实验室基本技能培训

单道可调移液器、多道可调移液器、 电子调节/显示移液器。 Tip头/吸头/枪头：10 ul（白），200 ul（黄）， 1 000 ul（蓝）， 5 000 ul（白）。
紫外分析仪
• 用于检测许多主要生物大分子物质如蛋 白质、核苷酸等。
PCR仪
• PCR(Polymerase Chain Reaction)是指聚合 酶链式反应。其反应是用DNA聚合酶在体外大量扩 增DNA片段的一种方法。 • PCR仪就是将此方法实现了自动化操作的一 种仪器，是分子生物学实验常用和必备的设备。 • PCR仪包括普通PCR仪、梯度PCR仪、荧光定 量PCR仪。
• 注意：1、每次使用前要根据烘干物品要求确定合适的温度；
• • • 2、物品不能排列太密，以免影响热气流动、散热； 3、保证鼓风机正常运转； 4、需要观察工作室内样品情况时，可透过玻璃门观察。 但箱门以少开为好，以免影响恒温。特别是200℃以上时，开 箱门可能使玻璃门骤冷而破裂。
1) 温度控制系统
其它设备
•D.冰冻干燥机：用于生物大分子水溶液的冰冻干燥， 可由其水溶液直接制得固体干粉。 •E.机械和水环式真空泵：用于旋转蒸发器和各种真 空抽气操作。
•F.冷室: 4℃-10℃的冷室，工作人员可以在其中进
行各种柱层析、各种电泳、生物大分子的提取和分离、 透析等操作，并可以贮存各种生物制品和生化试剂。 •G.暗室:主要用于一些避光的实验，如显影。
实验一 实验基础知识/基本技能培训
实验基础知识/基本技能培训
实验目的
• 谨记实验室规程 • 认识分子生物学实验的主要仪器设备 • 掌握分子生物学实验仪器设备基本技能
目
录
前言：分子生物学实验规程
第一节：分子生物学实验设备 第二节：分子生物学基本技术 第三节：实验安排
前
言
分子生物学实验规程
实验规程
温度控制系统
低温操作可以用制冰机制冰块降温； 对于需在较高温度下进行的操作，则可 使用烘箱、微波炉、恒温水浴锅、恒温
空气摇床等。
实验用水处理系统
实验用水 • 一次蒸馏水：水经过一次蒸馏，不挥发的组分残 留在容器中被除去，挥发的组分（氨、二氧化碳、有 机物）进入蒸馏水的初始馏分中，通常只收集馏分的 中间部分，约占60％。 • 多次蒸馏水：在一次蒸馏水中加入碱性高锰酸钾 溶液，除去有机物和二氧化碳；加入非挥发性的酸 （硫酸或磷酸），使氨成为不挥发的铵盐。 • 无（去）离子水：指除去了呈离子形式杂质后的 纯水。主要指采用离子交换树脂处理方法，应用离子 交换树脂去除水中的阴离子和阳离子，但水中仍然存 在可溶性的有机物。
实验规程
4) 用电安全相关规定：
• 按照规定（电压、功率）合理用电。
• 手上有水或潮湿请勿接触电器用品或电器设备。
• 掌握主要仪器、设备的性能和操作方法，严格按 操作规程操作。 如：擦拭、维修过程中要关闭电源 •
• 最后离开实验室务必随手将不用的水、电等开关 关闭。
实验规程
5) 环境卫生相关规定：
• 2) 实验用水处理系统
• 3) 消毒系统
• 4) 计量系统
• 5) 离心设备
• 6) 电泳装置
• 7) 凝胶成像系统
1) 温度控制系统
• 冰箱/柜的使用：
门（随手关，关严）
电源（防止不小心关闭）
• 微波炉：
要用微波炉专用容器（不能加热金属、密封物）；
不要让微波炉空转； 微波炉工作时不要将眼睛紧靠微波炉5厘米之内去观看微 波炉工作-眼睛对微波最敏感，以免受到不必要的伤害； 防灼伤！不要徒手拿容器、不要把容器口冲着人！
电泳装置
• 电泳是生化实验中最常用最重要的实验技术 之一，主要用于分析、鉴定，也可用于制备。 • 电泳装置由电泳仪和电泳槽两部分组成。 • 电泳仪：电泳时提供一定的电压和电流 • 电泳槽：凝胶电泳系统的核心部分，根据电 泳的原理，凝胶都是放在两个缓冲腔之间，电场 通过凝胶连接两个缓冲腔。
电泳装置
1) 温度控制系统
• 制冰机的使用：（水-进水、排水；电）
• 1．不论何种原因停机时，不得连续启动，要每隔5分钟 再启动，以免损坏压缩机！ • 2．定时检查进、出水管接头，以便处理可能泄露的少量
余水！
• 3．不用时，应排掉内胆内余水，用干净的布擦干储冰箱 内胆！ • 5．在对制冰机进行清洁、检查及一周以上不用时，请拔 掉电源插头。
生物培养设施
• • 超净工作台 恒温培养箱
蛋白质检测设备
• 蛋白电泳槽和转印槽-用于western-blotting实验
蛋白质检测设备
• 酶标仪-用于ELISA （酶联免疫吸附实验）实验。
其它设备
• 实验室除以上常规设备和设施外，还必须装 备下列一些常用设备： •A.通风柜：用于有害和有毒气体的操作。 •B.组织打碎机和匀浆器：用于各种生物材料、动 植物组织和细胞的破碎。（研钵） •C. 超声清洗机：用于各种器皿、移液管和自动取 液器吸头的清洗和高效液相色谱仪所用流动相的脱 气等。
• 对液体进行灭菌，容器不能密封、体积不能超过容积的2/3； 灭菌结束后不能打开排气阀（尤其是上排气阀）。
分子生物学基本技术
• 1) 温度控制系统
• 2) 实验用水处理系统
• 3) 消毒系统
• 4) 计量系统
• 5) 离心设备
• 6) 电泳装置
• 7) 凝胶成像系统
4) 计量系统-质量
电子天平
• 2] 盖好（注意密封胶圈）顶盖后必须拧紧顶盖； • 3] 打开灭菌器的热源，开启排气阀排完空气后（约在水沸腾 后10 min～15 min ）关闭排气阀； • 4] 将压力升至102.9 kPa(1.05 kg/㎡),温度要求达121℃,维 持到规定时间（根据物品性质以及有关情况确定,一般20 min～30 min）; • 5] 灭菌结束后,要待压力恢复到零位后开盖取物。
计量系统
•⑶液体体积度量仪器：常用的有各种量筒、移液 管、容量瓶、移液器。
计量系统
• ⑷ 液体溶质定量仪器：主要有紫外分光光度 计和可见分光光度计等。
离心设备
•实验用离心机分为制备性离心机和分析性离心机。
•制备性离心机主要用于分离各种生物材料。
•离心方法是分离和制备生物大分子最常用的手段。
•制备性离心机可分为三类:低速、高速（冷冻）、 超速离心机。
• 恒温水浴锅、恒温空气摇床：
根据需要设置温度； 恒温水浴锅中要保持足够的水量。
分子生物学基本技术
• 1) 温度控制系统
防污染
• 2) 实验用水处理系统
• 3) 消毒系统
Hale Waihona Puke • 4) 计量系统• 5) 离心设备
• 6) 电泳装置
• 7) 凝胶成像系统
3) 消毒系统
高压灭菌锅
• 1] 在主体腔内加入适量的清水，将灭菌物品放入灭菌器内；
• 注重环境卫生，并须保持整洁。
• 化学物溢满地面或工作台时应立即选用合适的方 法擦拭冲洗干净。 • 严格区分开污染区和洁净区。
污染区：戴手套操作。 洁净区：徒手操作。
实验要求
• 1) 详细记录和分析实验结果，并按时提交 实验报告； • 2) 实验中一定要处处用心、勤动手，多问 为什么； • 3) 仔细操作和观察； • 4) 保留好每一步的实验样品，在确准的情 况下才能当废液扔掉。
• 严格遵守生命科学中心制定的安全规则。 • 发现实验室/楼内任何地方有危害安全之人、事、 物等，必须立即向有关人员反映并作紧急处理。 1) 穿着规定
• 必须按规定穿戴工作服。
• 进行危害物质、挥发性有机溶机、特定化学物质 等化学药品操作实验，必须要穿戴防护具（防护 口罩、防护手套、防护眼镜）。 • 长发及松散衣服妥善固定。
环境温控：大部分的分子生物学实验都要求在 一定的温度下进行操作，为了保持这些条件，实验 药品、试剂、 样品等的取放 室应装备空调等。 药品、试剂、样品等的保存：不同药品、试剂、 样品要求在不同的温度下保存，实验室必须备有4℃、 －20℃、－80℃的冰柜/箱，需要在更低温度下保存 的样品，则须使用液氮罐。
第一节 分子生物学实验设备
分子生物学实验设备
• 1) 温度控制系统 • 2) 实验用水处理系统 • 3) 消毒系统 • 4) 计量系统 • 5) 离心设备
• 6) 电泳装置
• 7) 凝胶成像系统 • 8) PCR仪
• 9) 生物培养设施
• 10) 蛋白质检测设备 • 11) 其他设备
温度控制系统
• 5] 严禁有腐蚀性的称物直接接触称盘与天平面板。 • 6] 使用完毕后，要清理称盘、面板，保持仪器清洁。
4) 计量系统-体积
• 依称量需要选择合适的器皿-各种量筒、移液管、容量瓶。 • 移液器：
量程包括：0.1-2.5 ul，0.5-10 ul，10-100 ul，20-200 ul，100-1000 ul，500-5000 ul。
• 对环境高度敏感的精密电子测量仪器, 使用时应小心操作, 台 面应无明显振动, 不要放在空调口。 注意：1] 调整底角螺丝使水平指示器的气泡居中。 2] 使用精密电子天平前最好热机15~20分钟，以确保正 确读取电子天平的数值。 • • 3] 称量物品前先按（归零）键；称样时关上天平小门。 4] 称物品时，勿超过精密电子天平的最大称量，且需将物 品放于称盘中心，需轻拿轻放，不要冲击称盘。
其它设备
•H.基因导入仪：用于向受体生物细胞中导入基 因。常用的导入仪有：电导入仪、基因枪、激 光和超声导入仪、原生质体融合仪等。 •I.高效液相色谱仪和毛细管电泳仪：用于各种 生物大分子的分析与鉴定。
第二节 分子生物学基本技术
分子生物学基本技术
---使用方法及注意事项 • 1) 温度控制系统
实验规程
2) 饮食规定 • 禁止在实验室吃喝食物且使用化学药品后 需先洗净双手方能进食。