精浆生化检测与男性不育

（一）精浆α-葡糖苷酶测定
精浆中存在两种α-葡糖苷酶的异构体，其中中性 α-葡糖苷酶占 80%，仅来源于附睾； 酸性α葡糖苷酶占 20%， 主要来源于前列腺。 WHO 手册推荐了中性α-葡糖苷酶的检测方法。 【检验原理】
酸性条件下，通过对精酸性α-葡糖苷酶的抑制，
保留中性α-葡糖苷酶活性，后者分解底物生成终
产物对硝基酚，对硝基酚在405nm波长有最大
吸收波长，颜色深浅与单位时间内精浆中性α-葡
糖苷酶活力成正比。
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【临床意义】
中性α-葡糖苷酶是附睾分泌功能的指标。结合激
素和睾丸其他指标，对远端输精管阻塞有较好的
诊断价值。果糖结合中性α-葡糖苷酶检测，可大
大提高其诊断阻塞性无精子症的价值。
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【精浆果糖检测中应注意三点】 ①果糖标准液配制后应放置 2 周后使用， 使用 2 周后出现吸光度降低时应立即更换新的果糖标 准液。 ②离心速度不同精浆果糖浓度稍有差异。 离心速 度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。 因此，离心 速度不得低于 3 000 g 离心 15 min。 ③精液液化后应立即离心将精子和精浆分离， 否 则会影响精浆果糖检测结果。
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先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性；精囊炎时， 果糖含量降低。不完全射精或射精过频，果糖含 量亦降低。 精浆果糖与α-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输 精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精 管、精囊发育不良引起的无精症。 精浆果糖正常参考值：0.87~3.95g/L。
精浆生化检测在男性不育诊断中的应用
一、男性不育概述
不孕不育已成为全球性难题，男性约占50%，其 中约75%病因不甚明确。 事关男女双方，受孕过程复杂，需要： 合格的精子、输精管道、附属性腺 合格的卵子、子宫和输卵管
精子质量越来越差，患者人群越来越大 卵子质量越来越差，患者年龄越来越轻 相对性不育多，绝对性不育少 WHO至今没有可供推荐的有效方案
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（三）、精液检查
精液检查是诊断男性不育最基础和最重要的检查项目
正常精液标准（WHO 第五版） ———————————————————————————————— 体积 ≥2.0ml PH ≥7.2 精子密度 ≥15×106/ml 精子总数 ≥40 ×106/一次射精 活力 前向运动精子≥32% 精子形态 严格标准下正常形态的精子≥4% 精子活率 ≥50%的精子存活 白细胞 <1×106/ml 免疫珠实验（IBT） 活动精子结合免疫珠<20% 混合抗球蛋白反应（MAR） <50%精子有凝集 ———————————————————————————————— ﹡根据Kruger和menkfeld标准。
正常参考值：≥20U/每份精液
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【精浆α-葡糖苷酶检测中应注意两点】 ①离心速度不同， 精浆α-葡糖苷酶活性有所差 异。离心速度越高，精浆总α-葡糖苷酶水平越低。 因此， 在精浆α-葡糖苷酶的检测中， 精液离心 时的速度不得低于 3 000 g 离心 15 min。 ②精浆α-葡糖苷酶活性与禁欲时间的长短密切相 关。禁欲时间越长，α-葡糖苷酶水平越高。禁欲 7 天以上的精浆α-葡糖苷酶水平明显升高。因此， 精浆α-葡糖苷酶水平检测的最佳禁欲时间最好为 4 ~ 7天。
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（四）精液生化检查
项目
枸橼酸
参数
每份精液 ≥52μmol
果糖
锌 肉毒碱(DTNB法) 中性α-葡糖苷酶 酸性磷酸酶 白细胞数
≥13μmol/每份精液或者定性试验阳性
每份精液≥2.4μmol ≥ 0.319mmol/L ≥20U/每份精液 ≥200U/每份精液 ＜1×106/ml
性功能和射精功能障碍 免疫因素不育 不明原因不育 单纯精浆异常不育 医源性因素不育 全身性疾病因素不育 先天性因素不育 继发性睾丸损伤不育 精索静脉曲张不育 附属性腺感染不育 内分泌因素不育 特发性少精症/隐匿精子症 特发性弱精子症 特发性畸形精子症 特发性无精子症
精浆检查
导致不育的因素
是
是 是 是 是
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研究显示， 随着精液放置时间的延长， 精浆果 糖浓度逐渐降低。精液放置 2 h 后离心所得精浆 果糖浓度比立即离心时精浆果糖浓度显著降低， 放置 4 h 比 2 h 又显著降低，而且，此种降低 与活动精子浓度呈显著正相关（r = 0.374，P = 0.009）。
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无 致 病 因 素
获得性睾丸因素 精索静脉曲张 感染指标检查 激素检查（T低+ FSH不升高或PRL升高）
精子 未 发 现 睾丸体积及FSH
有 精子密度 正常 精子活力 正常 精子形态 异常 睾丸活检/生精发生
异常
异常 异常
不全
完全 梗阻性无精子症
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四、精浆生化分析方法及临床意义
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人类精浆的组成几乎都来自于附属性腺，其中约 30%来自前列腺，60%来自精囊腺，5%～ 10%来自附睾及尿道球腺等。 精浆生化标志可反映附属性腺功能。这些特异性 标志总排出量的高低可用以评价男性附属性腺的 功能状态， 也可用于综合评价不育的发病原因和 机制。
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（六）其它检查
内分泌检查:LH、FSH、T、PRL、E2 抑制素B(Inhibin B) 影像学检查：超声、造影、CT、MRI 染色体及Y染色体微缺失检查 睾丸活检术：TESA、TESE、PESA、MESA、microTESE
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精液分析：精子的数量、活力和形态（少精、弱 精、畸形精子、无精子、液化不良） 局限性：受许多内外因素干扰、波动大、不能反 映病因（疾病在精子上的反映） 精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性 腺功能。
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精浆生化指标与附属性腺的关系
附睾：中性α-葡糖苷 酶、左旋肉毒碱 精囊：果糖 前列腺：酸性磷酸酶、 柠檬酸、锌 感染、外伤或手术： 抗精子抗体
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如何合理诊断及治疗 虽然诊断手段众多，但仍 然有75%的患者无法明 确诊断。 合理利用目前的手段诊断 男性不育是一个难题。 重点：精浆生化分析
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性功能及射精功能 正常 抗体包裹的精子 阴性 精子的各参数 异常
异常 阳性 正常 正常 异常 是 医源性因素 全身性疾病或环境因素 先天性因素 是 是
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（二）精浆果糖测定
精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验 室进行，WHO 也推荐以精浆果糖浓度的测定作 为评价精囊腺功能的指标。 目前， 用于检测精浆果糖的方法有间苯二酚显色 法、气相层析法、吲哚显色法等多种方法。
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【临床意义】 精囊分泌的果糖是精子能量的主要来源。睾酮的 水平影响精囊果糖的分泌，雄激素不足可造成果 糖含量降低，因此果糖含量间接反映睾丸间质细 胞分泌睾酮的功能。 果糖可为精子的运动提供能量。 精囊腺功能紊乱 时， 精液总量减少， 精浆果糖含量降低， 进而 引起精子活力不足， 导致不育。
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三、男性不育的诊断
（一）、病史 要全面了解家族史、婚育史、性生活史和其它对生 育可能造成影响的因素，还要简要了解女方病史。 （二）、体格检查 体型及第二性征 生殖器官的检查 其它检查：直肠指诊、神经反射
非常重要！许多不育患者可通过病 史和体检大体判断其生育能力
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（五）抗精子抗体
大量研究资料表明10%-30%的不育不孕患者血 清或精浆中可检到AsAb 。 为排除免疫性因素，AsAb检测已是男性不育症的 重要检查项目之一 目前WHO推荐的AsAb检测方法为免疫珠法(IBT) 和混合抗球蛋白反应试验(MAR)。MAR操作简单、 快速，可以和精液的常规化验同时进行，国内比较 常用。
环境、药物 感染 创伤和手术
肝肾功能不全 肿瘤
先天性梗阻 获得性梗阻 功能性梗阻
抗精子抗体
性欲减退 ED 射精功能障碍 尿道下裂
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7000余例男性不育患者病因统计
性功能障碍 泌尿生殖道感染 先天性畸形 获得性疾病 精索静脉曲张 内分泌紊乱 免疫性因素 其他异常 特发性精液异常 或不明原因 1.7％ 6.6％ 2.1％ 2.6％ 12.3％ 0.6％ 3.1％ 3.0％ 75.1％
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现状
二、男性不育的病因
男性不育
睾丸前因素
睾丸因素
睾丸后因素
下丘脑疾病
垂体疾病
内源性或外源 性激素异常
先天性异常
外源性损害
全身疾病
输精管道梗阻
免疫因素
性功能障碍
Kallmann LH或FSH缺乏
垂体功能不足 高催乳素血症
雌、雄激素过多 糖皮质激素过多 甲状腺功能异常
染色体异常 隐睾 雄激素抵抗