临床细菌培养鉴定流程及报告分解
细菌培养报告总结范文
报告编号：2023-0001一、摘要本次细菌培养报告针对患者临床标本进行微生物学检验，通过严格规范的实验操作，对分离培养的细菌进行鉴定和药敏试验。
现将实验过程及结果总结如下：二、实验材料与方法1. 实验材料：临床标本、细菌鉴定试剂、药敏纸片、营养琼脂、血琼脂、生理盐水、无菌试管、无菌棉签等。
2. 实验方法：（1）标本采集：按照无菌操作原则，采集患者大便、尿液、血液等临床标本。
（2）标本处理：将采集到的标本进行适当稀释，分别接种于营养琼脂、血琼脂平板，37℃培养24小时。
（3）细菌分离：观察平板上菌落生长情况，挑取典型菌落进行纯培养。
（4）细菌鉴定：采用生化试验、血清学试验等方法对纯培养的细菌进行鉴定。
（5）药敏试验：采用纸片扩散法，对分离得到的细菌进行药敏试验。
三、实验结果1. 细菌鉴定结果：本次培养共分离出金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌等细菌。
2. 药敏试验结果：（1）金黄色葡萄球菌：对青霉素、头孢噻肟、万古霉素敏感，对红霉素、克林霉素、四环素耐药。
（2）大肠埃希菌：对头孢噻肟、氨苄西林、左氧氟沙星敏感，对阿莫西林、头孢他啶、四环素耐药。
（3）白色念珠菌：对氟康唑、伏立康唑、特比萘芬敏感，对酮康唑、咪康唑、克霉唑耐药。
四、讨论1. 本实验严格按照微生物学检验规范进行，保证了实验结果的准确性。
2. 通过细菌培养鉴定和药敏试验，为临床提供了有效的细菌学依据，有助于指导临床合理用药。
3. 在本次实验中，金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌等细菌的分离鉴定和药敏试验结果与临床诊断相符，为临床治疗提供了有力支持。
4. 针对本次实验结果，建议临床医生在治疗过程中，根据细菌的药敏试验结果，合理选用抗生素，以减少耐药菌的产生。
五、结论本次细菌培养报告通过对临床标本进行微生物学检验，成功分离出金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌等细菌，并对其进行了鉴定和药敏试验。
实验结果为临床治疗提供了有效依据，有助于提高治疗效果。
细菌室标本操作流程
细菌室标本操作流程
细菌室是进行细菌培养和鉴定的重要实验室，操作流程的规范
性和严谨性对于实验结果的准确性至关重要。
下面将详细介绍细菌
室标本操作的流程。
1. 样本接收：首先，接收来自临床的标本，如血液、尿液、脑
脊液等，标本应该在规定时间内送到细菌室，并在接收时进行标记，包括标本来源、送检医生、送检时间等信息。
2. 样本处理：接收到标本后，需要进行处理，包括标本的分装、保存和处理。
不同类型的标本需要采取不同的处理方法，确保标本
的完整性和质量。
3. 样本培养：将处理好的标本进行培养，通常采用琼脂培养基，根据标本的性质选择不同的培养基。
培养条件包括温度、湿度、氧
气含量等，需要根据不同的细菌种类进行调整。
4. 细菌鉴定：培养出的细菌需要进行鉴定，包括形态学特征、
生理生化特性、抗生素敏感性等。
通常采用显微镜观察细菌形态，
进行生化试验和抗生素敏感性试验。
5. 结果记录：对鉴定结果进行记录，包括细菌种类、数量、鉴
定方法、结果等信息。
确保结果的准确性和可追溯性。
6. 报告发放：将鉴定结果整理成报告，发送给临床医生，帮助其进行治疗方案的制定。
7. 清洁消毒：操作结束后，对实验室进行清洁消毒，确保实验室的卫生和安全。
细菌室标本操作流程需要严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
同时，操作人员需要具备专业知识和技能，保证操作的规范性和安全性。
只有这样，才能为临床诊断和治疗提供可靠的实验结果。
细菌鉴定流程
可以水解蛋白质、多肽和脂肪。通常不水解精氨酸。通常不还原硝酸盐。有些菌株能生长在含有 丙酮酸（作为碳源和能源）、谷氨酸、生物素和无机盐的培养基上。另一些菌株需要含某些氨基 酸更复杂的培养基。
专性好氧，最适生长温度约为35℃。大多数菌株可在10℃生长，有些在45℃生长。能在5%NaCl 生长，但不常在10%或15% NaCl中生长。大多数菌株对溶菌酶和新生素敏感。 对植物和动物不致病。通常存在于土壤、灰尘、水、人和其他动物皮肤上。
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Group 2
THANKS
14生基一班 第二小组
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20
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形态及理化特征
形态特征：菌落特征
菌落形态
在培养基上呈黄色菌 落。菌落圆形，凸起， 光滑且有光泽，边缘
整齐。
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形态及理化特征
形态特征
显微特征 圆球状，无鞭毛且不可运动
鞭毛染色
1、步骤 制片：滴菌液→倾斜玻片→室温干燥 染色：A液3-5min→水洗→B液冲残水，覆盖染色 →出现明显褐色时轻轻水洗→晾干
2、结果 受试菌为革兰氏染色阳性菌
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形态及理化特征
理化特征
大肠杆菌
TITLE TITEXT
淀粉水解实验
受试菌 枯草芽孢杆菌
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1、步骤： 固体淀粉培养基→划线接种→37℃培 养24h→滴加碘液（均匀铺满平板） →观察
2、结果： 受试菌周围未出现无色透明圈 说明不能分泌胞外淀粉酶
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形态及理化特征
理化特征
建议新的模式菌株： CCM 169;ATCC 44698;NCTC 2665.
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结果与分析
细菌分离培养实验报告
细菌分离培养实验报告
实验目的：
通过对样品的细菌分离和培养，观察和鉴定细菌种类及其生长特征，为日后的研究奠定基础。
实验原理：
细菌分离培养是指将样品中的微生物通过特定的方法分离出来，并且在适宜的培养基上进行培养。
主要步骤包括选择样品、消毒、接种、分离和鉴定。
实验步骤：
1.选择样品：本次实验选用的是口腔拭子样品。
2.消毒：将口腔拭子放入细菌营养液中，充分均匀振荡，将细
菌营养液倒入灭菌瓶中。
3.接种：将灭菌瓶中的细菌营养液，均匀地涂抹在培养基平板上，用铁环进行接种。
4.分离：将铁环进行细菌分离，标记好分离点。
5.鉴定：根据样品的菌落形态、生长特征及其他相关检测方法，进行初步鉴定和筛选，待进一步的鉴定。
实验结果与分析：
在培养基平板上观察到了菌落的生长，初始生长时间为48小时。
根据菌落的形态、颜色、大小和特征等，初步判断菌落为链球菌属（Streptococcus）。
结论：
通过细菌分离培养实验，成功分离出一株链球菌属的菌落，并进行初步鉴定，为日后的进一步研究提供了基础。
细菌培养实验报告模板(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉细菌培养的基本原理和方法。
2. 学习观察细菌的生长特征。
3. 掌握无菌技术操作，提高实验技能。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有繁殖速度快、形态多样等特点。
在适宜的培养基和条件下，细菌可以生长繁殖，形成肉眼可见的菌落。
通过细菌培养，可以观察其生长特征，为后续研究提供基础。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基等。
2. 细菌：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
3. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器、无菌操作台等。
4. 实验试剂：无菌水、无菌棉签、无菌生理盐水等。
四、实验方法1. 培养基制备：按照说明书配制牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基，高压蒸汽灭菌后备用。
2. 细菌接种：将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基中。
3. 恒温培养：将接种后的培养基放入恒温培养箱中，分别于37℃和30℃下培养24小时。
4. 观察记录：观察细菌在培养基上的生长情况，记录菌落形态、大小、颜色等特征。
5. 无菌技术操作：在无菌操作台中，进行接种、移液等操作，防止污染。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，形成圆形、金黄色、表面光滑的菌落。
2. 大肠杆菌在营养肉汤培养基上生长良好，形成乳白色、浑浊的菌液。
六、实验分析1. 通过本次实验，掌握了细菌培养的基本原理和方法。
2. 观察到金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在不同培养基和温度下的生长特征，为后续研究提供了基础。
3. 在实验过程中，注意无菌技术操作，防止污染。
七、实验讨论1. 细菌在不同培养基和温度下的生长情况有何差异？2. 如何提高细菌培养的效率？3. 在实验过程中，如何避免污染？八、实验总结通过本次细菌培养实验，我们了解了细菌的基本特征和生长规律，掌握了无菌技术操作，为后续研究奠定了基础。
在实验过程中，我们要注重细节，严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性。
细菌分离培养与鉴定程序
细菌分离培养与鉴定程序一、背景记录1、猪的临床症状2、不同猪的发病阶段（早、中、晚、解剖前宰杀还是解剖前已死亡）3、解剖病变（保存好照片）二、分离用培养基1、常用培养基：鲜血琼脂培养基、巧克力培养基2、非常用培养基：麦康凯培养基、沙门氏菌选择性培养基三、病料的选取和保存1、首选来自刚宰杀后的活畜禽或死后2-4小时内的畜禽2、得到病料后应该立即进行细菌分离，分离细菌前最长保存时间（在4℃冰箱内）最好不要超过3-4小时。
分离细菌前应将病料保存在4℃冰箱不得放入-20℃冰箱。
分离细菌后如需要根据细菌生长鉴定情况来决定病料用途（需再次接种、需再次触片、需接种动物等等）可先将病料暂存4℃冰箱，但不得超过2天。
一般情况下分离细菌后应及时将需长期保存的少量病料分装到塑料瓶中进行记录保存，多余的病料进行无害化处理。
四、分离路线1、选择分离细菌的目标脏器：根据疑似疾病和病理变化确定，一般选病变比较严重的脏器做为分离细菌的目标脏器，并选择脏器的病健交界处做为细菌分离的最终部位。
一头猪应该选择多个脏器或部位分离细菌。
并对不同部位细菌在整个疾病中的作用有一定的评价，如：心血中的细菌多为全身感染分布的病原；关节、肠道、创口、及肺脏则可能只是局部分布的细菌。
）2、分离细菌一般采用鲜血琼脂培养基划线培养、怀疑存在只能在巧克力培养基上且需要一定二氧化碳才能生长的细菌（如：副猪嗜血杆菌、传染性胸膜肺炎放线杆菌等）感染时、应同时采用巧克力培养基划线、放到烛缸进行培养。
划线时应该在做到无菌操作的前提下尽量取较大的一块组织或较多量的分泌物、先在培养基表面涂布一小片区域，然后弃去病料再用接种环从涂布区域开始进行划线。
这样一方面可保证分离到病料中的细菌，另一方面也能保证长出单个菌落为进一步鉴定提供方便，同时也为评价病料中细菌含量及不同细菌数量比例的评价提供依据。
如果病料来自病程较长或死亡动物且细菌种类复杂、难以确定病原菌的情况下、可考虑分离细菌的同时取病料接种小鼠、再从小鼠分离细菌，二者互为参考。
细菌检查结果实验报告
细菌检查结果实验报告
实验目的：
掌握细菌检查的基本实验方法，提高细菌检查的准确性和可靠性。
实验原理：
通过培养基的制备和处理，将待检样品中的细菌定性、定量，并采取相关手段进行分离鉴定。
实验材料：
1. 细菌培养基
2. 待检样品
3. 洗涤液
4. 离心机
5. 培养皿
6. 显微镜
7. 细菌计数器
实验步骤：
1. 处理待检样品：将待检样品加入适量洗涤液中，使用离心机将细菌沉淀；
2. 制备细菌培养基：根据实验需要，选择适当的培养基制备；
3. 接种培养基：将处理后的细菌沉淀悬浮液均匀地接种在培养
基表面，密封培养皿；
4. 培养细菌：将培养皿放入恒温培养箱中，设定适当的温度和培养时间；
5. 细菌计数：按照定量实验需求，使用细菌计数器统计细菌的数量；
6. 分离鉴定：根据实验要求，使用相关方法对细菌进行分离和鉴定；
7. 显微观察：将分离出的细菌悬液挤压在玻片上，利用显微镜观察细菌形态和结构。
实验结果：
1. 统计出细菌的数量；
2. 分离鉴定得出待检样品中存在的细菌种类；
3. 通过显微观察获得细菌的形态和结构特征。
实验讨论：
根据实验结果可以初步判断待检样品是否污染。
同时，进一步观察细菌的形态和结构特征可以推测细菌的特性和可能引发的问题。
实验结论：
通过本次实验，成功利用细菌计数、分离鉴定和显微观察等方法对待检样品中的细菌进行了定性、定量和形态结构的分析，提高了细菌检查的准确性和可靠性。
细菌分析鉴定实验报告
一、实验目的1. 学习细菌分离与培养的基本操作方法。
2. 掌握细菌形态观察、生理生化反应等方法在细菌鉴定中的应用。
3. 提高实验操作技能和微生物学基础知识。
二、实验原理细菌是微生物的一种，具有独特的形态、生理生化特性。
通过观察细菌的形态、生理生化反应等特征，可以鉴定细菌的种类。
本实验主要采用以下方法进行细菌分析鉴定：1. 形态观察：通过显微镜观察细菌的形态、大小、排列等特征。
2. 生理生化反应：通过测定细菌对特定底物的代谢产物、颜色变化等，判断细菌的生理生化特性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等标准菌株；土壤、水、食品等样品。
2. 仪器：显微镜、细菌培养箱、无菌操作台、酒精灯、接种环、培养皿、试管等。
四、实验方法与步骤1. 细菌分离与培养（1）将样品进行无菌处理，制成悬浊液。
（2）取适量悬浊液，分别接种于不同类型的培养基上，如营养琼脂培养基、伊红美蓝培养基等。
（3）将接种后的培养基放入细菌培养箱中，培养适宜时间。
2. 细菌形态观察（1）取适量培养好的细菌，制成悬浊液。
（2）在显微镜下观察细菌的形态、大小、排列等特征。
（3）记录观察结果。
3. 细菌生理生化反应（1）将培养好的细菌接种于不同类型的生理生化试剂中，如糖发酵试剂、吲哚试剂、甲基红试剂等。
（2）观察试剂颜色变化、沉淀形成等反应现象。
（3）记录观察结果。
五、实验结果与分析1. 细菌分离与培养实验结果显示，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等标准菌株在相应培养基上生长良好，形成典型的菌落。
2. 细菌形态观察显微镜下观察，金黄色葡萄球菌呈球形，单个或成对排列；大肠杆菌呈杆状，单个或成链排列；肺炎克雷伯菌呈球形，单个或成对排列。
3. 细菌生理生化反应金黄色葡萄球菌对葡萄糖发酵呈阳性，吲哚试验、甲基红试验等均呈阴性；大肠杆菌对葡萄糖发酵呈阳性，吲哚试验、甲基红试验等均呈阴性；肺炎克雷伯菌对葡萄糖发酵呈阳性，吲哚试验、甲基红试验等均呈阴性。
细菌培养分析报告
细菌培养分析报告一、引言细菌培养是生物学实验中常用的一项技术，通过在培养基中提供适宜的营养物质，利用适当的条件促进细菌的繁殖和生长。
本报告旨在通过对细菌培养过程进行分析，提供有关细菌生长特性和培养情况的详细信息。
二、实验方法1. 材料准备：准备所需培养基、细菌菌株和培养器材。
2. 培养基制备：按照配方准确称量各成分，加入适量的蒸馏水中，进行灭菌处理。
3. 细菌接种：采用无菌手技，将细菌菌株接种到培养基中，并进行标记。
4. 培养条件设定：根据细菌的需求，设定合适的培养条件，如温度、pH值、气氛等。
5. 培养过程监测：定期观察培养基的变化，记录细菌的生长情况。
三、实验结果经过几天的培养，我们对细菌生长情况进行了详细的观察和记录，并得出以下结果：1. 细菌菌落形态观察：根据菌落形态的不同特征，我们可以初步判断细菌属于哪个科属，如球菌、杆菌等。
2. 细菌菌落计数：通过对菌落的数量进行计数，我们可以了解细菌的繁殖速度和密度。
3. 细菌菌液测定：通过测量培养液中细菌的浓度，我们可以掌握细菌的生长曲线和最适生长条件。
4. 细菌形态观察：通过显微镜观察，我们可以了解细菌在培养基中的形态特征，如形状、大小、组织结构等。
5. 培养基变化观察：记录培养基的颜色、透明度、气味等变化，可以判断细菌是否产生代谢产物、产生酸碱性变化等。
四、讨论与分析根据实验结果，我们对细菌培养过程进行了讨论与分析，并得出以下结论：1. 细菌生长速度：根据菌落计数结果和细菌菌液测定数据，我们可以推测出细菌的生长速度以及最适生长条件。
比较不同条件下细菌生长的情况，可以进一步优化培养条件，提高细菌产量。
2. 细菌形态与功能关系：通过对细菌形态的观察和研究，我们可以了解到细菌的结构与其功能之间的关系。
例如，某些形态特殊的细菌可能具有特殊的代谢能力或者致病性。
3. 培养基变化分析：根据对培养基的变化观察，我们可以推断细菌在培养基中的代谢情况，如产生酸碱性变化可能与产酸菌的生长有关。
细菌培养的流程介绍
血培养是如何从标本中获得细菌培养及药敏报告的？1、常规的血培养标本需采集两管，一份为需氧菌培养，一份为厌氧菌培养。
血培养瓶为密封装置，其底部含有培养基、显色剂。
当血液标本中有细菌生长时，细菌会产生二氧化碳，二氧化碳可造成密封样本内气压和PH值的改变，显色剂也会变色。
因此血培养中获得阳性结果。
若培养5天后显色剂没有变化，则提示样本中没有细菌生长，血培养获得阴性结果。
2、血培养标本出现阳性结果后，采集少量血培养样本，在玻片上进行图片进行革兰染色进行初步鉴定，并向临床出具初步报告。
同时在培养皿中进行接种。
接种方法为分区划线法。
其原理是，在一个培养皿中，通过划线的方式将样本进行充分的不定量的倍比稀释，使得培养皿中生成可分离的单个细菌生成的单克隆菌落。
若不进行分区划线，培养皿中的菌落会非常密集，不便于挑取菌落进行鉴定，鉴定后向临床出具二级报告。
我院采用三区划线，某些医院要求高会采用五区划线，通常三区划线后就可获得有效的单克隆菌落。
培养皿中所使用的培养基会根据细菌的特征进行选择，常用的有普通“血琼脂培养基”、“巧克力培养基”。
某些特殊细菌需要特殊的培养基。
3、培养皿中获取单克隆菌落后，需要根据经验鉴定哪种细菌为优势菌，哪种细菌为致病菌，哪种细菌为定植菌。
选择致病菌进行再次培养，并将其定容为1个“麦氏浓度”。
此时开始进行药敏鉴定。
经典的药敏方法有2种。
1、倍比稀释法：将某种抗生素进行精确的倍比稀释，观察在哪种浓度的抗生素培养基中细菌会出现生长与不生长的交界。
此浓度为该种抗生素对该细菌的“最低抑菌浓度（MIC）”。
该方法虽然精确定量，但耗时耗力，一种抗生素需要配置多个浓度，一种细菌需要选择多种抗生素进行药敏鉴定，在此基础上，发展出“纸片法”。
2、纸片法：在固态培养皿中均匀进行细菌接种，以培养皿中心为界进行扇形分区。
将含有某种抗生素的纸片放在一个区域中，多个区域可以放置多种抗生素纸片，因此在一个培养皿中就可以对多种抗生素进行药敏鉴定。
细菌分离培养及鉴定
临床标本培养基选择
生殖道标本根据临床医生所写的检验项 目接种相应的平板及操作：
淋球菌培养接种淋球菌平板;念珠菌培养接 种沙保罗培养基；支原体培养则按《支原体培 养的操作规程》操作；作普通培养则接种血平 板和巧克力平板
观察细菌在平板上的生长现象
血平板：大小、形状、边缘、颜色、表 面、透明度、湿润度、黏度、溶血性 mac平板：大小、形状、颜色、透明度、 湿润度、黏度 巧克力平板：大小、形状、颜色、透明 度、湿润度、黏度
采集标本后立即送检！
标本接收原则
严格实行核对制度 ：包括姓名、性别、年
龄、门诊号/住院号、病床号、标本类型、容 器、标识、检验目的等。
所有拒收或退回标本均应在登记本上登 记，登记内容包括：病人姓名、病区、床号
送检医师、送检项目、拒收 ( 退回 ) 原因、拒收 时间、经手人等
痰标本涂片染色低倍镜下分类
抗酸染色注意事项
为防止交叉感染，标本先高压灭菌后再 涂片染色 染色充分 脱色时间宁长勿短 在涂抹痰标本时严禁对载玻片进行加热
临床标本培养基选择
血： 血培养瓶 中断尿：血平板、mac平板 脑脊液：血培养瓶、血平板、巧克力平 板 穿刺液：血培养瓶、血平板、巧克力平 板、mac平板 胆汁：血平板、巧克力平板、mac平板 大便:.麦康凯、SS、血平板
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片 干燥 固定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
革兰染色程序
初染 媒染 脱色 复染
冲洗
冲洗
冲洗
结晶紫 1’ 1’
冲洗
碘液 1’
95%乙醇 30” 复红
细菌的培养与鉴定方法
无菌操作技术要点
01
实验前需对实验室进行 彻底清洁和消毒，确保 无菌环境。
02
实验人员需穿戴无菌防 护服、手套、口罩等， 避免自身微生物对实验 的干扰。
03
无菌操作应在生物安全 柜内进行，确保实验操 作过程中不受外界微生 物的污染。
误差。在数据分析和报告撰写时，应充分考虑误差范围并给出合理的解释。 • 经验分享：在进行细菌培养与鉴定实验时，保持无菌操作是关键。此外，合理设计实验方案、选择合适的实验
方法和试剂也是提高实验成功率和准确性的重要因素。同时，及时记录实验过程和结果，以便后续分析和报告 撰写。
06
前沿技术展望与挑战
新型检测技术发展趋势
实验室应建立废弃物处理记录制度， 对废弃物的来源、种类、数量及处理 方式进行详细记录，以便于监管和追 溯。
05
结果分析与报告撰写 技巧
数据整理和分析方法
1 2 3
数据整理
将实验数据进行分类、归纳和整理，以便后续分 析。包括菌株生长情况、菌落形态、生化反应结 果等。
统计分析
运用统计学方法对实验数据进行处理，如计算平 均值、标准差、变异系数等，以评估数据的可靠 性和差异性。
支原体培养与鉴定
常用支原体培养基，37℃培养24-72小时，观察菌落形态和溶血现象 ，通过支原体特异性抗体进行鉴定。
04
实验操作规范及注意 事项
实验室安全规范
实验室人员必须严格遵守实验室安全规章制度，掌握基本的安全知识和操作技能。
实验室应配备必要的安全防护设施，如生物安全柜、防护服、护目镜等，确保实验 人员的安全。
核酸杂交技术
利用特异性核酸探针与待检细菌核酸进行杂交，通过检测杂交信 号鉴定细菌种类。
细菌病的实验室诊断流程
细菌病的实验室诊断流程
1、标本收集
实验室诊断流程的第一步是收集所要检测的标本，如尿样、血样、痰样或细胞等。
收集的标本必须是新鲜的，并必须完好无损。
2、分离或培养病原菌
获取的标本中可能含有多种病原菌，因此，需要进行培养及分离的工作来获取纯种的病原菌。
从医学的角度来讲，分离或培养出的病原菌必须是纯种的，以便于进一步的诊断。
3、鉴定病原菌
获取纯种的病原菌后，检测人员需要对病原菌进行鉴定。
检测病原菌通常采用生化组分分析、菌落形态分析、系统发育分析、菌属认定或DNA测序等技术，确定诊断标本中疑似病原菌的种属、生物学特性，以及它们的抗药性基因组布局等。
4、鉴定病原菌的抗药性
实验室鉴定的病原菌抗药性有助于医生选择更有效的抗药药物。
常用
的抗药性检测方法有ANTIBIOTIC DISCS试验和电泳膜扩散试验。
这些检测方法对不同的病原菌菌株，针对不同的抗生素，采取不同的实验条件，预测目标病原菌对一定抗生素的敏感性及耐受性。
5、细菌致病性诊断
在检测病原菌的抗药性后，为了更加准确地诊断病原菌的致病性，还需要采取更多的检测措施。
通常采用血清学检测或抗原免疫检测的方法，对标本中的抗原物质进行测定。
6、诊断报告
在进行完上述所有流程之后，检测人员最后会将检测结果写入报告，包括受检者的个人信息，标本收集、分离及鉴定流程，诊断结果及抗药性等内容，以便医生根据报告判断需要提供何种治疗方法，制定出更为有效和安全的治疗方案。
细菌的培养及鉴定
临床常见问题
痰涂片与痰培养结果不一致？ 培养和涂片选择的痰液不同；标本采 集时间过长，部分苛养菌死亡； 选择药敏结果敏感的药物，临床治疗无 效？ 体外药敏试验只能预测体内治疗效果， 并不等同；一般来说，耐药=治疗无效， 敏感≠治疗有效
今天培养结果与前天结果不一样？ 1）取材是否规范？ 2）痰标本有时候选择优势菌做，可能结果 不一样 3）抗生素的使用 鉴定结果为四联球菌、革兰阳性杆菌，为 何没有药敏结果？ 1）四联球菌为微球菌，一般不引起人体致 病，考虑为污染 2）革兰阳性杆菌目前没有参照标准，故暂 不做药敏试验，若需要治疗参考阳性球菌 用药
成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌 由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密， 故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小， 再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因 此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫 色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量 高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂 为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡 结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈 无色，再经复红等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌 呈红色。
细菌培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作
4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂
5.采样后立即送检
6.送检标本应注明来源和检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群
病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液
无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
2017/4/12
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⑵支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲 膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和
支气管肺泡灌洗法，均由临床医生按照相应操
作规程采集，但必须注意所采集标本尽可能避
免咽喉部正常菌群的污染。
⑶小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子
伸入咽部，小儿经压舌刺激咳ห้องสมุดไป่ตู้时，可喷出肺
部或气管分泌物粘在拭子上送检。
⒊分离培养
临床细菌培养鉴定常规报告流程
思考题
1、血培养阳性结果如何分级报告？ 2、如何根据尿液菌落计数分析尿培养结果 是感染还是污染？
医学微生物实验室基本条件及设备 医学微生物学检验的基本技术 临床各种标本的采集、分离培养及 报告方式
临床常见细菌的分离鉴定
一、医学微生物实验室基本条件及设备
4.结果报告 ⑴阳性结果报告 初级报告：阳性血培养结果非常重要，应该立 即口头报告给医生，包括革兰氏染色特性和形 态，疑似何种菌等。同时记录报告日期、时间、 内容以及接受报告人的姓名。 中级报告：报告直接抗菌药物敏感试验结果和 细菌种属的初步鉴定结果。 最终报告：报告细菌种属名和标准抗菌药物敏 感试验结果。 ⑵阴性结果报告 普通血培养3天无菌生长可报告为“72小时培 养未见细菌生长”但培养瓶要继续培养至7天， 如果发现有菌生长，可发补充报告，某些特殊 致病菌培养时间需延长。
（四）粪便 急性感染性腹泻可以由细菌、病毒及原 虫引起，实验室常规检查是细菌培养。 每种感染性腹泻的致病菌因其独特的致 病机理而引起一系列不同的典型症状， 这些症状和详细的病史能为诊断腹泻疾 病类型提供依据。因此，为了查找腹泻 病因，必须了解患者的病史即：症状、 发病时间、年龄、旅游史、进食情况和 使用抗菌素情况。
致病菌能够破坏宿主的防御系统，其致 病机理是细菌产生毒素和对人体组织的 侵袭性，值得注意的是有些细菌既具有 侵袭性又能产生毒素。抗生素治疗可以 破坏宿主的正常菌群，导致某些细菌如 艰难梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单 胞菌和念珠菌等过度生长，也可引起腹 泻。沙门氏菌、志贺氏菌、气单胞菌和 邻单胞菌应作为实验室常规培养的主要 腹泻病原菌。
⒋结果分析及报告
⑴结果分析 痰及下呼吸道分泌物标本易受到 定植在上呼吸道的正常菌群污染。当从送检标 本中分离出多种细菌时，确定那一种分离细菌 是引起下呼吸道感染的病原菌，这对临床诊断 与治疗至关重要。当在同一培养基上分离出1 种以上的病原菌（复合菌）时，要结合患者的 临床症状，涂片染色镜检情况及患者近期细菌 分离培养结果等，综合判断所分离的多种细菌 中那一种细菌可能为致病菌，通常多为优势菌。 当分离的优势菌与涂片染色镜检结果一致时， 要做药敏试验。若分离培养结果与涂片染色镜 检结果不一致时，可不进行药敏试验，以免误 导，仅报告分离鉴定结果，由临床大夫定夺是 否重试。
(2)报告方式 初步报告：在分离出细菌后，进行革兰 氏染色，作出初步报告。 最终报告：有意义的阳性结果报告，应 报告菌落计数、细菌种名及药敏结果。 无意义的阳性结果报告，报告菌落 数、革兰氏染色形态特征，并注明是纯 培养或是混合菌生长。 阴性结果报告:应报告无菌生长和菌落计 数＜1000cfu/ml或 ＜100cfu/ml尿。
（二）痰（即下呼吸道感染标本）
临床通常将正常人喉以上部位称为上呼吸道， 上呼吸道定植有大量的正常菌群，而气管以下 包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道，通常无 菌。下呼吸道感染包括急性气管～支气管炎、 慢性支气管炎急性发作，支气管扩张继发感染 及肺实质感染（肺炎、肺脓肿）等。病原体有 细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次 氏体和原虫等。 下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰， 痰呈脓性、粘稠或血性，是下呼吸道感染细菌 检查的主要标本。细菌学检验能明确感染病原， 并提供有关抗菌药物对分离菌的抗菌活性，有 助于疾病的治疗、流行病学调查研究和医院感 染的监测。
(三 ) 尿 尿路感染是指尿道内有大量微生物繁殖 而引起的尿路炎症。从肾脏排泌出来的 尿液正常情况下是无菌的，如果在尿液 中分离出细菌（排除污染因素）即为菌 尿，同时伴有感染症状者称为尿路感染。 根据感染部位可分为上尿路感染（肾盂 肾炎）及下尿路感染（膀胱炎），男性 还可出现前列腺炎。
1.尿中常见分离菌
(1) 痰标本培养前处理：不含或粘液很少的标 本可直接接种，遇有含大量粘液的标本，应加 入等量的液化剂（如PH7.6的10g/L胰酶溶液 等），放置35℃待充分液化再行接种 。亦可 加液化剂后搅拌混匀离心，取沉淀物接种。 ⑵一般细菌分离培养：将处理后的痰标本分 别划区接种于血平板(适用于分离肺炎链球菌 和其他细菌),巧克力平板(适用于分离嗜血杆 菌)和麦康凯/中国兰平板。巧克力平板需置5% 二氧化碳环境（无二氧化碳培养箱可用烛缸）， 35 ℃培养24小时后观察菌落形态，涂片染色， 挑取可疑纯菌落，做进一步鉴定。
2. 标本的采集与运送
⑴ 采血指征 一般患者出现以下体症时可作 为采血的重要指征：发热（≥38℃）或低温 （≤36℃ ）、寒战、白细胞增多（计数＞ 10000×109/L），特别有“核左移”未成熟的 或杆状核白细胞，皮肤黏膜出血，昏迷，多器 官衰竭，血压降低，CRP升高及呼吸快，特殊 患者（如血液病）出现粒细胞减少，（成熟的 多形核细胞＜1000×109/L ）血小板减少等， 或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症 应采集血培养。新生儿菌血症应该增加尿液和 脑脊液培养。最好在感染患者未进行系统性抗 菌药物治疗之前及时采集血培养。
基本设备
生物安全柜 孵育温箱（有条件的要有二氧化碳培养 箱） 显微镜 接种器具 冰箱、冰柜 高压灭菌设备 火焰灯
二、医学微生物学检验的基本技术
基本染色
基本接种方法
基本染色
主要用于形态学检查，因为形态学检查是鉴定
细菌的重要手段，有助于细菌的初步鉴别，
也是决定采用何种生化鉴定的重要提示。有 时通过形态学检查可得到初步诊断，如痰中 的抗酸杆菌和泌尿生殖器官分泌物中的淋病 柰瑟菌等，染色方法主要有革兰氏染色法，
抗酸染色法，鞭毛染色法，异染颗粒染色法，
墨汁荚膜染色法等。
基本接种方法 曲线划线法（又称连续划线法）、分区 划线法、棋盘格划线法、倾注平板法、 斜面接种法、穿刺培养法、液体培养基 接种法等。
三、临床各种标本的采集、分离培养及 报告方式
血（适用胸腹水）
痰
尿 便 脓
（一）
血
当微生物侵入血液迅速繁殖超出免疫系统清除这 些微生物的能力时形成菌血症或真菌血症。 1.血培养中常见的分离菌 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 凝固酶阴性葡萄球菌 肺炎克雷伯菌 肺炎链球菌 阴沟肠杆菌 A群B群链球菌 产气肠杆菌 肠球菌 伤寒沙门菌 绿脓杆菌 鲍曼不动杆菌
2.标本采集及运送 对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS，肺炭疽， 肺鼠疫等)的患者采集痰标本时必须注意生物 安全防护。 ⑴自然咳痰法（最常用的方法）：以晨痰为佳， 采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁 口腔和牙齿。尽可能在使用抗菌药物之前采集 标本，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐 入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口 带盖的容器中，标本量要≥1ml。标本要尽快 送检，不能及时送检的标本室温保存≤2小时。
革兰氏阳性菌 金黄色葡萄球菌 血浆凝固酶阴性葡萄球菌 肠球菌 A群链球菌 结核分支杆菌 念珠菌 革兰阴性菌 大肠埃希菌 克雷伯菌属 变形杆菌属 淋病奈瑟氏菌 肠杆菌属 假单胞菌属 罗威登菌属 沙雷菌属 不动杆菌属 假单胞菌属
⒉ 标本的采集与运送
⑴尿培养检查的临床指征(有下列情况之一者， 应进行尿培养） a.有典型的尿路感染症状 b.有肉眼脓尿或血尿 c.尿常规白细胞和/或亚硝酸盐阳性 d.不明原因的发热而无其他局部症状 e.留置导尿管的病人出现发热 f.膀胱排空功能受损 g.泌尿系统疾病手术前
1.呼吸道标本(痰)中常见的分离细菌
革兰氏阳性菌 草绿色链球菌，肺炎链 球菌，化脓性链球菌 表皮葡萄球菌 ,金黄色 葡萄球菌,其他葡萄球菌 微球菌，消化链球菌， 消化球菌 肠球菌 真杆菌，丙酸杆菌，乳 酸杆菌 放线菌，奴卡苗，结核 分枝杆菌 白喉棒状杆菌，类白喉 棒状杆菌 念珠菌 革兰氏阴性菌 韦荣球菌 脑膜炎奈瑟菌，其他奈 瑟菌 卡他莫拉菌 肺炎克雷伯菌及其他克 雷伯菌 沙雷菌，变形杆菌 大肠埃希氏菌及其他肠 杆菌科细菌 百日咳鲍特菌，不动杆 菌 铜绿假单胞菌及其他假 单胞菌属细菌 嗜肺军团菌，气单胞菌 流感嗜血杆菌，付流感 嗜血杆菌 拟杆菌，梭杆菌
⑵报告方式 由于检验结果报告的时效性，下呼吸道标 本细菌学检验结果分为初步和最终结果报告。 ▲ 初步报告：当标本涂片革兰氏染色细胞 学和细菌学镜检发现有临床诊断意义的结果时， 应及时发出描述性的初步报告。 ▲最终报告：镜检结果与分离培养结果相 一致时，最终报告规范的细菌名称和药敏试验 结果。若分离培养结果与镜检结果不一致时， 仅报告分离鉴定结果，不做药敏试验。若分离 培养未检出优势菌，可报“未培养出病原菌”。
3．分离培养 ⑴一般培养: 用定量接种环或无菌微量 加样器取尿液0.001ml或0.01ml(已使用 抗生素患者),接种于血平板和麦康凯/中 国兰平板,不能定量时需用倾碟法记数， 35～37℃培养18～24小时。 (2)特殊培养: 对临床要求真菌、淋病奈 瑟菌及结核菌等培养者，根据细菌所需 条件接种相应特殊培养基，放置相应条 件下进行培养。
⑵采血时间及采血量 采血培养应该尽量在使
用抗菌药之前进行，在24小时内采集2～3份血
培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视
为单份血培养）。对间歇性寒战或发热应在寒 战或体温高峰到来之前0.5～1小时，采集血液， 或于寒战或发热后1小时进行。成人采血量8～ 10ml，儿童1～5ml。血液和肉汤之比1：5 ～1：
细菌实验室
无菌实验室
基本设备
细菌实验室
细菌实验室是细菌检验的场所，在此完