果糖 1,6- 二磷酸醛缩酶(Fructose 1,6 bisphosphate aldolase ,FDA )试剂盒说明书
果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)检测
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果糖-1,6-二磷酸醛缩酶（FBA）检测
果糖1,6-二磷酸醛缩酶（Fructose 1,6 bisphosphate aldolase, FBA）是糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径及光合作用中参与卡尔文循环的重要酶，催化果糖1,6-二
磷酸可逆的裂解为磷酸二羟丙酮和3-磷酸甘油醛，广泛存在于动植物及微生物体内，在各种逆境胁迫下表现不同的响应，能与细胞骨架结合，参与微管的聚合，细胞的内吞和膜泡运输，同时还参与了病原菌的侵染过程。
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二磷酸醛缩酶的活性变化。
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生化法测定果糖-1,6-二磷酸醛缩酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关参数（中英文）。
3. 图片。
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5. 果糖-1,6-二磷酸醛缩酶活性信息。
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果糖_1_6_二磷酸酶AMP变构抑制剂的研究进展
果糖-1, 6-二磷酸酶AMP变构抑制剂的研究进展李占梅1, 2, 别建波1, 宋宏锐2, 徐柏玲1*(1. 中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所, 北京 100050; 2. 沈阳药科大学制药工程学院, 辽宁沈阳 110016)摘要: 果糖-1,6-二磷酸酶(fructose-1,6-bisphosphatase, FBPase)是肝葡萄糖异生路径中的一个限速酶, 催化果糖-1, 6-二磷酸水解为果糖-6-磷酸。
抑制FBPase的活性, 可减少内源性葡萄糖的生成, 降低血糖水平, FBPase 抑制剂是潜在的新型治疗Ⅱ型糖尿病的药物。
本文综述了近年来FBPase一磷酸腺苷 (adenosine monophosphate, AMP) 变构抑制剂研究的最新进展。
关键词: 果糖-1, 6-二磷酸酶; FBPase抑制剂; 糖尿病中图分类号: R916 文献标识码:A 文章编号: 0513-4870 (2011) 11-1291-10 Recent advance in the discovery of allosteric inhibitors binding to theAMP site of fructose-1, 6-bisphosphataseLI Zhan-mei1, 2, BIE Jian-bo1, SONG Hong-rui2, XU Bai-ling1*(1. Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100050, China;2. School of Pharmaceutical Engineering, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China)Abstract: Fructose-1, 6-bisphosphatase (FBPase), a rate-limiting enzyme involved in the pathway of gluconeogenesis, can catalyze the hydrolysis of fructose-1, 6-bisphosphate to fructose-6-phosphate. Upon inhibiting the activity of FBPase, the production of endogenous glucose can be decreased and the level of blood glucose lowered. Therefore, inhibitors of FBPase are expected to be novel potential therapeutics for the treatment of type II diabetes. Recent research efforts were reviewed in the field of developing allosteric inhibitors interacting with the AMP binding site of FBPase.Key words: fructose 1, 6-bisphosphatase; FBPase inhibitor; diabetes糖尿病是一种多基因调控的慢性代谢性疾病, 主要表现为持续的高血糖及糖尿。
果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
果糖-1,6-二磷酸醛缩酶（FBA）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC2270规格：50T/48S产品简介：果糖1,6-二磷酸醛缩酶（Fructose1,6bisphosphate aldolase，FBA）（EC4.1.2.13）是糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径及光合作用中参与卡尔文循环的重要酶，催化果糖1,6-二磷酸可逆的裂解为磷酸二羟丙酮和3-磷酸甘油醛，广泛存在于动植物及微生物体内，在各种逆境胁迫下表现不同的响应。
果糖1,6-二磷酸醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸生成3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮，在磷酸丙糖异构酶和α-磷酸甘油脱氢酶作用下催化NADH和磷酸二羟丙酮生成NAD和α-磷酸甘油，340nm处吸光值的变化可反映果糖1,6-二磷酸醛缩酶活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、分析天平、低温离心机、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、超声破碎仪、冰盒。
产品内容：提取液一：液体60mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加5mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加5mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后4℃保存。
试剂四：液体20μL×1瓶，4℃避光保存。
临用前加5mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存。
试剂五：液体200μL×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加5mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
操作步骤：一、粗酶液的提取：①总FBA酶：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液一）充分冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
果糖16二磷酸酶
果糖-1,6-二磷酸酶（Fructose-1,6-bisphosphatase，简称FBPase）是一种催化反应的酶，它能够催化果糖-1,6-二磷酸向果糖-6-磷酸的转化，这是糖异生途径中的一个重要反应。
在糖异生途径中，FBPase参与到糖原的合成过程中。它的作用是将糖异生途径中的中间产物果糖-1,6-二磷酸转化为果糖-6-磷酸，这是糖异生途径中的最后一个步骤。这个反应需消耗ATP，同时也是一个可逆反应，可以被果糖-6-磷酸逆转。
可治性罕见病—果糖1,6一二磷酸酶缺乏症
可治性罕见病—果糖1，6一二磷酸酶缺乏症一、疾病概述果糖一1，6一二磷酸酶缺乏症(fructose -l，6- bisphosphatase deficiency)是一种罕见的遗传代谢病，呈常染色体隐性遗传。
目前尚不清楚其发病率，至今报道约100余例。
该病的致病基因是位于染色体9q22的FBP1基因。
当该基因发生突变，导致肝脏果糖一1，6一二磷酸酶缺乏或活性低下时，可造成1，6一二磷酸果糖转化为6-磷酸果糖的途径出现障碍，影响糖异生过程，造成果糖、乳酸、甘油等上游糖异生底物的堆积[1-3]。
二、临床特征该病的临床表现主要为发作性低血糖、高乳酸血症、代谢性酸中毒和酮症等，可致新生儿或婴儿死亡[4]。
发热、感染、进食不足及应激状态等常为本病发作的诱因。
本病也可在摄人大量果糖或蔗糖（1g/kg体重）后发作，静脉输注果糖或甘油有致命危险。
患儿发病年龄一般为生后1天～4岁。
由于乳糖由乳糖酶分解成葡萄糖和半乳糖的过程不受果糖一1，6一二磷酸酶的影响，婴儿常在断奶后才出现症状，发作期代谢紊乱较易纠正，而发作间期正常[5]。
最常见的首发症状为呕吐，其次为嗜睡、呼吸和心率增快等，血生化检查除低血糖、乳酸酸申毒外，还可伴有肝损害、凝血酶原时间延长等[6]。
三、诊断血生化检查显示低血糖、高乳酸血症、代谢性酸中毒，多伴有酮症。
发作期血、尿代谢筛查可发现糖异生底物堆积，可显示乳酸、3-羟基丁酸、甘油和3一磷酸甘油等的异常升高。
肝活检检测果糖一1，6一二磷酸酶的酶活性可确诊。
因肌肉组织中含有与肝脏不同的另外一种同工酶，本病患者在肌肉的活性并不下降，因此肌肉活检组织的酶活检测结果对本病无诊断价值。
在疾病的非发作期，甘油、果糖或丙氨酸负荷试验及禁食试验可诱发代谢紊乱，有助于疾病诊断，但并非确诊手段且存在一定危险，故不作为首选诊断方法。
仅在当临床及生化检测均高度支持本病，而基因检测和酶活性测定均正常的情况下，这种功能试验可尝试使用[5]。
果糖-1,6-二磷酸酶缺乏症
十分秀气
基本介绍
本病果糖-1,6-二磷酸酶缺乏症是一种先天性糖代谢紊乱疾病，是一种少见病。此酶催化1,6 二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和无机磷，在糖异生代谢过程中起重要作用。患儿慢性反复发作 性病程，临床表现为腹泻、呕吐、拒食后出现软弱及嗜睡，并出现抽搐，均为非特异性症 状， 血生化检查提示严重低血糖、高乳酸血症、代谢性酸中毒、酮症，提示存在能量代谢障碍。
检查，表现如早期低血糖表现、过度通气、反复呕吐、 生长发育落后等等，辅助检查血生化可见酸中毒、低血糖等。确诊需要依靠肝、小肠粘膜果糖1,6-二磷酸酶的活性。
治疗
关于本病治疗，坚持长期食用含果糖、脂类、蛋白质低的食物，少量多餐，避免低血糖，出 现低血糖时，首先发作期应积极治疗低血糖，如果患儿有低血糖症状，应口服或静脉注射葡萄糖。 急性严重低血糖需静脉推注葡萄糖，之后持续快速静脉滴注葡萄糖液维持，如同时合并代谢性酸 中毒而未给予碳酸氢钠，但在输注葡萄糖后酸中毒得到快速纠正，维持治疗旨在避免饥饿，尤其 是在感染和发热时，主要措施有增加喂养次数、食用生玉米淀粉，必要时可使用胃管持续喂养。 另本病患儿禁静脉用甘油果糖、果糖二磷酸钠等制剂。
临床表现
本病小儿在婴儿期可出现过度通气、呕吐、生长发育落后、肝脏增大、肌张力和生理反射降 低。部分患儿在出生后2天内出现低血糖和酸中毒，此病也可由于心脏疾病、应激等刺激急性发 作。
部分本病患者短时间内发病，出现呕吐、腹痛、出冷汗，甚至昏迷和惊厥等低血糖症 状， 若不及时终止这类食物患儿则出现食欲不振、腹泻、体重不增， 以及肝大、黄疸、水肿和 肾小管损害等，严重者可发生急性肝功能衰竭、肝硬化、出血倾向。
果糖-1,6-磷酸酶
病因
本病病因目前尚不明确，果糖-1,6-二磷酸酶是糖原异生的关键酶，果糖-1，6-二磷酸酶是 糖异生途径中的关键催化酶，在葡萄糖异生过程中，不同的糖异生底物在多种 酶 的 作 用 下 转 化 为 1， 6-二 磷 酸 果 糖，之后水解为 6-磷酸果糖和无机磷，进而完 成糖异生的下游步骤， 该酶的缺陷导致 1，6-二磷酸果糖向 6-磷酸果糖转化障碍， 影响糖异 生底物向葡萄糖的转化，导致胰高血糖素抵抗性低血糖，同时造成果糖、乳酸、丙酮酸、丙氨酸 及甘油等上游糖异生底物的堆积。
果糖-1,6-二磷酸酶
果糖-1,6-二磷酸酶果糖-1,6-二磷酸酶（Fructose-1,6-bisphosphatase，简称为 FBPase）是一种参与葡萄糖代谢的酶，存在于几乎所有真核生物、许多原核生物以及一些病毒中。
它是Gluconeogenesis（糖异生）途径中的一个重要酶，负责将2分子果糖-1,6-二磷酸（FBP）水解为2分子磷酸果糖（F6P），从而使糖异生途径前进。
该酶是糖异生途径和糖原合成途径中的限速酶之一，在空腹时，肝脏中糖异生途径占主导地位，FBPase的活性是肝脏维持正常生理状态所必需的。
结构与功能FBPase 主要由 3 个结构域构成：N 端结构域、中间结构域和 C 端结构域，这些结构域在进化过程中具有高度的保守性。
N 端结构域含有磷酸化酶催化所需的脯氨酸残基，是酶催化和调节的关键区域。
中间结构域含有两个反向同构的催化中心，这些催化中心使 FBPase 能够高效地水解两个 FBP 分子，从而生成两个 F6P。
C 端结构域则对物质基础进行分类和整合，为 FBPase 酶学和生物学特性的整合提供基础。
FBPase 对许多环境因素，如 pH 值，离子强度和温度等，均表现出高度的敏感性。
稳定剂和抑制剂都能够显著地影响酶的活性。
对于细胞与机体内的 FBPase 来说，该酶的调节显得尤为重要。
急性调节通常由磷酸化和解磷酸化等化学修饰实现，而长期调节则主要由基因表达调控实现。
FBPase 的磷酸化和解磷酸化磷酸化和解磷酸化修饰对于 FBPase 的调节非常重要。
当细胞需要进入糖异生途径时，活性化的酶被磷酸化，并透过蛋白水解酶4的参与，磷酸化 FBPase 的活性在糖异生途径的起始阶段被激发，以产生更多的葡萄糖。
与此相反，当细胞需要停止进行糖异生途径时，F6P 是其调节的关键物质，彼时解磷酸化的 FBPase 更方便形成稳定的 F6P/FBP 催化活性平衡，从而使糖异生途径的前进效率下降。
改变 FBPase 的活性和构象调整代表了一种非常快速和可靠的方式，调整葡萄糖代谢产物的浓度，从而使细胞适应外界环境的需求。
果糖-1,6-二磷酸(FDP)含量检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4197
果糖-1,6-二磷酸（FDP）含量检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4197可见分光光度法规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液一液体30mL×1瓶4℃保存提取液二液体5mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1支4℃保存试剂三液体15mL×1瓶4℃保存试剂四液体40mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入1mL蒸馏水，充分溶解后待用，用不完的试剂4℃保存，4℃保存一周；2、标准品：临用前加入1176μL蒸馏水充分溶解，配制成50μmol/mL果糖-1,6-二磷酸标准溶液。
产品说明：果糖1,6-二磷酸（fructose-1,6-diphosphate,FDP）是糖酵解过程中的一种重要的中间产物，对多种酶具有调节作用，具有改善细胞能量代谢、增加能量利用、抗心律失常及抗组织过氧化等作用，广泛应用于临床医药。
醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸裂解，产物与2,4-二硝基苯肼在酸性介质中反应生成2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈红棕色，在540nm处有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、低温台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水、EP管。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.组织：按照质量（g）：提取液一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液一）加入提取液一，冰浴匀浆后于4℃，12000g离心10min，取0.8mL上清液，再加入0.16mL提取液二，4℃，12000g离心10mi n 后取上清待测。
果糖-1,6- 二磷酸( Fructose-1,6 Diphosphate ,FDP )试剂盒说明书
货号：MS2207 规格：100管/96样果糖-1,6-二磷酸（ Fructose-1,6 Diphosphate ，FDP）试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：果糖1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂，是糖酵解途径的重要中间体，广泛存在于动植物和微生物体内，能影响细胞内钾离子的浓度，改善葡萄糖和其他能量底物的代谢，促进组织氧的释放，广泛应用于临床医药制剂。
测定原理：醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸降解，产物与DNPH缩合成紫红色物质，在540nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制:试剂一：液体110mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体0.4mL×1支，4℃避光保存。
试剂三：液体4mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体16mL×1瓶，4℃保存。
样品处理:1.组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清待测。
3.液体：直接检测。
测定操作:第1页，共2页计算公式:a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y= 0.6971x+0.0012，R2=0.99831．按照质量计算FDP（mg/g 鲜重）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（W÷V样总）= 1.43×(△A-0.0012)÷W2．按照细胞数量计算FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（细胞数量÷V样总）=1.43×(△A-0.0012)÷细胞数量3．按照液体体积计算FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.6971= 1.43×(△A-0.0012)W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mLb.用96孔板测定的计算公式如下标准曲线：y= 0.3486x+0.0012，R2=0.99831．按照质量计算FDP（mg/g 鲜重）= (△A-0.0012) ÷0.3486÷（W÷V样总）= 2.87×(△A-0.0012)÷W2．按照细胞数量计算FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.3486÷（细胞数量÷V样总）= 2.87×(△A-0.0012)÷细胞数量3．按照液体体积计算FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.3486= 2.87×(△A-0.0012)W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mL注意事项:最低检出限为1.72 mg/L。
果糖1,6-二磷酸盐
果糖1,6-二磷酸盐
果糖1,6-二磷酸盐（fructose-1,6-bisphosphate）是一种生物分子，是糖酵解途径中的重要中间产物。
它的分子式为C6H14O12P2，分子量为340.116 g/mol。
果糖1,6-二磷酸盐在糖酵解途径中的作用是将葡萄糖分解成两个三碳分子的丙酮酸。
它是糖酵解途径中的关键中间产物，也是糖酵解途径中ATP生成的重要来源。
在糖酵解途径的第三步，果糖1,6-二磷酸盐被酶类催化分解成为两个三碳分子的丙酮酸和磷酸二酯。
果糖1,6-二磷酸盐的研究历史可以追溯到20世纪初。
1905年，德国生物化学家Emil Fischer首次发现了果糖1,6-二磷酸盐的存在，并研究了它在糖酵解途径中的作用。
此后，随着生物化学和分子生物学的发展，人们对果糖1,6-二磷酸盐的研究也越来越深入。
近年来，果糖1,6-二磷酸盐在医学和生物技术领域的应用也越来越广泛。
例如，研究人员利用果糖1,6-二磷酸盐的特殊性质，开发出了一种新型的生物传感器，可以用于检测血液中的葡萄糖浓度。
此外，果糖1,6-二磷酸盐还被广泛应用于生物制药和生物能源等领域。
总之，果糖1,6-二磷酸盐是糖酵解途径中的重要中间产物，具有重要的生物学意义和应用前景。
果糖1,6二磷酸酶与肿瘤代谢
【摘要】 代谢重编程已被定义为肿瘤细胞的标志性特征之一。
果糖-1，6-二磷酸酶1（fructose-1，6-bisphosphatase 1，FBP 1）是糖异生的限速酶，其在多种类型肿瘤组织中的表达均下调，可能的机制为DNA 甲基化，转录因子、微小RNA 及蛋白泛素化调控等。
FBP 1低表达与癌症低生存率和高复发率相关。
FBP 1抑制Warburg 效应以及Wnt/β-Catenin 、缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor ，HIF ）及RAS/MAK 等信号通路，从而抑制肿瘤进展。
同时，FBP 1在NK 细胞的免疫杀伤过程中也发挥作用。
但FBP 1在癌症进展中的作用仍有众多问题需要研究。
【关键词】 果糖-1，6-二磷酸酶；Warburg 效应；肿瘤代谢；肿瘤免疫Fructose 1, 6-bisphosptase and tumor metabolismLIAO Kun, YANG Shi-yu, WANG Jiang-huang, LI Bo (Department of Biochemistry and Molecular Biology, Zhongshan School of Medicine, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510080, China)Corresponding author: LI Bo, E-mail: libo 47@ 【Abstract 】 Metabolic reprogramming has been defined as a hallmark of cancer cells. Fructose-1,6-phosphatase 1 (FBP 1) is a rate-limiting enzyme for gluconeogenesis. FBP 1 is generally down-regulated in various types of tumor tissues. The down-regulation of FBP 1 is driven by multiple mechanisms, including DNA promoter methylation, transcription factor, microRNA and protein ubiquitination-mediated regulation. Low levels of FBP 1 are associated with short patient survival and high recurrence rates. FBP 1 inhibits the Warburg effect and multiple protumorigenic signaling pathways, including Wnt/β-Catenin, hypoxia-inducible factor (HIF), RAS/MAK, to inhibit tumor progression. Moreover, FBP 1 also plays a role in modulating tumor immunity mediated by NK cells. However, many remaining questions about the role of FBP 1 in cancer demand further efforts.【Key words 】 Fructose-1,6-phosphatase; Warburg effect; Tumor metabolism; Tumor immunity果糖-1，6-二磷酸酶与肿瘤代谢廖昆，杨时雨，王江煌，李博（中山大学中山医学院 生化教研室，广州 510080）基金项目：国家自然科学基金优秀青年科学基金（81622034）；国家自然科学基金面上项目（81572508）；广东省自然科学基金项目（2016A 030313260）通讯作者：李博 E-mail ：libo 47@肿瘤细胞在有氧状态下增加葡萄糖的摄取量，并且伴随乳糖的生成增多，这一现象称为Warburg 效应或有氧糖酵解。
丙糖磷酸异构酶_果糖_1_6_二磷酸醛缩酶及果糖_1_6_二磷酸酶的共表达
ISSN 058229879生物化学与生物物理学报ACTA BIOCHIMICA et BIOPHYSICA SINICA 2001,33(1):131-136CN 3121300/Q收稿日期:2000206229 接受日期:2000209208中国科学院基础性研究重点资助项目3联系人:Tel ,02126416330021429;Fax ,021*********;e 2mail ,hbchen @研究简报丙糖磷酸异构酶、果糖21,62二磷酸醛缩酶及果糖21,62二磷酸酶的共表达唐功利 杨春松 鲍建绍 王燕芳 陈海宝3(中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室,上海200032)施定基 刘凤龙(中国科学院植物研究所光合室,北京100093)摘要 致力于建立一条控制或降低大气中CO 2浓度的途径,选择对蓝藻进行代谢工程以便改进其光合固定CO 2的效率。
作为研究的初始阶段,将编码丙糖磷酸异构酶、果糖21,62二磷酸醛缩酶及果糖21,62二磷酸酶的3个基因构建进一个由启动子t rc 控制的表达质粒p TrcFA T ,成功地在大肠杆菌中实现了上述3个基因的活性共表达。
活性测定结果显示:从1L 培养液获得的破菌上清液每分钟可以催化二羟丙酮磷酸(DHAP )转化成700μmol 果糖262磷酸。
在此基础上进一步构建了这3个基因共表达的大肠杆菌2蓝藻穿梭表达质粒,也在大肠杆菌中实现了活性表达。
当外源基因的操纵子与载体质粒以大于1∶1的比例进行构建时,可显著提高外源基因的表达量及相应的酶活性。
关键词 丙糖磷酸异构酶;果糖21,62二磷酸醛缩酶;果糖21,62二磷酸酶;共表达 大气中温室气体浓度上升导致的全球气温变暖、气候异常已引起人们的普遍关注,其中CO 2是主要的温室气体[1]。
按照政府间气候变化专业委员会(IPCC )的分析,若按照目前CO 2排放的趋势增长,到下个世纪,全球平均温度将以每10年0.2～0.4℃的速度升高[2],从而带来气候变暖、海平面升高、耕地减少、农业病虫害加剧、北极圈CO 2生态失衡等一系列恶果。
1,6二磷酸果糖的临床应用
1,6二磷酸果糖的临床应用1，6-二磷酸果糖的临床应用【关键词】二磷酸1 前言自从1980年MarKov等首次观察了外源性1，6-二磷酸果糖(Fructose1.6-Diphosphate，FDP)对缺血性心肌的保护作用后，FDP在心血管系统的作用已经从基础研究发展到临床广泛应用阶段 ,1, 。
2 FDP的药理作用与用法2.1 药理作用 FDP是细胞内糖代谢的重要中间产物，FDP可作用于细胞膜，通过激活细胞膜上的磷酸果糖激酶，增加细胞内高能磷酸键和三磷酸腺苷(ATP)的浓度，从而促进钾离子内流，恢复细胞静息状态。
增加红细胞内三磷酸甘油酸的含量，抑制氧自由基和组胺释放，有益于休克、缺血、缺氧、组织损伤、体外循环、输血等状态下的细胞能量代谢和对葡萄糖的利用，起到促进恢复、改善细胞功能的作用。
2.2 用法静脉滴注，每次50,100ml，每日1,2次，最大量200ml/d，静脉滴注速度为4,7ml/min，或遵医嘱，伴有心力衰竭时，剂量减半。
3 药代动力学给健康志愿者静脉输注本品(250mg/kg)，5min内其血浓度可达770mg/L，半衰期约10,15min，并向血管外组织分布，经过水解形成无机磷及果糖从血浆中消除。
4 FDP的临床应用4.1 脑卒中和颅脑损伤由脑卒中和颅脑损伤引起的颅内血肿或水肿均能引起颅内压升高，颅内灌注压相对不足，脑血流量减少，导致神经细胞因缺血、缺氧而功能障碍;脑血栓形成能直接引起神经细胞缺血、缺氧;颅脑损伤还能直接损伤神经细胞。
由于神经细胞受损伤，细胞常规有氧代谢受抑制，能量产生不足，因此通过加快细胞无氧代谢能产生大量乳酸，引起乳酸性酸中毒，而无氧糖代谢中限速酶-磷酸果糖激酶在酸中毒情况下活性降低，三磷酸腺苷(ATP)的产生随之减少。
许萍等 ,2, 对40例脑卒中(包括高血压脑出血和脑血栓形成)伴偏瘫和21例颅脑损伤伴昏迷患者随机分组采用常规疗法，其中约一半病例加用FDP治疗。
FDP
关于1,6-二磷酸果糖(FDP)的读书报告来源：1,6-二磷酸果糖[Fructose-1, 6-diphosphate，FDP]，又名Esa-fosfina。
分子式为C4H14O12P2, 分子量为340.1,结构如图，常以钠、钙、锌等盐的形式存在。
FDP是葡萄糖代谢的重要中间产物和驱动物质,近年来又发现FDP在医药、食品、保健品和化妆品等方面有许多新用途,使这早在1905年就被Harden和Young发现的天然化合物,重新引起国内外学者的浓厚兴趣,成为一个新的研究热点。
FDP是生物体内糖酵解途径的一个重要代谢中间产物，由果糖6磷酸和ATP（腺嘌呤核苷三磷酸）在果糖-6-磷酸激酶作用下反应生成。
工业上由啤酒酵母制得。
性质:FDP可作用于细胞膜，调节糖代谢中若干酶活性，尤其是激活磷酸果糖激酶（PFK），聚增细胞内高能磷酸池，产生大量的ATP，促进钾离子内流，恢复细胞极化状态，从而有益于休克、缺氧、缺血、损伤、体外循环和输血等状态下的细胞能量代谢以及对葡萄糖的利用，以促进细胞修复和改善功能。
在临床上，FDP作为调节糖代谢中若干酶的活性和恢复、改善细胞代谢的分子水平药物，用于休克、急性心肌梗塞、心肌直视手术、外周血管疾患和重危病人接受胃肠外营养疗法等疾病的治疗和辅助治疗。
FDP具有促进细胞内高能集团的重建，保持红细胞的韧性及向组织释放氧气的能力，是糖代谢的重要促进剂，用于急性心肌梗塞，心功能不全，冠心病、心肌缺血发作、休克等症状的急救药物。
FDP早在1905年就被发现，近年来又发现了它的许多新的用途，重新引起国内外学者的浓厚兴趣和广泛深入的研究。
FDP既有冻干粉剂，供静脉注射，国外还开发了片剂、胶囊、冲剂等口服剂型。
也用于制备营养口服液、牙膏和护肤护发化妆品等。
FDP制备工艺:酶转化法早在1942年,Neuberg即报道了用新鲜的啤酒酵母(Baker酵母)制备FDP精品的方法,以后,Leisola等又报道用啤酒厂废弃的酵母,以蔗糖、磷酸盐为底物经酶促磷酸化反应制备FDP 此法几经改进仍沿用至今,为国内外工业化生产FDP的基本方法。
1,6-二磷酸果糖的脑保护作用研究进展(精)
1,6-二磷酸果糖的脑保护作用研究进展袁宝莉，宋晓红，李瑞林（西安交通大学第二医院儿科，陕西西安710004）摘要1,6-二磷酸果糖是葡萄糖分解代谢的产物，近年来被广泛用于心、肾、肝、脑的缺血性治疗。
该文综述了1,6-二磷酸果糖的脑保护作用机制剂量范围及其应用，探讨对临床缺血性脑疾患的治疗意义。
关键词1,6-二磷酸果糖；钙离子；缺血性脑损伤1,6-二磷酸果糖（fructose-1 , 6- dip hosphate, FDP；or fructose-1 ,6-bisphosphate , FBP）是葡萄糖分解代谢的中间产物，在体外经静脉注射后可广泛分布于心、肾、肝、脑等器官。
自上世纪70年代开始，FDP就被广泛应用于心脏骤停、心肌梗死、心肌缺血及肾脏缺血等的治疗上[ 1，2 ]。
但直到80年代后期，研究人员才发现FDP可以通过血脑屏障被中枢神经系统代谢，并且它对于脑功能的保护和恢复具有独特作用，于是学术界开始了对FDP应用于脑血管疾病的实验性研究。
这为目前尚未有特效治疗的缺血性脑损伤开拓了一条新思路。
1. 1,6-二磷酸果糖的作用机制学术界对于FDP的脑保护作用机制一直存在三种假设。
第一种由Markov等（1981年）提出，认为机体将摄入的FDP作为一种高能物质及糖酵解的调节剂，以此来加强无氧代谢；第二种由Galzigna等（1989年）提出，认为FDP并未进入到细胞内发挥作用，它通过改变离子流动包括氢离子（H+）流动来调节细胞内PH值;第三种说法（1992年）认为FDP通过鳌合血清中游离钙离子（Ca 2+ ）来减少进入细胞内的Ca2+ 譬如FDP可以减少心肌组织Ca2+ 摄入来减少游离Ca2+ ；此外尚存在有其他一些假说，不一一详述。
近年来学者们在上述假说的基础上，运用体外细胞培养技术及其他高科技手段对FDP的作用机制进行探索，已取得一定进展。
1 .1稳定细胞内Ca2+ ，维持内环境稳定Ca2+ 内流是细胞破环的主要原因，FDP通过减少由缺氧导致的神经元胞浆内的Ca2+ 上调来发挥神经保护作用[ 3 ] 。
1,6二磷酸果糖对严峻多发伤患者肝功能的爱惜作用
1，6-二磷酸果糖对严峻多发伤患者肝功能的爱惜作用王志华，蔡金芳，王静恩【摘要】目的探讨1，6-二磷酸果糖（FDP）对严峻多发伤患者肝功能爱惜作用的机制。
方式将44例多发伤患者随机分为FDP组（n=22）和对照组（n=22）。
FDP组利用FDP 10 g/天静脉点滴，对照组给予门冬氨酸钾镁40 ml/天静脉点滴，其他医治两组相同，疗程均为7天。
于医治前和医治第8天测定血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）及血浆生化指标（AST、ALT、γ-GT）。
结果 FDP组与对照组在医治前TNF-α、IL-六、AST、ALT、γ-GT比较不同无统计学意义。
两组血浆AST、ALT、γ-GT医治后均较医治前降低（P＜），且FDP 组较对照组下降明显（P＜）。
医治后FDP组TNF-α、IL-6下降较对照组明显（P＜）。
结论 FDP对严峻多发伤时肝功能损伤有良好爱惜功能，其机制与下调TNF-α、IL-6水平有关。
【关键词】多发伤；1，6-二磷酸果糖；肝脏功能；细胞因子Protective effect of fructose-1，6-diphosphate on liver function in severe multiple trauma patients［Abstract］Objective To study the protective effect offructose-1，6-diphosphate（FDP） on liver function in severe multiple trauma Forty-four patients with severe multiple trauma were randomly divided into two patients were given FDP in a dose 10 g/d through intravenous drip for 7 day as FDP group，and 22 patients were given potassium and magnesium aspartate 40 ml per day through intravenous drip for 7 days to serve as control same treatment was given to both groups other than contents of tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-6（IL-6） and biochemistrial indexes were measured on admission and eight day in both AST，ALT，γ-GT，TNF-α、IL-6 were not different both in FDP group and routine treatment group before the treatment，plasma AST、ALT and γ-GT decreased in both groups，but the decreasing of all the indexes was more marked in FDP group（P ＜）.TNF-α、IL-6 levels reduced more significantly after treatment in FDP group than routine group （P＜）.Conclusion FDP has beneficial effects in protecting liver function in patients with severe multiple trauma，which may be related to the reduction of serum level of TNF-α、IL-6.［Key words］ multiple trauma;fructose-1，6-diphosphate;liver function;cytokine严峻多发伤后由于缺血、缺氧、感染等因素使氧自由基增多，抗氧化能力减弱，造成肝细胞损害。
翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis)果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALDO-C)基因定位
第50卷 第5期 海 洋 与 湖 沼Vol.50, No.5 2019年9月OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICASep., 2019* 浙江省农业(水产)新品种选育重大科技专项, 2016C02055-1号。
王志刚, 硕士研究生, E-mail: 623474593@ ① 通信作者: 郑荣泉, 博士, 教授, E-mail: zhengrq@ 收稿日期: 2019-03-10, 收修改稿日期: 2019-04-14翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis )果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶(ALDO-C )基因定位、克隆及表达分析*王志刚1 刘士力4 李贤露1 吕卓云1 毛丽盈1 唐超然1 郑荣泉1, 2, 3①(1. 浙江师范大学化学与生命科学学院 金华 321004; 2. 浙江省野生动物生物技术与保护利用重点实验室 金华 321004; 3. 浙江师范大学行知学院 金华 321004; 4. 浙江省淡水水产研究所 农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室 湖州 313001)摘要 鲌翘嘴红(Erythroculter ilishaeformis )鲌是大型淡水鱼类鳊亚科(Abramidinae)中最大的一种鱼, 具有较高的经济价值。
但其饲料转化率及抗病性研究相对较少, 相关基因信息缺乏。
本研究以翘鲌嘴红为对象, 利用RACE 鲌技术克隆翘嘴红果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶(ALDO-C )基因, 该基因cDNA 全长1945bp, 其中ORF 区975bp, 编码325个氨基酸, 5′非编码区933bp, 3′非编码区37bp 。
通过实时荧光定量PCR 检测了ALDO-C 在不同组织中相对表达水平。
发现ALDO-C 鲌基因在翘嘴红的肾、肝、肌肉、性腺中均有表达, 且在肾中表达量最高, 显著高于其他组织。
同时采用石蜡切片、H.E 染色和原位杂交染色, 鲌观察分析翘嘴红的肾组织显微结构和ALDO-C 基因的表达定位, 结果表明, ALDO-C 在鱼类肾单位和集合管结构、调节肾组织水平衡及抗病性方面有重要作用。
遗传性果糖不耐受症诊疗
遗传性果糖不耐受症概述遗传性果糖不耐受症（hereditary fructose intolerance，HFI）是一种罕见的常染色体隐性遗传性果糖代谢病。
是由于编码果糖-1，6-二磷酸醛缩酶B（fructose-1，6-bisphosphate aldolase，醛缩酶B）ALDOB基因突变致B型醛缩酶缺乏，导致1-磷酸果糖在肝脏、肾、肠中堆积，使肝糖原分解和糖异生受抑制而致病。
表现为低血糖发作，如未能及时诊治，可导致严重肝病、低血糖脑病及肾损害，有潜在致命危险。
病因和流行病学醛缩酶由A、B、C3种同工酶组成，其主要在肝脏、肾脏和小肠表达。
在正常情况下，外源性果糖在空肠吸收，通过门脉系统进入肝脏，在醛缩酶的作用下完成1-磷酸果糖裂解，1，6-二磷酸果糖裂解，生成磷酸二羟丙酮与三磷酸甘油醛。
遗传性果糖不耐受因主要醛缩酶B活力降低所致，因此HFI主要临床症状及受累器官与肝、肾、肠有关。
人类醛缩酶B基因ALDOB定位于染色体9q21.3-22.3，长约14.4kb，包含9个外显子和8个内含子，调控合成醛缩酶B蛋白，醛缩酶B由364个氨基酸组成，呈一个四聚体结构。
目前已报道了60种ALDOB基因突变类型，其中该基因在欧洲人群中的常见突变是p.Ala150Pro和p.Ala175Asp，c.324+1G＞A剪切变异常见于印度北部人群。
ALDOB基因突变后，使醛缩酶B的结构和活性均发生改变。
患者摄入或输注含果糖成分的物质后，1-磷酸果糖不能转化磷酸二羟丙酮与三磷酸甘油醛，从而在肝中大量堆积。
可造成如下病理生理过程：①消耗细胞内库存的无机磷酸盐，造成三磷酸腺苷（ATP）缺乏，导致肝线粒体氧化磷酸化减少，肝细胞ATP依赖性离子泵功能障碍，细胞肿胀，细胞内容物外溢，引起组织如肝脏、肾小管功能障碍，导致多种物质代谢紊乱；②抑制磷酸化酶、果糖1，6-二磷酸酶、果糖激酶活性，糖原分解和糖异生作用异常，出现低血糖及多脏器损害；③抑制磷酸甘露糖异构酶，导致蛋白-N-糖基化障碍。
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货号：MS2210 规格：100管/96样果糖 1,6-二磷酸醛缩酶（Fructose 1,6 bisphosphate aldolase，FDA）
试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
植物叶绿体中果糖1,6-二磷酸醛缩酶是光合作用中参与calvin循环的重要酶。
催化果糖1,6-二磷酸和景天庚酮糖1,7-二磷酸的合成反应，在各种逆境胁迫下表现不同的响应。
测定原理：
果糖1,6-二磷酸醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸生成3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮，在磷酸丙糖异构酶和α-磷酸甘油脱氢酶作用下催化NADH和磷酸二羟丙酮生成NAD和α-磷酸甘油，340nm处吸光值的变化可反映果糖1,6-二磷酸醛缩酶活性的高低。
自备实验用品及仪器：
天平、震荡仪、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制：
提取液一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加2mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加2 mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加2 mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂五：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。
酶液提取：
①总FDA酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FDA酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FDA酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FDA酶活性。
建议测定总FDA酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FDA，则按照步骤②提取粗酶液。
测定操作：
1.紫外分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2.取微量石英比色皿/96孔板，依次加入100μL试剂一，20μL试剂二，20μL试剂三，20μL
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试剂四，20μL试剂五，20μL粗酶液，充分混匀，记录340nm处10s的吸光值A1和310s 的吸光值A2，△A=A1-A2
计算公式：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义：每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr （2）按照样本质量计算
酶活单位定义：每克组织每分消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/g 鲜重）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.54×ΔA÷W （3）按照细胞数量计算
酶活单位定义：每104个细胞每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/104 cell）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总) ÷T
= 321.54×ΔA÷细胞数量
（4）按照液体体积计算
酶活单位定义：每毫升液体每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/mL）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷V样÷T=321.54×ΔA
V反总：反应体系总体积，0.2mL；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L/mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，
5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g
b.用96孔板测定的计算公式如下
（1）按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义：每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×Cpr) ÷T= 643.08×ΔA÷Cpr （2）按照样本质量计算
酶活单位定义：每克组织每分消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/g 鲜重）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=643.08×ΔA÷W （3）按照细胞数量计算
酶活单位定义：每104个细胞每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/104 cell）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总) ÷T
= 643.08×ΔA÷细胞数量
（4）按照液体体积计算
酶活单位定义：每毫升液体每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min/mL）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷V样÷T= 643.08×ΔA
V反总：反应体系总体积，0.2mL；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，0.5cm；V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g
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