乳酸测定方法的初步研究

乳酸测定方法初步研究

摘要

乳酸是重要的生化产品，广泛应用于食品、医药、环保等各领域，目前L-乳酸的主要生产方法为微生物发酵法。近年来由于其可用于合成可降解塑料——聚乳酸的性质而受到众多的关注，具有广阔的市场前景。本研究利用薄层色谱、EDTA和对羟基联苯法建立了乳酸的定性定量检测方法，并对实验条件范围进行了研究，结果如下：

1、得到了分离提纯精制L-乳酸的具体参数：实验分别在55℃、60℃、65℃、70℃四个温度下直接用50%的稀硫酸酸解浓缩的乳酸钙溶液，用0.1%甲基紫溶液作为指示剂对粗L-乳酸进行了精制。在此范围内均可得到纯度大于90%的乳酸，精制后的乳酸颜色清澈，对精制的乳酸进行第二次分子蒸馏得到了结晶乳酸。采用分子蒸馏技术精制L-乳酸，在操作压力为0.1Pa，蒸馏温度为70℃效果最好，同时实验发现适宜的蒸馏温度应低于75℃。

2、确定了乳酸的薄层定性分析条件，实验结果表明，定性分析方法效果良好；方法简单，精确度高，显色稳定，重复性好，可应用于乳酸含量的测定。

3、确定了利用EDTA法测定乳酸的可行性。在消除其他离子干扰的前提下，钙离子可迅速与乙二胺四乙酸二钠反应，以钙—经酸为指示剂，用EDTA标准溶液滴定，溶液成纯蓝色为滴定终点，用滴定消耗的EDTA 体积和摩尔浓度可求得乳酸钙的含量。

4、在一定浓度范围内，乳酸含量与 565 nm 处波长吸光度呈线性关系，因此，可以通过测定 565 nm 处的吸光度来测定乳酸的含量。通过实验证明此方法可行并且快速有效。

5、用DNS法测定残糖含量中。以葡萄糖的浓度Y（mg/ml）对540nm分光光度值，进行线性回归，其回归方程为Y=1.4163X+0.0255，相关系数为0.9988。为以后测定发酵液中残糖含量奠定了基础。

关键字：L-乳酸，精制，测定，分离，含量

目录

前言............................................................................................................................. - 2 - 第一章文献综述 ......................................................................................................... - 2 -

1.1 乳酸的性质 .................................................................................................... - 2 -

1.1.1 乳酸的分子结构................................................................................... - 2 -

1.1.2 乳酸的理化性质................................................................................... - 3 - 第二章乳酸测定方法研究 ........................................................................................... - 3 -

2.1引言 ............................................................................................................... - 3 -

2.2 发酵液中L-乳酸的分离精制......................................................................... - 4 -

2.2.1 仪器与方法................................................................................................. - 4 -

2.2.1.1仪器及试剂....................................................................................... - 4 -

2.2.1.2 实验方法.......................................................................................... - 4 -

2.2.1.3结果与讨论....................................................................................... - 5 -

2.3 同型、异型乳酸发酵的确定（薄层色谱）....................................................... - 6 -

2.3.1 仪器与方法................................................................................................. - 6 -

2.3.1.1仪器及试剂....................................................................................... - 6 -

2.3.1.2实验方法 .......................................................................................... - 6 -

2.3.1.3结果与讨论....................................................................................... - 7 -

2.4 乳酸含量测定................................................................................................. - 8 -