酚-氯仿提取步骤
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酚-氯仿法提取DNA步骤
1、取200 µL病毒液于新的EP管内,再加入200 µL 饱和酚,用手缓慢颠倒混匀5 min后,12000 rpm离心5 min。
2、取上清于新的EP管内,加饱和酚和氯仿各100 µL,用手缓慢颠倒混匀5 min后,12000 rpm离心5 min。
3、重复步骤2。
4、取上清于新的EP管内,加200 µL氯仿,用手缓慢颠倒混匀5 min后,12000 rpm离心5 min。
5、取上清于新的EP管内,加与上清等量的75%的冻乙醇,手摇混匀后,-20℃放置20 min。
6、12000 rpm离心10 min,小心倒掉乙醇,置于室温晾干,加50 µLddH2O溶解DNA,-20℃保存备用。