猪囊尾蚴重组抗原和基因工程疫苗的研究进展
基于Cap蛋白研制的猪圆环病毒2型疫苗研究进展
基于Cap蛋白研制的猪圆环病毒2型疫苗研究进展刘畅;陈艳;颜秋;吕其壮【摘要】猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)是危害世界养猪业的主要疫病之一,主要由猪圆环病毒2型(PCV-2)引起.该病毒可引起感染猪免疫系统的破坏,造成严重的免疫抑制,继而引发多种病毒/细菌的混合感染与继发感染,给世界养猪业造成了巨大经济损失.近年来疫苗免疫接种是防控PCVAD的有效手段,由于衣壳蛋白(capside,Cap)是PCV-2的主要免疫保护性抗原,因此常被用作研制PCV-2基因工程疫苗的理想靶抗原.论文就PCV-2 Cap蛋白基因工程疫苗的研究进展进行综述,以期为今后PCV-2新型疫苗的研究提供参考.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2019(040)006【总页数】5页(P83-87)【关键词】猪圆环病毒2型;疫苗;衣壳蛋白;免疫增强剂【作者】刘畅;陈艳;颜秋;吕其壮【作者单位】玉林师范学院生物与制药学院,广西玉林537000;玉林师范学院生物与制药学院,广西玉林537000;玉林师范学院生物与制药学院,广西玉林537000;玉林师范学院生物与制药学院,广西玉林537000;广西农产资源化学与生物技术重点实验,广西玉林537000【正文语种】中文【中图分类】S858.28猪圆环病毒相关疾病(Porcine circovirus-associated diseases,PCVAD)是猪呼吸道疾病综合征、猪皮炎和肾病综合征、断奶仔猪多系统衰竭综合征等多种疾病的总称,主要由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)引起[1]。
PCV-2是目前已知的最小的动物病毒之一,归属于圆环病毒科圆环病毒属,无囊膜,病毒粒子呈20面体对称,其基因组全长为1766 bp~1768 bp,编码11个开放阅读框(ORF),目前只有ORF1-ORF6被证明能够编码病毒蛋白[2]。
研究表明,PCV-2感染能够破坏易感动物的免疫系统,造成免疫抑制,导致机体抵抗力下降,且易诱发多重病毒和(或)细菌的协同感染或继发感染,给疾病的诊断和治疗带来巨大的困难。
猪带绦虫病的流行特点及防治措施
nmgxmy2008@组稿\Email:罗军(安徽省泗县大庄镇畜牧兽医站,安徽宿州234311)摘要:随着人们生活质量的不断提高,绿色无公害散养猪备受青睐。
由于散养猪管理松散,人群与猪直接接触较频繁,再加上个别屠宰加工者自行宰杀、贩卖,导致囊虫肉(米猪肉)进入食用环节。
“米猪肉”是由猪囊虫寄生在猪肌肉中引起的病变,该病是人畜共患病,不仅影响着人们的健康,同时也对养猪业造成重大的经济损失。
文章从传播途径、流行特点、临床特征、诊断和防治措施等方面进行了简要分析。
关键词:猪带绦虫病;囊虫病;流性特点;诊断;防治措施中图分类号:S858.28文献标识码:B文章顺序编号:1005-5959(2019)07-027-011传播途径猪带绦虫属于人畜共患的寄生虫,成虫即是猪带绦虫(有钩绦虫、链状带绦虫),其幼虫即是猪囊尾蚴或者是猪囊虫。
这种人畜共患病持续存在的一部分原因是农村散养猪只与人粪接触,养殖户自行屠宰贩卖、食用未煮熟的猪肉,菜板生熟肉混用和食用不洁蔬菜及人粪污染的水等情况使患病几率加大。
最主要的原因是部分规模化养猪舍没有定期消毒驱虫、卫生条件差和污染的粪便处理不当所致,使猪成为绦虫病的隐性携带者,引发其他猪只发病。
2流行特点规模化养殖中消毒卫生不到位、不定期驱虫、粪便处理不当引起绦虫的隐性携带。
好多生态养殖的散养猪群,一般在圈外活动觅食较多,误吞人粪中猪带绦虫节片或虫卵的机会较多。
猪吞入虫卵遭受感染后,六钩蚴从虫卵中逸出并钻入肠黏膜的血管和淋巴管中,到达身体各部,多数寄生于肌肉之中,发育为具有感染性的囊尾蚴,寄生于咬肌、舌肌、膈肌及肋间肌等横纹肌中[1],当人食用含有猪囊尾蚴的生或未煮熟的猪肉时,可以感染猪囊尾蚴而患囊虫病。
易感人群多以青壮年居多,而且男性多余女性[2]。
3临床特征猪绦虫成虫影响着猪的生长,引起贫血、水肿,寄生在眼部会出现视力减退,严重的甚至失明;寄生在脑部会伴随神经症状;寄生于人体小肠内,头节和小钩吸附于肠壁,会导致肠黏膜损伤,出现腹部不适、腹痛、消化不良、腹泄和便秘等症状,虫体摄取了大量的营养物质导致身体消瘦;寄生在喉部时,出现叫声嘶哑并伴有短咳;寄生在舌肌、咬肌时,吞咽困难。
猪囊尾蚴重组抗原和基因工程疫苗的研究进展
[ 中图分 类 号 ] ¥5 .3 [ 827 2 文献标 识 码 ] A [ 章编 号 ] 10 -74 2 1 )20 3 -4 文 0 46 0 (0 2 0 -05 0 Re e r h Pr g e sf r Re o b n n s a c o r s o c m i a tAntg n ie
限 , 验 中假 阳性可能性大 。各种 纯化方 法所得 抗原 试
从分 析结果看 特性 各不相 同 , 其诊 断结果 受纯 化过 但
程 影响 , 缺乏统 一的评价标 准 , 且纯 化过程 繁琐 , 不能
苗 均取 得 了 良好 的预 防效 果 , 使 免 疫 动 物 获 得 抗 可
虫 卵攻 击感 染 的抵抗 力 , 数动 物能 得 到完全 保护 。 多
细 胞抗 原等 用 于免 疫 保 护 性 试 验 , 些 抗 原 作 为 疫 这
nsrets ,LS 的敏感 性 较 高 , 特异 性 较低 。 oobnas E IA) y 但 单 克隆抗体 纯化 的抗 原用 于 免疫 诊 断能 区分 囊尾 蚴 病 人 和 其 它寄 生 虫 病人 , 由于其 抗 原 决 定簇 较 局 但
囊 尾 蚴 ( yt ecscl l a ) 是 一 种 由猪 C scru el o e 病 i us 带 绦 虫 ( anasl m) Tei ou 的幼虫 引起 严重 的人 畜共 患 i 寄 生虫 病 。囊 尾蚴 病 的免 疫 预 防 研 究 开 展 较早 , 有 全 囊虫 匀浆 抗 原 、 钩 蚴抗 原 、 六 六钩 蚴排 泄一 分泌 抗 原 、 尾蚴 体外 培 养 的 分 泌代 谢 抗 原 和组 织 培 养 的 囊
a d Ge e i gn e i g Va cn fCy tc r o i n n t En i e rn c i e o sie c ss c
猪囊尾蚴cDNA文库的免疫学筛选和新基因的发现
I m u osr e ng o a ni o i m n c e ni f t e a s lum m ea e t d s c t c so e DN A i a y a d dic v r f n w e s HU AN G lbr r n s o e y o e g ne
蚴 c A 文 库 中挑 取 了 4个 阳性 斑 ,C DN P R后 4个 片段 大 小 约 在 20 10 p 3个 大 的片 段 测 序 结 0 ~ 80b ,
果经分析表明均含有完整开放阅读框 , 同源 序 列 分 析 结 果 显 示 获 得 的 3个 基 因 片 段 与 G n ak中 eB n
【 要 】 目的 摘 从 猪 囊 尾 蚴 c N 文 库 中 筛 选 免 疫 学 阳性 蛋 白 的 编 码 基 因 , 临 床 猪 囊 尾 蚴 患 者 D A 为
的 免 疫 学 诊 断 提 供 特 异 的重 组 抗 原 。 方 法 用 脑 囊 尾 蚴 病 人 血 清 免 疫 学 筛 选 猪 囊 尾 蚴 c N 文 D A 库, 阳性 克 隆经 P R 技 术 扩 增 噬 菌 体 载 体 中 插 入 的 D C NA 片 段 , 将 其 克 隆人 P 一8 质 粒 载 体 并 MD 1T 中 , 序 结 果 与 G n a k中 的 核苷 酸 序列 进 行 同源 性 分 析 。结 果 血 清 免 疫 学 筛 选 后 , 猪 囊 尾 测 eBn 从
维普资讯
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C i sC n rl h nJDi o to P 囊尾蚴 c N D A 的免疫 学筛选 和新基 因的发现
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基因工程疫苗论文2100字_基因工程疫苗毕业论文范文模板
基因工程疫苗论文2100字_基因工程疫苗毕业论文范文模板基因工程疫苗论文2100字(一):鹦鹉热衣原体基因工程疫苗研究进展论文摘要:鹦鹉热衣原体(Chlamydiapsittaci,Cps)是专性细胞内寄生、革兰氏阴性病原体,能在鸟类、人类和其它哺乳动物中广泛传播。
Cps能够导致禽类的呼吸道和消化道疾病,引起家禽高热、腹泻、异常分泌物以及产蛋下降。
常规衣原体疾病防控主要依赖于抗生素,但随着对食品安全的重视、养殖端减抗替抗的推行,需要开展生物安全和疫苗免疫等防控技术研究以预防衣原体感染。
本文综述了Cps亚单位疫苗、DNA疫苗和活载体疫苗等基因工程疫苗的研究进展。
关键词:鹦鹉热衣原体;亚单位疫苗;DNA疫苗;活载体疫苗鹦鹉热衣原体(Chlamydiapsittaci,Cps)具有广泛的宿主谱,它可以感染465种鸟类和包括人在内的46种哺乳动物,导致结膜炎、肺炎、支气管炎、流产和关节炎等疾病,对家禽和公共卫生安全造成了巨大的威胁[1]。
Cps主要通过空气气溶胶飞沫快速传播,也可以通过直接接触分泌物和排泄物途径而引起感染。
鸡对Cps具有一定的抗性,火鸡、鸭和鸽则相对易感,雏禽感染可引起体温升高、肿眼、厌食和腹泻等临床症状,种禽感染可引起严重的输卵管炎,导致产蛋率下降到10%以下或停止产蛋[2]。
目前对Cps的早期感染可用四环素、金霉素和土霉素等多种抗生素治疗,但由于其细胞内寄生性引起的持续性感染以及长期使用抗生素造成的耐药性增加等因素,使得使用抗生素不能从根本上控制该病[3]。
因此,衣原体疫苗的研制就具有重要的意义。
从20世纪50年代开始,衣原体疫苗研制开始兴起,经历了减毒活疫苗、灭活疫苗到基因工程疫苗等发展阶段。
由于Cps减毒活疫苗存在毒力返强的风险,灭活疫苗只激发体液免疫应答,且存在内毒素引起不良反应的问题,因此,这两种疫苗在生产上应用较少。
近年来,基因工程疫苗成为Cps疫苗研究的重点。
1Cps亚单位疫苗1.1重组蛋白疫苗随着DNA重组技术的发展,安全性好、易大规模生产的基因工程亚单位疫苗越来越多地受到关注。
猪囊尾蚴病检疫检验与防控措施
0 引言
猪囊尾蚴病时有猪带绦虫蚴虫寄生感染所致的一种 寄生虫疾病,该病不仅生猪感染率高,具有重阳性,重 阳率为0.58%。囊尾蚴虫病类型较多,临床常见的病症 分为6型及若干亚型,其中涉及神经系统的囊尾蚴虫病 就有9型,包括癫痫型、脑实质型、脑室型、混合性、 无症状型等。猪感染囊尾蚴虫病以脑型最为常见。猪脑 型囊尾蚴虫病的发病率约占猪囊尾蚴虫病的80%。我国 猪囊尾蚴虫病的检出率为8%~20%。全国每年由该病造 成的猪肉损失高达2亿kg,由此造成的直接经济损失高 达1.21亿每年。部分地区流行猪囊尾蚴虫病时的感染率 高达50%以上,给地方养殖业造成严重威胁。猪囊尾蚴 虫病的可靠的检疫检验技术手段及有效的防控措施是预 防其感染传播的必要基础。研究该课题对于提高猪囊尾
(3)活体检查。感染猪囊尾蚴虫的病猪眼部外肌 和舌肌肉面、舌尖部位有明显的白色透明的米粒至黄豆 大小的凸起的节节,形态为圆形或近圆形,触摸时有突 起感,按压时可明显感觉到凸起物有游离感。可通过对 病猪做活体检查,仔细观察结膜及舌下等部位,见结膜 有包囊存在即可诊断为猪囊尾蚴病。 2.2 屠宰后检疫
猪囊尾可根据舌、舌下、结膜等部位出现的米粒至 黄豆大小的结节、囊虫等做出诊断。死猪可通过剖检诊 断。剖检可见咬肌、腰肌等骨骼肌及心肌中有明显的囊 虫。肌肉中钙化后的囊虫及包囊呈现黄白色颗粒状,见
图1。在观察诊断的基础上,还可采取皮内试验、乳胶 凝集试验、补体结合试验、对流免疫电泳、间接血凝试 验、酶联免疫吸附试验等做出综合诊断。
防疫与检疫 | Prevent epidemics and quarantine
猪囊尾蚴病检疫检验与防控措施
梁风云 (山东省阳谷县畜牧兽医事业发展中心,山东 聊城 252300)
摘要:猪囊尾蚴病作为一种寄生虫疾病,防控工作必须严格执行屠宰前、屠宰后的疫病检疫检验。检验过程中必须全程做 好防护措施,严格执行检验流程和规定,确保检验结果的准确性和可靠性。此外,还需开展健康知识的普及,鼓励养殖场 积极转变饲养管理方式,强化猪场的规范化、标准化饲养,强化定期的消杀管理和猪场的无害化处理,从多途径预防猪囊 尾蚴病的传播扩散。该文首先阐述了猪囊尾蚴病的病原与生活史、流行病学、临床症状、诊断及治疗,然后分析了猪囊尾 蚴病的检疫检验,最后以聊城地区畜禽肉类检疫防疫管理为例,针对检疫防疫的问题及猪囊尾蚴病高发的原因,提出防控 猪囊尾蚴病的措施。 关键词:猪;囊尾蚴病;检疫检验;防控 中图分类号:S828 文献标识码:B doi:10.3969/j.issn.2096-3637.2022.14.048
大学病原生物学考试练习题及答案251
大学病原生物学考试练习题及答案21.[单选题]病原菌不侵入血液,但其在局部产生的外毒素侵入血液引起特殊的中毒症状,称为A)毒血症B)菌血症C)败血症D)内毒素血症答案:A解析:2.[单选题]下列哪项细菌代谢的产物对人体不利A)维生素B)抗生素C)细菌素D)热原质答案:D解析:3.[单选题]下列哪一项与细菌遗传性变异有关A)细菌染色体B)胞质颗粒C)细胞膜D)细胞质E菌毛答案:A解析:4.[单选题]往往存在于流行性感冒引起继发性细菌感染的是A)大肠埃希菌B)霍乱弧菌C)沙门菌属D)痢疾杆菌答案:B解析:5.[单选题]肺炎球菌可引起A)支气管肺炎B)支气管哮喘C)阻塞性肺炎解析:6.[单选题]结合肥大细胞和嗜碱性粒细胞的Ig是( )A)IgMB)IgGC)IgED)IgA答案:C解析:7.[单选题]破伤风芽胞梭菌的治病条件A)机体抵抗力降低B)感染的伤口C)厌氧的伤口D)化脓的伤口答案:C解析:8.[单选题]能引起人畜共患病的病原体是A)霍乱弧菌B)布氏杆菌C)梅毒螺旋体D)淋病奈瑟菌答案:B解析:9.[单选题]油镜使用结束后,采用哪项溶液擦拭镜头A)95%乙醇B)结晶紫溶液C)香柏油D)二甲苯答案:D解析:10.[单选题]原核细胞型微生物不包括( )A)沙眼衣原体B)钩端螺旋体C)结核分枝杆菌D)新型隐球菌答案:D11.[单选题]大多数细菌最适宜生长温度为A)37℃B)41℃C)22℃D)4℃答案:A解析:12.[单选题](,0.5 分)引起小儿百日咳的细菌是A)百日咳鲍特菌B)流感嗜血杆菌C)嗜肺军团菌D)白喉棒状杆菌答案:A解析:13.[单选题]下列不是HIV血液传播途径的是A)输入带有HIV的血液B)输入带有HIV血制品C)药瘾者共用不消毒的注射器D)使用消毒过的注射器答案:D解析:14.[单选题]与细菌致病性有关的细菌代谢产物是( )A)维生素B)抗生素C)细菌素D)细菌毒素答案:D解析:15.[单选题]一女性患者,28岁,农民,急性腹泻2天,每天腹泻10余次,脓血便伴有粘液,有里急后重感,腹痛,肠鸣音亢进。
猪囊尾蚴病重组DNA疫苗pcDNA3.1-TSO45—4B在小鼠体内的表达及诱导的细胞免疫效应
・
论著 ・
猪囊尾蚴病 重组 D NA 疫苗 pD .- S 54 c NA 3 1T O4—B 在 小 鼠体 内 的表 达 及 诱 导 的细胞 免 疫 效 应 *
王媛 媛 , 新 一 ,方 强 ,胡 守锋 , 小迪 ,张 莺莺 ,陈兴 智 ,王 雪梅 ,夏 惠 孙 杨
( 埠 医学 院病 原 生 物 学 教 研 室 , 徽 省 感 染 与 免 疫 重 点 实 验 室 , 徽 蚌 埠 2 3 3 ) 蚌 安 安 3 0 0
[ o ra fP to e il y 0 7Au ; ( )2 2 2 5 ] J u n l ahg nBoo .2 0 g 2 4 :6 — 6 . o g
猪囊虫病疫苗的研究进展
4 ~5 u 2 7 2k 的 十组分 。以成熟 虫卵可 溶性抗原 免疫 的羊 血清
也 含 有 抗 3 ~ 3 u和 4 ~5 u抗 原 的抗 体 + 以 虫 体 抗 原 、 4k L 7 2k 而
未成熟虫卵抗原免疫 的羊 血清 没有此 分子质量 蛋 白组分 的抗
第 2次 免疫 后 用猪 带 绦虫 卵 攻 击 + 护 率 达 8 . 。Nac 保 49 si — m no等从 自然 感 染 猪 获 得 的猪 囊 尾 蚴 制 备 头 节 蛋 白抗 原 el
( P . 这 种 抗 原 中 加弗 氏 不完 全佐 剂 , 试 验 猪 皮 下 注 射 3 S A) 在 对 次 ,0d后 给 猪 喂 1 0 个 绦虫 卵 。免 疫 组 猪 检 出高 教 价 的特 1 00 0
进行 一次性免疫 , 经虫 卵攻击表 明, 其具有抵抗猪囊尾蚴侵袭 的
免疫 原性 以 3 0万个 细 胞加 改进 的 弗 氏 完 全佐 剂 免疫 效 果最 0
1 od后抗体阳性率可达 7 ~1 0 5 0 %。Va e 等^从肥头缘虫 lz d
囊尾 蚴 中电泳 分离 出 l 2种 蛋 白 组 分 + 过 筛 选 - 分 子 质 量 经 以
钩 蚴抗 原 加 不 完 全 佐 剂 免 疫 羊 + 周 后 , 1 5 1 虫 卵 攻 2 用 . × 0个
区。猪带绦虫 的幼虫——囊尾蚴不但寄生在猪体 引起 猪囊虫病 造成 巨大的经 济损失 . 而且可侵^ ^体 的不同部位 引起 各种囊 虫病 + 中寄生在中枢神经系统的囊虫可致神经 系统损害 。 其 引起
k u抗 原 经 亲 和 层 折 筛选 出 的羊 带 绦 虫 重 组 基 因 疫 苗 , 显 示 良 并 好 的 免疫 保护 作 用 。 2 猪囊 尾 蚴 细 胞 疫 苗
猪囊尾蚴AgB重组质粒在免疫小鼠体内的表达及其抗体水平检测
第3 2卷 第 6期
21 年 6 月 00
中 国 预
防 兽
医 学 报
VOl 3 NO. _ 2. 6 J n. 2 0 u 01
Chi s o r lo e n ie V ee na y M e cne ne e J u na fPrve tv tr r dii i
L nh u7 0 4 , hn ; . olg f nma Me i l cecs Xi in giutrl nv rt, mmq 3 0 2 C ia az o 3 0 6 C ia 2 C l eo i l dc i e, n a gA r l a U iesy U e A aS n j cu i i 0 5 , hn ) 8
佐 剂按 11 积 比乳 化 ,以每 只 10 :体 0 g的 剂量 ,肌 肉注免 疫 5周 龄 左右 的 B B c小 鼠 ,3周后 加 强 免 疫 。 同时 , AL / 通过 原 核表 达制 备 重 组 Ag 蛋 白作 为 E IA检 测 抗 原 ,通 过 间接 E IA 方 法检 测 免 疫 小 鼠 的抗 体 水 平 。结 果 显 B LS LS
p a m x r s ig Ag fCy t e c s c l l s e ls i e p e sn B o si r u el o a d c u
猪带绦虫研究进展4-2
血象中有时可见嗜酸性粒细胞轻度增高。粪便 或肛门拭子检查虫卵阳性率不高且无法区别虫种。 从粪便中排出的妊娠节片内的子宫分支形状和数 目有助于与牛带绦虫鉴别。酶联免疫吸附试验可 检出患者粪中抗原成分;聚合酶链反应(PCR)可扩 增粪便中虫卵或虫体的种特异性DNA,以检测人体 内猪带绦虫成虫,亦可帮助诊断。
(三) 生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)
(四) 单克隆抗体-酶联免疫吸附试验(McAbELISA)
(五)酶联免疫电转移印记技术(EITB)
(六)胶体金免疫层析技术(GICA)
(七)斑点金免疫渗滤法(DIGFA)
2020/6/16
(八)滴金免疫测定法(DIGFA)
二、猪带绦虫病免疫学诊断
2020/6/16
猪带绦虫
2020/6/16
成虫结构
头节 scolex
颈节 neck
幼节immature proglottid
链 体
成节mature proglottid
孕节gravid proglottid
2020/6/16
囊尾蚴(囊虫cysticercus)
2020/6/16
皮下即肌肉囊尾蚴病
2020/6/16
特异性抗原
• Mr 8 000抗原家族 • GP50抗原 • 钙结合蛋白 • Mr 10 000抗原 • 热激蛋白 • 合成肽抗原 • 噬菌体肽库模拟表位
2020/6/16
猪囊尾蚴病免疫学诊断方法的 研究进展
(一) 酶联免疫吸附试验(ELISA)
(二)斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ)
2020/6/16
猪带绦虫的分布
田东和三江株为猪带绦 虫;融水为牛带绦虫和 猪带绦虫混合流行区
天津师范大学考试试卷
2013 —2014 学年第一学期期末考试试卷(开卷)科目:生物学文献检索与论文写作学院:生命科学学院一、完成检索报告(30%)1. 自定检索题目2. 利用检索工具完成检索报告,列出所检索出的结果。
3. 注意事项:(1)至少利用2种检索工具:书目数据库(天津师范大学图书馆馆藏书目数据库);维普期刊数据库来检索你所自定的检索题目。
(2)以参考文献的形式列出检索的结果。
每个检索工具至少提供10条纪录。
(3)提供检索题目检索题目:基因工程(1)书目数据库检索:[1]侯云德.病毒基因工程的原理与方法[M].北京:人民卫生出版社,1985.[2]李宁.高级动物基因工程[M].北京:科学出版社,2012.[3]孙明.基因工程[M].北京:高等教育出版社,2006.[4]李立家,肖庚富.基因工程[M].北京:科学出版社,2004.[5]陆德如,陈永清.基因工程[M].北京:化学工业出版社,2002.[6]杨汝德.基因工程[M].广州:华南理工大学出版社,2003.[7]贺淹才.基因工程概论[M].北京:清华大学出版社,2008.[8]静国忠.基因工程及其分子生物学基础[M].北京:北京大学出版社,1999.[9]冯斌,谢先芝.基因工程技术[M].北京:化学工业出版社,2000.[10]彭秀玲,袁汉英.基因工程实验技术[M].长沙:湖南科学技术出版社,1987.8.[11]谢纳.生物芯片分析[M].北京:科学出版社,2003.(2)维普期刊数据库检索:[1] 刘立军.猪囊尾蚴病重组抗原和基因工程疫苗的研究进展[J].国外畜牧学:猪与禽,2013(8):75-77.[2] 张文玲.渗透调节物质在植物抗寒基因工程的应用[J].安徽农业科学,2013,41(14):6152-6154.[3] 杨惠兰.基因工程上演中国速度[J].中国经济周刊,2013(31):82-83.[4] 孔卓怡,钟莉.基因工程策略强化生物法生产CoQ10研究进展[J].黑龙江科学,2013(7):45-47.[5] 许孟先.猪大肠杆菌K88、K99双价基因工程灭活苗免疫效果观察[J].浙江畜牧兽医,2013,38(4):3-4.[6] 谢晓航,李宜海,卢国伟.Z.mobilis基因工程菌发酵酒精技术条件的研究[J].大众科技,2013,15(7):87-89.[7] 李宁宁,李雅.基于动物纤维素酶基因工程的科学前沿动态可视化方法研究[J].科技管理研究,2013,33(13):196-199.[8] 刘玲玲.基因工程在马铃薯育种中的应用现状[J].山东农业科学,2013,45(6):130-133.[9] 曹南.基因工程在食品中的应用分析[J].湖南农机:学术版,2013(2):230.[10] 熊伟.基因工程技术培育抗病毒马铃薯种质的研究进展[J].平顶山学院学报,2013,28(2):71-74.[11]杨瑞红.生物脱硫微生物及基因工程应用的研究进展[J].生物技术进展,2013,3(3):190-195.[12]王飞,陈慧慧,李健.基因工程药物治疗白血病的研究进展[J].现代肿瘤医学,2013,21(5):1158-1162.二、检索题(20%)1.以实例详细描述你如何利用“CNKI E-Learning”学习平台。
囊尾蚴病免疫学诊断的研究进展
1 检 测 指 标
尤其是脑脊液 C g A 检测有助于脑囊虫病的诊断 , 而血清 C g A 检
经处 理 , 检测到的则是游离 型 C g和 C b 并非代 表总体抗原 、 A a,
抗 体情况 。崔琢等 E A法检测 19例脑囊尾蚴病患者 。用 LI S 0 血 清抗原 、 体及循环免疫复合物 , 抗 结果表 明: 19例标本 中, 在 0
检 出囊 尾 蚴 抗 原 阳性 率 3 . 3 , 体 阳性 率 6 .8 % , 环 3 0% 抗 8 1 循
测则有助于疗效考核。 13 免 疫 复 合 物 ( I 检 测 , CC) 随 着 C b和 C g在 临 床 诊 断 上 A A
的应用 , 出现 了其检测结果 与个 别临床症 状不符 的问题。 由于 抗原 、 抗体及其免疫复合物( I ) CC 三者统一 体地存在 , 若样 本不
11 抗 体 检 测 目前 主 要 检 测 IG 和 IG 。总 IG存 在 时 间 . g g4 g 较 为 持久 , 非活 动 期 也 可 检 测 到 , 疗 前 后 没 有 明显 差 异 J 在 治 。 囊 尾 蚴特 异 IG g 4的检 出与 体 内囊 尾 蚴 的 存 活 有 一 致 性 , 体 感 机
染囊尾蚴后血 清特异 抗体 水平 显著 升高 , 以特 异的 I 4为 尤 g G 主, 感染 消除后特异抗体 可持续存 在 , 特异 的 IG 但 g4会 迅速 降
低 或 消 失 。 因此 , 出囊 尾 蚴 特 异 IC 检 g, 囊 尾 蚴 病 诊 断 和 疗 效 4在 考 核 中具有 很好 的应 用 价 值 。检 测 抗 体 的抗 原 分 为 粗 抗 原 、 纯 化 抗 原 、 因重 组 抗 原 。 基
猪带绦虫基因工程疫苗研究进展
生 …。该 病 常 用 吡 喹 酮 、 阿 苯 达 唑 和 甲苯 质 粒 在 大 肠 埃 希 菌 中 表 达 G s T - 4 5 W. 4 B 疫组 的减虫率 为 9 7 %, G S T - 4 B X 免 疫 组
达 唑 等 化 疗 药 物 进 行 防 治 ,但 是 长 期 使 融 合 蛋 白 , 将其 2 0 0 g加 2 0 6佐 剂 免 疫 的 减 虫 率 为 9 5 %。 用 化 疗 药 物 存 在 一定 的 毒 副 作 用 ,且 易 猪 , 首 次免 疫 1 个 月后 , 用2 5 0 0 0枚 猪 1 . 2 1 8 k u抗 原 : H a r r i s o n等 [ 1 1 将 羊 绦 产 生 抗 药 性 。 随着 分 子 生 物学 技 术 的 发 带 绦 虫 卵 攻 击 ,攻 击 后 3个 月 发 现 G 虫 六 钩 蚴 抗 原 用 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 展 , 已有 实 验 证 实 疫 苗 防 治棘 球 蚴 病 和 抗 体 水平 在 2 8周 后 升 高 。 免疫后 5 5 d ( S D S P A G E) 分离 。 切下 1 2~ 1 8 k u的 囊 虫 病 并 取 得 了很 好 的 效 果 _ 2 ] , 研 制 基 达 最 高 水 平 ,并 获 得 了 9 5 %的减 虫率 和 蛋 白条 带 免 疫 羊 后 证 明 , 该 抗原 ( T O1 8 )
0 . 6 6 % ~6 . 0 0 %。 感染 人数 1 2 6万 , 囊 虫 转 录本之间都存 在 明显 的变 异 ,因此 , 2 0 6 佐 剂 肌 肉注 射 免疫 4 0 d龄 家 猪 。 2 1 d
的感 染率 为 O . 1 4 % 一3 . 2 O % 。 感 染 人 数 T S O 4 5 W. 4 B 是 最 有 潜 在 开 发 价 值 的 疫 后 .用 2 5 0 o O枚 成 熟 猪 带 绦 虫 卵 攻 击 ,
新型基因工程疫苗的研究及发展趋势分析
新型基因工程疫苗的研究 及发展趋势分析学院:动物科技学院班级:姓名:学号:日期:新型基因工程疫苗的研究及发展趋势分析 近几年来,随着分子生物学技术的发展,运用生物高新技术研究出许多新型动物疫苗,包括重组亚单位疫苗、基因缺失疫苗、重组或载体疫苗、合成肽疫苗、抗体疫苗以及核酸疫苗。
这些高科技疫苗的生产无需大量培养致病微生物,克服了传统疫苗的一系列缺点,为研制更安全、更有效的疫苗提供了新的途径。
基因工程疫苗就是用基因工程的方法或分子克隆技术分离出病原的保护性抗原基因,将其转入原核或真核系统使其表达出该病原的保护性抗原,制成疫苗;或者将病原的毒力相关基因删除,使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗。
亚单位疫苗(subunit)利用基因工程技术,取出微生物中编码保护性抗原肽段的基因,再将此基因与质粒等载体重组,导入受体菌(细菌、酵母)或细胞,使之在受体菌或细胞内高效表达,产生大量保护性肽段,提取此保护性肽段,加佐剂后即成为亚单位苗。
目前常用于亚单位疫苗生产系统的,一是以杆状病毒为外源抗原基因的载体,在昆虫细胞中表达生产;二是利用穿梭质粒为载体,运送外源抗原基因在酵母细胞中表达生产;三是在强大的启动子控制下以动物病毒为载体在动物细胞中表达生产。
世界上最早的以基因工程技术构建生产的实验性疫苗是基因工程口蹄疫亚单位疫苗,第一个商品化的基因工程疫苗是预防仔猪腹泻的大肠菌菌毛K88亚单位疫苗)又称重组活毒疫苗。
通常以动物活载体疫苗(vectored vaccines病毒弱毒或无毒株,如痘苗病毒、疱疹病毒、腺病毒、反转录病毒等作为载体,插入外源抗原基因构建成重组活病毒载体,转染病毒细胞,使载体病毒获得表达外源基因的新的特性,此种重组体疫苗称为基因工程活载体苗。
病毒活载体苗其本质是杂交病毒,它既含有一种病毒复制所需的全部基因,又含有另一种病毒编码免疫原性蛋白质的基因片段。
用这种杂交病毒免疫家禽,既能刺激宿主产生体液免疫,又能刺激宿主产生细胞免疫。
猪带绦虫病的流行特点及防治措施
猪带绦虫病的流行特点及防治措施作者:罗军来源:《当代畜禽养殖业》 2019年第7期罗军(安徽省泗县大庄镇畜牧兽医站,安徽宿州 234311)摘要:随着人们生活质量的不断提高,绿色无公害散养猪备受青睐。
由于散养猪管理松散,人群与猪直接接触较频繁,再加上个别屠宰加工者自行宰杀、贩卖,导致囊虫肉(米猪肉)进入食用环节。
“米猪肉”是由猪囊虫寄生在猪肌肉中引起的病变,该病是人畜共患病,不仅影响着人们的健康,同时也对养猪业造成重大的经济损失。
文章从传播途径、流行特点、临床特征、诊断和防治措施等方面进行了简要分析。
关键词:猪带绦虫病;囊虫病;流性特点;诊断;防治措施中图分类号:S858.28文献标识码:B文章顺序编号:1005-5959(2019)07-027-011 传播途径猪带绦虫属于人畜共患的寄生虫,成虫即是猪带绦虫(有钩绦虫、链状带绦虫),其幼虫即是猪囊尾蚴或者是猪囊虫。
这种人畜共患病持续存在的一部分原因是农村散养猪只与人粪接触,养殖户自行屠宰贩卖、食用未煮熟的猪肉,菜板生熟肉混用和食用不洁蔬菜及人粪污染的水等情况使患病几率加大。
最主要的原因是部分规模化养猪舍没有定期消毒驱虫、卫生条件差和污染的粪便处理不当所致,使猪成为绦虫病的隐性携带者,引发其他猪只发病。
2 流行特点规模化养殖中消毒卫生不到位、不定期驱虫、粪便处理不当引起绦虫的隐性携带。
好多生态养殖的散养猪群,一般在圈外活动觅食较多,误吞人粪中猪带绦虫节片或虫卵的机会较多。
猪吞入虫卵遭受感染后,六钩蚴从虫卵中逸出并钻入肠黏膜的血管和淋巴管中,到达身体各部,多数寄生于肌肉之中,发育为具有感染性的囊尾蚴,寄生于咬肌、舌肌、膈肌及肋间肌等横纹肌中[1],当人食用含有猪囊尾蚴的生或未煮熟的猪肉时,可以感染猪囊尾蚴而患囊虫病。
易感人群多以青壮年居多,而且男性多余女性[2]。
3 临床特征猪绦虫成虫影响着猪的生长,引起贫血、水肿,寄生在眼部会出现视力减退,严重的甚至失明;寄生在脑部会伴随神经症状;寄生于人体小肠内,头节和小钩吸附于肠壁,会导致肠黏膜损伤,出现腹部不适、腹痛、消化不良、腹泄和便秘等症状,虫体摄取了大量的营养物质导致身体消瘦;寄生在喉部时,出现叫声嘶哑并伴有短咳;寄生在舌肌、咬肌时,吞咽困难。
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猪囊尾蚴重组抗原和基因工程疫苗的研究进展冯金瑞;刘立军【摘要】猪囊尾蚴病(Cysticercosis)是由猪带绦虫的幼虫囊尾蚴寄生于人或猪等而引起的人畜共患寄生虫病,是公认的世界经济病之一。
严重威胁着人体健康,并给畜牧业造成重大经济损失,猪囊尾蚴病的免疫防治势在必行。
然而在猪囊尾蚴病疫苗研究中,疫苗抗原的选择和来源一直困扰着兽医工作者。
该文就近年来猪囊尾蚴病诊断重组抗原和基因工程疫苗的分子生物学研究进展进行了综述。
%Cysticercosis,which is known as a social-economic disease in the world,is an important zoonosis infecting human and pig caused by Taenia solium larval Cysticercus cellulosae.This disease must be prevented for its influence on international competition of the meat product and the great economic loss.However,the choice and source of vaccinal antigen always puzzles veterinarians.This paper reviewed recent research progress in molecular biology of vaccine for Recombinant antigen and genetic engineering vaccine of cysticercosis.【期刊名称】《畜牧兽医杂志》【年(卷),期】2012(031)002【总页数】4页(P35-38)【关键词】猪囊尾蚴病;重组抗原;基因工程疫苗【作者】冯金瑞;刘立军【作者单位】甘肃畜牧工程职业技术学院,甘肃武威733006;甘肃畜牧工程职业技术学院,甘肃武威733006【正文语种】中文【中图分类】S852.732囊尾蚴 (Cysticercus cellulosae)病是一种由猪带绦虫(Taenia solium)的幼虫引起严重的人畜共患寄生虫病。
囊尾蚴病的免疫预防研究开展较早,有全囊虫匀浆抗原、六钩蚴抗原、六钩蚴排泄一分泌抗原、囊尾蚴体外培养的分泌代谢抗原和组织培养的细胞抗原等用于免疫保护性试验,这些抗原作为疫苗均取得了良好的预防效果,可使免疫动物获得抗虫卵攻击感染的抵抗力,多数动物能得到完全保护。
但这些抗原都来自虫体本身,都不能通过体外繁殖而获得,而且抗原成分复杂。
粗制抗原包含了寄生虫的分泌、排泄、代谢产物以及宿主成分(主要是白蛋白和免疫球蛋白)的混合物,宿主成分的存在会造成诊断上的交叉反应及假阳性或假阴性的出现,虽然做酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbentassy,ELISA)的敏感性较高,但特异性较低。
单克隆抗体纯化的抗原用于免疫诊断能区分囊尾蚴病人和其它寄生虫病人,但由于其抗原决定簇较局限,试验中假阳性可能性大。
各种纯化方法所得抗原从分析结果看特性各不相同,但其诊断结果受纯化过程影响,缺乏统一的评价标准,且纯化过程繁琐,不能批量生产,限制了其进一步的推广应用。
而重组抗原稳定、价廉、结果重复性好,所以利用重组DNA技术制备出大量高纯度的诊断用抗原是解决人、猪囊尾蚴病免疫预防和诊断的关键和趋势所在。
1 猪囊尾蚴病重组抗原澳大利亚学者Johnson等用基因工程方法克隆并表达了羊带绦虫六钩蚴抗原,用其制成的疫苗对羊的保护率达94%,这一突破性研究的成功标志着用基因工程方法研制猪囊虫疫苗是切实可行的。
科研人员从羊带绦虫中鉴定3种宿主保护性六钩蚴抗原(16 k、18 k和45 W),这些抗原的同源分子对牛感染牛带绦虫虫卵也有很好的保护作用。
从猪带绦虫六钩蚴抗原中也鉴定并克隆出与羊带绦虫(To18和To45w)和牛带绦虫(TSA18和 TSA9)同源的TSOL18和TSOL45-1A,并在体外进行表达纯化出特异性抗原,为猪囊尾蚴病的免疫预防和诊断奠定基础。
王敏等应用已从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选出的28 ku、18 ku、14 ku和34 KU抗原诱导表达出四种囊尾蚴重组融合蛋白抗原,经Western-blot法检测不同类型及不同病程患者,显示多克隆 FPSWB可提高检出率且识别抗体更敏感。
苏彩霞等将猪囊尾蚴磷蛋白P12基因克隆到毕赤酵母菌表达系统分泌性表达载体,经过培养条件的初步优化获得稳定表达目的蛋白的重组蛋白菌株,表达产物SDS-PAGE检测结果表明:表达量占33%,分子量为12.6 ku,Western-blot分析结果表明,重组磷蛋白能被囊尾蚴病人阳性血清抗体识别。
Yasuhito Sako等克隆并表达了猪囊尾蚴低分子量蛋白AglV1/Ag2的嵌合分子,用ELISA法诊断脑囊尾蚴病,结果获得了89.7%的阳性率。
Fleury用合成的抗原表位诊断脑囊尾蚴病,结果显示多肽HP6-2和Ts45W-1分别获得93%和85%的敏感性和特异性,结合应用可使敏感性达到100%。
通过偶连剂将小分子物质连接到载体分子上可刺激机体产生良好的抗体反应。
张少华等应用异型双功能连接剂MBS(间一马来酰亚胺苯甲酸一N一羟基琥珀酰亚胺酯)将猪带绦虫六钩蚴18KU重组蛋白(TSOL18)和载体蛋白—牛血清白蛋白(BSA)进行连接,制备连接蛋白 BSA-TSOL18,用以增强TSOL18的免疫原性.连接蛋白利用快速脱盐柱分离技术进行纯化。
结果表明:TSOL18与 BSA偶连摩尔比为1∶3时连接有效,BSA-TSOL18连接物用ELISA方法进行活性鉴定4份免疫兔血清,结果表明BSA-TSOL18连接物的P/N值>3,连接物均具有与TS0L18的抗原活性。
Manoutcharian等克隆5种猪囊尾蚴和巨颈绦虫囊尾蚴共同表达的抗原,其中的KETc7抗原被认为是猪囊尾蚴保护性抗原。
其后Toledo等重组了猪囊尾蚴和巨颈绦虫囊尾蚴共有的抗原表位KETcl、KETcl2,发现它们对猪囊尾蚴感染具有高度的保护性,可以作为猪囊尾蚴病的候选疫苗。
Vazquez·Talavera等重组了猪囊尾蚴的副肌球蛋白(Tpmy),即抗原B,以巨颈绦虫为动物模型研究其对猪囊尾蚴病的免疫保护作用,发现其减虫率约52%,具有较好的免疫保护作用。
杨湘越等在巴斯德毕赤酵母中表达42kua猪囊尾蚴抗原cC1,在表达条带处出现了能被抗cC1猪血清多抗所识别的蛋白,表明该表达产物具有天然cC1的免疫原性。
Hancock等成功地克隆并表达了GP50基因,该基因为扁豆状血凝素纯化糖蛋白(LLGP)抗原的成分之一,实验证明该重组抗原GP50在Western blot实验中与猪囊尾蚴病人血清反应的特异性达到100%,且该重组抗原与经LLGP确定为阳性血清反应的敏感性为90%,这就进一步证实重组抗原具有很高的免疫学活性和更高的特异性。
郭爱疆,岳城等利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),从猪囊尾蚴虫体中扩增出小热休克蛋白(small Heashock protein,sHSP)基因,克隆至原核表达栽体pGEX—4T-1,在大肠杆菌BL2中以GST融合蛋白的形式表达。
表达产物为64 Ku的融合蛋白。
免疫学分析(Western blot,ELISA)结果表明,sHSP能与猪囊尾蚴血清反应。
将表达产物免疫小鼠,进行Western blot和ELISA检测,其抗血清能与猪囊虫粗抗原及纯化的sHSP重组融合蛋白产物发生免疫学反应。
说明从猪囊尾蚴虫体中扩增出小热休克蛋白(small Heashock protein,sHSP)基因的表达蛋白能够作为囊虫病疫苗的免疫原进行大量研究。
该研究为丰富新的诊断试剂和免疫用重组抗原具有重要意义。
2 猪囊尾蚴病基因工程疫苗基因工程疫苗是使用DNA重组生物技术,把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中,使之充分表达,经纯化后而制得的疫苗。
应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。
随着对猪囊尾蚴病研究的不断深入,研究者们通过对囊尾蚴的相关基因进行大量研究,寄希望找出免疫原性和反应原性较好的基因。
随着分子生物学的发展,人们开始通过基因工程技术大量制备特异的ES抗原。
因此,利用基因重组技术在体外表达排泄分泌抗原将会在囊虫病的免疫诊断和免疫预防中发挥重要的作用和保护效应。
在猪带绦虫六钩蚴抗原方面,唐雨德等从猪带绦虫六钩蚴cDNA文库中筛选目的基因并进行克隆表达,重组抗原用血清学方法和猪体免疫试验进行鉴定,筛选保护性抗原基因。
将该基因表达纯化纯化,并与免疫刺激复合物佐剂结合,制成猪囊虫病基因工程疫苗。
应用昆明小鼠建立了猪囊虫病的实验动物模型,进行上述疫苗的免疫预防试验,免疫1次和2次的免疫保护率分别为96.9%和98.4%。
动物的免疫预防试验显示,疫苗安全性好,且免疫组发现的囊虫多数已死亡。
在流行区进行的现场试验和区域试验表明,免疫猪无不良反应,囊虫感染率由20%降为1.1%,取得了满意的效果。
丁军涛将改造好的Tsol18基因片段插入Asd+的组成型表达载体pYA3341,构建重组表达载体pYA3341-Tsol18,将重组载体电转化入缺失腺苷酸环化酶(△asd)的减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,构建活载体疫苗株X4550(pYA3341-Tsol18)表达Tsol18重组蛋白的抗原性,结果显示重组疫苗X4550(pYA3341-Tsol18)在没有选择压力的情况下连续培养100代后,随机挑选的重组疫苗菌株全部都能生长和表达Tsol18重组蛋白,经BALB/c小鼠口服重组疫苗2.0×1012cfu 30d后,存活率100%,证明重组疫苗口服安全可靠,小鼠口服免疫后第21 d在脾脏仍能检测到大量的重组疫苗株,表明重组疫苗在体内能够长期存活,有利于刺激机体产生持久的免疫应答。
3 展望各种抗原和疫苗种类繁多,对囊尾蚴病诊断和免疫预防都有很好的效果,但兽医工作者更希望找出相比有高效、持久、广谱、简便、廉价、无致病性等优点的疫苗。
有学者把核酸疫苗誉为“疫苗的第三次革命”。
在寄生虫病疫苗方面,核酸疫苗也迅速得以研究应用,也得到许多学者的关注。
人们将病原的保护性抗原编码的基因片段克隆入真核表达质粒载体,直接用来免疫动物,通过转染动物细胞而在动物体内目的基因直接表达,使动物获得免疫。
或者将病原的毒力相关基因删除掉,使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗免疫动物,取得了一定的进展。