微生物实验细菌培养接种 ppt课件

斜面培养基
半固体培养基
结果观察——普通平板
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2020/11/29
普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。
注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或 粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。
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2020/11/29
结果观察——液体培养基
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2020/11/29
结果观察——斜面培养基
精品资料
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2020/11/29
• 你怎么称呼老师？ • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你
是否会认为老师的教学方法需要改进？ • 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我
笨，没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
I M Vi C试验
大肠埃希菌 + + - -
产气杆菌
- - ++
IMViC试验： 是吲哚、甲基红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定。
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实验小结
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1、三类培养基
➢液体培养基——用于增菌； 均匀混浊、沉淀、表面生长
➢ 半固体培养基——观察动力；保存菌种（6个 月）；穿刺线，扩散生长
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细菌培养接种法——平板划线法
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菌种：混合菌液 材料：普通平板 用具：接种环 方法：分区划线
原始区域
1区 2区
4区 3区
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细菌培养接种法-- 2020/11/29 斜面接种、液体接种、半固体
菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面 材料：斜面、液体、半固体培养基 用具：接种环、接种针
液体培养基
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糖发酵试验
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不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。
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甲基红（methyl red）实验 2020/11/29
M - 甲基红（methyl red）实验 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 葡萄糖→丙酮酸
甲基红 甲基红 +
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吲哚（indol）试验
I-吲哚（indol）试验
分装，高压灭菌， 15磅（121.3℃）15～20分钟
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人体、物品中细菌检查
材料：普通平板 （1份/组）
钱
手
发
衣
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
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飞沫、空气中细菌检查
材料：血平板 （1份/组）
距口15—20cm 用力咳嗽三次
来自百度文库
置空气中 （避日光照射）
琼脂斜面培养基上大肠埃 希菌形成的菌苔生长现象
菌苔（mossy）
指细菌生长繁殖后，在培养基 表面形 成的一层培养物
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结果观察——半固体培养基
1、 扩散生长：具有动力的 细菌,可见培养物扩散和培 养基变混浊。 即有鞭毛的细菌：由穿刺线 向外扩散生长（羽毛状或云 雾状）
2、原位生长：没有动力的 细菌，可见培养物没有扩散， 培养基仍然澄清。 即无鞭毛的细菌： 沿穿刺 线生长
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚 ↑
对二甲基氨基苯甲醛
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枸橼酸盐利用试验
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C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
利用枸橼酸盐生长 +
不能利用
-
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硫化氢试验
2020/11/29
硫化氢试验（醋酸铅培养基）
某些细菌分解含硫氨基酸，生成H2S， H2S遇铁盐（如硫化亚铁、醋酸铅等）， 则形成黑褐色硫化铁（铅）沉淀物，而
呈黑色为（＋）。
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尿素酶试验
2020/11/29
产生氨使培养基变碱， 指示剂显红色，为阳性。 如：变形杆菌为阳性。
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IMViC试验
2020/11/29
IMViC试验
I - 吲哚（indol）试验 M - 甲基红（methyl red）试验 V - VP（Voges-Proskauer）试验 C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
30分钟
飞沫
空气
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
结果观察——血平板
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2020/11/29
表皮葡萄球菌在血 琼脂平板培养基上 形成不溶血的菌落。
甲型溶血性链球菌形 成的α溶血现象也称 为甲型溶血现象或草 绿色溶血现象，属于 不完全溶血。
金黄色葡萄球菌形成 的β溶血现象也称为乙 型溶血现象，属于完 全溶血。
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细菌代谢产物观察
细菌的酶不一样，对营养物质的分解能力不一样， 产生的代谢产物也不一样。
常见：
• 糖发酵试验 • 吲哚（indol）试验 • 甲基红（methyl red）实验 • VP（Voges-Proskauer）试验 • 枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验 • 尿素酶试验 • 硫化氢试验
➢ 固体培养基——分离纯化；保存菌种（1个月） 菌落、菌苔
2、IMViC试验
第三次实验课内容
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1、热力对细菌和芽胞的杀菌作用 2、紫外线的杀菌作用 3、常用化学消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验 4、耐药性变异； 5、细菌的鞭毛变异； 6、高压灭菌器的使用； 7、细菌的鉴定程序； 8、全自动微生物分析仪的基本原理及简单操作步骤
基础培养基的制备
去筋膜黄牛肉绞碎500g加入1000ml蒸馏水
4℃浸泡过夜煮沸半小时
直接煮沸2小时
脱脂纱布过滤，按比例加入1％蛋白胨、0.5% NaCl，0.1%K2HPO4加热溶解补足水至1000ml
调整酸碱度至pH 7.6
过滤，补足失水 重新校正pH一次
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检菌如无细菌生长 （液体透明）即可应用
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第二次实验课
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内容
1.细菌培养法（录象） 2.基础培养基制备（讲解示教） 3. 细菌接种法（一份/组）讲解 4.人体、物品中细菌检查（一份/组）讲解 5.飞沫、空气中细菌检查（一份/桌）讲解 6.观察细菌代谢产物（讲解） 7. 第一次实验报告评讲
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