阳性;效价≤1:16(++)者判为阴性;介于二者之间判为可疑。

禽类血清效价≥1:16(++)者判为阳性;效价≤1:4(++)者判为阴性;介于二者之间判为可疑。

[注]被检样品采集及处理方法:1.血清:按常规方法采血及分离血清,要求无腐败。

医学知识一人畜共患寄生虫病的检疫

医学知识一人畜共患寄生虫病的检疫

2.对人的危害:猪囊虫寄生于人体 的肌肉和各组织器官对人的健康 产生危害。囊虫病的患者可因囊 尾蚴的寄生部位而有所不同,可 导致肌肉酸痛,无力发胀等症状; 可引起视力障碍,甚至失明;可 使人头昏,头痛记忆力减退,严 重可引起癫痫发作,甚至失语昏 迷死亡。体内有成虫寄生的患者 主要表现为腹痛、腹泻、消化不 良、贫血和消瘦。
淋巴结淋巴组织增生肿大、坏死
左:肺水肿,小叶间质增宽,充 积半透明水肿液; 右:肾脏瘀血肿大
猪皮肤出血,结痂(4月龄)
肺高度水肿,特别是间质水肿
脾肿大极明显(8月龄猪) 脾脏肿大(下),上为正常对照
肝散在出血、坏死点、脾滤泡坏死 (2月龄猪)
肾散在小白点
实验室检疫
1.涂片检查:采取患畜和病死尸体的胸腹腔渗出液、血 液或肝、肺、肺门淋巴结等直接抹片或涂片镜检,可 发现虫体。其中以肺脏涂片和急性感染期的血液片检 出率较高。
2.动物接种试验:取病死猪肝、肺、淋巴结等病科,研 碎后加16倍生理盐水,制成1:10悬液,室温下沉淀, 取上清液0.5~1毫升,接种于小白鼠腹腔,接种后观 察4周,小白鼠发病死亡,取腹腔液或脏器涂片镜检, 可见弓形虫。
3.血清学诊断:方法有间接血凝试验、补体结合反应、 荧光抗体法、酶联免疫吸附试验。
实验室检疫
旋毛虫检验的方法主要有目检和镜检法、集样消 化法、酶联免疫吸附试验、间接血凝试验和免疫荧光 抗体技术等。
常规镜检法:在每头猪的左、右横膈膜肌脚各剪取一 块约15∼30克肉样,与胴体编为同一号码,送检验室 检验。在充足自然光线下,先剥离膈肌的肌膜,再将 肉样顺肌纤维方向拉紧,肉眼观察有无针尖大小的小 亮点或灰白色或浅灰白色的小钙化点,然后从肉样两 面顺肌纤维方向各剪取6个麦粒大的肉片(每侧膈肌剪 取肉粒12个)共24片,用玻璃板压平展开,在50∼70 倍低倍镜下逐一检查有无虫体。

阿拉山口口岸周边野外区鼠情监测报告

阿拉山口口岸周边野外区鼠情监测报告

阿拉山口口岸周边野外区鼠情监测报告郭刚;尹小平;张杰;马东虎;阿不都·扎伊尔【期刊名称】《口岸卫生控制》【年(卷),期】2008(013)005【摘要】目的掌握阿拉山口口岸周边野外区鼠、蚤密度,种群构成、季节消长规律,为鼠情防制提供依据.方法于2006年4月-2007年3月使用板夹夹夜法和弓形夹夹捕法相结合时口岸野外区鼠情进行调查,并利用微量血凝法检测F1抗体及抗原.结果经过1年的监测,在口岸野外区共捕获鼠形动物279只,经过鉴定隶属2目4科6属8种.弓形夹捕获率为10.1%,捕获优势种为大沙鼠.板夹捕获率为1.8%,捕获优势种依次为子午沙鼠、红尾沙鼠和西伯利亚五趾跳鼠.分离鼠体表寄生蚤1 539匹,优势种为臀突客蚤.血清学检测大沙鼠血清114份,检出F1阳性血清10份,阳性感染率为8.8%.结论对口岸野外区应重点加强在鼠、蚤活动高峰期对大沙鼠密度、染蚤情况及鼠疫血清学等方面的调查.由于子午沙鼠、红尾沙鼠等宿主动物经常参与大沙鼠鼠疫流行,因此也不能放松对这类宿主的监测.【总页数】4页(P42-45)【作者】郭刚;尹小平;张杰;马东虎;阿不都·扎伊尔【作者单位】阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063【正文语种】中文【中图分类】R185.3【相关文献】1.哈尔滨市道外区2001—2003年居民鼠情监测报告 [J], 刘滨铎;赵力红;赵友善2.2007年新疆阿拉山口口岸地区鼠情监测对比分析报告 [J], 叶志辉;骄娃;马东虎;尹小平;阿不都·扎伊尔3.国境口岸鼠情监测方法探讨 [J], 张北鹰;魏龙江;郝雨来;王宏权;李洪明4.福州马尾口岸鼠形动物及其体表寄生虫监测报告 [J], 李昱辰;熊国欢;刘宝英;高思维;许丽皇;李航平;林醒忠5.深圳皇岗口岸鼠血清的鼠疫及肾综合征出血热抗体监测报告 [J], 吴利平;练春林;李金水因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

西藏部分地区藏猪弓形虫血清学调查研究

西藏部分地区藏猪弓形虫血清学调查研究
1 . 1 . 3 仪 器
1 . 2 . 3 . 1 操作 方法
酶标分析仪 ,型号:R T - 6 1 0 0 ,恒温培养箱等。
1 . 2 检 测 方 法
1 . 2 . 1 间接 血凝 试验 ( I H A)
在检 测 卡 的加 样孔 内加 入 2 滴 ( 1 0 0 1 ) 待 检血 清 样 品 。 将 检测 卡平 放 于 桌面 上 ,在 室温 下静 置 5 —2 0 mi n 内判 定结 果 。超 过 2 0 a r i n 的结果只能作为参考。
干 。加 酶 :每孔 加 酶标 记 物 1 0 0 ‘ l 。温育 :置3 7 ℃温育 3 0 ai r n 。 从 西 藏拉 萨 市堆 龙 县 、墨 竹工 卡 县 、林 周 县 、达孜 县 、尼木 洗板 :同上 。显 色 :每孔 加 显 色剂 A、显 色 剂B 各5 0 l ,振 荡 混 县 、曲水 县 ,林 芝 地 区米 林 县 、林芝 县 等 地个 体养 猪 户共 采 集 藏 匀 ,3 7  ̄ C 避光反应1 5 ai r n 。终 止 :每 孔加 终 止 液5 O l ,振 荡 l O 猪 血样 1 9 5 份 ,分离 血清 待检 。 8 ,充分 混匀 。终 止后 5 — 3 0 a r i n 内读数 。
弓形虫 病 是 由刚 地 弓形 虫 引起 的一 种 人兽 共 患性 寄 生虫 病 , 孔 允 许有 前 滞 现 象 “ + ” 外 、其 余 各孔 均 为 “ 一 ” ,稀 释对 照 为 该 病 在 全 世 界 广泛 流 行 。西 方 国 家 人 群平 均 感 染 率 高 达 1 5 %左 ”的前提下 ,对待检血清进行判定 ,否则重做 。待检血清效 右” 1 ,我 国 人 体 平 均 感 染 率 达 8 % 】 。此 病 主要 引 发 母 猪 死 胎 、 价 ≥1: 6 4 ,判 为 阳性 ,反 之为 阴性 。

藏羊的弓形虫 衣原体和布鲁菌病的血清抗体检测

藏羊的弓形虫  衣原体和布鲁菌病的血清抗体检测
当 地 动 物 防 疫 监 督 机 构 应 对 调 运 的 种 用 、 用 、 用 乳 役
[ 3 Ma nelP F. tu D| cpama b vsifcin n 3 u sl Arh rG My ols o i net si o y u gcle[] Ve l o dAnma,09,5 1 91 7 o n av sJ . t i F o i l20 2 :3 —7 . Cn
的某 些传 染病 时有 发 生 , 别是 出现 以母 藏羊 流产 、 特 死胎 、 羊睾 丸肿 大 等 侵 害 生殖 系统 为 特 征 的 一类 公
病最 为严 重 。为 了 摸 清上 述 情 况 是 否 与衣 原 体 、 弓 形 虫和 布鲁 菌等病 有关 以及 这 3种疫 病 在该 地 区的 感染 现状 , 今后 疫病 有效 防制 提供 科学 依据 , 据 为 根 青海 省农 牧厅 、 海 省 动 物疫 病 预 防控 制 中心 的 安 青 排部 署 , 我们 于 2 0 0 8年 1 0月 至 2 1 0 0年 1 2月 , 检 抽 了天峻 县 7个 乡镇藏 羊 9 0只 , 3 进行 了血清学 调查 。 结果 报告 如 下 。
业部 GB 1 6 62 O ( / 8 4 —O 2 动物 布鲁 氏菌 病诊 断 技术 》 ( 进 行 操作及 判 定l 。 2 ]
2 结 果
在 9 0份被 检血 清 中用 I 3 HA 方 法 检 出 衣 原 体 抗 体 阳性 1 8份 , 1 阳性 率 为 1 . 9 ; 出 弓形 虫 抗 2 6 检
3 1 本 次 调 查 结 果 , 原 体 的 阳 性 率 为 1. 9 ; . 衣 2 6 弓形 虫 阳性 率 为 3 1 , 鲁 菌 阳性 率 为 1 1 ; .2 布 _8

反向间接血凝试验(RIHA)在动物疾病诊断中的应用进展

反向间接血凝试验(RIHA)在动物疾病诊断中的应用进展

反向间接血凝试验(RIHA)在动物疾病诊断中的应用进展庄金秋;梅建国;王艳;谢金文;莫玲;沈志强【摘要】Reverse indirect hemagglutination test(RIHA)is a simple and practical laboratory testing technology, which has been widely used in the field of human and animal diseases and clinical detection. The progress on the application of RIHA in the diagnosis of animal virus diseases,bacterial diseases and parasitic diseases was summarized, to provide reference for clinical veterinary science and technology workers.%反向间接血凝试验(RIHA)是一种简单实用的实验室检测技术,已广泛应用于人类及动物疾病的田间及临床检测。

本文概述了RIHA在动物病毒病、细菌病和寄生虫病诊断方面的应用进展,以期为兽医临床科技工作者更好地应用该法诊断疾病提供参考。

【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2016(033)006【总页数】5页(P55-59)【关键词】反向间接血凝试验;诊断;应用【作者】庄金秋;梅建国;王艳;谢金文;莫玲;沈志强【作者单位】山东省滨州市畜牧兽医研究院,山东滨州 256600; 滨州市贝尔凯瑞生物技术有限公司,山东滨州 256600;山东省滨州市畜牧兽医研究院,山东滨州256600; 滨州市贝尔凯瑞生物技术有限公司,山东滨州 256600;山东省滨州市畜牧兽医研究院,山东滨州 256600;山东省滨州市畜牧兽医研究院,山东滨州256600;山东省滨州市畜牧兽医研究院,山东滨州 256600;山东省滨州市畜牧兽医研究院,山东滨州 256600【正文语种】中文反向间接血凝试验(reverse indirect hemagglutination test,RIHA)是以红细胞为载体的间接凝集试验,即用已知的抗体致敏红细胞,然后与样品在适宜的条件下反应。

1例青海藏獒犬巴贝斯虫病的诊疗_伊平昌

1例青海藏獒犬巴贝斯虫病的诊疗_伊平昌

[28][29][30]CALVO -PINILLA E ,CASTILLO -OLIVARES J ,JAB -BAR T ,et al.Recombinant vaccines against bluetongue virus [J ].Virus Res ,2014,182:78-86.MA G ,ESCHBAUMER M ,SAID A ,et al.An equine her -pesvirus type1(EHV -1)expressing VP2and VP5of serotype8bluetongue virus (BTV-8)induces protectionin a murine infection model [J ].PLoS One ,2012,7(4):e34425.苗海生,李乐,廖德芳,等.蓝舌病多克隆抗体C-ELISA 检测方法的建立和比较研究[J ].云南农业大学学报,2014,29(1):58-62.(责任编辑:钱英红)1例青海藏獒犬巴贝斯虫病的诊疗伊平昌1,王守宁2(1.青海省西宁市畜牧兽医站,青海西宁810003;2.青海省大通县桥头镇家畜病院,青海大通810100)摘要:介绍了1例青海藏獒犬巴贝斯虫病的发病情况、临床症状、实验室检查,提出了使用特效杀虫药物,同时采取对症治疗措施的治疗原则,以期为兽医临床防治巴贝斯虫病提供参考。

关键词:藏獒犬;巴贝斯虫病;诊断;对症治疗中图分类号:S858.292.27文献标识码:A 文章顺序编号:1672-5190(2015)11-0110-02犬巴贝斯虫病是以蜱虫为传播媒介,引起急性溶血性疾病发作的一种季节性血液原虫病,属于人兽共患病,目前呈世界性分布[1]。

依据宿主特异性和形态学将犬的巴贝斯虫分为犬巴贝斯虫(Babesiacanis )和吉氏巴贝斯虫(B.gibsoni )2类[2]。

我国主要以吉氏巴贝斯虫为主,呈地方性流行。

ELISA和IHA检测弓形虫抗体的比较试验研究

ELISA和IHA检测弓形虫抗体的比较试验研究
3C l g f i ce csL n ynU iesy L n ynF j n 3 4 0 ) .o eeo Lf S i e, o ga nvri , o ga ui , 6 0 0 l e n t a A s rc : bet e T i pp r a n lz ee ce c L S dI A m to r eet gT gn i b ta t O jci : hs a e s oa a et f i yo E IA a e df t i . o di v w t y h i n f n H h od cn
学术研究
d i 03 6 6i n10 - 742 1 . . 9 o: .9 9 .s.0 8 4 5 . 21 0 1 s 0 00
E IA和 IA检测弓形虫抗体的比较试验研究 LS H
罗才庆 ’游景洲 , 晶晶 s黄翠 琴 s , 刘 ,
(. 1 永定县农业局动物防疫监督检查站 福建龙岩 340 ; 6 10
2中华人 民共和国龙岩 出入境检验检疫局 福建龙岩 3 40 ;. . 6 0 03 龙岩学院生命科学学院 福建龙岩 34 0 ) 60 0
摘 要: 目的: 分析 E I LS A方法和 I A方法检测 弓形 虫病的可靠性 。方法: H 本文应用酶联免疫吸附试验
( LS 和 间接 血凝试 验 (HA) E IA) I 两种 方 法 , 平行检 测 来 自 岩 市某 个猪 场的 3 龙 2份猪 血 清 中的抗 弓形 虫特
L oC i ig, o ig h u, i ig ig, u n ii。 u aq n ’Y uJn z o LuJn j 。H a gCuq n n
(.og i itI n ynF j n 3 4 0 ; 1 n dn o ny ueuo A r l e nm l u rni ek on, ga ui , 6 1 0 Y c u nc  ̄ a

最全的动物疫病实验室检测方法

最全的动物疫病实验室检测方法

最全常见疫病实验室检测方法目录常见疫病实验室检测方法 (1)目录 (1)常见ELISA操作方法 (3)亚洲 1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒 (3)猪瘟抗原检测试剂盒 (6)猪瘟病毒抗体阻断ELISA试验 (12)猪瘟单抗酶联免疫吸附试验 (14)口蹄疫结构蛋白检测方法(3ABC-I-ELISA) (16)口蹄疫抗体液相阻断-酶联免疫吸附试验 (18)PRRS抗体间接酶联免疫吸附试验 (22)犬细小病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (24)犬瘟热病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (26)常见PCR操作方法 (28)猪伪狂犬病毒PCR诊断试剂剂盒 (28)猪圆环病毒PCR诊断试剂盒 (31)常见RT-PCR操作方法 (34)口蹄疫病毒分子检测诊断试剂盒 (34)H5亚型禽流感病毒RT-PCR检测试剂盒说明书(20次) (36)新城疫病毒RT-PCR 检测试剂盒 (38)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒 (41)凝集、血凝实验操作方法 (44)弓形虫间接血凝试验(lHA)试剂使用说明书 (44)伪狂犬病乳胶凝集试验试剂盒 (45)猪细小病毒病乳胶凝集试验〈LAT〉诊断试剂盒使用说明书 (46)猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验〈LAT〉操作程序 (47)猪瘟正向间接血凝试验试剂使用说明书及实验操作程序 (48)口蹄疫正向间接血凝试验 (51)高致病性禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验程序 (52)琼脂扩散试验 (54)鸡马立克氏病 (54)禽流感琼脂凝胶免疫扩散试验 (56)荧光抗体检测 (58)猪瘟荧光抗体试验操作程序 (58)对狂犬病疑似动物脑组织的直接免疫荧光(dFA)检测 (59)血清学诊断检测常用试剂配方 (61)禽流感HA和HI试验用溶液的配制 (61)补充实验 (64)猪流感病毒H1亚型Hl试验抗原与阴、阳性血清说明书 (64)猪流感病毒RT-PCR检测 (67)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒猪繁殖与呼吸综合症(Nsp2 1594~1680变异株)RT-PCR检测实验 (69)一、布鲁氏菌病试管凝集试验抗原与阴、阳性血清 (72)二、布鲁氏菌病虎红平板凝集试验 (73)动物结核病诊断操作规程 (74)常见ELISA操作方法亚洲 1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒一试剂盒内含物.说明书亚洲 1 型口蹄疫阳性对照血清( 己稀释浓度为 1:8) .96 孔 ELISA 板亚洲 1 型口蹄疫阴性对照血清.液体稀释槽 3% 双氧水.U 型96孔抗原抗体反应板 25×PBST洗涤液(稀释时准确量取).封板膜豚鼠抗血清稀释液.灭活亚洲Ⅰ型口蹄疾病毒抗原 (用冰决包裹 ) 终止液.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒兔抗血清包被缓冲液(碳酸盐)胶囊.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒豚鼠抗血清底物 (柠檬酸 -磷酸盐)缓冲液片剂.兔抗豚鼠血清IgG-辣根过氧化物酶结合物 OPD 片剂二器材准备 ( 需用户自备 )1.移液器:5-50µl移液器、0.2—10µl移液器、50—200µl移液器、50—300µl 12道移液器各一把。

实验室血清学常用检测方法

实验室血清学常用检测方法

常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前,该项技术已在兽医学上得到广泛的应用,大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。

1、酶联免疫吸附试验的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。

在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。

用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。

再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。

此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。

2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。

用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型:①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。

在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。

例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA,就是根据这种原理设计的。

②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。

用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。

与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。

乙肝HBs的检测常采用本法。

本法关键在于酶标抗原的制备,需要根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。

此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于于间接法。

此外,该方法不受被检动物种属差异的限制。

③.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。

其原理为利用酶标记的抗体(抗免疫球蛋白抗体),检测与固相抗原结合的受检抗体(见图1)。

青海省化隆县牦牛弓形虫病血清学调查

青海省化隆县牦牛弓形虫病血清学调查
2. 0 0
2 0 5 1 5
10 2 1 7 13 0
111 被检血 清 . .
清晨 出牧 前采集化隆县6 个乡镇牦 牛颈
阴性数 ( 1 份) 6
阳性 率
静脉血 10 ,当天送 化验 室,用离心机 以2 0 r n 2份 50/ 离心 mi 1mi分离 出血清 ,冷冻保藏备用 。 5 n 1 . 诊 断液 .2 1 弓形虫I HA抗原、阴阳性标准血清 、稀 释
畜 ,发病后 常表现 呼吸系统 和神经 系统症状 ,也 可引起 母畜流 产不 孕等繁殖 障碍 ,我 国将 弓形虫病 列为 二类动 物 疫病 近年 来 化 隆县 牦 牛适 龄 母 牛流 产 比例 逐年 增 高 ,呈地方 性流行 ,流行面 积大 ,发病率 高。待检血 清效价达到或超过 1 4 :6 为阳性 ,以“ + 为阳性 终点。 +” 2 结 果
山东畜牧兽医
21 0 2年第 3 3卷
青海省化隆县牦 牛 弓形 虫病血清学调查
任旭 荣 ( 青海省化隆县动物疫病预防控制中心 800 ) 190
摘要 应用 间接血 凝 实验( ) 法对 采 自 mA 方 青海省化隆县6 乡 的10 个 镇 2 头牦牛血清进行 了 弓 虫病血清 学调 查 形
摇 匀 ,至 于4C冰 箱 2 h 使 用 , 每 孔 家 00 5 , 加 完 后 " 4后 .2ml 将 反应板 置于微 量振荡器 震荡 l2 n mi ,室 温 下 静 置4 或 h
种专 性细胞 内寄 生的致病 原虫 ,在 自然 界广泛 分布 ,
寄主 范围广 ,主要 寄生在各 种哺乳动 物和禽 类 。猫 科动 物 为 弓形 虫病 的终 末 宿主 ,哺乳 动 物 和 鸟类 为 中 间宿
防控制 中心提供 。

家禽血凝试验及血凝抑制试验的操作方法及注意事项

家禽血凝试验及血凝抑制试验的操作方法及注意事项

家禽血凝试验及血凝抑制试验的操作方法及注意事项顾晓明【摘要】血凝试验及血凝抑制试验因其简便、快速、准确、实用被广泛应用.但在试验过程中,人为因素的影响很大,常常因为操作不规范等,导致试验结果不准确,甚至失败.因此,要了解试验的操作方法及注意事项,本文结合以往操作经验,简要总结归纳,供读者参考.【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2016(032)008【总页数】2页(P50,97)【关键词】血凝试验;血凝抑制试验;操作方法;注意事项【作者】顾晓明【作者单位】江苏盐城市亭湖区动物卫生监督所,江苏盐城 224002【正文语种】中文血凝试验(Hemagglutination Test,HA)与血凝抑制试验(Hemagglutination Inhibition Test,HI)试验是检测家禽A类疾病(新城疫和禽流感等)的常规方法,也是检测家禽免疫抗体水平一种基本方法。

该方法具有经济、反应迅速可靠、操作简便和可以对抗体水平进行量化的优点,能够处理大量的样品,是一种在基层临床实践中极易推广的检验检疫手段与诊断方法[1]。

但试验结果受操作技术的影响很大,因此,试验时必须细心,保证试验的精准性。

采血在血清学检测和实验研究中是一项前提性工作,采血质量的好坏,直接影响能不能进行实验和判定实验结果[2]。

采血时,采血者除认真做好自身防护工作,采血设备需经消毒干燥,做到无菌采样。

分离血清的血液,试管要静置、斜放,便于血清析出。

温度在23℃以上时,血样在2 h内即可析出清亮的血清。

若温度为10℃左右的时候,最好立即放入37℃培养箱中孵育2~3 h。

在送样过程中,血样不可剧烈摇晃以免溶血,送至实验室后要立即分离血清,不能立即分离的血样要及时冷藏。

如血清样品有溶血、胶冻样现象出现时应弃去。

家禽中,除鸡外,有些禽(如水禽、鸽子)血清可能对鸡红细胞产生非特异性的凝集,造成假阳性反应。

可用待检血清做血凝试验,如果待检血清出现凝集红细胞的现象,则说明有非特异凝集素存在,需用鸡红细胞进行吸附。

青海省动物弓形虫病的血清学检测

青海省动物弓形虫病的血清学检测

aa s Txp am odi yteidrc h m glt ai sa (H i Qnh i rv c. h sl o e a 6 gi t ooh s ag n ib i t e agui t nasy I A)n ig a poi e T er uts w dt t 8 n h n e n o n e sh h
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Ab t a t 1 3 e u s mp e f a i l w ih i cu e o a h e e u n , i eo o , a l Hi ly s s r c : 0 9 S r m a l s o nmas h c n l d d lc l s e p, q i e T b tn d g c ma ma a a I b b c pa e u p k My s a a o n a ir Mi e—E w r s T b tn a tl p n c e e u e o d tc h n i o y o a , lta ia, o p lx f n tn e ; l n d a d , i eo n eo e a d milw r s d t e e t e a t b t b
S r li l eet n o o o ls s i l o n h i r vn e eogc tci f x pamoi i Anmas fQig a P o ic aD o T sn yo nm l n e r a c ne , ii ,10 6 Qn hi cd m f i a a dV t i r Si csXnn 8 0 1 ) A en y e g

牛衣原体病血清检测

牛衣原体病血清检测

总计
360
101
2 8. 05
表 2 养殖模式的不同耕牛的感染情况分析调查结果
率(%)
散养型 牛场
12 0
55
45.83
规模化 牛场
24 0
46
19.16
合计
36 0
101
28.05
地方性流行的特点袁 一旦牛感染该病后表现症状为院 牛犊出现 肠炎尧 肺炎等多种并发性炎症遥 母牛妊娠期间流畅尧 乳房炎及 死胎等特征遥 公牛患病降低繁殖能力尧 并发睾丸炎等遥 本文对 青海省玉树州的某地区进行耕牛衣原体病血清检测袁 共 360 份 血清袁 检测结果为共 101 份为阳性袁 平均阳性率为 28.05%遥 同 时袁 对 猿 个不同地区耕牛的患病情况分析袁 其中 B 地区的感染 率 最 高 袁 为 35.00% 袁 A尧 C 地 区 次 之 袁 分 别 为 21.67% 和 27.50%袁 这个数据说明袁 B 地区的衣原体疾病传染几率较大袁 传播风险更高袁 畜牧养殖户应重视该病的发展袁 做好防护工 作遥 对养殖模式不同的耕牛感染情况进行分析可知袁 散养型耕 牛 患病 率明 显高 于 规 模 化 养牛 场 袁 阳 性 率分 别 为 45.83%和 19.16%袁 可以建议更多养殖户进行规模性养殖袁 减少衣原体病 的发生遥
本文针对青海省玉树州囊谦县进行试验检测袁 检查牛血清 360 份袁 调查结果显示袁 102 份牛血清样本中衣原体阳性占比 28.33%袁 散养场的阳性率高于规模化牛场袁 数据分别为 41.73% 和 20.37%曰 同时不同生长阶段的牛患病率也存在差异袁 经产耕 牛 的 患 病 率 较 高 袁 为 32.76% 袁 其 后 为 青 年 耕 牛 袁 数 据 为 21.46%袁 牛犊患病率最低袁 仅为 7.67%袁 总结为该地区的衣原 体感染病情较为严重袁 应引起当地养殖行业的重视遥 本文对 380 份耕牛血清进行试验检查袁 对该病的防御提出简单的防控 方法袁 促进牛业养殖户稳定健康的发展 [1]遥 1 材料和方法 1.1 血清样本来源
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El c r c r i g a An l s s o r ni a tFa l r o e n Ra s e t o a d o r m a y i f Ch o c He r iu e M d li t
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动 物 医学进展 ,0 2 3 ( 1 21 4 2 1 ,3 7 :3 —3
Pr g e si t rn r e c n o r s n Ve e i a y M dii e
青 海 省 部 分 地 区藏 獒 及 草 地 鼠类 弓形 虫 抗体 间接 血 凝试 验 检 测
马 国 璧
出现 了以 临床为 中心 的又一 个研 究热 潮 。弓形 虫 可 以感染 温血 动物 的许 多属 , 括人 , 科 动物 是 终末 包 猫
宿主 。动物 通过 吃 了被 猫科 动物 粪便 中卵囊 污 染 的
16 9 4年 , 江 西 发 现 了我 国第 1个 病 例 , 在 同年 福 建
也 发现 1 。但 由于 当 时未 引 起 重 视 , 缺 乏诊 断 例 且
内 。近 年来 , 有关 野生 动 物感 染 弓形 虫 的情 况 正
引起 人 们 的 高 度 重 视 _ 。弓形 虫 病 在 我 国 发 现 较 3 ] 晚 ,9 5年 , 建 省首 次 从 猫 、 、 和 豚 鼠等 动 物 15 福 兔 猪 分 离成 功 , 分 别 于 1 5 并 9 7年 和 1 5 9 9年 正 式 报 道 。
关键词 : 间接 血 凝 试 验 ; 测 ; 检 弓形 虫
文 章 编 号 :0 75 3 ( 0 2 0 一 1 2 0 1 0 —0 8 2 1 ) 7 O 3 — 3
中 图 分 类 号 : 8 27 3 ¥ 5 . 2
文 献标 识 码 : B
弓 形 虫 病 ( o o l mo i) 是 由 刚 地 弓 形 虫 T x pa s s , s
( a g h uUnv r i f C ieeMe iie G a g h u Gu n d n , 1 4 5 C ia Gu n z o ie s y o h n s t d c , u n z o , a g o g 5 0 0 , hn ) n
Ab t a t Th nayssi o d s u st i iia c fusn h lc r a d og a ( sr c : e a l i s t ic s hesgn fc n eo i g t e e e toc r i r m ECG)i d rt v l — n or e o e a u a e t a s wih c r i a tf iu e ( t he r t t h on c he r a l r CHF)m o e . 3 D a s we e r nd m l i i e n o 2 g ou ,2 d 1 6 S r t r a o y d v d d i t r ps 4 i he m o e o n t d lgr up,a d 1 n t e n r a o . Th a s i de oup we e i du e y a ra n 2 i h o m lgr up e r t n mo lgr r n c d b d imycn t i O
c p h a o e fCH F Th t n a d l o la sECG sr c r e o y t e r tm d l o . e s a d r i 1 t c d mb 1 wa e o d d,a d t e h a tc e fce t a d n h e r o fii n n
病 。2 O世纪 7 0年代后 期 , 因猪 弓形 虫 病 大 流 行 , 而
(T z p amag n i ) 引起 的人 兽共 患 病u 。现 o o ls o d i 所 J
已知 弓形虫 存在 于全球 五大 洲 的至少 2 0种 动物 体 0
引起 兽 医部 门 的重 视 , 掀起 研 究 家 畜 弓形 虫 病 的热
myo a dilp t ol g c le a n to r s d t e iy t po h ss c r a a h o ia x mi a i n we e u e o v rf hehy t e i.The r s ls s we ha h e u t ho d t tt e ECG o he r t n m o e o p we et pia l h ng d i o a wa d S s g e o e l v ton ( o t g l f t a si d lgr u r y c ly c a e nt n up r T e m ntc nv x ee a i v la e e —
潮 。到 2 O世 纪 8 0年 代 , 生 部 门也 开 展 了全 国性 卫 流 行病学 调查 , 本 上 掌 握 了我 国 弓形 虫 病 的流 行 基 特 征 。由于新 技术 的采 用 以及 诊 断 试 剂 的 供 应 , 发 现的病例 也逐 年增 多 。同时 , 由于 医疗 部 门的介 入 ,
( 海 省 畜 牧兽 医科 学 院 , 海 西 宁 8 0 1 ) 青 青 10 6
摘 要 : 用间接 血凝试验 (HA) 对 青 海省 部 分 地 区 的藏 獒 、 马拉 雅 旱 獭 、 应 I , 喜 高原 鼠 兔及 中华鼢 鼠 的
3 1 血 清样 品 , 1份 进行 弓形 虫特 异性抗 体 的检 测 。结果检 出 3 3份 阳性血 清 , 阳性 率为 1 . 1 。 0 6
手 段 , 现 的病 例 又不多 , 发 而被认 为是一 种 罕见 的疾
食物 ,或者通过 母体 传给 胎儿 的方 式感 染 。尽管 把
收稿 日期 :0 20 — 9 2 1 — 3 1 作 者 简 介 : 国璧 ( 94 ) 男 , 肃张 家川 人 , 马 15一 , 甘 实验 师 , 期从 事 动 物 疫病 防 治研 究与 推 广 。 长
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