病毒保存液中EDTA和tris的作用
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EDTA、Tris、病毒保存液在病毒检测中的应用
新冠病毒全球肆虐的环境下,如何快速检查并隔离阳性感染者在控制疫情的作用就不言而喻了。
在目前流行的标本采集与处理方法中,EDTA、Tris、病毒保存液在不同的阶段发挥着重要作用。
这里做一个简要梳理。
鼻咽拭子:采样器用一只手轻轻握住人的头部,拭子插入另一种,通过鼻孔插入拭子进入,沿着下鼻梁的底部慢慢变深。
因为鼻管是弯曲的,所以不要用力过猛,以免造成外伤性出血。
什么时候拭子的尖端到达鼻咽腔的后壁,轻轻旋转一次(如果出现反射性咳嗽,请稍等片刻),然后慢慢取出药签并将药签的尖端浸入装有2-3ml病毒保存液(或等渗盐溶液,组织培养液)的试管。
粪便标本:取1ml样品处理液,取大约一个大小的样品。
粪便标本处理溶液可以在实验室内部制备:1.211g tris,8.5g 氯化钠,1.1克无水氯化钙或1.47克含结晶的氯化钙水,溶于800毫升去离子水中。
以8,000rpm离心5分钟,吸收上清液保留使用。
肛门拭子:将消毒棉签轻轻插入肛门深3-5厘米,然后轻轻旋转并拉出,立即将拭子放入15毫升螺口盖采样管中包含3-5ml病毒保存溶液,丢弃尾巴并拧紧管盖。
血液样本:建议使用含有EDTA抗凝剂的真空血管收集5ml血液样本。
核酸提取应在
全血或血浆中进行根据核酸提取试剂的类型选择。
对于血浆分离,整个血液应以1,500至2,000 rpm离心10分钟,然后将上清液收集在带螺帽的无菌塑料管中。
血清标本:用真空负压血液采集5毫升血液标本收集管。
将标本在室温下放置30分钟,在1,500-2,000的范围内离心 rpm 10分钟,并在带螺帽的无菌塑料管中收集血清。
其他材料:根据设计要求以标准化的方式收集。