盐酸小檗碱的分离纯化论文
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
摘要：黄连是一种广泛应用于中药和食品添加剂的植物材料，其主要活性成分之一为
盐酸小檗碱。
本研究旨在通过提取和纯化的方法获得高纯度的盐酸小檗碱，并对其抑菌活
性进行研究。
实验结果表明，通过硅胶柱层析法可以达到较高的纯化效果，所得盐酸小檗
碱的纯度超过98%。
进一步的抑菌活性研究表明，盐酸小檗碱对多种细菌具有较强的抑制
作用，尤其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制效果最明显。
方法：采集新鲜的黄连植株，将其晒干并粉碎。
然后，采用乙醇提取法提取黄连中的
活性成分。
提取液经过浓缩后，使用硅胶柱层析法进行纯化，以获得高纯度的盐酸小檗碱。
通过红外光谱和高效液相色谱分析对提取物和纯化后的产物进行鉴定和分析。
采用平板法
和微量稀释法研究盐酸小檗碱的抑菌活性。
结论：本研究通过提取和纯化的方法成功获得高纯度的盐酸小檗碱，并对其抑菌活性
进行了研究。
结果表明盐酸小檗碱对多种细菌具有较强的抑制作用。
这为进一步开发和利
用盐酸小檗碱作为抗菌药物提供了重要的理论和实践基础。
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究冀满丰
【期刊名称】《国际医药卫生导报》
【年(卷),期】2006(12)24
【摘要】目的探讨高纯度盐酸小檗碱的可行性.方法先将存在于黄连中的盐酸小檗碱转化为溶解性较大的硫酸小檗碱提取出来,然后再将其转化为盐酸小檗碱粗品,进一步用薄层色谱法分离得到纯度相对较高的盐酸小檗碱,再用柱层析法分离纯化,经乙醇反复多次重结晶,得到高纯度的盐酸小檗碱,采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱含量.结果本方法提纯得到的盐酸小檗碱纯度达97%以上.结论本方法操作简单、实用、重现性好,可用于大批量生产及合理利用资源提供科学依据.
【总页数】3页(P75-77)
【作者】冀满丰
【作者单位】深圳市宝安区龙华人民医院药剂科,广东深圳,518109
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.黄酮类化合物的提取·分离纯化和含量测定方法的研究进展 [J], 郭雪峰;岳永德
2.反萃分散液膜分离提取黄连中生物碱研究 [J], 欧阳丽;何鼎胜;苏孝礼;谢青季;马铭;姚守拙
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4.三颗针中盐酸小檗碱的提取分离工艺研究 [J], 肖道安;罗小凤
5.可乐饮料中咖啡因含量测定——有机物提取分离研究性学习案例 [J], 吉祖筠;夏心悦;郑子谅;周天昊;孙翼远;姚姝婉;张滨淇;张羡旸;赵顺懿
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关于小檗碱提取工艺分析论文
关于小檗碱提取工艺分析论文关于小檗碱提取工艺分析论文【摘要】小檗碱作为临床上常用的药材成分应用广泛，为提高小檗碱的提取得率，近年来对小檗碱提取的工艺研究很多。
该文主要综述了近些年来对小檗碱提取工艺的研究进展。
【关键词】小檗碱提取工艺黄连黄柏三颗针正交实验小檗碱又称黄连素，广泛分布在植物界，大约有4个科10个属植物都已发现有小檗碱存在。
小檗碱是黄色针状晶体，表现为季铵型、醇型3种互变异构体，其中以季铵碱型最稳定。
小檗碱能缓慢溶解于冷水（1∶20）或冷乙醇（1∶100），在热水或热乙醇中溶解度比较大，难溶于丙醇、氯仿或苯，盐类的溶解度都比较小，硫酸盐在水中的溶解度约为1∶30，盐酸盐微溶于冷水。
小檗碱可从三颗针、黄连、黄柏等植物中提取。
由于黄连生长缓慢，价格较高，黄柏来源也较少，现我国主要应用三颗针作为提取原料。
小檗碱是临床上一种常用的广谱抗菌药，主要用于菌痢、胃肠炎、痈肿等细菌性感染。
现代研究证明小檗碱有抗肿瘤、抗心率失常、降压、降血糖等作用，在临床上有越来越广泛的应用，需求量日益增加。
为提高小檗碱提取效率，近些年来对小檗碱提取工艺的研究很多，本文对这一方面作一综述。
1酸水法提取小檗碱酸水法是目前工业生产提取小檗碱常用的方法。
从三颗针中提取小檗碱,常用多倍量的0.3%硫酸水溶液浸泡24h，滤液用石灰乳调pH 值至12，过滤，滤液用盐酸调pH值到2～3,再加入6%左右的精制食盐,使食盐完全溶解,放置过夜,抽滤得盐酸小檗碱粗品［1］。
或用0.5%的硫酸水溶液冷浸提取,酸水液用石灰乳调pH值到7左右,滤液浓缩用盐酸调pH值到2～3，再加入6%左右的精制食盐,使食盐完全溶解,过滤，沉淀溶于热水，加石灰乳调pH值到8.5～9趁热过滤,滤液再用盐酸调pH值到2～3，放冷过滤得盐酸小檗碱粗品［2］。
廖志新等［3］以产于青海等地的三颗针为原料，采用正交实验法，对酸水法提取盐酸小檗碱的生产工艺进行研究，找出了最佳的提取工艺。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
收稿日期#&$2 &$ $$修订日期#&$2 &* $! 基金项目北方民族大学校级科研项目'#&$2l];?a&#(+北方民族大学引进人员科研启动项目'!!&&0&#*&&(+北方民族大学植物性农产
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黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
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'$'北方民族大学生物科学与工程学院#银川)*&&#$+ #'宁夏特殊生境微生物资源开发与利用重点实验室#银川)*&&#$(
由真菌和细菌引起的植物病害严重影响作物的 产量和 品 质#是 造 成 巨 大 经 济 损 失 的 主 要 原 因 之 一)$#*%喷施化学 抑 菌 剂 是 目 前 控 制 病 害 采 取 的 主 要手段#但存在食品安全$环境污染以及易诱导病原 物产生ห้องสมุดไป่ตู้性等问题%因此#开发新型$安全$环保的 农业病 害 防 控 技 术 是 当 前 生 产 中 亟 待 解 决 的 问 题)0*%已有研究证实植物多种次生代谢产物对病害 具有良好的抑制作用)!**#通过植物获取抑菌成分用 于预防和控制农业病害的发生#具有低毒$安全$环
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天然药物盐酸小檗碱的分离提取
实训一天然药物盐酸小檗碱的分离提取小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。
主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。
黄连中小檗碱含量最高，可达10%左右，以盐酸盐的形式存在于黄连中。
小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
小檗碱属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色，45℃-160℃即分解。
其中以季铵碱式结构状态最稳定，可以离子化呈强碱性，用过量的氢氧化钾处理小檗碱盐类时，可转变为醇式叔胺碱和醛式仲铵碱，季铵碱式小檗碱可离子化，故有一定亲水性，因此，游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。
醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。
小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。
如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。
黄连素被硝酸等氧化剂氧化，转变为樱红色的氧化黄连素。
黄连素在强碱中部分转化为醛式黄连素，在此条件下，再加几滴丙酮，即可发生缩合反应，生成丙酮与醛式黄连素缩合产物的黄色沉淀。
一、实验目的1、掌握从中草药中提取、精制生物碱的方法；2、熟悉盐酸小檗碱的化学性质与鉴定方法。
3、熟悉用层析色谱法检识天然药物的基本操作。
二、实验原理根据小檗碱的盐酸盐在在水中的溶解度小（1：500，微溶于冷水，易溶于沸水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿、石油醚），而小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度大（1:30溶于冷水，溶于乙醇）。
因此，从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用热水提出；然后向提取液中加入氯化钠盐析，再加盐酸，使其由硫酸盐转化为盐酸盐，结合氯化钠的盐析作用降低其在冷水中的溶解度，此时，盐酸小檗碱从溶液中析出，从而制得盐酸小檗碱。
盐酸小檗碱提取工艺的研究
盐酸小檗碱提取工艺的研究
盐酸小檗碱是一种广泛应用于医药工业的药物原料，主要用于治疗胃病和黄疸等疾病。
因此，研究盐酸小檗碱的提取工艺对于提高其产量和质量具有重要意义。
盐酸小檗碱的提取工艺主要包括以下几个步骤：
1. 原料选取：选择含有丰富盐酸小檗碱的植物材料作为原料，常用的有小檗树根、茎、叶等。
2. 粉碎和筛选：将选取的植物材料进行粉碎和筛选，获得适当粒度的粉末。
3. 固液提取：将粉碎和筛选后的植物材料与适量溶剂进行混合浸泡，经过一段时间后，进行过滤分离植物材料与溶液。
4. 浓缩和结晶：将得到的溶液进行浓缩，使溶液中的溶剂蒸发；然后通过冷却结晶使得盐酸小檗碱从溶液中结晶出来。
5. 滤饼漂洗：将结晶滤饼进行漂洗，去除杂质，并提高盐酸小檗碱的纯度。
6. 干燥和粉碎：将漂洗后的盐酸小檗碱滤饼进行干燥，去除水分；然后进行粉碎，得到细粉末状的盐酸小檗碱。
7. 包装和储存：将得到的盐酸小檗碱进行包装，并储存在适宜的环境中，以保证其质量和稳定性。
上述工艺中的每个步骤都需要进行条件的优化和控制，以提高盐酸小檗碱的产量和纯度。
同时，还需进行相关的分析和检测，以确保提取过程的质量和安全性。
中药小檗碱的提取与纯化工艺研究
中药小檗碱的提取与纯化工艺研究中药是一种源远流长的传统医学，在中国几千年的医学发展历程中，中药一直扮演着重要的角色，而小檗碱作为一种常用中草药的主要有效成分之一，被广泛应用于中药领域，特别是在治疗炎症和肝胆疾病方面，其功效被广泛认可。
小檗碱的化学结构与药理活性已经有了很详细的研究，而小檗碱的提取与纯化技术也是当前研究的热点之一。
本文将围绕小檗碱的提取与纯化工艺展开深入的探讨。
一、小檗碱的提取方法小檗碱的提取方法主要有煎煮提取法、超声波提取法、微生物法等多种，其中煎煮提取法是目前广泛应用的一种方法。
煎煮提取法是从小檗树干、叶子中提取小檗碱的一种方法，具体操作步骤如下：1.将干燥的小檗树干、叶子粉碎成小颗粒。
2.将粉碎后的小檗树干、叶子装入提取器中。
3.倒入足够的水，与植物原料的比例是1:10。
4.开始加热，加热时间一般为1-2小时，煎煮温度控制在100℃左右。
5.将提取液过滤，并将提取液中的小檗碱进行测定。
尽管煎煮提取法对于小檗碱的提取有较好的效果，但该方法有一定缺点，如提取时间过长，提取率低，会导致部分有效成分的流失等问题。
因此，研究人员不断尝试寻找更加高效、优质的提取方法。
二、小檗碱的纯化方法小檗碱的纯化方法主要分为溶剂沉淀、柱层析、高效液相色谱等方法，其中，溶剂沉淀法是用最为广泛的一种方法。
溶剂沉淀法是利用有机溶剂将混合物中小檗碱选择性地溶解，然后对溶液进行加热蒸发，使其缓慢冷却，在此过程中，小檗碱分子会重新排列，逐渐凝结形成晶体，从而实现对小檗碱的纯化。
溶剂沉淀法的操作步骤如下：1.将小檗碱提取液进行浓缩，获得浓缩提取液。
2.在浓缩提取液中，加入约2倍的醋酸乙酯，用过量的溶剂使得小檗碱选择性地溶解。
3.加热溶液，用一定量的醋酸盐水稍加冷却，然后加入特定的醇类溶剂，使得小檗碱动态平衡，从而排列得更加紧凑。
4.将溶液慢慢冷却，在此过程中，小檗碱分子逐渐凝结形成晶体。
5.将晶体过滤、洗净、干燥，最终获得小檗碱。
(完整word版)黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连(coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连(coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎.黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效.黄连的有效成分主要是生物碱,已分离出的主要生物碱有小檗碱(berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱(jatrorrhizine)等.其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求］1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法.2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。
[实验原理］小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125,酸性硫酸盐1:100，硫酸盐l:30，但在热水中都比较容易溶解.小檗碱常以季铵碱形式存在,碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式.OO33NHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色)N+OOOCH3OCH3小檗碱（黄连素)掌叶防己碱又称巴马亭,为黄色结晶,溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶,并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇,在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质.再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。
黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。
[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O ONHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）N+OOOCH33小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。
21实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
1:100
盐酸小檗碱(B.Cl)
1:500
几乎不溶
酸性硫酸小檗碱(B.HSO4)
1:100
微溶
中性硫酸小檗碱(B2.SO4)
1:30
可溶
中性磷酸小檗碱(B3.PO4)
1:15
可溶
小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。
1.润湿
取黄连粗粉50g置烧杯中，加0.3%硫酸约10ml润湿，放置30
min
2.装筒（分次装入渗漉筒并排气）
3.浸渍
用0.3%硫酸浸泡过夜
4.渗漉
收集9—10倍量的渗漉液
等待空余时间：
10g硅胶G + 30ml(0.8 % CMC-Na)研匀，铺板
（二）分离
1.取渗漉液，加40% NaOH调PH至11～12，放置过夜；
2.渗漉法及酸溶碱沉法的操作技术
教学内容
备注
实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究概述
黄连是一种常用的中药材，具有清热解毒、泻火生津、消肿止痛等功效。
其中的盐酸小檗碱是黄连主要的有效成分之一，具有广谱的抑菌活性，可用于治疗各种感染性疾病。
本文旨在通过对黄连中盐酸小檗碱的提取、纯化和抑菌活性研究，探讨其在临床中的应用前景。
提取方法
1. 首先将黄连研成细末，加入适量的水或乙醇中搅拌均匀，得到黄连浸膏。
2. 将黄连浸膏过滤，去除杂质，得到黄连提取液。
3. 将黄连提取液用醋酸铅沉淀黄连素，将上清液过滤后加入盐酸，使黄连素转化为盐酸小檗碱。
4. 将盐酸小檗碱用乙醇重结晶，得到纯净的盐酸小檗碱晶体。
纯化方法
2. 用溶剂萃取和凝胶层析等方法对中和盐酸小檗碱进行进一步分离纯化。
抑菌活性研究
1. 实验室选取一系列常见的病原微生物，包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌等，通过体外实验检测盐酸小檗碱的抑菌活性。
2. 对盐酸小檗碱的最小抑菌浓度、抑菌圈直径等指标进行测量。
结果分析
实验结果显示，盐酸小檗碱具有广谱的抑菌活性，对上述各种细菌均有明显的抑制作用。
在最小抑菌浓度和抑菌圈直径方面，盐酸小檗碱的抑菌效果均较优秀。
此外，研究还发现，盐酸小檗碱对革兰氏阳性菌的抑制作用更强，说明其对此类微生物具有比较强的敌菌活性。
结论。
小檗碱的提取分离及鉴定
盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O33NHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）N+OOOCH3OCH3小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。
再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。
[实验内容]一、提取分离黄连粗粉50g500ml，浸渍20分钟加石灰乳调PH值至中性放置10分钟，抽滤滤液加HCl调PH2～3加滤液体积4～5％的NaCl，放置30分钟，抽滤沉淀滤液（主要含小檗碱、掌叶防己碱、黄连碱等生物碱）加200ml水加热至澄明趁热抽滤滤液放置、抽滤沉淀二、生物碱类检识1．化学检识：（1）丙酮加成反应：取样品0.05g，溶于50ml热水中，加入10％NaOH 溶液2ml，混合均匀后，于水浴中加热至50℃，加入丙酮5ml，放置，即有柠檬黄色结晶析出。
黄柏中盐酸小檗碱的提取与检识
黄柏中盐酸小檗碱的提取与检识朱彬彬(药学系药监班)【摘要】小檗碱常以季铵碱的形式存在，碱性强，能溶于水，但因黄柏中富含粘液质，且粘液质溶于水，形成粘稠的浆状，影响以后的实验操作，所以首先用石灰乳沉淀粘液质。
其后，用水自黄柏中提取小檗碱。
利用盐酸小檗碱几乎不溶于水的性质，可加盐酸，将游离小檗碱转化为盐酸小檗碱沉淀析出【关键词】黄柏小檗碱提取【引言】综合运用渗漉,盐析,重结晶,柱色谱等提取分离纯化的方法,实现对黄柏中小檗碱的提取分离【材料】抽滤泵，电炉，石棉网，天平，展开槽，渗漉筒，布氏漏斗，抽滤瓶，色谱柱，微量进样器，滤纸，铁架台，万能夹，棉花，培养皿，玻璃棒，橡皮管，滴管，硅胶-G薄层板，量筒，1000ml具塞三角瓶，100ml烧杯两只【方法】粗提：取黄柏粗粉40g＋0.3％11dH2SO4水300ml→搅拌30分钟，超声提取10分钟，静置过夜→脱脂棉过滤→得滤液＋石灰水调PH至12，静置30分钟→脱脂棉过滤→得滤液＋浓盐酸调PH至2.0，加入滤液量的10％的氯化钠溶解，静置过夜→抽滤→得到盐酸小檗碱粗品。
精制:盐酸小檗碱粗品＋40ml蒸馏水→加热溶解，趁热抽滤→得到滤液→冷却至400c以下后＋浓盐酸调PH至2.0，静置30分钟，析晶完全，抽滤→得到沉淀→用蒸馏水水洗至中性，得到盐酸小檗碱精品检识:①浓HNO3试验:取小檗碱少许，加2ml稀硫酸，溶解后加浓硝酸数滴，观察颜色变化②丙酮试验:取小檗碱少许，加3ml水，加热溶解后加NaOH试液2d,观察颜色变化→放冷后加丙酮4d ，振摇，观察并记录现象③薄层色谱法试样:自制盐酸小檗碱乙醇溶液点两个标记①②对照品:盐酸小檗碱对照乙醇溶液点两个点展开剂:正丁醇:冰醋酸:水(4:1:1)12ml【结果】1.浓硝酸试验:颜色由黄色变成红棕色，说明黄柏中含有盐酸小檗碱2.丙酮试验:出现浑浊，产生黄色沉淀，说明黄柏中中含有盐酸小檗碱3.薄层色谱法:如图所示【结论】比移值早规定范围内，判断其符合标准。
黄连生药中盐酸小檗碱提取工艺的优选
黄连生药中盐酸小檗碱提取工艺的优选
背景介绍
盐酸小檗碱是一种具有重要药理活性的生物碱，可以广泛应用于医学、农业等领域。
而黄连是盐酸小檗碱的主要来源之一，其含盐酸小檗碱的量与品质对提取工艺有着至关重要的影响。
目的和意义
本文旨在探讨黄连生药中盐酸小檗碱的提取工艺，在优选提取工艺的同时，还可为进一步研究盐酸小檗碱提供参考。
研究内容
1.实验材料和方法
本实验以黄连粉末为原料，用超声波辅助萃取技术进行提取。
以提取出的总碱含量和含盐酸小檗碱的含量为考核指标，通过单因素试验和正交试验进行工艺优选。
2.实验结果和分析
通过单因素试验，考察了提取温度、乙醇浓度、固液比、萃取时间等因素对提取效果的影响。
结果表明，提取温度、乙醇浓度、萃取时间对提取效果有着显著影响，而固液比对提取效果的影响不显著。
通过正交试验，构建了四因素三水平的正交实验设计，并对数据进行分析。
结果表明，最优提取条件为提取温度 60℃、乙醇浓度 70 %、固液比1:25、萃取时间 30 min，此时盐酸小檗碱的提取率为 4.76%，和总碱含量达到最大值。
3.结论
通过实验，得出了黄连生药中盐酸小檗碱提取工艺的最优条件，同时也得出了一些有关提取工艺的结论。
此外，对于提取工艺的优化和完善也提供了参考。
总结
本文探讨了黄连生药中盐酸小檗碱的提取工艺，并通过实验得出了最优条件。
在进一步研究和实践中，可继续完善和提高盐酸小檗碱的提取效果，为其广泛应用于医学、农业等领域提供更好的条件和效益。
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究diarfhea—Dred0minantirritablebowelsyndromeJGastroentero1Hepato1.2000,127:1695—1703[5】候晓华,张锦坤,易碎琼,等.腹泻型肠易激惹综合症粪便茵群变化【J】.临床消化病杂志.1990,2(1):72[6】MurrayCD.FlyunJ,RatcliffeL,eta1.Effectofacutephysica1andpsycho1ogica1stressongutautonomicinnervationinirritab1ebowe1syndromeGastroenterology.2004.127(6):1695—1703.[7】Lesbros-Pantof1ickovaD,MichettiP,eta1.Meta—analysis:Thetreatmentofirritablebowe1syndrome[J】.A1imentPharmacolTher.2004,20(11—12):1253—1269收稿日期:2006—1卜17黄连中的盐酸小檗碱的提取,分离及分离物的含量测定研究冀满丰深圳市宝安区龙华人民医院药剂科广东深圳518109摘要目的探讨高纯度盐酸小檗碱的可行性.方法先将存在于黄连中的盐酸小檗碱转化为溶解性较大的硫酸小檗碱提取出来,然后再将其转化为盐酸小檗碱粗品,进一步用薄层色谱法分离得到纯度相对较高的盐酸小檗碱,再用柱层析法分离纯化,经乙醇反复多次重结晶,得到高纯度的盐酸小檗碱,采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱含量.蛄果本方法提纯得到的盐酸小檗碱纯度迭97%以上.蛄论本方法操作简单,实用,重现性好,可用于大批量生产及合理利用资源提供科学依据.关键词黄连盐酸小檗碱提取分离HPLC Studyontheextractionandseparationanddeterminationof berberiRehydrochiorideinRhizomacoptidisJIManfengDepartmentofPharmacy,LonghuaPeople'sHospitalofBaoan,Shenzhen518109 AbstractObjectiveToseekthefeasibi1ityofobtaininghighlYpureberberinehydrochloride. MethodsBerberinehydrochlorideinRhizomacoptidiswasturnedintoberberinesulphuricof largedissolubi1ity,andthenwasturnedintocrudeberberinehydrochloride.Relativehighlypureb erberinehydrochloridewasseparatedbyTLCfurther.Andberberinehydrochloridewasseparatedby columnchr0mat0graphy.Finally,thehighlypureberberinehydrochloridewasobtainedbyseveralcr ystalIi—zationsinethanol,anditscontentwasmeasuredbyHPLC.ResultsThepurityofberberinehyd rochlo一75国际医药卫生导报2006年第12卷第24期(半月刊) rideobtainedinthismethodreachover97%.Conclusionthismethodischaracterizedbyconv enience,practicality,goodrepr0ducibility,whichcanbeappliedtomassproductionandsuppliedforre asonableexpl0itati0nofresource. KevwordsRhizomacoptidisberberinehydrochlorideextractionseparationHPLC中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1007-1245(2006)24—0076-03黄连是毛莨科植物黄连CoptiSChinensiSFranch或同属他种植物的根茎,是一种重要且用途广泛的中药,具有清热解毒等功效,其主要成分是生物碱,文献报道过分离方法操作繁琐,成本高,且选用的展开系统多为苯,甲醇等致癌物质,笔者经多年实践,改进以上的各种不完善之处,进一步简化其操作过程,获得纯度较高的盐酸小檗碱.1试剂及材料黄连(批号:O6O326)购于广州市药材公司;盐酸小檗碱对照品盐酸小檗碱(批号:l1O7l3—2OO2O8)中国药品生物制品检定所;三用紫外分析仪;硅胶G,柱层析硅胶(青岛海洋化工厂):乙腈,甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯.2方法2.1提取称取黄连粗粉3O克,加O.3%H,SO200ML,超声波提取lh,棉花过滤,加石灰乳调PH至1O以上,过滤,滤液用稀盐酸调PH至3,加入含盐量约7%食盐,搅拌使溶解,放置析晶l5分钟,抽滤,滤渣用蒸馏水洗3次,得粗品.2.2TLC分离取上述提取的粗品用乙醇适量溶解,备用.硅胶G,0.3%CMC—NA按1:3.5比例研磨均匀手工铺板,板的规格为lO*20cm,105"C活化1h,干燥器中放置一晚, 带状点样,以正丁醇一冰乙酸一水(7:1:1)展开高度约为12cm,取出,晾干,在紫外灯下(365nm)观察,在与对照品盐酸小檗碱对应的色带处用铅笔圈出来, 将该色带刮下来,置三角瓶中,用乙醇洗至硅胶粉无色76为止,然后将乙醇液浓缩至一定体积(备用).2.3柱层析分离将一根直径为3em,长约为40am的层析柱固定于铁架台上,称取柱层析硅胶(100—200目),加适量硅胶与上述TLC分离的样品拌匀,挥干,以乙酸乙酯洗脱,收集鲜黄色的色带,流份置于水浴上浓缩至一定体积,用塑料薄膜封口,放置析晶,然后收集微量结晶,再用乙醇重结晶几次,得到纯度较高的样品.2.4样品的含量测定..2.4,l色谱条件:色谱柱为kromasilcl8柱(25OmmX4.6mm,5m);流动相为:乙腈一O.1%磷酸溶液(35:65);检测波长346nm{柱温:室温;流速:lml/min;进样量为2Ol.在此条件下测定盐酸小檗碱,盐酸小檗碱峰与其他峰达到基线分离.2.4.2线性关系考察:精密称取干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品适量,甲醇溶解并制成O.098mg/ml的对照品溶液,分别精密吸取O.1,O.2,O.4,O.8,1.6,3.2ml对照品溶液置5ml容量瓶中,并用甲醇定容,摇匀,分别进样2Ol,记录色谱图和峰面积,以峰面积积分值y为纵坐标,浓度x为横坐标,绘制标准曲线,得线性回归方程:y=1.40XlO~x+5.47X10,r=O.9993,线性范围是:O.0392~1.2544g.2.4.3精密度试验:取同一供试品溶液重复进样6次,每次2Ol,测定峰面积,盐酸小檗碱6次峰面积测定结果的RSD为O.99%,表明方法精密度良好.2.4.4重复性试验:按供试品溶液制各项下制各6份供试品溶液,分别进样2Ol.测定峰面积,计表1加样回收率试验结果国际医药卫生导报2Oo6年第12卷第24期(半月刊)A盐酸小檗碱标准品B盐酸小檗碱样品C盐酸小檗碱阴性图1高效液相色谱图算盐酸小檗碱含量,6次测定结果的RSD为1.13,表明方法重复性好.2.4.5回收率试验:精密称取盐酸小檗碱结晶50mg,置于1Om1量瓶中,加甲醇至刻度,得浓度为5mg/ml的溶液.精密移取lml置5ml容量瓶中,用甲醇定容得浓度为1mg/ml的溶液,再精密移取该溶液lml,加入浓度为0.8lmg/ml,1.Omg/ml,1.2mg/ml的盐酸小檗碱对照品溶液1m1,摇匀,测定盐酸小檗碱的峰面积,并计算加样回收率,结果见表1.2.4.6稳定性试验:取同一供试品溶液,按上述色谱条件于0,1,2,4,8,12,24h分别进样2Ou1,测定盐酸小檗碱的峰面积,结果RSD=1.O8,表明供试品溶液在24h内稳定.2.4.7样品含量测定:称取"2.3"项下的盐酸小檗碱样品2mg,置25m1容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,进样2Ou1,进样3次,以三次测定结果的平均值作为含量测定值.结果样品平均含量为97.2%(RSD=1.18%).3讨论本实验用稀硫酸为溶剂,将药材中盐酸小檗碱转为硫酸小檗碱,利用超声波的高频率振动,提高其有效成分的提取率,用石灰乳使提取液呈碱性,从而除去提取液中的鞣质,粘液质及过量的硫酸,用TLC法分离纯化盐酸小檗碱,但经处理后得到的盐酸小檗碱经TLC检验发现还有少许杂质,故利用柱层析法将其进一步分离纯化,用乙酸乙酯为洗脱剂,样品纯度得到进一步提高,然后再用乙醇重结晶几次,最后得到精品,经HPLC检测,纯度达到97.2%,本方法简单实用,操作性强,成本低,毒性小,特别适合推广大批量生产,如进行大批量生产,也可去掉TLc那步,用多一次柱层析代替估计效果更佳.参考文献【1】苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术【M】. 北京:人民卫生出版社,2000:869【2】黄红中.中药师手册【M】.广州:羊城晚报出版社, 2002:365收稿日期:2006-ll—l677。
【免费下载】黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。
[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O ONHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）N+OO33小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究作者：屈欢黄雪王军节来源：《植物保护》2020年第02期摘要为了探究盐酸小檗碱在植物病原真菌方面的抑制作用，以黄连根粉为材料，采用酸水法提取和乙醇重结晶获得盐酸小檗碱纯品，采用生长速率法研究了盐酸小檗碱对常见植物病原菌的抑制活性。
结果表明，盐酸小檗碱的提取率为3.3%，经高效液相色谱法测得其含量为93.56%;抑菌活性试验表明，盐酸小檗碱在100 μg/mL时对玉米大斑病菌的抑制率达99.9%，EC50為8.20 μg/mL，表现出比药剂对照噁霉灵和百菌清更高的抑制活性;进一步的试验表明，与噁霉灵及百菌清相比，盐酸小檗碱对玉米大斑病菌的抑制作用具有持效期长的特点。
关键词盐酸小檗碱; 提取纯化; 含量测定; 抑菌活性中图分类号： S 482.292 文献标识码： A DOI： 10.16688/j.zwbh.2019020Abstract The aim of this study is to measure the antifungal activity of berberine hydrochloride. The root powder of Rhizoma Coptidis was used as material to obtain berberine hydrochloride， the purified product of which was successfully obtained through extraction by using acid-water method and recrystallization with ethanol， and the antifungal activity of berberine hydrochloride against phytopathogenic fungi was investigated using the mycelial growth rate method. The results showed that the extraction rate of berberine hydrochloride was 3.3% and its content was 93.56% measured by HPLC. The results of biological assay indicated that berberine hydrochloride exhibited an excellent antifungal activity against Exserohilum turcicum at the concentration of 100 μg/mL with an inhibition rate of 99.9% and EC50 value of 8.20 μg/mL， which were better than those of hymexazol and chlorothalonil， two commercially available agricultural fungicides. Compared with hymexazol and chlorothalonil， the inhibition effect of berberine hydrochloride on E.turcicum had a longer effective period.Key words berberine hydrochloride; extraction and purification; determination of content; antifungal activity由真菌和细菌引起的植物病害严重影响作物的产量和品质，是造成巨大经济损失的主要原因之一[1-2]。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究【摘要】本研究致力于探究黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性。
首先介绍了研究背景和意义，随后详细阐述了提取和纯化的过程。
通过设计抑菌实验，得出了盐酸小檗碱在抑菌中的活性结果并对相关机制进行探讨。
研究表明盐酸小檗碱具有较强的抑菌效果，可在抗菌领域有潜在应用。
在结论部分指出了盐酸小檗碱在抑菌中的潜在应用价值，并展望了未来进一步深入研究的方向。
通过本研究，为利用黄连中盐酸小檗碱的抑菌效果提供了重要参考和指导。
【关键词】黄连，盐酸小檗碱，提取，纯化，抑菌活性，研究，机制，应用，展望1. 引言1.1 研究背景黄连中盐酸小檗碱是一种具有很强抑菌活性的成分，在中医药领域被广泛应用。
小檗碱是一种重要的生物碱，具有较强的抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性，是黄连的主要活性成分之一。
近年来，随着抗生素耐药性的增加和细菌耐药性问题的日益严重，寻找新的抗菌药物成为当前科研的热点之一。
对黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究具有重要的科学意义和应用价值。
通过对该成分的深入研究，可以为开发新型抗菌药物提供理论和实验基础，为探究其抑菌机制提供参考，有望为解决当前抗生素耐药性问题带来新的希望。
本研究将针对黄连中盐酸小檗碱进行提取纯化及抑菌活性研究，旨在探讨其在抗菌领域的潜在应用价值，并为未来相关研究提供基础和参考。
1.2 研究意义黄连中盐酸小檗碱的抑菌活性研究还可以为中药在临床上的合理应用提供支持。
通过深入研究盐酸小檗碱的抑菌机制，可以更好地指导中药的合理使用，提高中药的治疗效果，减少药物的副作用，保护人们的健康。
对黄连中盐酸小檗碱的抑菌活性进行研究，对于中药的现代化发展具有积极意义。
2. 正文2.1 提取黄连中的盐酸小檗碱提取黄连中的盐酸小檗碱是一项关键的工作，因为小檗碱被证实具有很好的抑菌活性，可以用于制备药物以治疗多种感染性疾病。
在提取盐酸小檗碱的过程中，首先需要将黄连粉末与乙醇混合，然后进行超声波提取或者加热回流提取，将小檗碱溶解出来。
盐酸小檗碱的分离纯化论文
盐酸小檗碱的分离纯化论文黄连中盐酸小蘖碱的提取分离与鉴定姓名：王倩系别：信息工程系班级：13级生物二班指导教师：孙静日期：2014年11月30日第1章前言1.1小檗碱特性小檗碱是一种季铵碱,其游离碱为黄色针晶,Mp.145℃(乙醚),微溶于水,能溶于热水和乙醇中，难溶于苯、丙酮、氯仿，几乎不溶于石油醚。
小檗碱与氯仿、丙酮、苯在碱性条件下均能形成加成物。
小檗碱盐酸盐难溶于冷水，易溶于热水；硫酸盐易溶于水。
溶解度分别为:小檗碱,1∶２０（冷水）,1∶100(冷乙醇);盐酸盐,1∶500(冷水);硫酸盐,1∶30(冷水),利用这些特性提取盐酸小檗碱。
1.2小檗碱作用小檗碱是一种常用的广谱抗菌药，抵抗多种原因引起的腹泻，并具有抗病原体作用，通常用于治疗原发性高血压、心律失常、高脂血症、消化性溃疡和2型糖尿病等疾病。
常用的小檗碱提取方法有：醇提、酸水、石灰乳、酶解和酸性乙醇等。
本实验以黄柏为原料，分别用以上5种方法提取其中的小檗碱，并对各种方法的得率进行了比较，以期筛选出适于黄檗中小檗碱提取的最佳方法1.3小檗碱提取纯化鉴定方法掌叶防己碱本实验是利用小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。
而它们的盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解度则更小。
利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱。
再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。
1.4本项目研究的意义2014年中国小檗碱市场研究报告依托多年对小檗碱行业的研究，结合小檗碱行业历年供需关系变化规律，立足国内市场，兼顾全球市场环境，对小檗碱行业内企业群体进行了深入的调查与研究。
同时，2014年中国小檗碱市场研究报告也针对小檗碱行业及其上下游行业的特点，从不同角度切入行业，为小檗碱行业企业提供了强大的数据支持与专业级的市场导向。
并为企业制定发展战略、进行投资决策和企业经营管理提供权威、充分、可靠的决策参考。
1.5 研究内容1.5.1黄连中盐酸小檗碱的提取1.5.2 小檗碱的分离纯化1.5.2 小檗碱的鉴定第2章黄连中小檗碱的提取2.1实验材料与方法2.1.1实验材料黄连粗粉2.1.2实验试剂2%硫酸溶液、石灰乳、Hcl、Nacl.2.1.3实验仪器粉碎机，渗漉筒，烧杯2.1.4实验方法取黄连粗粉，放入粉碎机，称重约50g加0.3％硫酸500ml（超过药材0.2cm）浸渍20分钟，装入渗漉筒30分钟，滤过药渣滤液加石灰乳调PH值至中性放置10分钟抽滤滤液加HCl调PH2～3，加滤液体积10％的NaCl，放置过夜，抽滤盐酸小檗碱粗品2.2 结果与分析通过以上操作，制得盐酸小檗碱的粗品，由于操作过程中试剂配制微小误差，使得提取的盐酸小檗碱的粗品比预计的少。
盐酸小檗碱提取方法研究进展
文章编号：2096-0387 (2018) 02-0135-03第4卷第2期 生物化工Vol.4 No.22018 年 4 月Biological Chemical EngineeringApr. 2018盐酸小檗碱提取方法研究进展韩宁娟，方欢乐，牛睿，葛维娟，刘荣利(西安培华学院，陕西西安710125)摘要：小檗碱作为一种有药效的化合物，不仅具有良好的抗菌作用，同时具有降血糖、降血脂、抗肿瘤和免疫调节等药理 作用。
本文对盐酸小檗碱提取方法进行了阐述，以期为盐酸小檗碱的开发利用提供参考。
关键词：盐酸小檗碱;提取方法；黄连 中图分类号：R284文献标志码：AResearch Progress on Extraction Methods of Berberine HydrochlorideHan Ning -juan , Fang Huan -le , Niu Rui , Ge Wei -juan , Liu Rong-li(Xi ’ an Peihua University , Shaanxi Xi，an 710125)Abstract ： As a compound with broad application prospects , berberine not only has good antibacterial activity , but also has pharmacological effects such as lowering blood sugar , lowering blood fat , anti-tumor and immune regulation .This article describes the extraction method of berberine hydrochloride in order to provide a reference for the development and utilization of berberine hydrochloride .Key words ： Berberine hydrochloride ; Extraction method ; Coptis chinensis小檗碱（berberine )又称黄连素，属于季铵型异 喹啉类生物碱，主要存在于小檗科、毛莨科和防己科 等植物中，是一种传统的中医消炎药及抗菌药，临床 上主要用于治疗胃肠道疾病。
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黄连中盐酸小蘖碱的提取分离与鉴定姓名：***系别：信息工程系班级：13级生物二班****：**日期：2014年11月30日摘要 (2)第1章前言 (3)1.1小檗碱特性 (3)1.2小檗碱作用 (3)1.3小檗碱提取纯化鉴定方法 (3)1.4本项目研究的意义 (4)1.5 研究内容 (4)第2章黄连中小檗碱的提取 (4)2.1实验材料与方法 (4)2.2 结果与分析 (5)第3章盐酸小檗碱的分离纯化 (5)3.1实验材料与方法 (5)3.2 结果与分析 (6)第4章盐酸小檗碱的鉴定 (6)4.1实验材料与方法 (6)4.2 结果与分析 (7)第5章结论 (7)参考文献 (8)摘要生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。
小檗碱是一种季铵碱,其游离碱为黄色针晶,Mp.145℃(乙醚),微溶于水,能溶于热水和乙醇中，难溶于苯、丙酮、氯仿，几乎不溶于石油醚。
小檗碱与氯仿、丙酮、苯在碱性条件下均能形成加成物。
小檗碱盐酸盐难溶于冷水，易溶于热水；硫酸盐易溶于水。
溶解度分别为:小檗碱,1∶２０（冷水）,1∶100(冷乙醇);盐酸盐,1∶500(冷水);硫酸盐,1∶30(冷水),利用这些特性提取盐酸小檗碱。
主要研究结果为:1.盐酸小檗碱精制2.氧化铝柱层析分离纯化盐酸小檗碱。
3.盐酸小檗碱的鉴定。
关键字:盐酸小檗碱提取分离第1章前言1.1小檗碱特性小檗碱是一种季铵碱,其游离碱为黄色针晶,Mp.145℃(乙醚),微溶于水,能溶于热水和乙醇中，难溶于苯、丙酮、氯仿，几乎不溶于石油醚。
小檗碱与氯仿、丙酮、苯在碱性条件下均能形成加成物。
小檗碱盐酸盐难溶于冷水，易溶于热水；硫酸盐易溶于水。
溶解度分别为:小檗碱,1∶２０（冷水）,1∶100(冷乙醇);盐酸盐,1∶500(冷水);硫酸盐,1∶30(冷水),利用这些特性提取盐酸小檗碱。
1.2小檗碱作用小檗碱是一种常用的广谱抗菌药，抵抗多种原因引起的腹泻，并具有抗病原体作用，通常用于治疗原发性高血压、心律失常、高脂血症、消化性溃疡和2型糖尿病等疾病。
常用的小檗碱提取方法有：醇提、酸水、石灰乳、酶解和酸性乙醇等。
本实验以黄柏为原料，分别用以上5种方法提取其中的小檗碱，并对各种方法的得率进行了比较，以期筛选出适于黄檗中小檗碱提取的最佳方法1.3小檗碱提取纯化鉴定方法掌叶防己碱本实验是利用小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。
而它们的盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解度则更小。
利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱。
再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。
1.4本项目研究的意义2014年中国小檗碱市场研究报告依托多年对小檗碱行业的研究，结合小檗碱行业历年供需关系变化规律，立足国内市场，兼顾全球市场环境，对小檗碱行业内企业群体进行了深入的调查与研究。
同时，2014年中国小檗碱市场研究报告也针对小檗碱行业及其上下游行业的特点，从不同角度切入行业，为小檗碱行业企业提供了强大的数据支持与专业级的市场导向。
并为企业制定发展战略、进行投资决策和企业经营管理提供权威、充分、可靠的决策参考。
1.5 研究内容1.5.1黄连中盐酸小檗碱的提取1.5.2 小檗碱的分离纯化1.5.2 小檗碱的鉴定第2章黄连中小檗碱的提取2.1实验材料与方法2.1.1实验材料黄连粗粉2.1.2实验试剂2%硫酸溶液、石灰乳、Hcl、Nacl.2.1.3实验仪器粉碎机，渗漉筒，烧杯2.1.4实验方法取黄连粗粉，放入粉碎机，称重约50g加0.3％硫酸500ml（超过药材0.2cm）浸渍20分钟，装入渗漉筒30分钟，滤过药渣滤液加石灰乳调PH值至中性放置10分钟抽滤滤液加HCl调PH2～3，加滤液体积10％的NaCl，放置过夜，抽滤盐酸小檗碱粗品2.2 结果与分析通过以上操作，制得盐酸小檗碱的粗品，由于操作过程中试剂配制微小误差，使得提取的盐酸小檗碱的粗品比预计的少。
第3章盐酸小檗碱的分离纯化3.1实验材料与方法3.1.1实验材料盐酸小檗碱的粗品，3.1.2实验试剂黄连根粉,0.5%硫酸，石英砂，脱脂棉，石灰乳，10%盐酸，浓盐酸，氧化铝，95%乙醇，无水乙醇，10％氢氧化钠溶液,滤纸，硅胶，氯仿-氨-甲醇(30∶1∶8),氯仿-乙醇-0.1mol.L－1盐酸 (1∶1∶1，下层)3.1.3实验仪器层析柱、研钵、烧杯、硅胶薄层板、滤纸、抽滤装置、紫外灯、层析缸等3.1.4实验方法3.1.4．1盐酸小檗碱精制取所得粗品(未干燥)放入20倍量沸水中，搅拌溶解后，继续加热数分钟，趁热过滤[4]。
滤液滴加一滴浓盐酸，静置(过夜),滤取结晶，用蒸馏水洗数次,抽干，50℃以下真空干燥，即为精制盐酸小檗碱1氧化铝柱层析分离纯化盐酸小檗碱[5]a 氧化铝层析柱制备:取一支2.0cm×30cm层析柱,柱底覆盖少许脱脂棉,柱内加入一定体积95%乙醇,打开活塞,让溶液慢慢流出。
此时将已搅拌混均的氧化铝95%乙醇悬液(层析氧化铝120-140目,25-30g)不断加入层析柱内,至加完后,轻敲柱体,使各部分氧化铝均匀紧密一致。
待氧化铝沉降稳定(表面应平整),表面保持有少量溶剂(0.5cm左右)，关闭活塞。
b 进样:取约50 mg左右的盐酸小檗碱粗品，用尽量少的无水乙醇溶解制成溶液。
用吸管吸取样液沿柱壁四周小心加入,打开层析柱活塞使有溶剂滴下,待液面近与氧化铝表面相平,迅速用少量无水乙醇将柱壁样液洗下,待液面下降后再洗,反复多次,直至表面溶剂无色,让样品完全持留于氧化铝中,并保留有1cm左右溶剂,此时加入少许石英砂覆盖氧化铝表面,并沿管壁加入足量洗脱剂。
在此过程中要准确迅速,洗涤溶剂尽量少并尽可能不要扰动,氧化铝表面平整。
c 洗脱:使溶剂继续滴下,(注意向柱内添加无水乙醇,保持柱体湿润),洗脱样品。
按每流分5-10 mL收集洗脱液,并着重收集各个色段(从下至上):鲜黄色、桔红色(棕色段可不再洗脱),收集到的洗脱液经浓缩后进行检测鉴定。
d 氧化铝再生回收:层析后弃去氧化铝柱上端带深色部分,取出剩余氧化铝,依次用10％氢氧化钠溶液和水洗涤,晾干后经400℃烘4-6小时活化再生即可备用。
3.2 结果与分析通过以上操作，得到一定纯度的盐酸小檗碱纯品。
第4章盐酸小檗碱的鉴定4.1实验材料与方法（1）取自制精制盐酸小檗碱0.05g溶于50ml热水中，加入10%NaOH溶液2ml混合均匀后，于水浴上加热至50℃，加入丙酮5ml，放置，即有柠檬色丙酮小檗碱结晶析出。
抽滤，水洗后，干燥，测mp。
（2）取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀盐酸2ml待溶解后，加漂白粉少许，即显樱红色。
（3）取自制精制盐酸小檗碱少许，加水1ml待溶解后，加1~2滴，即产生绿色硝酸小檗碱沉淀。
（4）取自制精制盐酸小檗碱少许，加1ml待溶解后，加锌粉少许，再分数次加入浓硫酸数滴，每隔10min加1次，观察其黄色是否消退。
薄层色谱检识吸附剂：硅胶G-CMC-Na薄层板对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液样品：不同色带的甲醇溶液展开剂： CHCl3-MeOH-冰醋酸（7：1：2）检视：先在紫外灯光（365nm）下观察荧光，再喷改良碘化铋钾试剂。
记录图谱并计算Rf值4.1.1实验材料盐酸小檗碱纯品4.1.2实验试剂NaOH溶液、稀盐酸、漂白粉、浓硝酸、锌粉、浓硫酸、盐酸小檗碱甲醇溶液、 CHCl3-MeOH-冰醋酸、改良碘化铋钾试剂。
4.1.3实验仪器紫外可见分光光度计、烧杯，硅胶G-CMA-Na薄层板，真空干燥箱。
4.1.4实验方法1.取自制精制盐酸小檗碱0.05g溶于50ml热水中，加入10%NaOH溶液2ml混合均匀后，于水浴上加热至50℃，加入丙酮5ml，放置，即有柠檬色丙酮小檗碱结晶析出。
抽滤，水洗后，干燥，测mp。
2.取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀盐酸2ml待溶解后，加漂白粉少许，即显樱红色。
3.取自制精制盐酸小檗碱少许，加水1ml待溶解后，加1~2滴，即产生绿色硝酸小檗碱沉淀。
4.取自制精制盐酸小檗碱少许，加1ml待溶解后，加锌粉少许，再分数次加入浓硫酸数滴，每隔10min加1次，观察其黄色是否消退。
5.薄层色谱检识吸附剂：硅胶G-CMC-Na薄层板对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液样品：不同色带的甲醇溶液展开剂： CHCl3-MeOH-冰醋酸（7：1：2）检视：先在紫外灯光（365nm）下观察荧光，再喷改良碘化铋钾试剂。
记录图谱并计算Rf值4.2结果与分析通过颜色与RF值分析，得出薄层色谱检验后纯度大大提高，但收率降低。
第5章结论小檗碱是一种常用的广谱抗菌药，抵抗多种原因引起的腹泻，并具有抗病原体作用，通常用于治疗原发性高血压、心律失常、高脂血症、消化性溃疡和2型糖尿病等疾病。
本项目以黄连作为试验材料，从黄连中提取盐酸小檗碱，通过氧化铝层析柱的方法进一步纯化，进而得到纯度较高的盐酸小檗碱。
主要研究结果为:1．通过硫酸酸化水、石灰乳沉淀的方法，高效简便的提取得到了一定量的盐酸小檗碱粗品。
2 通过盐析和氧化铝层析柱的方法，对盐酸小檗碱粗品进行了纯化。
3 对盐酸小檗碱粗品和纯品进行纸层析和薄层层析测定，得知盐酸小檗碱纯度提高，但收率降低。
注释1．各地产黄连根茎小檗碱及总生物碱含量分别为4.2-6.7%，6.6-9.6%；栽培种比野生种含量少20％左右。
黄连除根茎作药材外，各部位均含小檗碱，黄连须根0.8-5.5％，叶为1.49％，老叶为2.5-2.8％，花为0.56％，种子为0.23％.2．浸泡药材粗粉的硫酸水溶液，浓度不宜过高，一般为0．2-0．3％为宜。
若硫酸水溶液浓度过高，小檗碱可成为硫酸氢小檗碱，其溶解度（1：100）明显较硫酸小檗碱（1：30）为小，降低提取效率。
硫酸水溶液浸出效果与浸泡时间有关，浸泡12小时约可浸出小檗碱80％，浸泡24小时，可浸出92％。
常规浸出应浸泡多次，使小檗碱提取完全，本实验中浸出液只收集第1次的浸泡液。
3．盐析时，加入氯化钠的量，以提取液量的10％计算，即可达到析出盐酸小檗碱的目的。
氯化钠的用量不宜过多，否则溶液的相对密度增大，造成盐酸小檗碱微细结晶呈悬浮态难以下沉。
4．在精制盐酸小檗碱过程中，因盐酸小檗碱放冷极易析出结晶，所以加热煮沸后，应迅速抽滤或保温过滤，防止溶液在过滤过程中冷却，析出盐酸小檗碱结晶，过滤困难，降低收率。
5．进行柱层析分离时,洗脱过程中需及时补加洗脱剂保持柱体润湿均匀;若柱体干裂,则分离无法进行。
6．纸层析检测时需预先要将层析纸在展开剂气氛中饱和15-30分钟,否则分离效果不佳。
),1030(C-O-C)。
7．红外光谱数据:IR.νKBrmaxcm-11505（芳环）,1471(Ar-O-C),1360(CH３参考文献[1] 俞建瑛、蒋宇、王善利编.生物化学实验技术.化学工业出版社[M].2005[2]于文国，卞进发.生化分离技术.北京：化学工业出版社[M].2006[3]孙彦.生物分离工程.第二版.北京: 化学工业出版社[M].2005。