清洁级实验动物房的使用优秀课件
实验动物的等级划分及实验动物房的设计规范
——您身边的实验室工程专家【特殊实验室】实验动物的等级划分及实验动物房的设计规范一、实验动物的分类实验室根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级，分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。
一级普通动物（CV），系指微生物不受特殊控制的一般动物。
要求排除人兽共患病的病原体和极少数的实验动物烈性传染病的病原体。
为防止传染病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性（即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果）。
二级清洁动物（CL），要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。
三级无特殊病原体动物（SPF），要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。
其除菌与灭菌的方法，可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。
四级无菌动物（GF）或栖生动物（GN），无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。
栖生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。
二、四类实验动物的病理检查标准在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。
一级外观健康，主要器官不应有病灶。
二级除一级指标外，显微镜检查无二级微生物病原的病变。
三级无特殊病原体动物。
无二、三级微生物病原的病变。
四级不含二、三级微生物病原的病变，脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。
三、动物房设计管理上的要求对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。
无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养，这种环境，目前国际上通用称为屏障环境，即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开，就如胎鼠在母鼠子宫内一样。
这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。
A隔离系统是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统，用于饲养无菌动物和栖生动物。
洁净实验室动物房净化洁净度要符合实验动物分
洁净实验室动物房净化洁净度要符合实验动物分洁净实验室动物房净化的洁净度根据不同类别动物制定，实验室根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级，分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或悉生动物。
1一级普通动物一级普通动物(CV)，不携带人兽共患病病原和动物烈性传染病病原的实验动物。
其饲育环境为开放系统，无空气洁净度要求。
实验室规划配电工程是根据实验仪器和设备的具体要求，经过专业的设计人员综合多方面因素设计完成的，与普通建筑有很大区别。
因为，实验室仪器设备对电路的要求比较复杂，并不是通常人们所认为的那样，只要满足最大电压和最大功率的要求就可以了。
2二级清洁动物二级清洁动物(CL)，除普通级动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。
来源于SPF动物或剖腹产动物。
一般饲养于半屏障系统。
3三级无特殊病原体动物三级无特殊病原体动物(SPF)，是指动物体内无特定的微生物、寄生虫存在，但带有非特定的微生物、寄生虫的动物。
主要指不携带潜在感染、条件致病和对实验干扰大的病原。
来源于剖腹产动物，饲养于屏障系统。
4四级无菌动物(GF)或悉生动物(GN)四级无菌动物(GF)或悉生动物(GN)，无菌动物指用现有检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。
无菌动物来源于剖腹产或无菌卵的孵化，饲养于隔离系统内。
悉生动物或称已知菌动物，广义上把无菌动物、已知菌动物、无特定病原体动物统称悉生动物;狭义上指已知菌动物。
实验室设计实验室地面对于洗涤室、高温室、气瓶室、含汞实验的实验室、恒温恒湿实验室、洁净实验室、大型仪器室等不同种类实验室，需要采用不同的地面处理方式。
5四类实验动物的病理巡查标准在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。
一级：外观健康，主要器官不应有病灶。
实验室设计以淡雅、清新色调为主，简约、自然、时尚、高档融为一体，不仅可以体现现代实验室的功能要求，而且极大的满足了人体工程学的规范。
第四章实验动物的环境控制PPT课件
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（二）空气湿度
▪ 多数动物不耐低湿。 ▪ 低温干燥环境下大鼠易患环尾病，当湿度为40%
时大鼠此症的发生率为25%-30%。 ▪ 在低湿情况下，大、小鼠的哺乳母鼠常发生拒哺
或咬仔现象，仔鼠发育不良，体重增长停滞。 ▪ 高温、高湿时，动物抵抗力下降，发病率和病死
.
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隔离器可安放于开放环境或屏障环境，其布局 和运作分别按上述系统的要求。隔离器呈长方形 箱状，安放于工作台上。实验动物饲养于隔离器 内；空气由送风机经空气过滤器通向隔离器的空 气入口，隔离器内的脏空气经空气出口排出。隔 离器的一侧装有橡皮手套，供隔离器内部操作使 用，隔离器另一侧有灭菌渡舱，供传入传出物料 及动物使用。有的隔离器还连有药液灭菌渡槽， 供剖腹取胎使用。
率增加，且利于病原微生物的存活和传播。
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表 4-3 一些国家对实验动物设施内相对湿度的规定
动物
实验动物设施内规定的相对湿度(%)
美国 ILAR* OECD** 日 本 中 国
小鼠
40－70
30－70 45－55 40－70
大鼠
40－70
30－70 45－55 40－70
仓鼠
40－70
30－70
▪ 在饲养室内保持一定气流，不仅可使温度、 湿度及化学物质组成保持均匀一致，而且 有利于将污浊气体排出室外。
▪ 实验动物通常采用值系0.13-0.18m/s的气 流。
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（三）气流和风速
▪ 动物室的通风换气，其目的在于供给动物新鲜空 气，满足实验动物生理的需要；除去室内恶臭物 质；排出动物呼吸、照明和机械运转产生的余热， 使饲养环境内温度、湿度和气流等因素达到一定 要求，稀释粉尘和空气中浮游微生物，使空气的 污染降低到最低程度。
进出SPF级动物实验室基本规程PPT学习教案
谢谢！
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1、准备间内的洁净笼具请适量取用，不要 把多余的放在饲养间或操作间，以免长时 间不用造成污染。
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2、换下的笼盒应该放入隔离间开紫外，从 实验室退出后，，经污染走廊到达隔离间， 关上紫外，清理干净盒内垫料，把垃圾以 及笼盒带出放在指定位置，并重新打开紫 外灯对隔离间进行消毒。
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2、可以必须喷洒2%的过氧乙酸后方能 进入
4、既可喷洒过氧乙酸，又可以接受紫外光者，需 先喷洒2%的过氧乙酸第2，2页然/共3后4页紫外照射20min，才能 进入动物房
三、大宗物品进出SPF动物实验室具 用喷洒2%过氧乙酸的 体流程 抹布擦拭物品确保无死 角
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5、使用过的实验用针头，药品等医用废物 由实验人员从传递仓带出实验室，并按学 校医用废物处理办法处置，严禁将废物遗 弃在实验室或丢弃于笼具内；以免伤害清 洁人员。
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6、引进动物进入实验室，必须提前申请， 严格隔离观察，在确实来源，检疫合格的 情况下方可进入实验室，严禁将不明来源 动物私自带入实验室，严禁将在SPF级实验 室之外实验过的动物重新带入SPF级实验室；
一般物品
体流程 无菌试剂类物品
耐高温物品
喷洒2%过氧乙酸
传递仓照射紫外 20min
喷洒2%过氧乙酸
高压灭菌
传递仓内侧开门取出物品
进行各项操作
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操作结束，物品从内侧放入传 递仓，人员出来后从外侧取出
打开紫外灯
小件物品进出注意事项
1、不能高压灭菌者从传递仓进入SPF动物实验室， 能高压灭菌者，必须通过高压灭菌进入
刷卡进入（一卡一人，严禁带人进入 ）
实验动物的环境控制课件
实验动物的环境控制课件
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环境因素对实验动物的影响
• 光照
– 强光会损害实验动物特别是啮齿类动物 的视力，并使其辨色能力下降。
– 光线波长可影响动物的生殖机能，蓝光 比红光更能促进大鼠的性成熟。
– 持续的黑暗可抑制大鼠的生殖，使卵巢
减轻；持续光照可大、小鼠出现永久性
阴道角化，多数卵泡达到排卵前期，而
特殊动物实验设施
一、感染性动物实验设施 – P4：对生命有高度危险的病原体操作实 验室。P3加单独建筑或隔离区域，供气、 排气、真空、消毒等系统，进入前换衣 服，出实验室前淋浴，3级生物安全柜操 作。
实验动物的环境控制课件
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特殊动物实验设施
二、放射性核素动物实验设施 – 要防止放射性核素对人的影响，防止射 线对一般动物和环境的放射性污染及同 位素的泄漏。 – 放射性物质工作屏障室通风柜
屏障系统 隔离系统
18～29
18～29
18～29
≤3
≤3
40～70
40～70 10～20
40～70 10～20
≤ 0.18
≤ 0.18
20～50
20～50
10000
100
≤ 2.45
≤ 0.45
≤14
≤14
≤14
≤60
≤60
≤60
150～300
150～300 150～300
实验12动/物12的或环1境0控/1制4课件12/12或10/14 12/12或101/16 4
实验动物的环境控制课件
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实验动物设施
• 普通环境 – 普通环境是饲养普通级动物的设施。 – 有适合实验动物居住的基本要求，并不 严格环境控制和积极的微生物控制。 – 适用于饲育教学用途的普通级实验动物。
清洁级动物房标准
清洁级动物房标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：清洁级动物房标准动物实验在科学研究中扮演着至关重要的角色，而一个干净、卫生、符合标准的动物房是确保动物实验结果准确和可靠的基础。
为此，相关机构制定了一系列关于动物房清洁级标准的要求，以保障动物实验的顺利进行和数据的准确性。
本文将介绍清洁级动物房标准的相关内容，以便科研人员参考和遵守。
一、清洁级动物房的定义及分类清洁级动物房是指用于动物实验的特定环境条件下的实验室空间，通常根据清洁程度的不同，可分为三个级别：一级清洁级动物房、二级清洁级动物房和三级清洁级动物房。
一级清洁级动物房要求最为严格，适用于高度清洁的实验，如细胞培养和无菌操作；二级清洁级动物房适用于中等级别清洁要求的实验，如小型动物实验；三级清洁级动物房适用于一般实验，如大型动物实验等。
二、清洁级动物房的基本要求1. 空气质量要求：清洁级动物房应具备合适的通风系统，保证室内空气的流通和新鲜度。
空气中的微生物和颗粒物浓度应控制在一定范围内，以确保实验的准确性和无菌操作的进行。
2. 气流方向要求：清洁级动物房内的气流应具有明确的方向性，通常为从洁净区向非洁净区的单向流动，以防止交叉感染和交叉污染的发生。
3. 温湿度控制：清洁级动物房内要能够保持稳定的温湿度条件，以适应不同种类动物的生活和实验需要，确保动物的健康和实验的进行。
4. 设施要求：清洁级动物房内应有合适的动物笼具、饮水器、饲料盆等设施，以及合适的灯光和水源等环境条件，以满足动物的日常生活需求。
5. 清洁消毒要求：清洁级动物房应定期进行清洁和消毒工作，清洁工作应分为日常清洁和定期清洁两种，以保证动物房的卫生状况。
6. 记录要求：清洁级动物房应建立完善的记录系统，对动物的健康状况、实验操作、清洁消毒等情况进行记录，以备查阅和分析。
7. 安全要求：清洁级动物房应建立健全的安全管理制度，对相关人员进行培训，提供必要的个人防护装备，并定期进行安全检查，以确保实验人员和动物的安全。
3.实验动物环境与设施
第三章 实验动物环境与设 施
2015-6-5
1
着重掌握 1. 环境因素对实验动物和动物实验有怎样的 影响。 2. 为生产合格（标准化）的试验动物，进行 规范化的动物实验，最终得到准确、可靠的试验结 果，要求怎样的设施作为保障体系和支撑条件。
2015-6-5
2
第一节 环境因素对实验动物的影响
注意:
新引进动物应在单独房间，单独笼架饲养一 段时间,待观察健康无病后再移入其它房间 不得向屏障动物房内传入不符合相应的实验 动物生产许可证的动物!
实验用品和器具进出清洁级屏 障动物房
用70%酒精或5 %碘伏仔细擦拭消毒物品 表面紫外灯照射15min 或直接喷雾消毒 手术器械可经高压消毒或经消毒液中浸泡 后在紫外灯下照射15min传入 小型仪器经灭菌通道喷雾消毒后传入
4、光照 工作照度150～300lx 动物照度15～20lx 明暗交替时间12/12或10/14h 照度对动物的生殖生理和行为活动有较大 影响 强光长时间照射引起角膜退行性变化
5、噪声 60dB以下音域，人1000~2000Hz,小鼠 1000~5000Hz。 引起小鼠听力性痉挛。 对生殖影响较大，如豚鼠流产。 引起动物呼吸、心跳、血压、肾上腺皮质激 素等生理指标变化。
表4-1
不同环境温度时戊巴比妥钠（95mg/kg） 腹腔注射导致大鼠死亡率比较
给药动物数(只) 死亡动物数(只) 死亡率(%)
环境温度(℃)
12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32
20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20
20 20 20 10 10 10 10 7 6 11 16
6、空气洁净状况 气体污染， 氨14mg/m3 有害气体，氨、甲基硫醇、硫化氢等 颗粒污染，100级，10000级，100000级 美国宇航局标准，每立方英尺空气中直径0.5微米 以上粒子的个数。 粉尘颗粒，是变应原，还是微生物的主要载体。
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清洁级动物——动物体内外不携带人畜 共患的病原体或动物传染病病原体的动 物。
– 对动物危害大的、科学研究干扰大的微生物 不允许存在。如肝炎病毒、仙台病毒。
普通级动物——未经严格控制微生物的 动物，饲养在开放环境设施中。用于教 育示教。
– 不允许存在人畜共患病和严重的动物传染病。 如沙门氏菌、出血热、弓形虫、螨、虱，猴 疱疹病毒（B病毒），鼠痘病毒。
实验、野生、经济、观赏动物的区别
动物
人 工 培 繁育 育
遗 传 背 物 种 来 微 生 物 、 用途
景
源
寄生虫
实验动 物
野生动 物
严格 未经
人工 自然
经济动 物
观赏动 物
一定程 度
一定程 度
人工 人工
明确 不明确
一般 一般
明确 不明确
一般 一般
人工控 制
自然选 择
科学实 验
保护或 发展经 济
择优劣 发展经
普通环境：该环境设施符合动物居住的 基本要求，不能完全控制传染因子，适 用于饲育教学等用途的普通级实验动物。
屏障环境：该环境设施适用于饲育清洁 实验动物及无特定病原体实验动物，该 环境严格控制人员和物品的进出。
隔离环境：该环境设施采用无菌隔离装置以保 存无菌或无外来污染动物，隔离装置内的空气、
项目
温度，℃
日温差，℃ ≤ 相对湿度，％ 换气次数，次/ h 气流速度，m/s 压强梯度，Pa
空气洁净度，级
落下菌数，个/皿 ≤
氨浓度，mg/m3 ≤
噪声， dB ≤
照度， 工作照
lx
度
动物照 度
昼夜明暗交替时间h
指
小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠
普通环境
屏障环境
标 隔离环境
19～26 4
8~10
-
20～25 3
清洁级实验动物房的使用
进入动物房要更衣、戴口罩、帽 子，经过风淋,为什么？
对实验动物为什么要实行环境控 制？
如何维护实验动物房正常运行？
进入动物房要更衣、戴口罩、帽子，经 过风淋，
为什么？
实验动物 实验用动物
实验动物——是指经人工培育，对其携 带微生物实行控制，遗传背景明确，来 源清楚，可用于科学实验、药品、生物 制品的生产和检定及其它科学实验的动 物。
如何维护实验动物房正常运行？
清洁级动物引入动物实验室的规定
1 、 外购的大、小鼠品系，需查明该生产单位 是否具 备该动物生产合格证，如不具备合法
证明，则立即退回。 2、 动物运输盒箱包装是否符合该级别要求， 如发现有破漏等不符合该级别要求的情况，则
立即退回。
3、 如怀疑该品系动物不合要求或不健康， 则应立即向法定检测机构要求鉴定，如确属不 合格或以次充好，则将该批动物如数退回，并 通报上级动物管理委员会严肃处理。
饲料、水、垫料和设备均为无菌，动物和物料
的动态传递须经特殊的传递系统，该系统既能
保证与环境的绝对隔离，又能满足转运动物时
保持内环境一致。该环境设施适用于饲育无特 定 病 原 体 （ SPF ） 、 悉 生 （ Gnotobiotic ） 及 无 菌（Germ Free）实验动物。
动物实验设施（设备）环境指标
4、 在以上三点均符合要求的前提下，将动物 连同包装盒一起送入缓冲间，不得在送入之前 将动物包装盒打开。
5、 动物连同合格的包装盒放入缓冲间 后，即喷洒过氧乙酸等空气消毒剂，开 启紫外线消毒20分钟，然后打开实验室 内缓冲间的门，连盒进入实验室，取出 动物入笼架。
汰
济
择优劣 观赏宠
汰
物
按微生物学控制原理分类：
实验动物可分为
– 普通级 – 清洁级 – SPF级（Specific Pathogen Free)无特定病原
体的动物 – 无菌动物
无菌动物——是指动物体内外无任何微 生物和寄生虫的动物。
– 是经人工剖腹产净化培育出来的。 – 饲养在隔离环境设施中。
鸡 隔离环境 16～26
3
20~50
20~50
100~1 50
100
无检 出
100~150 100 无检出
5~10
对 实 验 动 物 为 什 么 要 实 行 环 境控制？
影响实验结果的遗传和环境因素
基因型 表现型 演出型
发育环境 周围环境
动物实验的目的是对演出型进行各种有 控制的处理而获得实验结果。为求得动 物实验结果重复性好，就必须要求演出 型稳定。这就需要对决定演出型的遗传 和环境条件加以控制。 反应的重复性——指不同的实验工作者， 在不同的实验地点，不同的时间，用同 一品系动物所做的实验，几乎没有差异 地均能获得相同的结果。
SPF级（无特定病原体的动物）——是指实验 动物体内不存在特定病原微生物和寄生虫的特 殊动物。
– 不允许存在干扰实验的潜在感染，如绿脓杆菌。 饲养在屏障环境设施系统中。
来源：无菌动物→悉生动物→SPF动物
– 悉生动物——指体内携带的微生物是经人工有计划 投给的已知菌或动物生存必需菌。如大肠杆菌或双 歧杆菌。
实验动物环境因素包括两个方面：
– 自然因素（物理、化学、生物） – 人为因素
实验动物的环境因素
人为因素：设施、饲养、管理、调教和实验处理等
物理因素： 温度 湿度 气流 光照 噪声 笼具 垫料
饲养密度
品质控制
遗传因素
化学因素： 饲料 饮水 空气 臭气 杀虫剂 消毒剂
有毒物质
生物因素：各种病原体（细菌、病毒、寄生虫）
有三大特点：
1 遗传角度有要求，必须经人工培育， 遗传背景明确，来源清楚。根据基因的 纯合程度，实验动物分为：近交系、突 变系、杂交群、封闭群。
2 对其携带的微生物、寄生虫实行人工 控制。
3 用于科学实验，它是人类的替身，最 精密的仪器都无法替代。
实验用动物——是指一切能用于科学实 验的动物，除实验动物外，还包括野生 动物、经济动物和观赏动物。
动物对实验处理的反应：
R= （ A+B+C ） ×D±E
R—— 实 验 动 物 的 总 反 应 ； A—— 实 验 动 物 种 的 共 同 反 应 ； B—— 动 物 品 种 和 品 系 的 特 有 反 应 ； C—— 动 物 个 体 反 应 （ 个 体 差 异 ） ； D—— 环 境 的 影 响 （ 包 括 实 验 处 理 ） ； E—— 实 验 误 差 。
40～70 10~20
0.1~0.2 20~50
20~50 100~150
-
10000
30
3
14
60
150~300
100 无检出
15~20 12/12或10/14
犬、猴、猫、兔、小型猪
普通 环境
16 ～ 26
4
屏障环境 18～22
3
8~10
10~20
-
20~50
-
10000
30
3
100~200
隔离 环境