菊花组织培养和月季花药培养资料讲解

珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、 透性好，适合栽培 3、移栽 幼苗长壮后，移栽到土壤中
（六）栽培
幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况， 适时浇水、施肥，直至开花
课堂2 月季的花药培养
一、被子植物和裸子植物
1、被子植物定义：凡是种子有果皮包被着， 胚珠有子房壁包被着的植物，就叫做被子植物
2、花药的结构
花药
药隔：花药中部，由薄壁细胞构成， 内有维管束
花粉粒
花粉囊（4或2） 囊壁
表皮 纤维层
3、被子植物的花粉发育
花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的， 因此，花粉是单倍体的生殖细胞 ①经历时期： 四分体时期、单核期、双核期 ②花粉粒的形成
（1）基础知识
必要条件： 细胞离体
一定的营养物质、激素和其他
外界条件
原理: 细胞的全能性
①定义：
植物细胞具有全能性，即已分化的
细胞，具有使后代细胞形成完整个
体的潜能。
②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所
特有的全套遗传物质，都有发育成为完
整个体所必需的全部基因
结细果胞：的分形化成不同的细胞和组织 原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选
（六）栽培
二23、、、配实灭置验菌培操养作基 （分一装）好制的备培M养S固基体连培同养其基他器械一起进行高压蒸
汽灭菌
1、配置各种母液
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒 ①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
② 酒精处理
不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行 菊花的 组织培养，一般将PH值控制在5.8左右，温度控制在1822℃，并且每日用日光灯照射12h。
高 有利于根的分化、抑制芽的形成
生长素/细胞分裂素
低 有利于芽的分化、抑制根的形成
二、实验操作
（一）制备MS固体培养基 （二）外植体消毒 （三）接种 （四）培养 （五）移栽
2.离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件 的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。
常用的一种培养基是MS培养基。其主要成分包 括：大量元素，如N、P、K、Ca、Mg、S;微量元素， 如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有机物， 如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。在配 制好的MS培养基中，常常需要添加植物激素。
实例：玉米、大豆、梨、杏
2、裸子植物定义：凡是胚珠裸露，外面没有 子房壁包被，种子外面没有果皮包被的植物称 为裸子植物
实例：松、杉、柏
3、花的结构
4、花的作用 被子植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊 和雄蕊是进行有性生殖的主要部分
二、被子植物花粉粒的形成 1、雄蕊的结构
花丝 雄蕊：
花药：囊状结构，内有很多花粉粒
择性表达的结果
概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形 态、结构、生理功能上发生稳定性差 异的过程
植物组织培养的基本过程
离体的植物 脱分化 器官、组织、
细胞
愈 再分化 根 伤
组
织
芽
植 物 体
愈伤组织
（二）影响植物组织培养的因素
1.不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。
例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容易， 而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此，植物 材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种 植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会 影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择未开 花植株的茎上部新萌生的侧枝。
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后， 都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
（四）培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期 间应定期消毒。培养温度控制在18-22，并且脱 分化形成愈伤组织后，每日用日光灯光照12h。
（五）移栽 1、打开封口膜 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶 的封口膜，让试管苗在培养间生长几日 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消 过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间
组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分 化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间 的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。
3.植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的比 例等，会影响实验结果。
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞 分裂、脱分化和再分化的关键性激素。按照 不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的 实验结果。
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗
③消毒液处理
取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分， 放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min， 取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净 消毒液
（三）接种
1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种 室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空 气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外 线照射20分钟
当同时使用这两类激素时，两者用量的比例决定着发 育的方向，是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进 芽器官的分化，应除去或降低生长素的浓度，或者调 整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。
高 利于根的分化，抑制芽的形成 生长素/细胞分裂素 适中 利于促进愈伤组织的形成
低 利于芽的分化，抑制根的形成
4.除了上述因素外，PH、温度、光照等条件也很重要。
课题1 菊花的组织培养
通过必修课的学习，我们已经了解到 大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那 么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？
扦插
营养繁殖
嫁接
压条
组织培养
扦插
嫁接 压条
（一）植物组织培养的基本过程
组织培养 是指在人工培养 基上，离体培养植物的器 官、组织、细胞和原生质 体，并使其生长、增殖、 分化以及再生植株的技术。
与培养细菌的培养基有何不同？
MS固体培养基成分及比例
阅读课文，思考以下问题
1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不 同？
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不 同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包 括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
2、你认为组织培养过程中，成功的关键ห้องสมุดไป่ตู้哪些？这些步骤的 适宜条件是什么？