抗核抗体及常用检测方法
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酶联免疫 吸附试验 ( E L I S A) 、 蛋 白芯片法[ 1 0 】 、 金标法及 流式细胞 术【 l 】 】 等, 但临床应用最为广泛的还 是 I I F和 I B T 。 3 . 1 间接免疫荧光法 该方 法是公认进行 A N A筛查 的首 选方法 。早在 1 9 5 7年 , Ho l b o r o w和 F r i o u等首先 以啮齿动物组
i m mu n i l f u o r e s c e n c e , I I F ) 、 免 疫 印迹 法 ( i mm u n o b l o t t i n g t e s t , I B T ) 、
的研究 已不再仅仅局限于细胞核成分 , 其靶抗原的分布 已由传
统的细胞核拓展到整个细胞 , 除细胞核外 , 还包括 细胞浆 、 细胞 骨架 、 细胞分裂周期蛋 白等 。 根据细胞 内靶抗原的理化特性和分布部位 , 一般可将 AN A
最 为 常 见 的相 关 自身 抗 体 ; 抗 S S — A和抗 S S — B多 见 于 S S患
性抗体或特异性抗体可诊断 和鉴别诊 断疾病特 性 , 检测抗核抗
体可判断疾病 的活动性及预后 , 观察治疗反应 , 指导临床治疗 。 1 抗核抗体简介 顾名思义 , 抗核抗体 ( a n t i n u c l e a r a n t i b o d y , A N A) 是一种抗细
些非结缔组织病如慢性活动性肝炎 、 重症 肌无 力和慢性淋 巴性 甲状腺炎等也可见 A N A阳性 ,正常老年人也可 出现低滴度 的
ANA 。
组 专 门针 对 细胞 核 内脱 氧 核 糖 核 酸 ( D N A) 、核 糖 核 酸
( R N A) 、蛋 白质 、脂类 、酶类及这些物质分子 复合 物的抗体。
名。 如抗 R N P抗体 、 抗 D N A抗体等 ; 有 的则是按 靶抗 原分布位
织冰冻切片为抗原底 物 , 应用 I I F检测抗核抗体。 目前 临床检测 A N A, 多以 H e p - 2细胞和灵长类动 物肝脏如猴肝冰冻切片为抗
原底物片 。 H e p 一 2细胞 即人喉癌上皮细胞 , 其核抗原丰富、 特异 性强 、 含量 高 , 核大 、 细胞结构 清晰 , 易于判读荧 光染色 核型结 果, H e p 一 2细胞 片较 鼠肝 ( 肾) 冰冻切片检测 AN A, 阳性 率可提
பைடு நூலகம்
者, 抗 s s — A敏感性较 强 , 抗 s s — B特异性 较高 , 两者联 合检 测
和提高 s s的诊断率 , 如果联合检测抗 M3受体 抗体或 ( I t胞衬 蛋 白抗体 , 则可使原发性干燥综合征诊断 的敏感性提高至 8 0 %
以上 ;抗 n R N P抗体有助于鉴别结缔组织 和非 结缔组织病 ; 抗
抗原 主要 有 n R N P 、 S m、 S S — A和 S S — B 。③核 仁型 ( m l c l e o l a r
猛发展 。目前已发现具有不 同临床意义 的 A N A二十余种 , 形成
了初 具体 系 的抗 核抗 体谱 ( a n t i n u c l e a r a n t i b o d i e s , A N A s ) , 这些
质型 ( h o me g e n e o u s p a t t e r n , H) ,该型的靶抗原 主要有 d s D N A、
s s D N A、 核小体和组蛋 白。②核颗粒型( s p e k l e d p a t t e n, r S ) , 又称
核斑点型或核斑块型 ,可细分为核粗颗粒 型和核细颗粒 型 , 靶
高 1 0 %~ 2 0 %I 。
I I F检测 A N A, 主要有 以下 6种常见荧 光染 色模 型: ①核均
置命名 , 如抗线粒体抗体 、 抗 高尔基体抗体 和抗着丝点抗体等。
2 检 测抗 核抗体 的临床意义 对A N A的认识 始于狼疮细胞 的发现 , 而对 A N A研究 的兴 起和深入则是源于新病种 、 新技术 的不断发现和 临床 医学 的迅
胞核各种成分的 自身抗体 ,是 自身免疫风 f 生 疾病 ( a u t o i m mu n e r h e u m a t i c d i s e a s e s , A R D) 诊 断 中重要 的血 清学标 志物 『 1 ・ 2 1 , 其是
一
J o 一 1 抗体多见于肌炎 , 且与合并肺间质纤 维化相关 。此外 , 某
■ 鼢 磨
抗核 抗体 及 常用 检 测 方法
王 永贵 苏庆 军 陈建 国
( 解放军第 3 2 2医院 , 山西 大同 0 3 7 0 0 6 )
抗核抗体是抗细胞 内所 有抗原成分 的 自身抗体 的总称。 某 些 自身免疫性疾病往往伴有特征性 的 自身抗体谱 , 而疾病标记
体和抗 S c l 一 7 0可见于 5 0 %以上 的系统性 硬化症患者 ,是该病
分为五大类 : 抗D N A抗体 、 抗 组蛋 白抗体 、 抗非 组蛋白抗 体 、 抗 核仁抗体和抗其他细胞 成分抗体 。 每一大类因不同的抗原特性 又可分 为许多亚类 , 其命名方 式多种 多样 , 有的是 以首位被检 出该抗体 的患者 的姓名缩写命名 ,如抗 S m抗体 、抗 J o l 抗体 等; 有 的是按抗 体相关疾病 的病名命 名 , 如抗 P M— S c l 抗体 、 抗 S S A抗体和抗 S S B抗体等 ; 有的是按抗体的化学组成及特性命
A N A无器官特异性和种属特异性 ,大多数属于 I g G类抗 体 , 仅
少部分属 I g M和 I g A t 3 J 。随着分子生物学 、 细胞生物学和免疫学 等学科 的不 断发展及免疫荧光 技术 的 日益改进 ,目前对 A N A
3 抗 核 抗 体 的检 测 方 法
抗核 抗体 的检测 方 法较 多 ,如 间接免 疫荧 光法 ( i n d i r e c t