药物分析芳酸类非甾体抗炎药物的分析

相同药物,不同浓度, 相互比较,主点限量
三、二氟尼柳中有关物质的检查
所谓物质A和物质B的检查是 采用自身对照法进行检查的
TLC
HPLC
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第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析 萘普生的有关物质检查 色谱条件
杂质限量
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第三节: 特殊杂质及其检查法 二、对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙酰胺
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第四节 含量测定
1.直接滴定法
COOH OCOCH3
NaOH
中性乙醇 20℃以下
COONa H2O
OCOCH3
乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶
液中滴定过程易水解
中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，
可消除滴定误差
➢ pKa 3~6 的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定 ➢ pKa 6~9 的药物要用非水溶液滴定法 ➢若SA不合格，不宜采用本法
的NaOH液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4
COONa
COONa
NaOH OCOห้องสมุดไป่ตู้H3
NaAc H2O OH
2NaOH H2SO4
Na2SO4 2H2O
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第四节 含量测定
空白 消耗
样测 消耗
校正 因数
标示量%=
(V0-V) ×F ×T ×W ×100% W ×标示量
橙红色
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第二节 鉴 别
(三)氧化反应
甲芬那酸＋H2SO4
(O) K2Cr2O7
深蓝色
随即变为棕绿色
△
(四)水解反应
COOH
OCOCH3 Na2CO3
阿司匹林
黄色并产生绿色荧光
COONa
OH H2SO4
COOH OH
+
CH3COONa +CO2
H2SO4
白色水杨酸
CH3COOH
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第四节 含量测定
滴定度
滴定度 浓度
待测物反应 系数
滴定液物反 应系数
滴定液物摩 而质量
空白反应体 积
样品测定消 耗体积
样品称重量
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第四节 含量测定
3.两步滴定法(Two-step titration) Aspirin片
CH2COOH HO CH COOH
酸性
CH3
HO
R'
O R
芳基丙酸类
第一节: 结构与性质
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光谱特性
第一节: 结构与性质
酸性
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第一节: 结构与性质
光谱特性
水解
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OO S
HN CH3 O
光谱特性
NO2 尼美利舒 Nimesulide
第一节: 结构与性质
其它非甾体类抗炎药
第一节 典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质
❖ 一、典型药物与结构特点
(Aspirin) O OH
(Salicylic Acid) O OH
O CH3 O
(阿司匹林)
O OH O R
(Salsalate) O OH
R' (水杨酸类)
O F
O OH
(双水杨酯)
OH (水杨酸)
(Difunisal) O
测定：280nm 空白：CHCl3
①NaHCO3使ASA和SA成盐保留于柱上 用CHCl3洗脱的目的：去除中性或碱性杂质
②冰HAc酸化的目的：使ASA游离，易被 CHCl3洗脱
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第四节 含量测定
例子
对照品浓度
供试品吸光度
对照品吸光度
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第四节 含量测定
五、HPLC
HPLC
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第四节 含量测定
一、酸碱滴定法(Acid-base titration method) 苯甲酸 pKa 4.20 水杨酸 pKa 2.98 酸性较强
C OH
O ✓羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加； OH ✓分子内氢键，更增加了其极性
直接滴定
Aspirin、丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均 采用本法
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烯醇式结 构:酸性
第四节 含量测定
为什么氢氧 化钠能溶解
之？
本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几 乎不溶，在丙酮中微溶。所以CHP使 用定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后， 再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。
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第四节 含量测定
2.水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis)
COOH
COONa
OCOCH3
OH
2NaOH
CH3COONa H2O
2NaOH H2SO4
Na2SO4 2H2O
USP32-NF27
取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，缓 缓煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L) 滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的 NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4
显玫瑰红色
显淡紫色
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二、缩合反应显色
二苯甲酮结构
第二节: 鉴别试验
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第二节: 鉴别试验
❖ 三、重氮化-偶合反应 ❖ 对乙酰氨基酚具有伯氨基，在酸性条件下反应可生
成对氨基酚，再与亚硝酸钠进行重氮化反应，之后 再与碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。水解反应
片剂 规格
滴定 度
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第四节 含量测定
优点 缺点
直接滴定 水解后剩余滴定
法
法
两步滴定法
操作简便
水杨酸干扰少
结果准确，避免游 离SA及片剂中稳定
游离SA偏高 时结果偏高
不能完全排出干扰
二、非水溶液滴定法
吡罗昔康
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第四节 含量测定
四、UV
1.直接UV法
2.离子交换-UV法 氯贝丁酯在226nm的波长处有最大吸收，但对氯酚 等有关物质亦有吸收，干扰UV法的测定。根据氯贝 丁酯为酯结构，不能发生电离，而有关物质可发生酸 性解离的性质差异，采用阴离子交换色谱分离后，采 用UV法测定。
层
析
担体：硅藻土(Celite 545)
柱
固定相：一定pH的缓冲水溶 玻
液
棉
流动相：与水不相混溶的有机 溶剂(洗脱前必须先用水饱和)
4mm
压 榨 棒 21mm
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第四节 含量测定
b.ASA测定 供试液制备
洗脱 5,25mlCHCl3 相继洗脱，弃去CHCl3 洗脱 10ml冰HAc-CHCl3(1→50)**；85ml冰 HAc-CHCl3(1→100)，并稀释至100ml
对照 品浓
度
供试 品浓
度
对照 品浓
度
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水解
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第二节: 鉴别试验
❖ 依据药物理化性质，可展开一系列鉴别方
一、法与三氯化铁反应显色
水杨醛反 应
阿司匹林：紫堇色 双水杨酯：紫色
二氟尼柳：深紫色 均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色
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❖ 对乙酰胺基酚与三氯化铁 显蓝紫色
第二节: 鉴别试验
酚羟基反 应
(CH3CO)2O
OH
+
OH COOH
OCOCH3
醋酸苯酯
OH COO
HPLC法
水杨酸苯酯
OCOCH3 COOH
+
OCOCH3 COO
乙酰水杨酸 苯酯
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第三节: 特殊杂质及其检查法 二、甲芬那酸中2,3二甲基苯胺的检查
GC法
甲芬那酸
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第三节: 特殊杂质及其检查法
第二节 鉴 别
N-H O-H
N-H Ph:C=C 芳胺 酚
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❖ 八、色谱法
供试品保留时间
第二节: 鉴别试验
对照品保留时间
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第三节: 特殊杂质及其检查法 一、阿司匹林和双水杨酯
ONa
CO2 加压，
生产工艺
ONa COONa H+
水杨酸
OH COOH
。
-CO2
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第二节: 鉴别试验
❖ 六、特征元素反应： ❖ 分子中含有氯、硫等元素可以转化为氯化物或硫
化物进而进行鉴别。 七、光谱法 1、UV 2、IR
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第二节 鉴 别
(七) IR：阿司匹林
-COOH -OH
-COOH Ph-C
邻位取代Ph
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产生芳伯 胺
芳伯胺重氮化
HO
N2Cl +
偶合反应
OH + NaOH
NN
OH
OH
红色偶氮化合物 Company Logo
第二节 鉴 别
重氮化-偶合反应
OCOCH3 COO
贝诺酯
NHCOCH3
HO
+3H2O HCl
+
NH2 HCl
OH COOH
HO
NaNO2,2HCl
OH
N2+Cl-
NaOH
OH
NN
OH
主讲: 秦大伟
药物分析
第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
❖ 非甾体抗炎药（Nosteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）是 一类不含有甾体骨架的抗炎药，多数具有芳酸基 本结构。
❖ 本章主要讲芳酸类NSAIDs，同时讲一下尼美利 舒和对乙酰氨基酚。
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第四节 含量测定
60mm 200~300mm 350mm
3.CPC-UV法(Column Partition Chromatography)
✓利用固定相酸碱性的不同进行分离
✓利用药物和固定相起化学反应而进行分离
✓利用生成离子对进行层析分离 22mm
✓单纯靠选择流动相进行分离
匹林0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示剂显中
性)20ml，振摇使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液
(0.1mol/L)至显粉红色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置
水浴上加热15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H2SO4 液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml
F
OH
OH
(二氟尼柳)
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第一节: 结构与性质
酸性
O OH
光谱特性
H N
R
邻氨基苯甲酸类
酸性
Mefenamic Acid
O OH
H
CH3
N
CH3
甲芬那酸
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酸性
O R'
O
光谱特性
H N
R
邻氨基苯乙酸类
第一节: 结构与性质
酸性
基团特性
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HO C COOH
CH2COOH
枸橼酸
HO CH COOH
酒石酸
Trataric acid
水解产物 水杨酸SA HAc
Citric acid
第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA， TA，SA，HAc
第二步：水解后剩余滴定
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第四节 含量测定
取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿司
H2 (SCO4H,37C0~O7)25OC
双水杨酯
O O C CH3
COOH
ASA
OH
副产物 Company Logo
第三节: 特殊杂质及其检查法
COOH [O]
OH
淡黄、红棕、深棕色
O
HO
COOH
[O]
OH O
COOH
HPLC法
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第三节: 特殊杂质及其检查法
其它有关物质