生物检测技术

生物检测技术

一、名词解释

1．三线表:由三条线组成即顶线，栏目线，底线，顶线与底线为粗线栏目线为细线，必要时可添加辅助线，但仍称作三线表。

2．色谱图：）--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号－时间曲线，又称色谱流出曲线

3．抗原决定簇：抗原分子表面决定抗原特异性的化学基团。

4．放射性核素：指原子核能自发的产生成分或能级的变化，在变化时伴有射线的发射(放射线)，然后变成另一个元素的核素。

5．ELSIA：是一种集免疫学，生物化学和光学检验的检测技术。

6． PCR：聚合酶链式反应，其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温

变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进

行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简

便、省时等特点。

7．DNA复性：在适当的条件下变性DNA的两条互补链可再恢复成天然的双螺旋结构的过程。

8．CT值：每一个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环次数。

9．原代培养：取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前成为原代培养。

10.染色体带型:染色体经过特殊处理并用特定染料染色后，在光学显微镜下可见其臂上显示不同深浅颜色的条纹，此称为染色体带。各号染色体带的形态称为带型。

11.生物芯片：是一种高通量，微型化，自动化，成本低，防污染的检测技术。

12.放射自显影：利用放射性核素发射的射线使感光材料中卤化银等感光，显出影像后进行放射性。

13.电泳：只利用带电颗粒在电场中能向异性电极涌动这一现象来分离、纯化或分析检测供试品的一种生物化学技术。

14.光学检验：

15.tm值：DNA双螺旋结构降解50%的温度。

16.NOTHORN BLOTTING：即RNA分子杂交：是指将待检测RNA片段从变性的琼脂糖胶转移到固相支持介质上，再与标记的核酸探针杂交。17.免疫组织化学检验技术: 利用标记物标记的抗体与组织或细胞的抗原反应，结合形态学检查，对抗原做定性、定量、定位检测的技术。

二、选择题

1~5（过滤灭菌法）（免疫器官）（双缩脲）（核酸）（260nm）

6~10（ELISA）（常规育种）（带有化学键合基团的物体）（定量试剂盒）（多对引物）

三、填空题

1. SDS-PAGE的3个分离效应分别是浓缩效应、电荷效应、分子筛选效应。

2.双向电泳的第一向是等电聚胶电泳，第二向是SDS-PAGE电泳。

3.核酸能吸收紫外光是因为他们有嘌呤环和嘧啶环构成的共轭双键系统。

4.PCR反应体系的五要素分别是引物、模板、DNA聚合酶、二价阳离子、底物。

5.ELISA是集免疫学、生物化学、光学检测技术于一体的新型检测技术。

6.在免疫蛋白实验中最常用的两种标记抗体酶是和。

7.Southern转膜的3种方法分别是毛细管虹吸印迹法、电转引法、真空转移法。

四、判断题

1在实验室内发生触电要迅速切断电源，一面通知医生前来救治，一面立即查看触电者的情况，在等待医生来到的时间里，应进行胸外心脏按压和口对口人工呼吸（对）

2标准差反应一个数据集的离散程度，平均数相同的标准差未必相同，标准差越小距平均值越近越精确（错）

3正交实验是研究多因素多水平的一种设计方法，它是根据正交性从全面实验中挑选出部分有代表性的点，进行实验，这些有代表性的点具备了均匀分散齐整可比的特点（对）

4琼脂糖凝胶电泳时如果电压过高，则电泳分离的线性范围变窄，同时也会电泳中产生大量的热量，导致dna片段的降解（对）

5分光光度计在紫外区域以钨灯作为光源，发射185~400nm的连续光谱（错）

6 lgG是由四条多肽链组成的，两条大的链成为重链或者H链，两条小的链成为轻链或L链，他们通过非共价键连接成复合体（对）

7在温泉中分离一种水生噬热杆菌中提取的一种耐热dna聚合酶，即TAPdna多聚酶，他极大的推动了pcr技术的发展（对）

8northern杂交时在电泳结束后，需要对核酸进行变性，这样才能进行下一步的转膜(对)

9冷冻的细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞死亡(错)

10测定琼脂固体培养基上生长的细胞材料的鲜重，可以先取出细胞材料，吸去琼脂培养，用滤纸吸干水分，在直接称取重量（对）

五、简答题

1.简述实验设计的基本原则。

答：对照原则：空白对照、标准对照、实验对照、自身对照和历史对照

重复原则：即研究对象要是有一定的数量或者说样本含量应足够

随机化原则：即应保证每个实验对象都有同等机会进入实验或接受某种处理

均衡原则：即各处理组非实验因素的条件基本一致，以消除其影响

2.SDS-PAG E的基本原理。

答：SDS-PAGE是在蛋白质样品中加入SDS和b-硫基乙醇的样品处理液，SDS是一种很强的阴离子表面活性剂，他可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。强还原剂b-硫基乙醇可以断开二硫键，破坏蛋白质分子的四级结构。使蛋白质完全变性，解聚成单链分子。SDS与解聚后的单链充分结合，形成带有大量负电荷的蛋白质- SDS复合物，蛋白质分子结合SDS阴离子后，所带负电荷的量远远超过了他原有的静电荷，从而消除和遮盖了不同类型蛋白质见原有分析构像和电荷的差异。蛋白质的电泳迁移率主要决定于亚基的相对分子质量，而与其原有电荷和形状无关。

3.菌落原位杂交的基本原理

答：原位杂交是基于DNA分子变性和复性原理而发展起来的一种技术。两条不同来源的但具有同源性的核苷酸单链片段在适宜的条件下能够按照碱基互补配对原则通过氢键相互结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双链分子织切片或细胞内待测核酸（RNA或DNA）片段进行杂交，然后坦然相对应的检测方法（放射自显影等）予以显示，在光镜或电镜下观察目的DNA或mRNA的存在，并对其进行准确定位。

4.贴附生长细胞的生长过程

答：游离期、贴壁期、潜伏期、对数生长期、停止期（平台期）

5.DNA琼脂糖凝胶电泳的基本步骤？

用胶带将洗净干燥的制胶板的两端封好，水平放置在工作台上，调整好梳子高度开始配制琼脂糖凝胶，称取0.24克琼脂糖于30ml的0.5αTBE 中，在微波炉中使琼脂糖颗粒完全溶解冷却到60度左右加入溴化银最后浓度0.5g/ml摇匀后，冷却至45-50度时倒入制胶板中，使其厚度约为

3mm室温放置30-45分钟，溶液凝固成凝胶拔去梳子，撕下胶带，即制