实验三--食品中微生物菌落总数的测定

N
(n1 0.1n2 )d
较高稀释度有效 平板数
C
较低稀释度
较低稀释度有效 平板数
结果表述
10-1 均数 255 多不 可计 12 330 10-2 均数 36
描
述
最终结果 2.6×103
均在30~300间则按计数公式
ห้องสมุดไป่ตู้
各平板均>300，取稀释度最高者 345 报告，余计为多不可数 2 29 均小于30则取稀释度最低者报告 所有平板均不在30~300CFU且一 部分<30 或>300者以最接近30或 300者报告 所有平板均无菌落则记为< 1乘以 最低稀释倍数报告
3.5×104
1.2×102 2.9×103 < 1×10 即< 10
0
0
2、报告方式
菌落数在100cfu内时按四舍五入修约，采用两位有
效数字报告
大于或等于100时，第三位数四舍五入修约，取前两 位数字，例：205043210000 or 2.1×105 所有平板均为蔓延菌落而无法计数者报告菌落蔓延 若空白对照有菌落则此次检测结果无效 固体样品以cfu/g，液体以cfu/mL为单位
1、计数结果的表述
若只有一个稀释度平板在30~300CFU，则计算两平行平 板的均数，再乘以稀释倍数报告之 若有连续两个稀释度符合计数要求则按下公式：
所有符合计数要求 的平板菌落数之和
菌落总数
例：10-2=232，244 10-3=33，35 N= (232+244+33+35) (2+2×0.1)×10-2 = 24727
实验三
食品中微生物菌落总数的测定
一、实验目的
学习并掌握标准平皿活菌计数（SPC）的 基本原理和方法
明确菌落总数测定对被检样品进行卫生学
评价的意义
二、实验原理
菌落总数：食品检样经过处理，在一定条件下（如
培基基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每 g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
灭菌生理盐水当中，充分振荡，混合均匀，制成
10-1稀释度样品
2、梯度稀释法依次稀释样品到10-4
菌落总数操作流程图
3、选择10-2、10-3、10-4三个稀释度的样品均液，用无菌 移液管分别吸取1mL到无菌平皿中，每个稀释度做2个 平皿；同时，吸取1mL无菌生理盐水到1个平皿中作为
空白对照
4、熔化培养基
三、实验器材
（一）培养基
平板计数琼脂培养基
（二）实验材料 市售饮料 （三）其他 1、无菌培养皿7套 2、无菌吸管（ 1支10mL， 5支1mL） 3、无菌生理盐水（225mL三角瓶1个，9mL试管5支） （四）仪器
超净工作台
四、实验步骤
1、样品处理： 以无菌操作，先用酒精棉球擦拭样品表面后，用 无菌剪刀将包装剪破，量取检样25mL放入225mL
5、及时将已冷却到46℃的培养基倾入到平皿中，并转动
平皿使其混合均匀
6、37℃倒置培养2天
7、按照计数原则计数
五、菌落计数方法
选取菌落数在30~300cfu之间，无蔓延生长的平板 计数 低于30的记录具体菌落数，大于300的可记录为多 不可计，每个稀释度采用2个平行的均数 有较大片状菌落生长者不宜采用， 若片状小于平板一半时且余部均 匀分布，则以半个平板菌落数2 倍报告 无明显界限链状菌落每条单链视 为一个菌落
六、实验结果与分析
稀释倍数 10-2 10-3 10-4
菌落数(CFU)
样品菌落总数N= 分析
cfu/mL
七、思考题
1、菌落总数的定义是什么？
2、SPC法所得结果就是样品中实际的细菌总 数，这种说法对吗？为什么？
3、为什么熔化后的培养基要冷却到46℃才能
倒入有菌液的平板？
标准平皿活菌计数法（SPC法）是最常用的活菌计
数法
将微生物细胞充分稀释到单个分散，把这些单个分
散的细胞通过混菌法或涂布法使其均匀分布在平皿
培养基上，培养后长出的菌落肉眼可见，每个菌落
都由原液中单个细胞发育而来。
反映食品被细菌污染的程度
由于倾注平板法的局限，会有一部分细菌在该实验
条件下不生长，故计数结果要比实际值低。