HPLC标准曲线的制作

HPLC标准曲线的制作

你可以随便弄一个浓度进一针样品看一看你这个样品的吸收度如何，再根据你样品的吸收度配置适当的底浓度样品逐个稀释这样可以连检测线定量限一起做了，一举3得(最后将你得到的峰面积根据你的进样浓度做一个线性回归就行啦，线性好的话R的平方一般接近于1 。

请问下各位在上样的时候是进同浓度的不同体积的样液绘制标准曲线好还

是先配好不同浓度的样液再以相同体积进样好呢,

这2个有什么区别吗,

请你看看分析化学书，有关精密度和线性的关系就知道了，实在不行，可以查看2005版药典一部附录新药质量标准的技术要求项下。自己看看就知道了。

我觉得进不同浓度相同体积好.因为你进样体积不同.在同样的方法下,系统的

各项参数可能会发生变化.而且你要通过进样体积的变化来控制浓度范围,这样也不大可行.一般我们进样的体积是5到20微升.而这个狭小的范围我们能调控的浓度线性范围非常窄.而通过事先调配不同浓度的话,就简单可行,而且浓度范围可以任意去控制.在实际操作中,老师也一直是教我们通过控制不同浓度来制作标准曲线的.以上只是个人的粗浅看法,欢迎高手们前来批评指正!!!!!!!!!!

前面几个站友说得都很好。我简单再补充一点自己的看法。

一般而言，还是不同浓度进相同体积做标曲是最规范的做法，而且可以有效避免人为误差。比如说，你的一个浓度配错了，如果以这个浓度为基准进不同的体积，会导致你最后的结果会整体偏大或偏小。所以要特别注意。

但实际工作中，如果你们的产品做得比较成熟了，而且做实验的经验比较丰富，大家为了省事还是多采用配一个浓度进不同的体积。

以进样量做标准曲线和以不同浓度进样相同体积做标准曲线差别不大。

但一般建议第二种方法。

1，仪器存在系统误差，而且进样体积不一样增大了这种误差。这种误差不是人为可以控制的，所以越少越好。体积大了在进样环中存在扩散效应，而且取不同的体积本来就不是很准确。

2，两种方法在配制过程中存在人为误差，不过这是可以人为控制的。

但很多操作者在制作标准曲线的时候以第一种方法，是因为比较省事，用第二种方法比较麻烦，而且还学要消耗不少的标准品。