红枣多糖提取分离工艺的优化pdf

９．２５
１２．２０
比得率（％）
７０．０６
９２．４２
注：比得率以多糖得率最高者为 １ ０ ０ ％ 计。
Ⅲ （１：３） ５．２８７０ １３．２０ １００．００
从表 ３ 粗多糖得率可知，滤液与乙醇体积比为 １ ： ３ 时沉淀多糖效果最好，其次为 １ ： ２，最差的为 １ ： １。
由图 １ 、２ 可知，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均在紫外 ２ １ ５ ｎ ｍ 处 有一最大吸收峰，此为多糖特征吸收峰［ ５ ］；同时，三 种样品的紫外 － 可见光图谱、红外光图谱均重叠，表明
※工艺技术
食品科学
2006, Vol. 27, No. 03 151
表 ４ 不同浓度三氯乙酸去蛋白比较（原液 Ａ２８０ ＝ １．４１４） Ｔａｂｌｅ ４ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｒｅｍｏｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｉｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｃ
摘 要：采用正交设计法研究了提取温度、料液比、提取时间三因素对红枣提取的影响。初步筛选出优化水平 组合为 Ａ ２ Ｂ ２ Ｃ ３ 。同时对所得多糖经红外光谱、紫外光谱、纸层析法对其组成进行分析，并从脱色、除蛋白等方 面对其纯化作了初步研究，结果表明：所得红枣多糖为单一成分，是由木糖、半乳糖组成；活性炭脱色，Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ 法去蛋白效果明显。 关键词：红枣；多糖；提取；分离工艺；正交试验
将红枣洗净，去核，平均分成 ９ 份（每份 ５０ｇ），打 浆。根据因素水平表 １ ，按正交实验 Ｌ ９（ ３ ３） 浸提。将浸 提液过滤、浓缩，浓缩液加无水乙醇沉淀，４ ℃静置 ２ｈ 后离心（４０００ｒ／ｍｉｎ，１０ｍｉｎ），将沉淀物用石油醚脱脂， 冷冻干燥，得红枣粗多糖， 重复实验 ３ 次，正交试验设 计与实验结果见表 ２ 。
粗多糖量 （ｇ）
实验号 Ａ
Ｂ
Ｃ
Ｄ
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
１
１
１
１
１ ４．２７８０ ４．１３５０ ４．０２１７
２
１
２
２
２ ５．０６３０ ５．０６３０ ５．１３８０
３
１
３
３
３ ４．５２３８ ４．５４９０ ４．５６４２
４
２
１
２
３ ５．９９２３ ６．０４４０ ６．０３３３
５
２
２
３
１ ５．８６４０ ５．６１８０ ６．２２８６
６
１．３．１ 多糖的提取 多糖的提取工艺流程：红枣洗净去核、粉碎 → 热
水浸提 → 水提液过滤 → 冷冻浓缩 → 乙醇沉淀多糖 → 石 油醚脱脂 → 冷冻干燥 → 含量测定。将上述所得的粗多 糖用滤纸包好置于索氏提取器，８０℃恒温水浴回流 ６ｈ， 挥干石油醚，得褐色粗多糖。经气相色谱分析，石油 醚残留量小于 １０－５。
Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｎ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｄ Ｄａｔｅｓ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ＣＨＥＮ Ｇｕｏ－ｌｉａｎｇ１，３，ＺＨＡＮＧ Ｊｉｎ－ｗｅｎ２，＊，ＣＨＥＮ Ｚｏｎｇ－ｌｉ３，ＺＨＡＮＧ Ｘｉａｎｇ－ｑｉｎａ３ （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｇａｎｓｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００７０， Ｃｈｉｎａ；
１ 材料与方法
１．１ 材料与试剂 优质红枣，２ ０ ０ ４ 年 ４ 月购于延安集贸市场，实验
所用化学药品、试剂均为化学纯。 １．２ 仪器
紫外－可见光光度计（ＵＶ－１６０１ｐｃ） 日本岛津；红外 分光光度仪（ＩＲ－４４０，Ｉｎｆｒａｅｄｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍ） 日本； ＦＤ－１ 冷冻干燥机 北京博康实验仪器有限公司；ＫＤＣ－ ２０４４低速离心机 科大创新股份有限公司中佳分公司； 电子天平（ＦＡ１００４Ｎ） 上海精密科学仪器有限公司；高 速组织捣碎机（ＤＳ－１） 上海标本模型厂。 １．３ 方法
１．３．２ 多糖含量测定 多糖含量测定采用蒽酮比色法，其标准曲线制作方
法参考文献［３］，得线性回归方程为：Ｙ＝０．０４１７＋６．４３７６Ｘ （ Ｙ ：吸光度，Ｘ ：糖含量） 。
２ 结果与分析
２．１ 确定最佳提取工艺 影响红枣多糖提取率的因素很多，如料水比、温
度、时间以及提取次数等，为综合分析各因素的影响 程度，本实验采用 ３ 因素 ３ 水平正交试验［４］Ｌ９（３３），以确 定红枣多糖提取的最佳工艺。
※工艺技术
食品科学
2006, Vol. 27, No. 03 149
红枣多糖提取分离工艺的优化
陈国梁 １，３ ，张金文 ２，＊ ，陈宗礼 ３，张向前 ３ （１．甘肃农业大学生命科技学院，甘肃 兰州 ７３００７０；２．甘肃农业大学农学院，
甘肃 兰州 ７３００７０；３．延安大学生命科学学院，陕西 延安 ７１６０００）
２
３
１
２ ５．５８５０ ５．９０４０ ５．９３３２
７
３
１
３
２ ４．０３７２ ４．１５７０ ４．０５５０
８
３
２
１
３ ６．０２５９ ６．０８６ ６．０８１９
９
３
３
２
１ ５．２６８９ ５．３３６０ ５．３３６０
ｋ１ ８２．０５ ８５．５１ ９１．５２
ｋ２ １０６．３４ １０１．１２ ８９．７９
ｋ３ ９２．７２ ９４．４８ １００．２４
３６８。
取时间） 对多糖得率无明显影响。初步筛选出优化水平 组合为 Ａ ２ Ｂ ２ Ｃ ３ 。 ２．２ 乙醇分级沉淀多糖及光谱分析
本实验采用乙醇作为多糖沉淀剂，以 １：１，１：２，１： ３（滤液：无水乙醇，Ｖ／Ｖ）对在最优水平下所得红枣多糖浓 缩溶液进行分级沉淀，冷冻干燥，得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 三种粗多糖（见表 ３），并进行紫外 － 可见光谱与红外光谱 分析，结果见图 １ 、２ 。
［２］ 王玲， 张荣． 荔枝果露酒调配工艺研究［Ｊ］． 酿酒科技， ２００１， （１）： ６７－ ６８．
［３］ 李枚秋． 酒精浸提半发酵法酿制荔枝果酒［Ｊ］． 酿酒科技， ２０００， （３）： ９８．
［４］ 钟秋平， 阳辛风， 周文化． 全低温酿制优质荔枝全汁酒的工业化生 产工艺［Ｊ］． 食品与发酵工业， ２００４， ３０（１１）： １１４－１１６．
然科学版）， １９９９， １７（３）： ２４３－２４５．
150 2006, Vol. 27, No. 03
食品科学
※工艺技术
吞噬功能，促进淋巴细胞转化，对大、小鼠血虚模型、 气血双虚模型有较好改善作用［２］。 因此，红枣多糖的提 取与纯化工艺优劣，直接影响红枣的开发应用显得尤为 重要。但有关这方面的研究鲜有报道，本实验通过对 红枣多糖的提取、纯化工艺研究并对其组成成分进行初 步分析，旨在探索出红枣多糖的最佳提取分离工艺。
［５］ 杨幼慧， 张莉萍． 荔枝酒发酵工艺研究［Ｊ］． 酿酒， ２００４（２）： ６６－６８． ［６］ 邵宁华， 任永功， 牛树伦， 等． 葡萄酒氧化机理与工艺改革研究［Ｊ］．
山东农业大学学报， １９９４， ２５（２）： １５８－１６４． ［７］ 蔡定域． 酿酒工业分析手册［Ｍ］． 北京： 轻工业出版社， １９８８． １１０－１１４． ［８］ 郭其昌， 郭松泉， 张春娅， 等． 葡萄酒品尝法［Ｍ］． 北京： 中国轻工业
Ａ温度（℃） ８０ ９０ １００
Ｂ 料水比（Ｗ：Ｖ） １：１０ １：１５ １：２０
Ｃ时间（ｈ） ２ ４ ６
表 ２ 红枣多糖提取正交（有重复）实验结果 Ｔａｂｌｅ ２ Ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ （ｒｅｐｅａｔｅｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）
方差分析表明：红枣多糖提取工艺各因素中因素 Ａ （温度）和 Ｂ（料水比）对多糖得率有明显影响，而因素Ｃ（提
表 １ 影响红枣多糖提取因素水平表 Ｔａｂｌｅ １ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｄ ｄａｔｅｓ
ａｎｄ ｉｔｓ ｌｅｖｅｓ
水平 １ ２ ３
ห้องสมุดไป่ตู้
Ｒ
８．１０ ５．２１ ３．７７
Ｘ １ ２７．３５ ｃＡ ８．５０ ｂＢ ３０．５１ ａＡ
Ｘ ２ ３５．４５ ａＡ ３３．７１ ａＡ ２９．９３ ａＡ
Ｘ ３ ３０．９１ ｂＢ ３１．４９ ａＡ ３３．４１ ｂＡ
注：ＦＡ＝１６．７４ ；ＦＢ＝６．８２ ；ＦＣ＝４．２６ ；Ｆ（０．０５）＝３．５５ ；Ｆ（０．０１）＝６．０１ ；ＳＸ＝０．
枣（Ｚｉｚｙｐｈｕｓ ｊｕｊｕｂｅ Ｍｉｌｌ）属鼠李科（Ｒｈａｍｎａｃｅａｅ）。枣 的成熟果实为中医常用的医疗保健药材，具有补中医 气，养血安神之功效，主要用于脾虚食少，乏力便溏
等症［ １ ］ 。研究表明，红枣中的多糖成分可以提高衰老模 型小鼠 Ｓ Ｏ Ｄ 、Ｃ Ａ Ｔ 、Ｇ Ｓ Ｐ － Ｐ Ｘ 活力，降低血浆、肝匀 浆中 ＬＰＯ 水平，促进正常及免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞
收稿日期：２００５－０３－２９ ＊通讯作者 作者简介：陈国梁（ １ ９ ７ ４ ） ，男，讲师，在读硕士，研究方向为植物学及生物化学。
［１］ 农业部发展南亚热带作物办公室． 中国热带南亚热带果树［Ｍ］． 北京： 中国农业出版社， １９９８． ９０．
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｉｍｅ ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｄ ｄａｔｅｓ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ａ２Ｂ２Ｃ３ ｗａｓ ｃｈｏｓｅｎ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ． Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ａｕｔｈｏｒ ａｎａｌｙｚｅｄ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｙ ｉｎｆｒａｒｅｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ， ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ａｎｄ ｐａｐｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ． Ｔｈｅ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｄｅｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ， ｒｅｍｏｖｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒｓ ｗｅｒｅ ｄｅｅｐｌｙ ｓｔｕｄｉｅｄ， ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒｅｄ ｄａｔｅｓ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗａｓ ａ ｍｏｎｏ－ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ， ｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ａｎｄ Ｄ－Ｘｙｌｏｓｅ． Ｔｈｅ ｗａｙｓ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ｃｈａｒｃｏａｌ ｄｅｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ Ｓｅｖａｇ ｒｅｍｏｖｉｎｇ ｈａｖｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ． Ｋ ｅ ｙ ｗ ｏ ｒ ｄ ｓ：ｒｅｄ ｄａｔｅ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ 中图分类号：ＴＳ２４４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００６）０３－０１４９－０４
表 ３ 不同浓度乙醇沉淀多糖结果比较 Ｔａｂｌｅ ３ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｎｇ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｙ ｄｉｔｔｅｒｅｎｔ
ｅｔｈｙｌａｌｃｈｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
体积比
Ⅰ（１：１）
Ⅱ （１：２）
粗多糖量（ｇ）
３．６８９
４．８６４５
粗多糖得率（％）
２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｇｒｏｎｏｍｙ， Ｇａｎｓｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００７０， Ｃｈｉｎａ； ３．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｙａｎ’ａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｙａｎ’ａｎ ７１６０００， Ｃｈｉｎａ）
出版社， ２００２． ９７． ［９］ 李从发， 李枚秋， 彭黎旭． 腰果梨酒的果香保持作用研究［Ｊ］． 热带作
物学报， １９９９， ２０（３）： ２１－２３． ［１０］ 吴惠芳， 吴英华． 防止刺梨酒氧化褐变的探讨［Ｊ］． 酿酒科技， １９９９，
（１）： ５０－５２． ［１１］ 李从发， 李枚秋． 多酚在腰果梨酿酒中的作用［Ｊ］． 海南大学学报（自