全自动化学发光免疫分析仪运行原理ppt课件
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预先确定好的时间读取化学发光发射的量 （活动读数），可计算分析物的浓度，或根 据Index（截断值）来定性进行判断。
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项目运行方法类型
一步法
一步法分析需要29分钟处理时间,其中包括25分钟孵育
二步法
二步法分析需要29分钟处理时间,其中包括22分钟孵育
预先处理法
预先处理法需要对样品自动预先处理再按一步法和二步法分析样品
7
CMIA分析成份
磁性微粒子包被的捕捉分子（抗原，抗体或 病毒颗粒）用于特异性的检测被分析物。
吖啶酯标记的连接物 预激发液和激发液
8
ABBOTT i 2000SR试剂组成
R1试剂
R2试剂
试剂组成 中圈（RI）：包被有
抗体的顺磁性微粒子 内圈（R2）：吖啶
酯包被的抗体 外圈：样本稀释液 预激发液：1.32%的
快速反应一步法
快速反应一步法需要18分钟处理时间,其中包括11分钟孵育
快速反应二步法
快速反应二步法需要18分钟处理时间,其中包括8分钟孵育
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一步法 (i System) 1
• 在位置1加样品到RV杯中. • 在位置2试剂针R1加微粒子试剂和吖啶酯标记的连接物试
剂. • 在位置3振动混合样品和试剂. • 在位置4-86孵育25分钟.
即：磁性微粒子包被的捕捉分子（抗原，抗体或病毒颗粒） 特异的与被分析物中抗原、抗体结合形成抗原抗体复合物， 再与吖啶酯标记的连接物反应形成双抗体夹心抗原抗体复合 物。吖啶酯在过氧化氢的稀碱溶液中发生氧化还原反应生成 10-甲基吖啶酮，当它恢复到基态时发光，根据发光强度可 计算出分析物的浓度 。
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（3）激发态分子能够以辐射跃迁的方式 返回基态。
3
化学发光分析法的特点
由于化学发光分析不使用任何光源，避免了背景光和杂散光 的干扰，降低了噪声，大大提高了信噪比，因而，化学发光 分析法一般都有很高的灵敏度，通常可测定纳克级或皮克级 的化学成分。——高灵敏度
测量化学发光强度，多采用光电转换装置，用函数记录仪或 数显装置，记录化学发光的相对强度。以最大发光强度(曲 线的峰高)定量被测组分的浓度。——光电转换
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一步法 (i System) 2
• 在位置87 - 90 清洗站2#清洗RV杯混合物吸走没结合物质.
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一步法 (i System) 3
• 在位置94加入预激发液(Pre-trigger), 然后振动混合. • 在位置98 CMIA光学系统读空白值, 然后加入激发液(Trigger), 再测CMIA
然后系统在反应复合物中加入激发液（NaOH），吖啶酯在过氧化物和碱 性溶液中发生氧化反应，在碱性H2O2 溶液中，分子受到过氧化氢离子进 攻时，生成不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮，当其回到基态时发出最大发射波长为430nm 的光子。
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5． 检测被分析物存在的量 要检测被分析物存在的量，CMIA光路系统通过
-氨基末端脑钠肽前体
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化学发光基本原理
反应体系中的某种物质的分子(反应物、产物、中间体或 荧光物质) 吸收了反应所释放的能量而由基态跃迁至激发 态，然后再从激发态返回基态，同时将能量以光辐射的形 式释放出来，产生化学发光。将化学发光反应应用于分析 化学，根据某一时刻的发光强度或反应的发光总量来确定 体系的相应组分含量的分析方法叫化学发光分析法。
配备微机系统，自动进样，储存记录，打印结果，使化学发 光分析的速度更快。——全自动
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化学发光的分类
化学发光反应参与的免疫测定分为二种类型： 第一种是以发光剂作为酶免疫测定的底物，通过发
光反应增强测定的敏感性。
如：化学发光酶免疫测定（CLEIA，与酶标ELISA法类似， 即最后一步酶反应所用底物为发光剂 ）
第二种是以发光剂作为抗体或抗原的标记物，直接 通过发光反应检测标本中抗原或抗体的含量。
如：化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定 （CLIA）、电化学发光免疫测定（ECLI）
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ABBOTT i 2000SR检测原理
Architect I系统采用化学发光微粒子免疫分析技术 （Chemiluminesent Microparticle ImmunoAssay, CMIA）检 测样品中的抗原，抗体和分析物。
A + B = C + D*（激发态分子） D*→D + hv（激发态分子D*的光辐射）
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化学发光的反应条件
（1）能快速地释放出足够的能量 （化学 发光反应多为氧化还原反应，激发能与反 应能相当，DE=1Biblioteka Baidu0～300 kJ/mol）；发光 位于可见光区；
（2）化学反应的能量至少能被一种物质 所接受并使之生成激发态；
过氧化氢 激发液：
0.35mol./L的氢氧 化钠 清洗缓冲液：磷酸盐 缓冲液
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CMIA分析步骤
1．样品与微粒子结合
在样品检测过程中，微粒子（磁性微粒子包被的捕捉 分子）与样品在反应杯中混合，在孵育过程中，样 品中的被分析物与微粒子上的捕捉抗原相互反应结 合，形成免疫复合物。
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2．磁石将磁性微粒子吸附 孵育后，磁石将磁性微粒子（包括特异性的分
光学系统速率读数. • 在位置100液体从RV杯中废液吸走. • 在位置109退出RV杯装置(UL)推出RV杯道废物盒.
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二步法 (i System) 1
共112个RV杯空位，每18秒 转一个空位，200T/h。常规 28Min/TEST
• 在位置1加样品到RV杯中. • 在位置2试剂针R1加微粒子试剂. • 在位置3振动混合样品和试剂. • 在位置4 - 63孵育18分钟.
析物）吸附在反应杯的管壁上，反应复合物 被清洗去除未结合的物质，然后继续进行测 定。
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3．加吖啶酯标记的连接物 反应复合物在反应杯中与吖啶酯标记的连接物
反应结合，反应结束后，反应复合物被清洗 去除未结合的物质。
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4． 预激发液（H2O2）被加入进行本底读数
预激发液具有以下功能： ①建立一个酸性环境，防止能量的过早释放（光发射） ②防止微粒子的凝集 ③将吖啶酯从反应复合物中脱离下来，为吖啶酯的下步反应做准备
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项目运行方法类型
一步法
一步法分析需要29分钟处理时间,其中包括25分钟孵育
二步法
二步法分析需要29分钟处理时间,其中包括22分钟孵育
预先处理法
预先处理法需要对样品自动预先处理再按一步法和二步法分析样品
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CMIA分析成份
磁性微粒子包被的捕捉分子（抗原，抗体或 病毒颗粒）用于特异性的检测被分析物。
吖啶酯标记的连接物 预激发液和激发液
8
ABBOTT i 2000SR试剂组成
R1试剂
R2试剂
试剂组成 中圈（RI）：包被有
抗体的顺磁性微粒子 内圈（R2）：吖啶
酯包被的抗体 外圈：样本稀释液 预激发液：1.32%的
快速反应一步法
快速反应一步法需要18分钟处理时间,其中包括11分钟孵育
快速反应二步法
快速反应二步法需要18分钟处理时间,其中包括8分钟孵育
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一步法 (i System) 1
• 在位置1加样品到RV杯中. • 在位置2试剂针R1加微粒子试剂和吖啶酯标记的连接物试
剂. • 在位置3振动混合样品和试剂. • 在位置4-86孵育25分钟.
即：磁性微粒子包被的捕捉分子（抗原，抗体或病毒颗粒） 特异的与被分析物中抗原、抗体结合形成抗原抗体复合物， 再与吖啶酯标记的连接物反应形成双抗体夹心抗原抗体复合 物。吖啶酯在过氧化氢的稀碱溶液中发生氧化还原反应生成 10-甲基吖啶酮，当它恢复到基态时发光，根据发光强度可 计算出分析物的浓度 。
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（3）激发态分子能够以辐射跃迁的方式 返回基态。
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化学发光分析法的特点
由于化学发光分析不使用任何光源，避免了背景光和杂散光 的干扰，降低了噪声，大大提高了信噪比，因而，化学发光 分析法一般都有很高的灵敏度，通常可测定纳克级或皮克级 的化学成分。——高灵敏度
测量化学发光强度，多采用光电转换装置，用函数记录仪或 数显装置，记录化学发光的相对强度。以最大发光强度(曲 线的峰高)定量被测组分的浓度。——光电转换
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一步法 (i System) 2
• 在位置87 - 90 清洗站2#清洗RV杯混合物吸走没结合物质.
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一步法 (i System) 3
• 在位置94加入预激发液(Pre-trigger), 然后振动混合. • 在位置98 CMIA光学系统读空白值, 然后加入激发液(Trigger), 再测CMIA
然后系统在反应复合物中加入激发液（NaOH），吖啶酯在过氧化物和碱 性溶液中发生氧化反应，在碱性H2O2 溶液中，分子受到过氧化氢离子进 攻时，生成不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮，当其回到基态时发出最大发射波长为430nm 的光子。
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5． 检测被分析物存在的量 要检测被分析物存在的量，CMIA光路系统通过
-氨基末端脑钠肽前体
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化学发光基本原理
反应体系中的某种物质的分子(反应物、产物、中间体或 荧光物质) 吸收了反应所释放的能量而由基态跃迁至激发 态，然后再从激发态返回基态，同时将能量以光辐射的形 式释放出来，产生化学发光。将化学发光反应应用于分析 化学，根据某一时刻的发光强度或反应的发光总量来确定 体系的相应组分含量的分析方法叫化学发光分析法。
配备微机系统，自动进样，储存记录，打印结果，使化学发 光分析的速度更快。——全自动
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化学发光的分类
化学发光反应参与的免疫测定分为二种类型： 第一种是以发光剂作为酶免疫测定的底物，通过发
光反应增强测定的敏感性。
如：化学发光酶免疫测定（CLEIA，与酶标ELISA法类似， 即最后一步酶反应所用底物为发光剂 ）
第二种是以发光剂作为抗体或抗原的标记物，直接 通过发光反应检测标本中抗原或抗体的含量。
如：化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定 （CLIA）、电化学发光免疫测定（ECLI）
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ABBOTT i 2000SR检测原理
Architect I系统采用化学发光微粒子免疫分析技术 （Chemiluminesent Microparticle ImmunoAssay, CMIA）检 测样品中的抗原，抗体和分析物。
A + B = C + D*（激发态分子） D*→D + hv（激发态分子D*的光辐射）
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化学发光的反应条件
（1）能快速地释放出足够的能量 （化学 发光反应多为氧化还原反应，激发能与反 应能相当，DE=1Biblioteka Baidu0～300 kJ/mol）；发光 位于可见光区；
（2）化学反应的能量至少能被一种物质 所接受并使之生成激发态；
过氧化氢 激发液：
0.35mol./L的氢氧 化钠 清洗缓冲液：磷酸盐 缓冲液
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CMIA分析步骤
1．样品与微粒子结合
在样品检测过程中，微粒子（磁性微粒子包被的捕捉 分子）与样品在反应杯中混合，在孵育过程中，样 品中的被分析物与微粒子上的捕捉抗原相互反应结 合，形成免疫复合物。
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2．磁石将磁性微粒子吸附 孵育后，磁石将磁性微粒子（包括特异性的分
光学系统速率读数. • 在位置100液体从RV杯中废液吸走. • 在位置109退出RV杯装置(UL)推出RV杯道废物盒.
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二步法 (i System) 1
共112个RV杯空位，每18秒 转一个空位，200T/h。常规 28Min/TEST
• 在位置1加样品到RV杯中. • 在位置2试剂针R1加微粒子试剂. • 在位置3振动混合样品和试剂. • 在位置4 - 63孵育18分钟.
析物）吸附在反应杯的管壁上，反应复合物 被清洗去除未结合的物质，然后继续进行测 定。
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3．加吖啶酯标记的连接物 反应复合物在反应杯中与吖啶酯标记的连接物
反应结合，反应结束后，反应复合物被清洗 去除未结合的物质。
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4． 预激发液（H2O2）被加入进行本底读数
预激发液具有以下功能： ①建立一个酸性环境，防止能量的过早释放（光发射） ②防止微粒子的凝集 ③将吖啶酯从反应复合物中脱离下来，为吖啶酯的下步反应做准备