造血干细胞的研究现状

造血干细胞的研究现状

造血干细胞的研究现状简介

造血干细胞（Hematopoietic Stem Cell ，HSC）是一种成体干细胞，是具有高度自我更新能力和多向分化潜能的造血前体细胞，属于多能干细胞。造血干细胞主要来源于三个渠道: 骨髓、外周血和脐带血。一般可将血细胞的生成过程划分为三个阶段: 造血干细胞、造血祖细胞和在形态上可以辨认的各种幼稚血细胞。造血干细胞采用不对称的分裂方式，平均每57 天分裂一次。它一方面可以再生，另一方面可以分化成髓红系干细胞和淋巴系干细胞，后两者又能分别分化成红细胞、巨核细胞、淋巴细胞、树突状细胞、NK细胞、粒细胞等一系列血细胞。造血系统不同阶段受不同基因表达调控，造血分化也受到若干个随机细胞因子的调控。

造血干细胞的生物学特征?:（一）自我更新和自我维持能力: 正常情况下，造血干细胞经过不对称有丝分裂形成两个子代细胞，其中一个仍保持造血干细胞的全部特征，这称为造血干细胞的自我更新或自我维持。自我更新使造血干细胞的数量和质量维持不变。另一个子细胞在有丝分裂过程中特征发生改变，逐渐走向分化的途径，维持循环的各种血细胞的数量。（二）高度增殖潜能: 在骨髓中，造血干细胞大约仅占骨髓0.05%，且大多数处于G0期。由于放、化疗造成造血细胞明显减少或在某些动员剂的作用下，造血干细胞能大量分裂，从而有更多的造血干细胞进入分裂周期。（三）多向分化潜能: 造血干细胞不仅能分化为各系统的血细胞系，还具有可塑性，可向某些非造血细胞转化，如神经细胞、骨骼肌细胞、肝脏细胞、血管内皮细胞以及多种组织的上皮细胞等。造血干细胞的表面标志主要有

CD34抗原、

CD38抗原、CD90抗原、CD117抗原、Sca1抗原和AC133抗原等，其中CD34是分离纯化造血干细胞的主要标志。利用这些表面标志，可将造血干细胞从造血组织中分离出来，进行研究。

对于不同种类的造血干细胞，分离纯化保存的技术也有所差异。首先要在无菌条件下在外周血、骨髓和脐血中采集造血干细胞，然后进行密度梯度离心，对单个核细胞分离，还要对CD34细胞分离，常用的方法有免疫磁珠法和流式细胞术等。近20 年来建立的造血干细胞的分选方法主要有FACS、组织培养瓶铺展贴壁、亲和吸附等，但都存在纯度不高、技术要求高、仪器设备昂贵、影响细胞活力、易于污染等不足。目前最主要的分离方式还是免疫磁珠分离法，具有简单易行、分选效率高、纯度高等优点。免疫磁珠是一种包被有单克隆抗体的磁性微粒，它可特异性地与靶物质（细胞、蛋白质、DNA和细菌等）结合，使之具有磁顺应性，继而在外加磁场的作用下被滞留，从而与其他成分分离?。

分离出造血干细胞后，还要对其进行鉴定。在人类，CD34阳性细胞群具有长期造血重建能力，推测绝大部分造血干细胞应为CD34阳性。由于CD34抗原在造血祖细胞上也有表达，故常以一些在干细胞为阴性表达的抗原（如HLA-DR，CD38等），对CD34 阳性细胞群进行再分类，以识别出其中的造血干细胞。常用的造血干细胞检测方法有: 脾克隆形成法、外克隆形成法、长期培养启动细胞检测法、移植实验法、流式细胞测量法等等?。

造血干细胞的冻存具有重要意义，可以减少传代次数，节省人力物力，储备细胞资源。对不同来源的造血干细胞，要采用不同的冻存方法?。常见的冷冻保护剂有二甲基亚砜（DMSO、）甘油、乙二醇、甲醇、乙酰胺等。对于骨髓干细胞，冻存速度以1?/min 为好，若太快则会造成细胞死亡，也可加入少量白蛋白。外周血造血干细胞采用分段降温，或用超速法。脐血造血干细胞与外周血类似。

造血干细胞的体外扩增和诱导分化具有重要意义。常见的体外扩增培养体系有基质支持的培养体系、无基质悬浮和持续灌注式生物反应器。其中，基质支持的培养体系是在体外模拟骨髓造血微环境，存在的问题主要有: 用自体基质细胞，患者自身基质受损，支持造血细胞增殖能力下降; 用异体基质细胞，难免混于收获的造血细胞中，影响移植成功。无基质悬浮培养体系是在培养基中加入外源性重组造血生长因子，但由于缺乏微环境支持，会影响扩增的造血细胞维持永久植活的能力。灌注培养是目前研究热点之一，其特点是不断增加

新鲜培养基以及不断抽走细胞代谢废物的消耗培养基，使细胞得以在一个相对稳定的生长环境内增殖，从而大大提高细胞密度。

造血生长因子（HGF）也是体外扩增的研究重点。HGF是造血细胞增殖分化的重要

调节因子。常见的造血生长因子有:SCF（干细胞因子）、IL-1 、IL-3 、IL-6（白细胞介素）、TPO（血小板生成素）CSF（集落刺激因子）等。但这些因子组合在扩增造血细胞的同时，也明显加速了造血干细胞的分化。扩增后的造血干（祖）细胞可用于支持治疗和免疫治疗，如用于移植后的全血细胞缺乏期回输，可降低死亡率;T 细胞输注可缓解移植后白血病的复发; 激活T 细胞、LAK细胞、NK细胞，可诱导非特异性免疫治疗。但这些临床应用及其有限，基本处于临床研究阶段，主要问题有: 扩增后的干细胞再植能力下降，脐血扩增后短期重建能力降低，植活时间明显延长，不能长期植入等等。

造血干细胞作为血细胞的“种子”，可通过移植使有关疾病得到治疗。例如血液系统恶性肿瘤、其他实体瘤、免疫系统疾病，都可以通过造血干细胞移植，使正常的造血干细胞代替原有的病理性造血干细胞，造血及免疫功能得以重建。由于异体移植会造成排斥反应，目前自体造血干细胞移植（ASCT）已广泛应用于化疗敏感的恶性淋巴瘤的治疗，并取得显著的疗效。外周血干细胞移植由于不用麻醉，费用较低，容易为患者所接受?。另外，在治疗自身免疫性疾病方面，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化症、?型糖尿病等，在给予大剂量免疫抑制剂治疗后实行自体干细胞移植，已成为当前研究的热点?。参考文献:

[1] 李莎. 造血干细胞研究进展[J]. 家畜生态学报，2008，（3）.

[2] 高福来，韩明子等. 骨髓干细胞分离技术的探讨[J]. 胃肠病学和肝病学杂志，2010，(6). [3] 陈智超.造血干细胞的生物学特征及其鉴定[J]. 临床内科杂志，2000，(6).

[4] 沈建良，黄友章等.造血干细胞低温保存及临床应用[J]. 北京医学，2009，(2). [5] 李虎生. 自体外周血造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤的研究进展[J]. 华夏医学，2010，(6).

[6] 景华. 造血干细胞移植在自身免疫性疾病中的应用进展[J]. 东南国防医药，2010，(4).

佛学经典励志语录，

一、人之所以痛苦，在于追求错误的东西。

二、与其说是别人让你痛苦，不如说自己的修养不够。

三、如果你不给自己烦恼，别人也永远不可能给你烦恼。因为你自己的内心，你放不下。

四、好好的管教你自己，不要管别人。

五、不宽恕众生，不原谅众生，是苦了你自己。

六、别说别人可怜，自己更可怜，自己修行又如何?自己又懂得人生多少? 八、福报不

够的人，就会常常听到是非; 福报够的人，从来就没听到过是非。九、修行是点滴的工夫。

十、在顺境中修行，永远不能成佛。十一、你永远要感谢给你逆境的众生。十五、当你快乐时，你要想，这快乐不是永恒的。当你痛苦时你要想这痛苦也不是永恒的。

十六、认识自己，降伏自己，改变自己，才能改变别人。十八、你可以拥有爱，但不要执著，因为分离是必然的。十九、不要浪费你的生命在你一定会后悔的地方上。

二十、你什么时候放下，什么时候就没有烦恼。

二一、内心没有分别心，就是真正的苦行。

二二、永远不去只看众生的过错。你只看众生的过错，你永远污染你自己。

二五、每一种创伤，都是一种成熟。