微生物知识培训 PPT课件

沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动)
4.培养基的用途 液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种
（二）无菌技术
1.无菌技术的概念 无菌操作用于防止微生物进入人体 组织或其它无菌范围的操作技术称为无 菌操作 。其操作中的每一步都需要做到 “无菌”，只有熟练、规范地进行无菌 操作，才可能保证无菌实验结果的成立。
专题2 :微生物的培养与应用
微生物基础知识
病毒
细菌
病毒界
微生物包括哪五类： 放线菌 真菌 原生动物
原核生物界 真菌界
原生生物界
特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通 常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有 的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿 素.不能进行光合作用.
细菌的外形与大小
细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染 色后显微镜观察
2.不同的微生物往往需要采用不同 的培养基配方 (参考教材附录内容)
3.不管哪种培养基，一般都含有水、 碳源、和氮源、 无机盐、等营养物质， 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必 需，而自身不能合成的化合物,如维生素、 某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二 氧化碳、渗透压等的要求。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠 体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环 境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才 死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水 分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.
菌落：
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。
真菌
酵母菌和霉菌
青霉
如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构
细菌的营养类型
根据细菌所利用的能源和碳源的不同 ，将细菌分为两大营养类型。 自养菌（autotroph） 异养菌（heterotroph） 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌

一、基础知识：
（一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成 的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 1.培养基的类型和用途 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培 养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌 种分离、鉴定菌落等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别 培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成 培养基。
细菌的构造
细菌细胞由外向里 依次有鞭毛、菌 （纤）毛、荚膜 、细胞壁、细胞 膜、细胞质，细 胞质中又有液泡 、储存性颗粒、 核质等。
图1-3 细菌的结构
细菌内毒素
细菌内毒素，英文称作Endotoxin，是G-菌细 胞壁个层上的特有结构，内毒素为外源性致热 原，它可激活中性粒细胞等，使之释放出一种 内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热 。 细菌内毒素的主要化学成分为脂多糖。.
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（１）消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死大部份 致病微生物的过程。区分为高程度消毒 （High-level Disinfection）、中程度 消毒（Intermediate-level Disinfection）、低程度消毒（Lowlevel Disinfection）三种方式。

菌落
细菌的菌落特征 因种而异
放线菌
1、结构： 单细胞原核 分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是 由放线菌产生的
病毒的结构
病毒
SARS病毒、
禽流感病毒
朊病毒（蛋白质病毒）
朊病毒

朊病毒就是蛋白质病毒，是只有蛋白质而没有 核酸的病毒。1997年诺贝尔医学或生理学奖 的获得者美国生物学家斯垣利· 普鲁辛纳（ S. B. Prusiner）就是由于研究朊病毒作出卓越贡 献而获此殊荣的。朊病毒不仅与人类健康、家 畜饲养关系密切，而且可为研究与痴呆有关的 其他疾病提供重要信息。
（2）灭菌的定义：
以化学剂或物理方法消灭所有微 生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、 霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工 作中最普通也是最重要的技术。
合成培养基:
根据细胞生存所需物质的种类和 数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、 维生素、碳水化合物、无机盐和其它 一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相 对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满 足体外细胞生长需要。
天然培养基：
天然培养基有血清、血浆、和组 织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某 些实验产物的提取和实验结果的分析; 易发生支原体污染;
选择培养基
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、 次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞

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细菌毒素分类


一般细菌毒素可分为两类，一类为外毒素（Exotoxin ）；它是一种毒性蛋白质，是细菌在生长过程中分 泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细菌主要是 革兰氏阳性菌。如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆 菌、金黄色葡萄球菌以及少数革兰氏阴性菌。 另一类为内毒素（Endotoxin）。是革兰氏阴性菌的 细胞壁的产物。细菌在生活状态时不释放出来，只 有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其 毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成 分。
人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细 胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如 血清）。
血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋 白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、 冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长