抗氧化能力的快速检测方法
抗氧化实验方法
抗氧化实验⽅法1还原⼒的测定样品2ml加到2ml 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.6）和2ml 1%的铁氰化钾溶液的混合液中。
混合物在50℃保温20min，然后在反应混合物中加⼊2ml 10%的TCA，混合后以3000rpm 离⼼10min，取上清液2ml与2ml蒸馏⽔以及0.4ml 0.1%氯化铁在反应试管中反应，10min 后测定其在700nm处的吸光值。
吸光值越⼤表明还原⼒越强。
注意：建议蛋⽩浓度以5mg/ml左右变化，例如2.5，5之类变化。
但具体情况应根据吸光值⼤⼩⽽定。
0.2mol/L pH6.6的磷酸盐缓冲液的配制见附表。
铁氰化钾溶液应盛装在棕⾊瓶中。
⽐⾊⽫的⽤法：可见光(>400nm)⽤玻璃⽐⾊⽫（即没有标字母或者标G的⽐⾊⽫），紫外光时（<400nm）⽤⽯英⽐⾊⽫（即标Q字⽐⾊⽫）。
2 DPPH⾃由基清除活性的测定将1.5ml样品液添加到1.5ml含0.1 mmol/L DPPH的95％⼄醇中，混合，振荡，在室温下放置30min，然后在波长517nm处检测（Ai）。
清除率计算公式为：空⽩为1.5 ml 95%的⼄醇加⼊1.5 ml蒸馏⽔调零。
式中：Ac——对照为1.5 ml DPPH溶液加上1.5 ml蒸馏⽔在517nm处的吸光值；Aj——1.5ml样品液加上1.5 ml 95%的⼄醇在517nm处的吸光值；Ai——1.5ml样品液加上1.5 ml DPPH溶液在517nm处的吸光值；注意：建议酶解液蛋⽩浓度以2mg/ml 左右变化，如0.5,1,2,2.5之类变化，但是具体情况应视清除率⽽定，最终结果应有清除率⼤于50%和⼩于50%的情况。
DPPH样品有毒，需戴⼝罩和⼿套进⾏操作。
⽽且DPPH试剂很昂贵，⽤时注意节约。
0.1m mol/L DPPH ⼄醇溶液的配制：准确称取0.00395gDPPH，⽤95%的⼄醇溶液溶解并定容到100ml。
3 在卵黄磷脂体系中抗氧化能⼒的测定以卵黄脂蛋⽩为底物的LPO模型反应体系包括:体积⽐为1:25稀释的卵黄悬液(卵黄⽤等体积的pH7.45，0.lmol/LPBS配成，使⽤前磁⼒搅拌10min)0.2 mL、⼀定浓度的样品溶液0.lmL、25m moll/LFeSO4溶液0.2mL，⽤PBS缓冲液补⾜⾄2.0mL。
抗氧化性能测试
实验步骤及操作
▪ 实验条件的设定
1.根据抗氧化性能测试的要求，设定合适的实验温度、时间和 湿度等条件。 2.确保实验条件的稳定性和可控性，以减小实验误差。
▪ 实验过程的操作
1.按照实验步骤，准确添加试剂和样品，避免操作失误。 2.实时监测实验过程，记录实验数据，发现异常及时处理。 3.保持实验过程的连贯性和稳定性，确保实验结果的可靠性。
抗氧化性能测试
结果分析与解读
结果分析与解读
▪ 结果总览
1.所有测试数据均表明，我们的系统在抗氧化性能测试中表现 出色。 2.与市场上的其他同类产品相比，我们的系统在多项指标上具 有优势。 3.我们的系统在持续高压和极端温度条件下的抗氧化性能尤其 突出。
▪ 抗氧化性能与时间的关系
1.随着时间的推移，系统的抗氧化性能始终保持在高水平，没 有明显下降。 2.在长时间运行后，系统的抗氧化性能依然稳定，没有出现明 显的性能损耗。
▪ 数据趋势分析与预测
1.通过数据分析，找出数据背后的趋势和规律，为决策提供支 持。 2.建立数据预测模型，对未来一段时间的抗氧化性能进行预测 。 3.结合行业趋势和发展动态，对数据趋势和预测结果进行全面 评估。 在抗氧化性能测试中，通过对历史数据的分析，可以揭示抗氧 化性能的变化趋势，为产品研发、改进和决策提供依据。同时 ，通过数据预测，可以为企业规划未来发展方向提供参考。 ---
▪ 数据处理技术与方法
1.掌握并运用先进的数据处理技术，如数据挖掘、数据清洗、数据分析等。 2.根据测试需求，选择合适的数据处理方法，确保结果的准确性和可靠性。 3.定期对数据处理技术进行更新和学习，保持与前沿技术的同步。 抗氧化性能测试涉及大量数据处理工作，合理运用相关技术和方法能够提高测试效 率，确保结果的准确性，并为进一步的研究提供有力支持。 ---
抗氧化功能评价方法
抗氧化功能评价方法
一、化学方法
1.自由基清除能力测定法：常见的方法有DPPH自由基清除法、ABTS 自由基清除法和超氧阴离子清除法。
这些方法通过测定样品对自由基的清除能力，间接反映了其抗氧化能力。
2.过氧化氢清除能力测定法：该方法通过测定样品对过氧化氢的清除能力，评价其抗氧化能力。
3.金属螯合能力测定法：该方法测定样品与金属离子的结合能力，反映了样品的抗氧化能力。
4.过氧化物酶活性测定法：该方法测定样品中过氧化物酶的活性，评价其抗氧化能力。
二、生物学方法
1.细胞实验法：该方法通过将样品加入细胞培养基中，观察其对细胞的保护作用，评价其抗氧化能力。
2.动物模型实验法：将样品通过灌胃、注射等方式给予动物，观察其对动物体内氧化损伤的保护作用，评价其抗氧化能力。
3.人体试验法：将样品通过口服、注射等方式给予人体，观察其对人体内氧化损伤的保护作用，评价其抗氧化能力。
三、综合方法
1.多指标评价法：综合考虑样品在化学方法和生物学方法中的多个指标，给予综合评分，评价其抗氧化能力。
2.生物传感器法：利用生物传感器对样品进行检测，通过测定信号的变化来评价其抗氧化能力。
3.分子生物学方法：通过测定样品中相关基因的表达水平和蛋白质的表达水平，评价其抗氧化能力。
以上仅为抗氧化功能评价方法的一部分，不同方法的选择应根据具体的研究目的和样品类型来确定。
在实际应用中，常常需要结合多个方法进行综合评价，以获得更准确的结果。
抗氧化活性测定方法
抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定方法在食品、药物、化妆品以及生物学研究中具有重要的应用价值。
抗氧化活性是指物质对自由基的清除能力，其测定方法可以评估物质的抗氧化性能和保护细胞免受氧化损伤的能力。
本文将介绍一些常用的抗氧化活性测定方法。
一、DPPH自由基清除法DPPH自由基清除法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、该方法基于DPPH自由基的紫色溶液，在受到氧化损伤时会褪色。
通过测定样品对DPPH自由基的清除能力，可以评估其抗氧化活性。
实验步骤：1.准备0.1mM的DPPH溶液。
2.取一定量的样品，加入适量的溶剂溶解。
3.取不同浓度的样品溶液，加入相同量的DPPH溶液。
4.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出样品的抗氧化活性。
二、还原能力测定法还原能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。
该方法基于物质对氧化剂的还原能力，通过测定还原剂浓度与吸光度之间的关系，评估样品的抗氧化活性。
实验步骤：1.准备一系列不同浓度的还原剂溶液。
2.取一定量的还原剂溶液，加入适量的氧化剂溶液。
3.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出还原剂的浓度与吸光度之间的关系。
4.根据吸光度与还原剂浓度的关系，评估样品的抗氧化活性。
三、总抗氧化能力测定法总抗氧化能力测定法是一种综合评估样品抗氧化活性的方法。
该方法基于样品的抗氧化剂含量和抗氧化活性，通过测定样品对氧自由基的清除能力，评估其总抗氧化能力。
实验步骤：1.准备一定浓度的氧自由基溶液。
2.取一定量的样品，加入适量的溶剂溶解。
3.取不同浓度的样品溶液，加入相同量的氧自由基溶液。
4.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出样品的抗氧化活性。
以上是常用的抗氧化活性测定方法，还有其他一些方法如ORAC法、TEAC法等也被广泛应用。
不同的方法适用于不同的样品和测定目的，选择适合的方法进行测定可以更准确地评估样品的抗氧化活性。
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法（倾向于考虑DPPH法和ORAC法）1.FRAP法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1]FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法，在低pH值的溶液中，Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。
反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。
该法快速简便、易于操作、重复性好，但FRAP反应属于电子转移(SET)反应，因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。
而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力，因此没有抗氧化能力的生物学相关性。
2.TEAC法(trolox equivalent antioxidant capacity)ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自由基。
在抗氧化剂存在时，这种自由基混合物的光吸收值下降，下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力，测得的结果以TEAC表示，即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。
TEAC法十分简单，适用于大量样品的分析检测。
但是，ABTS·+并非生理自由基，缺乏生理相关性，而且与FRAP方法相似，ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同，因此，只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。
3.DPPH法[2，3](2，2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity)DPPH·(二苯代苦味肼基自由基)法是较常用的方法之一。
总抗氧化能力测定(FRAP法)
精品文档小麦叶片总抗氧化能力测定（FRAP法）一、实验原理FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tri-pyridyl-tria-zine（Fe 3+-TPTZ）产生蓝色的 Fe2+-TPTZ,随后在 593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。
由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素。
并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10側，因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。
由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的，样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。
AntioxidantFe3+-TPTZ （橘黄色）---------- >Fe2+-TPTZ （蓝色）二、实验步骤1. FRAPT作液配制：0.3 M pH 3.6醋酸缓冲液：0.364g无水醋酸钠+3.2mL冰乙酸定容至200mL 用1M HCl调节pH至3.6 ;10mmol/L TPTZ溶液25mL 0.078g TPTZ 用40mM盐酸溶液定容至25mL 20mmol/L FeCl3溶液 50mL 2.78g 用 RO水定容至 50mL上述溶液以 10:1:1 的比例混合（现配现用）。
2. 取叶片0.1g，加入2.5mL蒸馏水研磨稍沉淀后取 1.5mL 12000g离心10min（4°C）,取上清液。
3. 在反应管中加入100uL上清液，再加入2.4mL工作液，37°C条件下水浴10min, 于593nm处测定吸光度，4. 标准曲线绘制：以0.1-1.6mmol/L的FeSQ的标准液替代样品绘制标准曲线。
三、结果计算以1.0mmol/L的FeSQ为标准，样品抗氧化活性以达到同样吸光度值为一个FRAP fi，计算结果。
精品文档2.8.2. Ferric Reducing/Antioxidant Power (FRAP) assayBriefly, the FRAP reagent contained 2.5 mL 10 mM L_1TPTZ solution in 40 mM L1HCI plus 2.5 mL 20 mM L1 FeCI^ and 25 mL 0+3 M L1acetate buffer, pH 3*6 was prepared freshly and warmed at 37°C・After addition of root ethanol extracts (prepared as in section 2.7) and incubation at 37°Cfor 5 min, absorbance of the reaction mixture was measured at 593 nm. The final result was expressed as the concentration of antioxidants having a ferric reducing ability equivalent to that of 1 mM L_1 FeSO4based on the standard curve for FeSO4 x 7H.0 at a concentration range between 100 and 1000 pM L_1 [3 口[1] Benzie I F F, Strain J J. The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as aMeasure of “ntioxidant Power”： The FRAP Assay[J]. Analytical Biochemistry, 1996, 239(1):70-6.[2] Katarz yna Szafra nska, Rafa? Szewczyk, Kryst yna Maria Jan as. In volveme nt ofmelat onin applied to Vig na radiata, L. seeds in pla nt resp onse to chilli ng stress[J].Central European Journal of Biology, 2014, 9(11):1117-1126.精品文档欢迎您的下载，资料仅供参考!致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习资料等打造全网一站式需求。
抗氧化 方法
DPPH法是测定物质抗氧化性能的一种快速简便的方法。
DPPH是一种很稳定的以氮为中心的自由基, 在特定波长(515nm下有最大吸收)下测定DPPH与抗氧化物质反应前后吸收值的变化可定量测定被测物质的抗氧化能力，若受试物能清除它,则提示受试物具有降低羟自由基、烷自由基或过氧自由基的有效浓度和打断脂质过氧化链反应的作用。
一、实验方法用微量移液器按表1的体积准确吸取C1、C2、S1、S2四组样液加入96孔板中，室温避光孵育30min后，用酶标仪测定在492nm（我们实验条件下）处的吸光度。
为消除无水乙醇与样品溶液引起的吸光度，分别设定对照空白与样品空白。
所用试剂与DPPH清除率计算公式如下：DPPH：0.25mM 无水乙醇配制，现配现用；DPPH清除率(%)={1 - (S1– S2) / (C1– C2)} × 100(S1、S2、C1、C2分别为样品、样品空白、对照、对照空白的OD492nm)。
表1 样品试剂用量表C1C2S1S2无水乙醇(μL) 样品(μL) DPPH(μL)合计(μL) 100100200200200100100200100100200即2,2‘-azino-di(3-ethylbenzthiazoline6-sulfonic acid，该方法是以这种水溶性的自由基引发剂为显色剂。
ABTS与过硫酸钾反应生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTS·+，向其中加入被测物质，如果该物质中存在抗氧化成分，则该物质会与ABTS·+发生反应而使反应体系褪色，然后在ABTS·+这种自由基的最大吸光波长下(一般选择734nm) 检测吸光度的变化来反映物质的抗氧化能力。
1、ABTS工作液的配制准确称量ABTS粉末溶于过硫酸钾(终浓度为2.45mM)配制为7mMABTS溶液，室温放置12-16h以备用。
实验前用无水乙醇稀释至其OD630nm=0.70(±0.02),标准曲线如下:表2不同浓度的ABTS自由基在630nm处光吸收值(OD)由表2知，实验应选择0.3mM的ABTS。
抗氧化活性测定方法
一、抗氧化测定1．DPPH:a)样品溶液浓度初测定，（0~4℃）储藏。
b)称4mg，加无水甲醇溶解于烧杯，转移至100mL容量瓶定容。
浓度为0.04mg/mL。
避光（0~4℃）储藏。
i.5ml离心管（2mlDPPH·溶液+2ml无水甲醇）混合后充分振摇，反映稳定，40min后测定。
以无水甲醇为对照分光检测λ=517nm。
平行测定2次。
A1ii.5ml离心管（2ml待测样+2mL无水甲醇）混合后充分振摇，反映稳定，40min后测定。
以无水甲醇为对照分光检测λ=517nm。
A2iii.5ml离心管（2mlDPPH·溶液+2ml待测样）混合后充分振摇，反映稳定，40min后测定。
以无水甲醇为对照分光检测λ=517nm。
A3清除率（Y）=[1-（A3-A2）/A1]∙100%。
平行测定3次，取平均值。
分别以试样质量浓度和清除率做显形回归方程并计算清除率为50%时，代测样品的浓度值，即半抑制浓度IC50。
自由基清除能力，AE=1/IC50。
根据AE大小判断待测样品清除自由基能力的大小，AE越大清除能力越强。
2．·OHa)PBS制配：磷酸二氢钠31.2g 1000ml蒸馏水定容，磷酸氢二钠71.6g1000ml蒸馏水定容。
移液管移液磷酸二氢钠190ml、磷酸氢二钠810ml 于1000ml 烧杯，pH 计调7.4。
b) 邻二氮菲：148mg 蒸馏水定容100ml 。
c) 硫酸亚铁：208.5mg 蒸馏水定容100ml 。
d) 100ml30%双蒸馏水定容300ml 。
封口。
i. 10ml 离心管（0.5ml 邻二氮菲溶液+1mlPBS 混匀后+0.5ml 硫酸亚铁混匀后+0.5ml 22O H +双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm 。
A1ii. 10ml 离心管（0.5ml 邻二氮菲溶液+1mlPBS 混匀后+0.5ml 硫酸亚铁混匀后+双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm.A2 iii. 10ml 离心管（0.5ml 邻二氮菲溶液+1mlPBS 混匀后+0.5ml 待测样+0.5ml 硫酸亚铁混匀后+0.5ml 22O H +双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm.A3iv. 10ml 离心管（1mlPBS+双蒸馏水定容10ml ）37℃水浴1h 后分光λ=536nm.A 空。
测定抗氧化的六种方法是
测定抗氧化的六种方法是
1.自由基清除能力测定法：通过测定样品对自由基的清除能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括DPPH（2,2-二苯基-1-苦基肼）自由基清除法和ABTS（2,2'-联氨基二-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)）自由基清除法。
2.氧化还原能力测定法：通过测定样品在氧化还原反应中的电子接受能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括还原能力测定法和Ferric reducing antioxidant power（FRAP）法。
3.金属离子螯合能力测定法：通过测定样品对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括铁离子螯合能力测定法和铜离子螯合能力测定法。
4.脂质过氧化抑制能力测定法：通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括脂质过氧化抑制能力测定法和TBARS（硫代巴比妥酸反应物）测定法。
5.蛋白质氧化抑制能力测定法：通过测定样品对蛋白质氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括蛋白质碳氧化酶活性测定法和蛋白质过氧化物酶活性测定法。
6.细胞抗氧化能力测定法：通过测定样品对细胞内氧化应激的保护作用来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括细胞活力测定法和细胞内氧化应激指标测定法。
抗氧化能力的测定（精选4篇）
抗氧化能力的测定（精选4篇）以下是网友分享的关于抗氧化能力的测定的资料4篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。
DPPH抗氧化能力测定篇一DPPH.法测定绿原酸清除自由基能力2.1 待测液的制备将绿原酸(纯度56%)、维生素C和没食子酸分别配制成体积分数为0.1mg/mL的无水乙醇溶液。
2.1.1 绿原酸母液的配制称取9.0 mg绿原酸，定容到50ml，即可得到绿原酸的母液0.1mg/mL。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml;mg/ml。
2.1.2 Vc母液的配制称取mg VC，定容到100ml，即可得到VC的母液。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml。
2.1.3 没食子酸母液的配制称取mg 没食子酸，定容到100ml，即可得到没食子酸的母液。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成不同浓度的溶液。
分别为mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml; mg/ml。
2.1.4 DPPH母液的配制称取mg DPPH，用无水乙醇定容到100ml，即可得到DPPH的母液。
然后，再将所配制的母液按照要求稀释成至一定浓度的溶液。
CDPPH= mg/ml。
（建议用0.025mg/mL）2.2 DPPH.溶液的可见光谱以无水乙醇为对照，在分光光度计上对DPPH.溶液进行在440～600nm下扫描。
Amax= nm2.3 抗氧化活性测定DPPH.是一种稳定的自由基，它的乙醇溶液呈紫色，在可见光区最大吸收峰为nm。
当DPPH.溶液中加入自由基清除剂时，溶液颜色变浅，517nm处的吸光度变小，而吸光度变小的程度与自由基被清除的程度呈线性关系。
因此，可用来检测自由基的清除情况，从而评价某物质的抗氧化能力，其能力用清除率(Scavenging Rate,SR)来表示，清除率越大，抗氧化能力越强具体实验步骤及方法：精确吸取的DPPH.溶液2mL与2ml无水乙醇混合均匀后，以相对应的溶剂(4mL无水乙醇)为对照，用分光光度计测定上述溶液在nm处的吸光度值(A0)。
常见体外抗氧化实验方法-抗氧化试验-抗氧化活性实验方法-抗氧化测定法-李熙灿Xican Li
常见体外抗氧化实验方法(含原理、试剂配制、操作流程、实例分析、英文表述)- 2023-3①DPPH·自由基清除法 2 Array②ABTS·+自由基清除法 5③ FRAP法(铁还原法) 811④过氧自由基(超氧自由基，·O2-)清除法(连苯三酚自氧化法)⑤羟基自由基(·OH)清除法(脱氧核糖法) 14⑥PTIO·自由基清除法(水溶液中) 16⑦ CUPRAC法(铜还原法) 18⑧铁络合能力(Ferrozin法) 20⑨脂质过氧化清除法(亚油酸为底物) 23⑩抗氧化产物的预测26①DPPH·自由基清除法/DPPH法原理：DPPH·（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical）即α, α-二苯基-β-苦基肼基游离基，由于p-π共轭，所以，氮自由基能稳定存在[1]。
当DPPH自由基被某物质清除，其最大吸收波长519nm处的吸光度A值随之减小；相应地，某物质自由基清除活性增加，其体外抗氧化活性也增加。
实验操作[1]:1.1 DPPH测试液的配置（适用于酶标仪测量，总体积为100μL）取DPPH 2毫克溶于约40mL溶剂（乙醇、95乙醇或甲醇）中，超声5min，充分振摇，务使上下各部分均匀。
取DPPH溶液80μL加入到96孔板中，加95乙醇（或无水乙醇）20μL，稀释混合，测A值，使A＝0.20±0.01。
该DPPH溶液避光保存，4h内用完。
（注意：如果是用分光光度计．．．．．，则A＝0.6±0.02比较合适）1.2 样品液的配置样品用合适的溶剂溶解，为便于计算，可配成1mg/mL浓度。
溶剂根据样品的极性进行选择，首选95乙醇或无水乙醇，如不溶可用DMSO。
1.3 预试取DPPH溶液80μL，往其中加少量样品液，加样时，先少后多渐加，边加边混合，并观察溶液的褪色情况，当溶液颜色基本褪去时，记下样品的加样量。
抗氧化性测定方法
抗氧化性测定方法1.1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法这是一种广泛应用的测定方法。
DPPH是一种深紫色的自由基，在接触到具有抗氧化能力的物质后会发生漂白反应。
在测定中，样品与DPPH 一起加入观察和记录，在吸收强度的变化可以反映出物质的抗氧化能力。
2.金属还原力抗氧化活性法（FRAP法）FRAP法基于物质的还原能力，测定物质对铁（Fe3+）的还原能力。
在该方法中，加入已知浓度的Fe3+溶液，并随着物质还原能力的增强，Fe3+逐渐被还原成可溶性Fe2+。
通过检测Fe2+的浓度变化，可以评估样品的抗氧化能力。
3.缩合亚硝酸盐法（NBT法）NBT法利用物质对亚硝酸盐的还原能力来测定其抗氧化能力。
NBT是一种黄色水溶性化合物，在接触到自由基后会转变为蓝色NBT还原物。
通过测定蓝色NBT还原物的吸光度，可以评估样品的抗氧化能力。
4.过氧化物过氧化物是一类非常有活性且具有氧化性的分子，在测定中被用作产生自由基的刺激源。
通过观察或测定样品与过氧化物产生的氧化反应，可以评估样品的抗氧化能力。
5.水溶性抗氧化能力（ORAC）法ORAC法是一种相对来说较复杂但更接近生物体内抗氧化能力的测定方法。
通过测定物质与自由基的竞争反应，以及维持反应平衡的时间，可以评估样品的抗氧化能力。
6.单线态氧发射（SOS）法SOS法是一种测定样品对单线态氧（1O2）的能力的方法。
在该方法中，通过检测样品对单线态氧的发射能力，评估其对自由基氧化损伤的能力。
在实际应用中，可以根据需要选择适当的抗氧化性测定方法，或者使用多种方法综合评估样品的抗氧化能力。
除了上述几种方法，还有其他一些方法如总抗氧化能力（TAC）法和细胞抗氧化测试（CAT）等方法也可以用于抗氧化性测定。
总抗氧化能力测定(FRAP法)
小麦叶片总抗氧化能力测定（FRAP法）一、实验原理FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tri-pyridyl-tria-zine(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。
由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素。
并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM，因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。
由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的，样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。
AntioxidantFe3+-TPTZ（橘黄色）——————> Fe2+-TPTZ (蓝色)二、实验步骤1.FRAP工作液配制：0.3 M pH 3.6 醋酸缓冲液：0.364g无水醋酸钠+3.2mL冰乙酸定容至200mL，用1M HCl调节pH至3.6；10mmol/L TPTZ溶液25mL：0.078g TPTZ用40mM 盐酸溶液定容至25mL；20mmol/L FeCl溶液50mL：2.78g用RO水定容至50mL；3上述溶液以10:1:1的比例混合（现配现用）。
2.取叶片0.1g，加入2.5mL蒸馏水研磨稍沉淀后取1.5mL 12000g离心10min（4o C），取上清液。
3.在反应管中加入100uL上清液，再加入2.4mL工作液，37o C条件下水浴10min，于593nm处测定吸光度，4.标准曲线绘制：以0.1-1.6mmol/L的FeSO的标准液替代样品绘制标准曲线。
4三、结果计算以1.0mmol/L的FeSO为标准，样品抗氧化活性以达到同样吸光度值为一个4FRAP值，计算结果。
[1]Benzie I F F, Strain J J. The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as a Measure of “Antioxidant Power”: The FRAP Assay[J]. Analytical Biochemistry, 1996, 239(1):70-6.[2]Katarzyna Szafrańska, Rafał Szewczyk, Krystyna Maria Janas. Involvement of melatonin applied to Vigna radiata, L. seeds in plant response to chilling stress[J]. Central European Journal of Biology, 2014, 9(11):1117-1126.。
材料抗氧化检测标准
材料抗氧化检测标准概述本文档旨在提供材料抗氧化性能的标准化检测方法和要求。
抗氧化性能是指材料对氧化过程的抑制能力，对于材料在存储和使用过程中的稳定性非常重要。
检测方法1. 总抗氧化能力检测总抗氧化能力检测是评估材料对不同类型氧化物的整体抑制能力。
常用的方法包括：- 自由基清除能力检测- 过氧化物清除能力检测2. 抗氧化剂含量检测抗氧化剂是材料中起到抑制氧化反应的关键成分。
检测抗氧化剂含量可以通过以下方法进行：- 色谱分析法- 光谱分析法3. 抗氧化性能长期评估长期评估是测试材料在特定环境条件下的抗氧化性能持久性。
常见的评估方法有：- 热老化测试- 光老化测试材料抗氧化标准为了确保材料的抗氧化性能符合要求，以下是一些常见的抗氧化标准：- ASTM D3895-14: Standard Test Method for Oxidative-Induction Time of Polyolefins by Differential Scanning Calorimetry (DSC)- ISO -6: Plastics - Differential Scanning Calorimetry (DSC) - Part 6: Determination of Oxidation Induction Time (isothermal OIT) and Oxidation Induction Temperature (dynamic OIT)- GB/T 8627-2007: 泡沫密度装置密度计量法结论通过遵循本文档中提供的检测方法和标准，可以对材料的抗氧化性能进行准确评估和有效管理。
这有助于材料的质量控制和长期稳定性维护。
dpph法
dpph法
DPPH法是一种测定抗氧化能力的方法，它可以用来测定物质的抗氧化能力，也可以用来测定植物提取物的抗氧化能力。
DPPH法的原理是：DPPH是一种自由基，它具有一个自由基反应中特有的结构，它的分子中含有一个芳基环，这个芳基环上有一个自由基，这个自由基可以与抗氧化剂发生反应，从而使DPPH的自由基变成非自由基，从而使DPPH的色素发生变化，从而可以用来测定抗氧化能力。
DPPH法的实验步骤如下：
1.准备实验材料：准备DPPH溶液、待测物质溶液、标准抗氧化剂溶液；
2.测定：将DPPH溶液和待测物质溶液按照一定的比例混合，然后将混合液放入光度计中，测定其吸光度；
3.计算：将待测物质溶液和标准抗氧化剂溶液按照一定的比例混合，然后将混合液放入光度计中，测定其吸光度，然后计算待测物质抗氧化能力的折算值，即DPPH法的结果。
DPPH法是一种简单、快速、准确的测定抗氧化能力的方法，它可以用来测定物质的抗氧化能力，也可以用来测定植物提取物的抗氧化能力，是一种重要的抗氧化检测方法。
抗氧化能力检测方法如何选择
抗氧化能力检测方法如何选择1.避免氧自由基法避免氧自由基法是一种常用的营养物质抗氧化能力检测方法，通过测定物质对人工合成的活性氧自由基的清除能力来反映其抗氧化能力。
常用的活性氧自由基包括DPPH自由基和ABTS自由基。
该方法简单易行，适用于大批量样品处理。
2.过氧化氢降解法过氧化氢降解法是一种定量测定物质抗氧化能力的方法，通过测定物质对过氧化氢的消耗程度来评估其抗氧化能力。
该方法操作简便，适用于多种样品类型。
3.金属离子螯合能力法金属离子螯合能力法是一种常用的抗氧化能力检测方法，通过测定物质对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化性能。
常用的金属离子包括铁离子、铜离子等。
该方法适用于多种样品类型，尤其适用于检测多酚类化合物的抗氧化能力。
4.体外细胞模型法体外细胞模型法是一种模拟人体细胞环境，通过测定物质对细胞的氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的细胞模型包括人类肝细胞HepG2、人类白血病细胞HL-60等。
该方法较为贴近真实的生理环境，但操作较为繁琐。
5.动物模型法动物模型法是一种模拟人体内环境，通过测定物质对动物体内氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的动物模型包括小鼠、大鼠等。
该方法能够更好地反映物质的抗氧化能力，在药物研发领域较为常见，但需注意动物伦理和实验条件等问题。
在选择抗氧化能力检测方法时，需要综合考虑实验目的、被测物的特性、实验条件、预算等因素。
有时需要结合多种方法来评估物质的抗氧化能力，增加研究可靠性。
同时，还需注意选择已经被广泛验证和接受的方法，以确保实验结果的准确性和可重复性。
抗氧化能力的体外测定方法研究进展
抗氧化能力的体外测定方法研究进展一、本文概述随着现代生活节奏的加快和环境污染的日益严重，人体面临的氧化应激压力不断增大，抗氧化能力的重要性日益凸显。
因此，抗氧化能力的体外测定方法研究进展成为了生物医学、营养学、食品科学等领域的研究热点。
本文旨在综述近年来抗氧化能力体外测定方法的研究进展，以期为相关领域的研究人员提供全面的信息参考和技术指导。
本文将首先对抗氧化能力的概念进行界定，明确其生理意义和重要性。
随后，将重点介绍几种常用的抗氧化能力体外测定方法，包括总抗氧化能力（TAC）测定、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定、过氧化氢酶（CAT）活性测定、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测定等。
还将探讨这些方法的优缺点、适用范围以及在实际研究中的应用情况。
通过本文的综述，我们希望能够为相关领域的研究人员提供全面的抗氧化能力体外测定方法的知识体系和技术指导，为推动抗氧化能力研究的发展和应用提供有益的参考。
二、抗氧化能力的概念和机制抗氧化能力是指生物体系在面临氧化压力时，通过一系列复杂的生化反应来消除或抵抗活性氧（ROS）和活性氮（RNS）的能力。
这些活性物质是由正常细胞代谢或环境应激产生的，它们具有高度反应性，能够破坏细胞内的关键分子，如DNA、蛋白质和脂质，从而引发各种疾病，如癌症、心血管疾病和神经退行性疾病等。
抗氧化机制主要包括酶促和非酶促两大类。
酶促抗氧化系统包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）等，它们能够催化ROS和RNS的分解，从而防止其对细胞的损害。
非酶促抗氧化系统则主要包括各种抗氧化剂，如维生素C、维生素E、谷胱甘肽、尿酸、胆红素等，它们可以直接与ROS和RNS反应，从而消除其活性。
近年来，对抗氧化能力的研究已经从简单的抗氧化剂筛选发展到了对抗氧化机制的深入研究。
研究者们开始关注抗氧化剂之间的协同作用，以及抗氧化剂与细胞信号通路之间的关系。
对抗氧化能力的评估方法也从单一的化学测定发展到了细胞模型和动物模型的评估，使得对抗氧化能力的理解更加全面和深入。
抗氧化活性测定方法
抗氧化活性测定方法1.水解度（DH ）的测定采用OPA （邻苯二甲醛）法，取3.00 mLOPA 溶液于试管中加入400 μL 稀释至一定倍数的水解上清液，精确反应2 min 后在340 nm 处测定吸光值。
同时以丝氨酸标准溶液（0.9516 mmol/L ）作参考和空白试验。
()mmol/g7.72tot h ）,摩尔数（mmol/g 每克原料蛋白的肽键毫tot 数0.4和1表示；h 式中：β、α分别以常 (2) 100％tot h /αβ-2SerineNH DH 清液体积N：稀释倍数；V：上含量；量；P：样品中的蛋白/g蛋白；X：样品重2serineNH ：mmol 2H 式中：SerineN (1) protein L/g P X V N mmol/L 0.9516空白式样－OD 标准样品OD 空白式样OD 待测样品OD2SerineNH =⨯=⨯⨯⨯⨯-=2.酶解产物的相对分子质量的分布采用高效液相色谱法测定。
取酶解液上清液稀释至一定浓度，微孔过滤膜过滤后上色谱柱。
色谱条件：实验色谱柱：TSK gel 2000SWXL （300 mmx7.8 mm ），流动相：乙腈：水：三氟乙酸=45:55:0.1（V/V/V ），检测波长220 nm ，流速0.5 mL/min ，柱温30℃，进样量10 μL 。
3.DPPH 清除能力测定取一定浓度的样品溶液4 ml ，加入1 ml 用甲醇配制的DPPH 溶液，并使DPPH终浓度为0.2 mmol/L 。
用力振摇混匀后置暗室中静置30 min ，于517 nm 处测定吸光度。
按照下式计算DPPH 清除率。
DPPH 清除率（％）=100*（1-（A2-A1）/A0），式中：A2是加入样品溶液后的吸光度；A1是样品溶液本底的吸光度；A0是空白对照液的吸光度。
4.总还原能力测定称取一定浓度的样品溶液2.5 mL ，加入0.2 mol/L 磷酸缓冲液（pH 6.6）和1％铁氰化钾溶液各2.5 mL ，混合均匀。
抗氧化性检测(羟基自由基、普鲁士蓝)
d.还原能力的测定采用普鲁士兰法。
分别精密吸取各组分浓度为0.1，0.5，1.0，2.0，5.0mg/mL的多糖及Vc 溶液2mL，加入0.2mol/L pH=6．6的磷酸盐缓冲液2.5mL及1%铁氰化钾溶液2.5mL，混匀，于50℃水浴加热20min后迅速冷却，再加入10%三氯乙酸溶液2.5mL，混匀后吸取2.5mL 溶液于比色管中，加蒸馏水2.5mL和0.1%氯化铁溶液0.5mL，常温反应10min后于700nm 处测定吸光值，吸光值越大，表明还原能力越强。
a.清除羟基自由基活性的测定采用水杨酸法。
在10mL试管中依次加入9mmol/LFeSO4溶液2mL，9mmol/L水杨酸-乙醇溶液2mL和各组分浓度为0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/mL的多糖或Vc溶液2mL，8.8mmol/LH2O2溶液2mL。
充分混匀后于37℃水浴30min，于510nm处测定吸光值A，以加蒸馏水为空白对照，做三次平行试验。
用以下公式计算对羟基自由基的清除率：R=[Ao-(Ai-Aj)]/Ao×100%(2-10)式中，Ao表示加入蒸馏水空白体系的吸光值；Ai表示为加入不同浓度样品溶液后测得的吸光值。
Aj表示水代替H2O2时不同多糖浓度下测得的本底吸光值。
取7支试管依次加入1.8 mmol/L FeSO4 1.0mL、1.8mmol/L水杨酸0.75 mL、0.3% H2O2 0.5mL摇匀，分别向7支试管中加入10 mg﹒L-1多糖溶液0.1、0.15、0.2、0.25、0.3 mL，再补水至0.5mL，摇匀，37℃水浴30 min，以双蒸水为参比测其510nm处吸光度Ax。
空白实验：0.5 mL双蒸水取代多糖溶液，重复上述过程，测吸光度A0；对照实验：用0.5 mL双蒸水取代H2O2溶液，重复上述过程，测吸光度A s；用蒸馏水分别取代多糖溶液和H2O2溶液，重复上述过程，测吸光度A s0 。