制药药剂教案
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实验1 生化实验基本操作
一、生化实验特点
介绍生化的重要性和有趣性,引起学生对生化课的兴趣,帮助学生树立正确的实验态度
1、简介生物化学学科特点:
1)一门在分子水平上研究和探索生命现象和本质的学科,发展迅速,进展快,是生命科学的领头羊,其理论和技术已渗入到医
学各学科,二十一世纪被称为分子生物学时代,这门学科的发
展,已很大程度上改变着人类的生存状态,但仍有很多未知领
域。
2)从同学们关心的角度(考研)说明生化的重要性。
3)是一门实验性学科,每一理论的提出都来自于科学实验,实验本身是这门学科的基础和重要组成部分,是探究问题的重要途
径,培养我们发现问题、分析问题解决问题的能力,而非机械
的操作(多问为什么!多想怎么办!)。
2、生化实验的特点:
1)主要运用化学的原理和方法设计的科学实验。
2)生化实验拥有先进的实验手段。
3)微量和定量是生化实验的一大特点。
二、生化实验室规则
让学生树立科学正确的实验意识,培养基本的科研素养。
1、实验前:认真预习,有自己的见解,提出实验思路和问题。
2、实验中:认真操作,仔细观察,如实纪录。养成良好的科学实验习惯,注意安全。
3、实验后:独立完成实验报告,分析结果和出现的问题,培养分析解决问题的能力。
离开实验室时,清点仪器,安排值日,检查灯火水电气等。
三、生化实验基本操作
1、玻璃仪器的清洗:(开始实验的重要步骤,是实验能否成功的重要因素)
一般玻璃仪器:(如试管,烧杯)自来水冲洗—肥皂水刷洗—自来水冲洗—
蒸馏水淋洗—干燥(倒置风干)
容量分析仪器:(如吸量管,滴定管)自来水冲洗—铬酸洗液浸泡—大
量自来水冲洗
蒸馏水淋洗—干燥
比色杯:自来水冲洗—酒精或盐酸浸泡—自来水冲洗—蒸馏水淋洗
***注:切忌用试管刷、粗布擦洗,分清毛面光面,手拿毛面。
清洁标准:对光面玻璃璧上有均匀的水膜,倒置不挂水珠。
教学内容与组织安排:
2、吸量管的种类及使用
分类:奥式吸量管,移液管,刻度吸量管(实验中要根据情况选取合适的吸量管)刻度吸量管:全流出式(刻度到尖端,
吹)和不完全流出式
使用:执管;取液(忌悬空);调准刻度(液体凹面,视线,刻度平行);
放液(管尖贴内壁);洗涤。
4、微量可调式移液器的使用
调节所需体积值;套枪头;垂直持握,大拇指按至一档取液;
排液按至一档后继续至二档;移取另一液体时更换枪头。
5、溶液的混匀
旋转混匀法:手持,手腕,离心运动。(适用于未盛满液体的试管或锥形瓶)
指弹法:左手持试管上端,右手轻弹试管下部。
颠倒混匀法:适用于有塞的容量瓶。
吸量管混匀法:用吸量管将溶液反复吸放数次。
玻璃搅动法:常用于固体试剂的溶解和混匀。
6、离心机的使用
BS原则平衡(balance)对称(symmetry)
实验2糖的颜色反应
[实验目的及要求]
1.掌握莫氏试验鉴定糖的原理和方法;
2.掌握塞氏试验鉴定酮糖的原理和方法
3.掌握杜氏试验鉴定酮糖的原理和方法.
[实验原理]
1.莫式试验:糖经无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与а-萘酚生成紫红色缩合物。
2.塞式试验:酮糖在浓酸的作用下,脱水生成5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应;有时亦同时产生棕红色沉淀,此沉淀溶于乙醇,成鲜红色溶液。
3.杜式试验:戊糖在浓酸溶液中脱水生成糠醛,后者与间苯三酚结合成樱桃红色物质。
[实验仪器及用品]
仪器:水浴锅
器皿:吸管、试管
实验药品:蔗糖、葡萄糖、淀粉、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、а-萘酚、浓硫酸、95%乙醇、间苯二酚、盐酸、间苯三酚。
[实验内容及步骤]
一、莫式实验
于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1 ml水中),然后各加莫式试剂2滴,摇匀,将试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5 ml(切勿振摇!),硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。
二、塞式试验
于4支试管中,分别加入0.5 ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%果糖溶液,然后各加莫式试剂2滴,摇匀,同时置沸水浴内,比较各管颜色及红色出现的先后顺序。
三、杜式试验
于3支试管中加入杜式试剂1ml,再分别加入1滴1%葡萄糖溶液、1%半乳糖溶液和1%阿拉伯糖溶液,混匀。将试管同时放入沸水浴中,观察颜色的变化,并记录颜色变化的时间。
三、实验现象记录
仔细观察实验中的颜色变化,对于塞式试验和杜式试验还需记录下颜色变化的时间。
[实验注意事项]
1.试管中加入各种糖后,做好标记,并按顺序放到水浴锅中;
2.实验过程中,要仔细观察溶液的颜色变化情况。
[实验报告要求]
1.写好预习报告,包括实验目的与要求、实验原理、重要的实验器材及试剂、实验步骤。
2.做完实验后,把所观察到的实验现象记录在实验报告上,并做相应的解释。
实验3蛋白质及氨基酸的呈色反应
一、目的:
1.了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。
2.了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理。
3.学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。
二、呈色反应:
(一)双缩脲反应
1.原理:
素加热至180℃左右,生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相似,也能发生此反应。可用于蛋白质的定性或定量测定。