小动物活体成像操作说明手册
BrukerXtreme多模式小动物活体成像系统吴伟全
四、拍摄成像
3. X光拍摄
X光拍摄参数如下：
参数设置好后，点击
拍摄，点击左侧的
按钮保存文件。
四、拍摄成像
4.白光拍摄
白光拍摄参数设置如下：
参数设置好后，点击 拍摄，点击左侧的
按钮保存文件。
五、图片处理 在软件中打开要处理的图片
点击软件顶部的菜单栏中
按钮，打开图像显示面板，点击display按钮下拉列 表选择不同的伪彩显示，拖动下部的滑条或改变数 值大小调节图像显示的最大最小值，达到最佳的显 示效果。
日常保养及注意事项
➢ 开放时间：周一至周五，上午8:00-12:00，下午2:30-5:30 ➢ 使用实行网上预约制度，可以提前一周预约。（即周一早
上8:00开始可预约下周周一到周五） ➢ 若因故未能使用，请务必与前一日事先告知取消。 ➢ 测试中或完毕时，若有异常情况，请报告仪器管理人员确
认仪器的状况。
动物或器官 结构清晰 无功能信息
Bruker Xtreme多模式小动物活体成像系统的基本操作 一、开机步骤
1.打开X光的电源（仪器前面上部），钥匙由 “Power Off” 转到“ON” 2.打开主机电源（仪器背面下部的）
3.打开电脑
二、CCD降温到工作温度
1.双击“
”图标打开软件
2.单击软件左上角的“
Bruker Xtreme 多模式小动物活体成像系统
Bruker Xtreme多模式小动物活体成像系统简介
Bruker Xtreme多模式小动物活体成像系统简介
Bruker Xtreme多模式小动物活体 成像系统是集多种成像模式（发光成 像、荧光成像、X光成像）于一体的 精密科研仪器，具有最多的成像模式、 最高的灵敏度、最高的分辨率和最快 的成像速度，可直观观察科研结果在 小动物活体中的变化，与分子研究和 细胞研究相佐证，使研究结果更加科 学严谨。
小动物活体荧光成像生物发光实验步骤
小动物活体荧光成像生物发光实验步骤随着生物学技术的不断发展，活体荧光成像技术已经成为了研究生物体内生物学过程的重要手段之一。
通过活体荧光成像技术，研究人员可以实时观察到小动物体内的生物发光信号，揭示生物体内的分子过程和疾病发生的机制。
以下是一般小动物活体荧光成像生物发光实验的步骤，供感兴趣的研究人员参考。
实验材料准备1. 小动物：选择适合的实验小动物，例如小鼠或斑马鱼等。
2. 荧光成像仪：选择适合的活体荧光成像仪器，以保证实验成像的清晰度和准确性。
3. 示踪剂：根据实验需要选择合适的荧光示踪剂，例如荧光蛋白或荧光染料等。
4. 外源激发源：准备合适的外源激发源，用于激发小动物体内的荧光信号。
实验操作步骤1. 实验前准备：将实验用小动物按照规定的操作流程进行麻醉或固定，以保证实验操作的安全性和准确性。
2. 示踪剂注射：根据实验设计，将选定的荧光示踪剂通过适当的途径注入小动物体内，可以是静脉注射、腹腔注射等。
3. 示踪剂激发：在示踪剂注射后，根据实验需要，使用外源激发源对小动物体内的荧光示踪剂进行激发，激发的光源要根据示踪剂的激发波长进行选择。
4. 荧光成像：使用荧光成像仪器对小动物体内的荧光信号进行实时观测和成像，在观测过程中要注意调节成像仪器的参数，以保证成像的清晰度和信号的准确性。
5. 数据分析：实时观测并记录荧光成像的数据，根据实验设计进行数据分析和结果统计，揭示小动物体内的生物发光信号的分布和强度变化。
注意事项1. 实验操作要严格按照规定的操作流程进行，确保实验的准确性和可重复性。
2. 在注射示踪剂和激发荧光信号的过程中，需要注意对小动物的生理状况和实验操作的影响，以减少对小动物的伤害和干扰。
3. 荧光成像过程中要注意对成像仪器的参数进行调节，以获得清晰准确的荧光信号成像数据。
4. 在数据分析过程中，要根据实验设计进行结果的统计和分析，确保实验结果的科学性和可信度。
5. 实验结束后要对小动物进行恢复和护理，确保小动物的健康和安全。
cy染料小动物活体成像操作流程
cy染料小动物活体成像操作流程2017/4/13吲哚花菁绿(ICG，indocyanine green)是经过FDA认证的菁染料，出于安全考虑，后期应用于活体（人、动物、细胞）的染料在结构上都和ICG有相似或相近之处。
cy系列染料是Amersham公司（目前为GE公司）最初开发的染料体系，它的桥环由苯并吲哚变为吲哚环，并在吲哚的苯环上对称地引入硫酸根基团，水溶性得到很大改善，分子量降低后对大分子的亲和力有所增加。
cy系列菁染料多带有羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS ester)、异硫氰酸酯(NCS)等活性基团，可与蛋白质、多肽、DNA或其他生物分子中的羟基、氨基或巯基以化学键的方式键合，表征生物分子的特性，形成具有生物功能的标记衍生物，广泛被用于抗体、多肽、小分子等多种荧光探针的合成中，可以说是目前使用最为广泛的一类近红外染料。
cy染料应选择GE、李记生物等公司产品，化工企业提供的cy染料产品，一般不作为活体成像使用。
一、Cy染料在活体成像的应用领域1. 标记特异性抗体在CY菁染料标记蛋白的研究中，除了牛血清白蛋白以外最先开始涉及的功能性物质是抗体。
从起初与IgG结合，用荧光光纤免疫传感器(FFOI，fluorescent fiber-optic immunosensor)考察抗原抗体反应，到现在连接特异性的单克隆抗体片段，对动物全身进行免疫荧光显影，分析片段在体内的分布代谢情况。
分析cy-抗体复合物在不同时间不同器官中的荧光强度变化，可对抗体的靶向性、清除率等有更直观的评价。
不过，染料抗体衍生物在降低背景噪音和非特异性吸附方面还有待进一步完善。
2. 标记特异性多肽(Conjugating to peptides)在肿瘤诊断和治疗中，与菁染料衍生物结合的多肽主要有两种：其一是针对肿瘤表面过量表达的受体；另一种则针对肿瘤相关酶类。
前者的报道很多，如生长激素抑制素、表皮生长因子，甚至一些特殊设计过的短肽，都可以被用来靶向结合肿瘤，现在更趋向于一些只有十几个氨基酸的环肽，因为它分子量小易于接近肿瘤部位，且呈环状构形不易被分解。
小鼠活体成像实验步骤
小鼠活体成像实验步骤引言小鼠活体成像是一种非侵入性的技术，可以用于研究小鼠的生理和疾病过程。
该技术结合了光学、荧光和成像学等多种技术，通过对小鼠进行荧光成像或生物发光实验，可以观察和定量评估小鼠内部器官的功能和病变情况。
本文将介绍小鼠活体成像实验的步骤和常用技术。
实验步骤步骤一：准备工作在进行小鼠活体成像实验前，需要进行一些准备工作：1.小鼠选择：选择适合实验的小鼠株系和个体。
要考虑小鼠的年龄、性别、体重等因素。
2.药物和探针准备：根据实验需求选择合适的药物和探针，并按照说明书进行准备。
3.仪器和设备准备：确保实验所需的成像仪器和设备正常工作，如荧光显微镜、全身小动物成像仪等。
4.实验环境准备：保持实验环境的清洁和稳定，控制温度、湿度和光照等因素。
步骤二：小鼠麻醉和固定1.麻醉小鼠：根据实验需求选择适当的麻醉方法。
常用的麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉。
全身麻醉常用的药物包括异氟醚、七氟醚等；局部麻醉常用的药物包括利多卡因等。
根据药物的剂量和给药途径麻醉小鼠。
2.固定小鼠：将麻醉后的小鼠固定在成像台上，可使用专用的小动物固定装置。
固定小鼠的目的是为了减少动物活动对成像结果的影响。
步骤三：探针给药和荧光探针成像1.探针给药：根据实验需求选择适当的荧光探针，并根据药物说明书的建议给予小鼠给药。
常用的探针有荧光染料、荧光蛋白等。
探针给药的剂量和给药途径根据实验需要确定。
2.荧光探针成像：根据实验需求选择合适的成像仪器和设备进行荧光探针成像。
常用的成像仪器有荧光显微镜、全身小动物成像仪等。
根据实验要求选择合适的成像方式，如单光子或多光子成像。
步骤四：数据分析和结果呈现1.数据分析：将荧光成像得到的数据导入相应的数据分析软件进行分析。
根据实验目的和假设选择合适的统计方法和分析技术，如图像分割、定量分析等。
将得到的荧光信号定量化，得到所需的数据结果。
2.结果呈现：根据数据分析得到的结果，可以使用图表、统计分析等方式进行结果呈现。
小动物活体成像操作说明手册
小动物活体成像操作说明手册第七部分操作7.1准备程序图7.1麻醉准备程序在开始麻醉程序之前，做一些准备程序可以帮助实验顺利进行，请参看图7.1 1) 请把不用的出气口用特制的黑色橡胶塞塞住。
(PN10168) 2) 把锥形通气口的位置对准。
3) 在麻醉程序开始前对照图片确保出气支管位置正确。
4) 确认气体循环管没有打结阻塞和松动。
5) 确认蒸发器内有足够的乙氟醚(Isoflurane)，如果需要注入请参看下一节。
7.2蒸发器注入程序警告:不能在正在进行氧气供应时向蒸发器内灌注液体乙氟醚(Isoflurane)。
注入前，关闭供应打开前面板上两个阀门开关监视流量计。
当流量球在指示管中的底部保持不动时说明已无气体流动，此时可以进行注入。
警告:只有当蒸发器控制旋钮处于关的位置才可以进行注入，在注入过程中不能打开任何氧气供应。
警告:只能使用乙氟醚(Isoflurane)不要使用其它麻醉气体，使用其它麻醉剂可能会导致危险。
警告:在处理剩余的麻醉剂时实验室要具备良好的通风条件，建议遵照已公布的安全条例进行操作，当丢弃剩余的乙氟醚(Isoflurane)时使用蒸发器使用手册上推荐的合适的化学容器。
警告:使用时XGI,8麻醉系统要保持直立状态。
蒸发器注入步骤1) 如图7.2所示，确保氧气供应被切断，可以在源头或减压阀处关掉它。
2) 如图7.3所示，确保蒸发器开关处于关的位置。
3) 打开两个前面板的阀门开关释放XGI,8的氧气，如图7.4所示可以看到阀门处于打开位置，流量计指示氧气已放完后，关闭这两个阀门开关。
4) 反时针旋转卸掉蒸发器的螺丝帽(如图7.5)。
确认试剂是乙氟醚(Isoflurane)，缓慢的倒进灌入口，透过玻璃指示窗随时观察乙氟醚(Isoflurane)的水平线，注意不要超过最大允许线。
如图7.6所示。
5) 注意:如果蒸发器在灌注前是干的，水平线在开始会轻微下落因为内部的棉芯会吸收一部分试剂。
6) 当乙氟醚(Isoflurane)达到玻璃指示窗上的最大标线时，表明蒸发器已灌注满。
活体成像技术操作流程
活体成像技术操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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小动物活体成像技术的原理及操作方法
小动物活体成像技术的原理及操作方法小动物活体成像技术是一种用于非侵入性的观察小动物体内活动的技术。
它可以通过显影小动物的生物分子、细胞、组织、器官以及整体结构，从而获取关于它们的形态、功能和代谢信息。
在医学研究、药物研发和临床诊断中，小动物成像技术具有重要的应用价值。
1.光学成像：光学成像是利用光线通过生物组织时的散射和吸收特性来观察和记录组织的形态和功能。
这种技术包括荧光成像、双光子显微镜、光声成像等。
其中，荧光成像是利用特定的分子标记物与目标分子结合后的荧光信号进行成像，而双光子显微镜则采用长波长激光来更深入地穿透生物组织进行成像。
2. 核磁共振成像（MRI）：MRI利用静磁场和脉冲磁场来获取生物组织的形态和功能信息。
其原理是通过对核自旋在静磁场中的预cession以及脉冲磁场的激发和接收来获取信号，并通过计算重建成图像。
3.正电子发射断层扫描（PET）：PET利用放射性同位素标记的生物分子来观察和记录生物组织的代谢、功能和分布情况。
其原理是标记荧光物质与目标分子发生放射性衰变并释放正电子，然后通过正电子与电子相遇并发生湮灭反应，产生两个光子，再通过和PET仪器接收器相遇并形成探测信号，最终通过计算重建出成像。
1.选择合适的动物模型：根据实验目的和需要，选择适合的小动物模型，例如小鼠、大鼠等。
确保动物的健康和生理状况符合实验要求。
2.准备适当的标记物：根据研究需求，选择合适的标记物。
标记物可以是荧光染料、放射性同位素、磁共振对比剂等，用于标记目标分子或组织。
3.标记物注射或给药：将选择的标记物进行注射或给药，使其能够与目标分子或组织结合。
4.成像设备设置：根据实验要求，将成像设备进行适当的设置，例如调整光源、控制磁场强度等。
5.成像操作：对标记物注射或给药后的小动物进行成像操作。
操作过程中可以根据需要调整成像参数，如曝光时间、扫描时间等。
6.数据分析和解释：对成像结果进行数据分析和解释，提取关键信息，评估实验效果，并与其他实验数据进行比较和验证。
小动物活体成像系统安全操作及保养规程
小动物活体成像系统安全操作及保养规程1. 引言小动物活体成像系统是一种常见的实验设备，广泛应用于生命科学研究领域。
为了确保设备的正常运行和延长设备使用寿命，正确的安全操作和定期的保养是必不可少的。
本文将详细介绍小动物活体成像系统的安全操作注意事项和保养规程，以确保操作人员和设备的安全以及保持设备的稳定性。
2. 安全操作注意事项在使用小动物活体成像系统时，应注意以下事项：2.1 设备安装和运输•在安装设备前，必须确保安装地点的电源和其他电气设备符合安全要求。
•在设备运输过程中，应轻拿轻放，避免碰撞和剧烈晃动，以免造成设备损坏。
2.2 电源和电气连接•在接通电源前，必须确保设备的电源开关处于关闭状态。
•插拔电源线时，应先将电源开关关闭，并按照正确的操作顺序进行。
2.3 操作须知•操作前，请仔细阅读设备的使用说明书，并根据熟悉设备的功能和操作流程。
•在使用设备时，请遵循实验计划和操作流程，避免不必要的操作失误。
•操作人员应佩戴适当的个人防护装备，如实验手套、实验服等。
2.4 软件操作•在使用软件前，请确保计算机已安装了相应的驱动程序和软件，且具备正常的运行环境。
•在操作软件时，请勿随意修改系统配置和参数设置，以免影响设备的正常运行。
2.5 设备维护•在维护设备时，必须先断开电源，以确保操作的安全性。
•定期清洁设备表面和光学部件，使用干净的软布擦拭，禁止使用有机溶剂。
•避免设备长时间处于高温、潮湿和震动环境中，以防止设备损坏。
3. 保养规程为了保持小动物活体成像系统的正常性能和延长设备使用寿命，需要进行定期的保养工作。
以下是一些常见的保养规程：3.1 定期检查•每个月定期检查设备的电源线和连接线是否磨损或损坏，如有磨损或损坏应及时更换。
•每个月定期清洁设备的滤镜和传感器，以确保成像质量。
3.2 定期校准•每半年定期校准设备的曝光时间和成像参数，以确保数据的准确性。
3.3 防尘措施•使用设备时，应尽量避免灰尘进入设备内部。
小鼠活体成像实验步骤
小鼠活体成像实验步骤一、引言小鼠活体成像是一种非侵入性的技术，可以用于研究小鼠的生理和病理过程。
该技术可以通过对小鼠进行荧光成像、放射性成像和磁共振成像等方式来观察小鼠内部的生物学活动和分子信号。
本文将介绍小鼠活体成像实验的步骤。
二、实验前准备1. 小鼠准备：选择符合实验要求的小鼠，如性别、年龄、体重等。
2. 设备准备：根据实验需要准备相应的设备，如荧光显微镜、放射性仪器或磁共振成像仪。
3. 样品制备：根据实验需要制备样品，如荧光探针或放射性标记物。
4. 实验环境：保持实验环境稳定，如温度、湿度和气味等。
三、荧光成像实验步骤1. 选择适当的荧光探针：根据要研究的生物学过程选择适当的荧光探针。
2. 注射荧光探针：将选定的荧光探针注射到小鼠体内，通常是通过静脉注射或皮下注射。
3. 荧光成像：将小鼠放在荧光显微镜中进行荧光成像，观察荧光信号的强度和分布情况。
四、放射性成像实验步骤1. 选择适当的放射性标记物：根据要研究的生物学过程选择适当的放射性标记物。
2. 注射放射性标记物：将选定的放射性标记物注入小鼠体内，通常是通过静脉注射或皮下注射。
3. 放射性成像：将小鼠放在放射性仪器中进行放射性成像，观察放射性信号的强度和分布情况。
五、磁共振成像实验步骤1. 选择适当的磁共振对比剂：根据要研究的生物学过程选择适当的磁共振对比剂。
2. 注入磁共振对比剂：将选定的磁共振对比剂注入小鼠体内，通常是通过静脉注射或皮下注射。
3. 磁共振成像：将小鼠放在磁共振成像仪中进行磁共振成像，观察磁共振信号的强度和分布情况。
六、实验注意事项1. 小鼠的选择要符合实验要求，如性别、年龄、体重等。
2. 实验设备要保持稳定，特别是在荧光成像和放射性成像实验中。
3. 样品制备要严格按照操作规程进行，以确保实验结果的准确性和可靠性。
4. 实验环境要保持清洁卫生，以避免外界干扰对实验结果的影响。
5. 实验过程中要注意小鼠的福利和健康，如给予足够食物和水，并定期检查小鼠的健康状况。
小动物活体成像技术的原理及操作方法
小动物活体成像技术的原理及操作方法小动物活体成像技术（In vivo Imaging）是一种非侵入性的影像学检测方法，能够实时观察小动物体内生物过程的变化。
这种技术被广泛应用于药物研发、疾病研究、肿瘤学以及神经科学等领域。
以下将详细介绍小动物活体成像技术的原理及操作方法。
原理：小动物活体成像技术主要依赖于生物标记物的发光或吸收特性，将其转化为可见光、近红外光或射线信号进行成像。
常见的活体成像方法包括生物发光成像（Bioluminescence Imaging, BLI）、荧光成像（Fluorescence Imaging, FLI）、放射性同位素成像（Radionuclide Imaging）以及磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging, MRI）等。
生物发光成像是应用广泛的一种小动物活体成像技术。
其基本原理是使用生物荧光标记物的荧光发射来观察对象的生物过程。
一般情况下，研究者将荧光标记物（例如荧光蛋白）合成到感兴趣的生物分子（例如蛋白质或细胞）中，然后用荧光成像仪观察荧光发射。
这种方法由于操作简便、解析度高以及成本相对较低而得到广泛应用。
操作方法：1.设计实验：在进行活体成像前，研究者需要设计合适的实验方案。
这包括选择适合的动物模型、确定使用的荧光或射线标记物、考虑成像时间点以及确定成像区域等。
2.准备动物：在进行成像前，需要准备适当的小动物（如小鼠或兔子）并保证其健康状态。
动物应该经过严格的饲养和管理，以确保成像结果可靠。
3.注射标记物：根据实验设计，将合适的标记物注射到小动物体内。
标记物可以是荧光蛋白、放射性同位素或磁性荧光探针等。
注射可以通过尾静脉注射、腹腔注射或皮下注射等方式进行。
4.成像操作：根据实验需求使用相应的成像设备进行成像。
不同的成像技术有不同的操作要求，例如生物发光成像需要使用荧光成像仪，而放射性同位素成像则需要使用放射性同位素摄像机。
5.数据获取与分析：进行成像后，需要对获得的数据进行分析和解释。
perkinelmer活体光学成像操作规程sop
perkinelmer活体光学成像操作规程sopperkinelmer是一家全球领先的生命科学与分析技术公司，其产品广泛应用于生命科学、诊断、食品安全等领域。
其中，perkinelmer活体光学成像技术（in vivo optical imaging）是一项创新的技术，可以用于研究动物的生理功能和疾病模型。
但是，使用这项技术需要严格遵守操作规程（SOP）以确保实验的安全性和有效性。
以下是perkinelmer活体光学成像操作规程SOP的步骤：第一步：实验前准备1. 确保实验室环境干净、整洁，减少任何可能对实验造成干扰的因素；2. 准备好所需的仪器和试剂，包括活体成像仪、小动物（如小鼠、大鼠）等；3. 穿戴实验室工作服、手套、口罩等个人防护用品，避免因为环境中的污染物造成实验结果的影响；4. 检查活体成像仪的电源、灯光等是否正常，确保仪器工作正常。
第二步：动物实验1. 选择适合的动物模型，如选择能够表达荧光标记分子的小鼠等；2. 在动物体内注射相应的分子探针，如荧光探针、放射性探针等；3. 根据实验需要，选择相应的成像方法，如荧光成像、放射性成像等；4. 通过活体成像仪对注射荧光探针/放射性探针的动物进行成像，记录相应的数据。
第三步：数据处理与分析1. 将活体成像仪采集到的数据导出到计算机上，进行相应的图像处理；2. 对成像结果进行分析，如鉴定特定的荧光信号、计算放射性标记的数量等；3. 保存数据、图像和分析结果，以备后续参考或分享。
需要注意的是，在进行perkinelmer活体光学成像实验过程中，应严格控制实验环境，避免任何可能影响实验结果的干扰，如温度、噪音、光线和振动等，同时，还要遵守相关的伦理、法律法规。
每位实验人员在进行实验前，应该熟悉并遵守规定的实验操作规程（SOP），确保实验的安全性和有效性。
小动物成像系统FXPro说明书
小动物成像系统FXPro说明书多模式小动物活体成像系统型号：DXS4000pro生产厂家：美国柯达成像功能：多波长荧光成像；生物学发光成像，X 光成像，同位素成像，兼容体外凝胶，蛋白胶分析等。
小动物活体成像操作步骤： 1、开主机电源、除湿机电源2、开X 光机电源3、开电脑电源4、等待20-30分钟，等仪器CCD 降温到-29℃-30℃度。
5、打开拍照软件carestream MI ，点击下方File 下方的Capture In-Vivo FX Pro ，弹出曝光程序界面。
在setting 处输入自定义文件名，如果已保存曝光程序，请直接选择相应设置。
6、在设置好参数后，点击Expose 进行曝光，也可以设定参数前通过Preview 来优化参数。
7、麻醉动物，放透明垫片在动物托盘上，将动物放到托盘上，先白光调节，确定f-stop 、focus 、FOV 、binning 等值，各参数调节到最佳模式。
8、选择想要的拍照模式（荧光成像、生物学发光、X 光、同位素），拍照。
9、通过Image display 工具条进行处理，可进行反转色调整，饱和度显示，图像明暗度的调整。
点击简化界面上的+号，可将界面扩展，在扩展界面可以对图像进行更多的处理，包括对比度调节，伪彩添加，设置信号阈值，图像叠加等。
保存图片10、图像伪彩添加：在扩展界面中点击display ，在下拉菜单中选择自己喜欢的伪彩格式。
11、图像对比度调节：通过调节对比度的红绿蓝三个方块来调节图像对比度。
12、图像信号阈值的设定：将鼠标放置到信号中央位置，观察下方信号强度数字显示，然后在信号边缘观察信号强度，然后手动输入信号的最大最小值，也可以点击Max 按钮，鼠标变成圆形，再将鼠标移动到信号最大区域位置，单击鼠标左键确定。
同样的放啊设定信号最小区域。
13、图像的叠加：讲扩展界面的overlay 打勾，选择两张overlay 的图片，一般是将荧光、生物发光、同位素成像与X-ray 或者white 进行overlay ，先把钱一张图像设置为transparence ，再将overlay 打勾，还可以同时将blink 打勾，这样可以看到重叠图像不断闪烁。
Bruker InVivo Xtreme小动物活体成像系统标准操作规程
Bruker In-Vivo Xtreme小动物活体成像系统标准操作规程【目的】通过制定本操作规程,规范小动物活体成像系统使用。
【准备】1、实验试剂(药物、染料、麻醉剂、水、脱毛膏等);2、实验对象(小鼠、大鼠、黑鼠、裸鼠等);3、如需要气体麻醉则要进行氧气准备,将麻醉剂倒入麻醉机中,并检查麻醉机检查窗中液位位于“min”与“Max”之间;气体麻醉前根据室内温度情况酌情打开动物空气加热器。
【开机】主机部分:1、打开X-Ray光源,将开关钥匙打到“ON”的位置;2、打开主机,将主机右后方的电源开关打到“ON”的位置。
接着打开电脑,等待网线图标出现一个黄色三角叹号后,将MI软件打开。
注意:仪器开机以后,需要大约20分钟的预冷时间。
附属部分:1、如需要进行气体麻醉,则需要打开麻醉机,并对实验对象进行预麻醉;2、如果需要进行三维旋转拍摄,则需准备动物旋转系统(MARS),动物旋转系统的准备需要在不开拍摄软件与MARS控制器按钮打到manual的情况下,先按要求将旋转器安装到暗箱中,然后将按钮打到auto,完成之后即可打开MI软件【拍照】1、将实验对象摆放到托盘中,拍照部位朝下,如拍摄腹部影像,需将实验对象腹部朝下,并将四肢伸展开,然后将托盘放入暗箱拍摄位置,放置就是托盘缺口朝右侧摆放;2、双击桌面MI图标,打开MI软件,单击“Capture”按钮,打开拍摄参数设置界面;1):拍摄界面顶部显示仪器型号。
MI软件提供同时拍摄两张图像的功能,即第一张图像就是Foreground,主图像,第二张图像就是Background,背景图像。
点击Foreground与Background按钮进行切换,对两张图像的拍摄程序分别进行编辑。
2):左边第一部分File里可以执行与创建、编辑修改一个Protocol,同时,Protocol还可以通过点击软件顶部的工具栏中Protocol按钮打开。
3):第二部分就是选择拍摄模式,共有5种,分别为Fluorescence荧光,Luminescence化学发光,Radioisotopix同位素,X-Ray X光,Reflectance反射光,另外可以Custom定制程序。
小动物活体成像安全操作及保养规程
小动物活体成像安全操作及保养规程
前言
为了保障小动物的健康和安全，以及人员的健康和安全，本文档旨在提供小动物活体成像的安全操作规程和仪器保养规程。
请仔细阅读本文档，并在实验过程中遵循规程和操作要求。
安全操作规程
1.实验室内严禁吸烟、喝饮料和食物。
2.操作仪器前，应仔细阅读使用说明书和本文档，并进行必
要的培训和指导。
3.操作前应了解所使用的小动物的基本情况，包括体重、身
体状况、品种等。
4.操作前应检查仪器是否损坏，如有损坏应及时通知维修人
员。
5.使用仪器时应戴手套和口罩，避免直接接触小动物和避免
呼吸小动物分泌物或气体。
6.操作前应将小动物进行安全固定，避免移动，减少可能的
安全事故。
7.操作中应监测小动物的呼吸、心跳、体温等，如发现异常
应及时停止操作，咨询专业人员。
8.操作后应认真清洁仪器和小动物固定设备，避免二次污染
和交叉感染。
仪器保养规程
1.定期清洁仪器，避免灰尘积累和影响成像质量。
2.定期更换仪器滤镜和光源，保证成像质量和可靠性。
3.定期校准仪器，保证成像数据准确性和稳定性。
4.仪器不适用时应及时关闭电源，并存放在干燥通风处，避
免雨淋和阳光直射。
5.定期检查仪器配件是否完整，如发现损坏和丢失应及时修
复或更换。
结语
小动物活体成像作为一种非常重要的生物检测手段，在实验中得到了广泛的应用。
为实验人员提供安全的操作环境和保养规程，进一步保障实验的科学性和有效性，也为实验人员自身的健康和安全提供了充分的保障。
感谢您的耐心阅读和合作。
小动物成像系统FXPro说明书
多模式小动物活体成像系统型号：DXS4000pro生产厂家：美国柯达成像功能：多波长荧光成像；生物学发光成像，X 光成像，同位素成像，兼容体外凝胶，蛋白胶分析等。
小动物活体成像操作步骤： 1、 开主机电源、除湿机电源2、 开X 光机电源3、 开电脑电源4、 等待20-30分钟，等仪器CCD 降温到-29℃-30℃度。
5、 打开拍照软件carestream MI ，点击下方File 下方的Capture In-Vivo FX Pro ，弹出曝光程序界面。
在setting 处输入自定义文件名，如果已保存曝光程序，请直接选择相应设置。
6、 在设置好参数后，点击Expose 进行曝光，也可以设定参数前通过Preview 来优化参数。
7、 麻醉动物，放透明垫片在动物托盘上，将动物放到托盘上，先白光调节，确定f-stop 、focus 、FOV 、binning 等值，各参数调节到最佳模式。
8、 选择想要的拍照模式（荧光成像、生物学发光、X 光、同位素），拍照。
9、 通过Image display 工具条进行处理，可进行反转色调整，饱和度显示，图像明暗度的调整。
点击简化界面上的+号，可将界面扩展，在扩展界面可以对图像进行更多的处理，包括对比度调节，伪彩添加，设置信号阈值，图像叠加等。
保存图片10、 图像伪彩添加：在扩展界面中点击display ，在下拉菜单中选择自己喜欢的伪彩格式。
11、 图像对比度调节：通过调节对比度的红绿蓝三个方块来调节图像对比度。
12、 图像信号阈值的设定：将鼠标放置到信号中央位置，观察下方信号强度数字显示，然后在信号边缘观察信号强度，然后手动输入信号的最大最小值，也可以点击Max 按钮，鼠标变成圆形，再将鼠标移动到信号最大区域位置，单击鼠标左键确定。
同样的放啊设定信号最小区域。
13、 图像的叠加：讲扩展界面的overlay 打勾，选择两张overlay 的图片，一般是将荧光、生物发光、同位素成像与X-ray 或者white 进行overlay ，先把钱一张图像设置为transparence ，再将overlay 打勾，还可以同时将blink 打勾，这样可以看到重叠图像不断闪烁。
cy染料小动物活体成像操作流程
cy染料小动物活体成像操作流程2017/4/13吲哚花菁绿(ICG，indocyanine green)是经过FDA认证的菁染料，出于安全考虑，后期应用于活体（人、动物、细胞）的染料在结构上都和ICG有相似或相近之处。
cy 系列染料是Amersham公司（目前为GE公司）最初开发的染料体系，它的桥环由苯并吲哚变为吲哚环，并在吲哚的苯环上对称地引入硫酸根基团，水溶性得到很大改善，分子量降低后对大分子的亲和力有所增加。
cy系列菁染料多带有羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS ester)、异硫氰酸酯(NCS)等活性基团，可与蛋白质、多肽、DNA或其他生物分子中的羟基、氨基或巯基以化学键的方式键合，表征生物分子的特性，形成具有生物功能的标记衍生物，广泛被用于抗体、多肽、小分子等多种荧光探针的合成中，可以说是目前使用最为广泛的一类近红外染料。
cy染料应选择GE、李记生物等公司产品，化工企业提供的cy染料产品，一般不作为活体成像使用。
一、Cy染料在活体成像的应用领域1. 标记特异性抗体在CY菁染料标记蛋白的研究中，除了牛血清白蛋白以外最先开始涉及的功能性物质是抗体。
从起初与IgG结合，用荧光光纤免疫传感器(FFOI，fluorescent fiber-optic immunosensor)考察抗原抗体反应，到现在连接特异性的单克隆抗体片段，对动物全身进行免疫荧光显影，分析片段在体内的分布代谢情况。
分析cy-抗体复合物在不同时间不同器官中的荧光强度变化，可对抗体的靶向性、清除率等有更直观的评价。
不过，染料抗体衍生物在降低背景噪音和非特异性吸附方面还有待进一步完善。
2. 标记特异性多肽(Conjugating to peptides)在肿瘤诊断和治疗中，与菁染料衍生物结合的多肽主要有两种：其一是针对肿瘤表面过量表达的受体；另一种则针对肿瘤相关酶类。
前者的报道很多，如生长激素抑制素、表皮生长因子，甚至一些特殊设计过的短肽，都可以被用来靶向结合肿瘤，现在更趋向于一些只有十几个氨基酸的环肽，因为它分子量小易于接近肿瘤部位，且呈环状构形不易被分解。
perkinelmer活体光学成像操作规程sop
perkinelmer活体光学成像操作规程sop 本操作规程旨在规范perkinelmer活体光学成像仪的操作流程，确保实验结果的准确性和安全性。
二、适用范围
本操作规程适用于perkinelmer活体光学成像仪的操作人员。
三、操作流程
1.准备工作
(1)将perkinelmer活体光学成像仪移至实验室中，放置在平稳的台面上。
(2)将仪器通电并预热，等待30分钟。
(3)根据实验需要选择相应的滤光片。
(4)使用消毒液清洁工作区域，并将操作所需的工具准备就绪。
2.实验操作
(1)将实验动物放置在适当的位置，根据需要进行麻醉或固定。
(2)根据实验需要进行体内或体外注射荧光探针。
(3)选择相应的曝光时间和光源强度，进行成像操作。
(4)操作完成后，关闭光源和电源，并清理工作台面和操作区域。
3.注意事项
(1)操作人员应穿戴实验室服和手套，避免接触荧光探针和动物体液。
(2)操作前需要经过相应的培训和实验经验的积累。
(3)操作时应注意实验动物的安全及福利，遵守相关法律法规。
四、记录和报告
操作人员应当对实验过程进行详细记录，并将实验结果报告给实验室负责人。
五、附则
本操作规程应严格遵守，如有需要进行修改，应当征得实验室负责人的同意后，方可实施。
小动物活体成像技术的原理及操作方法
2. 生物发光成像活体生物荧光成像技术是指在小的哺乳动物体内利用报告基因-荧光素酶基因表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+离子存在的条件下消耗ATP发生氧化反应，将部分化学能转变为可见光能释放。
然后在体外利用敏感的CCD设备形成图像。
荧光素酶基因可以被插入多种基因的启动子，成为某种基因的报告基因，通过监测报告基因从而实现对目标基因的监测。
生物荧光实质是一种化学荧光，萤火虫荧光素酶在氧化其特有底物荧光素的过程中可以释放波长广泛的可见光光子，其平均波长为560 nm(460—630 nm)，这其中包括重要的波长超过600 nm的红光成分。
在哺乳动物体内血红蛋白是吸收可见光的主要成分，能吸收中蓝绿光波段的大部分可见光；水和脂质主要吸收红外线，但其均对波长为590—800 nm的红光至近红外线吸收能力较差，因此波长超过600 nm的红光虽然有部分散射消耗但大部分可以穿透哺乳动物组织被高灵敏的CCD检测到。
生物发光成像的优点可以非侵入性，实时连续动态监测体内的各种生物学过程，从而可以减少实验动物数量，及降低个体间差异的影响；由于背景噪声低，所以具有较高的敏感性；不需要外源性激发光，避免对体内正常细胞造成损伤，有利于长期观察；此外还有无放射性等其他优点。
然而生物发光也有自身的不足之处：例如波长依赖性的组织穿透能力，光在哺乳动物组织内传播时会被散射和吸收，光子遇到细胞膜和细胞质时会发生折射，而且不同类型的细胞和组织吸收光子的特性也不尽相同，其中血红蛋白是吸收光子的主要物质；由于是在体外检测体内发出的信号，因而受到体内发光源位置及深度影响；另外还需要外源性提供各种荧光素酶的底物，且底物在体内的分布与药动力学也会影响信号的产生；由于荧光素酶催化的生化反应需要氧气、镁离子及ATP等物质的参与，受到体内环境状态的影响。
二、小动物活体成像1. 制作动物模型可根据实验需要通过尾静脉注射、皮下移植、原位移植等方法接种已标记的细胞或组织。
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小动物活体成像操作说明手册第七部分操作7.1准备程序图7.1麻醉准备程序在开始麻醉程序之前，做一些准备程序可以帮助实验顺利进行，请参看图7.1 1) 请把不用的出气口用特制的黑色橡胶塞塞住。
(PN10168) 2) 把锥形通气口的位置对准。
3) 在麻醉程序开始前对照图片确保出气支管位置正确。
4) 确认气体循环管没有打结阻塞和松动。
5) 确认蒸发器内有足够的乙氟醚(Isoflurane)，如果需要注入请参看下一节。
7.2蒸发器注入程序警告:不能在正在进行氧气供应时向蒸发器内灌注液体乙氟醚(Isoflurane)。
注入前，关闭供应打开前面板上两个阀门开关监视流量计。
当流量球在指示管中的底部保持不动时说明已无气体流动，此时可以进行注入。
警告:只有当蒸发器控制旋钮处于关的位置才可以进行注入，在注入过程中不能打开任何氧气供应。
警告:只能使用乙氟醚(Isoflurane)不要使用其它麻醉气体，使用其它麻醉剂可能会导致危险。
警告:在处理剩余的麻醉剂时实验室要具备良好的通风条件，建议遵照已公布的安全条例进行操作，当丢弃剩余的乙氟醚(Isoflurane)时使用蒸发器使用手册上推荐的合适的化学容器。
警告:使用时XGI,8麻醉系统要保持直立状态。
蒸发器注入步骤1) 如图7.2所示，确保氧气供应被切断，可以在源头或减压阀处关掉它。
2) 如图7.3所示，确保蒸发器开关处于关的位置。
3) 打开两个前面板的阀门开关释放XGI,8的氧气，如图7.4所示可以看到阀门处于打开位置，流量计指示氧气已放完后，关闭这两个阀门开关。
4) 反时针旋转卸掉蒸发器的螺丝帽(如图7.5)。
确认试剂是乙氟醚(Isoflurane)，缓慢的倒进灌入口，透过玻璃指示窗随时观察乙氟醚(Isoflurane)的水平线，注意不要超过最大允许线。
如图7.6所示。
5) 注意:如果蒸发器在灌注前是干的，水平线在开始会轻微下落因为内部的棉芯会吸收一部分试剂。
6) 当乙氟醚(Isoflurane)达到玻璃指示窗上的最大标线时，表明蒸发器已灌注满。
此时应停止，不要过分灌注。
顺时针旋紧螺丝帽。
为防止泄漏，请仔细检查螺丝帽已旋紧。
图7.2 氧气阀图7.3 蒸发器置于OFF图7.4 氧气压力计，前面板开关ON 图7.5拧下蒸发器螺母图7.6监视最大刻度线7.3设备操作步骤一在开始程序前分别称量两个乙氟醚(Isoflurane)活性炭过滤器(如图7.7)，在过滤罐上用不可擦除的标记记录这些信息和日期。
图7.7 图7.8 步骤1,称量过滤器步骤2,打开排气泵步骤二打开前面板上的排气泵的电子开关(如图7.8)确认流速超过每分钟6公升(LPM)。
步骤三打开高压氧气罐或其它供应源确保氧气供应(如图7.9)注意:推荐的氧气压力是每平方英寸55磅(或每平方英寸35,65磅之间的任意值，请根据需要选择)。
图7.9 图7.10 步骤3,打开氧气供应打开成像暗箱的气体开关步骤四打开IVIS系统成像暗箱的气体开关(如图7.10，在暗箱右侧)步骤五打开XGI-8前面板上的绿色氧气开关。
(如图7.11)图7.11 图7.12 步骤5,打开XGI-8氧气开关步骤6,把蒸发器旋钮设置到0, 步骤六把蒸发器旋钮设置到0,(如图7.12)步骤七打开前面板上标记着“IVIS Flow on/off”的开关(麻醉气体流向IVIS分支管，如图7.13)使用流量计设置流速。
注意:使用能使动物处于麻醉状态的最低量麻醉即可，最初建议如需麻醉5只成年鼠使用0.25公升每分钟的流量。
图7.13 图7.14 步骤7,打开“IVIS Flow” 步骤8,打开流向感应箱的开关步骤八打开标记着“CHAMBER On/off”的开关(麻醉气体流向感应箱)，如图7.14所示。
设置感应箱流量计的流速为1.5公升每分钟。
步骤九确认“IVIS MANIFOLD”的流速，可以根据需要进行调整。
步骤十关上“IVIS MANIFOLD”和“INDUCTION CHAMBER”的开关。
不要再调整流速计了。
步骤十一合理设置蒸发器的百分比，典型值是百分之2.5(如图7.15)，可以根据需要进行调整。
图7.15 图7.16 步骤11, 设置蒸发器的百分比步骤12,把动物放入感应箱步骤十二把动物放置在感应箱内(如图7.16)，关上并锁紧箱子。
步骤十三打开“INDUCTION CHAMBER”开关，注意，第一次运行的时间是最长的因为要把感应箱和管子充满试剂。
步骤十四打开“IVIS MANIFOLD”开关，等一段时间(通常是二分钟到五分钟之间)，麻醉气体到达分支管的锥形鼻塞处，然后把动物从感应箱中拿出来。
步骤十五在把动物从感应箱拿出之前要关掉“CHAMBER On/off”开关。
步骤十六快速的把动物拿出来放在锥形鼻塞处(如图7.17)。
如果先前没把多余不用的分支管堵住，此时用特制的黑色橡胶塞塞住(型号是PN10168)。
图7.17 图7.18 步骤16,将需要麻醉的动物放置好蒸发器置于OFF 步骤十七为了减少麻醉剂的泄漏，在不移动动物时要把感应箱关紧。
步骤十八当上述动物过程完成后，把蒸发器设置到关的位置(如图7.18)。
步骤十九打开“CHAMBER On/off”开关，让纯氧流进感应箱5分钟。
步骤二十直到感应箱充满氧气后，关掉“CHAMBER On/off”开关。
步骤二十一把氧气罐关上，切断氧气供应。
步骤二十二打开所有的开关让设备减压。
当IVIS MANIFOLD流量计和感应箱流量计的指示球下降到指示管的底部说明XGI,8减压完毕。
步骤二十三关上XGI,8的氧气开关(如图7.19)。
图7.19 步骤23, 关闭氧气开关步骤二十四当流量计停止不动时关掉所有的开关，关上排气泵。
如果需要，准备好以备下次使用。
第八章故障处理8.1 气体泄漏1) 在任何时候检测到XGI,8麻醉系统发生泄漏，使用者应当立刻关闭氧气供应。
联系龙脉得的技术部获取帮助。
2) 使用者可以自己维护系统的其它外部泄漏，如管子和连接处。
但是需要使用一个合适的泄漏检测装置例如SNOOP来隔绝泄漏源。
3) 如果遇到气体减少的情况，但没有检测到泄漏，请检测管子有没有打结和阻塞。
4) 旋紧接口，替换裂的和损坏的管子。
5) 如果气体减少怀疑有泄漏，隔绝系统的各部分以减少可能的泄漏，检查经常操作的部分如管子的连接处或连接到暗箱的管子有没有打结。
8.2动物感应箱的定时更换假设所有的气体流动正常，没有泄漏。
可能说明需要校准蒸发器或其它XGI-8服务。
8.3 更换XGI-8的保险丝在正常情况下，XGI-8不需要更换保险丝。
如果泵看上去作用效果不显著并且没有声音时，可能需要更换保险丝。
如果需要经常更换保险丝说明XGI,8工作不正常，请联系龙脉得的技术部获取帮助。
1) 确认电力供应稳定，可以用以下方法检查，在同一插座上使用另一个差不多相同功率的设备。
如果工作正常说明电力供应正常。
很有可能是XGI-8保险丝坏了。
2) 更换保险丝，如附录C图示。
3) 翘出保险丝屉，更换保险丝。
4) 装上保险丝屉和电源接口。
5) 如果更换保险丝没有解决问题，请联系龙脉得的技术部获取帮助。
Xenogen IVIS LuminaII系统中文简易操作手册中文简易操作手册IVIS LuminaII系统开机1. 启动计算机;2. 开启相机电源，开启主机电源(为在imaging chamber后方)，如需荧光检测开启荧光光源电源;3. 仪器开启后，点选桌面上Living Image图标，启动程序;4. 启动程序后，系统会要求点选个人ID进入。
若为新使用者，请键入三的英文字母作为ID名称;5. 画面出现control panel，按下“initialize IVIS system”，启动整套IVIS系统;-106. 待机器完成启始动作后，control panel 中的温度状态灯号为红色，等候约5分钟后温度降低，灯号转绿就可进行影像获取工作，此外按下温度灯号也可以观测目前CCD的温度及设定载台温度。
IVIS LuminaII 系统关机一般不建议作关机动作，因为软件会进行每天的背景值侦测作业，所以计算机及主机都不建议关闭。
除非有长时间不会使用到机器，才建议作关机作业。
1. 关闭软件:请点选主画面中“Living image”中的“Exit”;2. 依次关闭仪器电源(荧光光源电源，相机电源，主机电源);3. 关闭计算机电源。
Living image 软件操作1. 将老鼠或样品放入观察箱中关上门后，调整control panel中的参数设定。
2. 模式选择:依照样品种类选择“luminenscence”或者“fluorescence”。
3. Exposure Time:单位有sec及min可选择。
可利用鼠标或是数字键更改数字。
4. Binning:依所需影像画质选择，Binning数值越高，灵敏度越高但分辨率越低。
6. f/stop光圈:光圈大小，1>2>4>8，光圈越大，采集光信号越多。
7. Field of view:视野大小选择，共有ABCD四种高度选择。
选择后，系统会自动调整载台高度。
9(调整好参数，按下“acquire”获取图片。
10. 如果进行荧光成像，选择相应的激发波长和发射波长。
11(影像获取后，需进行影像分析。
先选择ROI的形状:有四种ROI可供选择:Circle, square, contour, grid (Countour为计算机自动圈选，Grid格状适用于microtiter plate)。
12(按下“Create”键，就会在影像上出现ROI圈选区，可利用鼠标调整ROI 的大小及位置。
13(按下“measurement”键，就会获得ROI区域的定量数值。
14. 当您完成影像获取后，需储存档案，点击“Save Living Image Data”。
15(选择“All Living Image Data Files”，此为raw data，会储存未经任何修改的档案模式，方便后续定量分析作业。
16( 若要读取之前的影像，点击“Browse LI Data”，之后选择欲读取的档案路径，利用鼠标双重敲击该档案，即可读取。
序列的设置和采集:注:本指南通过手动输入的光谱分离的步骤。
LivingImage 4.0软件版本包括一个autoexposure自动曝光设置和Imaging Wizard 成像向导。
有关如何使用这两个功能，请参阅各自的快速参考指南。
您还可以在the Spectral Unmixing Wizard Setup reference guide找到有关的信息。
这些功能旨在尽可能方便用户，我们强烈建议您利用这些优势时，执行这些步骤。
1。
如果您没有使用autoexposure自动曝光，首先用特定的激发和发射波长确定最佳成像时间。