转基因食品的检测方法
食品中转基因含量检测与标记方法
食品中转基因含量检测与标记方法随着人们对食品安全和健康的关注增加，对转基因食品的检测与标记方法也变得尤为重要。
转基因食品是指通过基因工程技术改变了食品中原有基因的组成，使其获得某种特定性状或产生特定功能的食品。
对转基因食品的检测与标记，对保障公众的选择权、监督食品质量与安全具有重要作用。
一、转基因食品检测方法1.1 PCR法（聚合酶链式反应法）PCR法是一种常见的转基因食品检测方法，其基本原理是通过特殊引物和DNA聚合酶的作用，使得基因的特定片段以指数级数繁殖。
该技术可以检测食品中转基因成分的存在与否，鉴定出转基因物质及其比例。
1.2 基于ELISA法ELISA（酶联免疫吸附法）是一种常用的生物化学分析方法，通过抗体与抗原的特异性结合，定量或定性测定目标物质。
对于转基因食品的检测，可以采用基于ELISA法的检测方法，利用特异性抗体与目标物质结合，通过比色或荧光等方式检测出转基因成分的存在。
1.3 残留DNA定性与定量检测传统的分子生物学方法可以通过提取食品中的DNA，利用PCR或实时荧光定量PCR技术进行定性与定量分析。
该方法的优势在于高灵敏度、高特异性和高准确性，可以检测低浓度的转基因成分。
二、转基因食品标记方法2.1 成分标记转基因食品标记的基本原则是明确食品中是否包含转基因成分，并在食品标签上进行清晰而准确的标注。
对于转基因农产品，标签上应标明是否“含转基因成分”。
对于转基因食品的配料，应清楚地标注其转基因成分含量。
这种方法通过提供相关信息，使消费者能够有意识地选择是否购买转基因食品。
2.2 标准化标志一些国家和地区通过制定相应的标准，规定食品标识中的转基因食品的标志。
例如，欧盟标准规定在食品包装上必须使用特定的转基因标签，以明确表示食品是否包含转基因成分。
2.3 二维码标记随着科技的发展，一些企业采用二维码标记的方式来提供更丰富的信息。
消费者可以通过手机扫描二维码，获取有关该产品的详细信息，包括是否含有转基因成分、遵从的标准、生产过程等。
转基因食品的检测方法
SDS沉淀法实验流程（以动物组织为例）
聚合酶链式反应（PCR) 复合扩增PCR 核酸印迹法
聚合酶链式反应（PCR)
聚合酶链式反应（PCR)是体外酶促合成特异 DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火、 适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行， 使目的DNA迅速扩展。
具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时 等特点。
转基因食品 的检测方法
普通大米(左）与黄金大米(右) 的比较。 黄金大米是一种转基因稻米品种，由美国 先正达种子公司参与研发。
非
五颜六色的玉米！
当香蕉遭遇转基因，太厉害了！
转基因食品的安全性越来越受到广泛关注，虽然迄今
为止尚未发现有证据表明转基因食品对健康和环境存在危害，
但由于转基因食品安全性评价具有积累性和潜在性特点，并
3.适温延伸（70℃-75℃）：在 Taq酶 （在72℃左右，活性最佳）的作用下， 以dNTP为原料，从引物的5′端→3′端 延伸，合成与模板互补的DNA链。
注：Taq酶<一种耐热的DNA聚合酶> dNTP<四种核苷酸，A、U、G、C的 混合物>
复合扩增PCR
复合扩增PCR是在同一反应管中含有一对以 上引物，可以同时针对几个靶位点进行检测的 PCR技术。
我国开发的转基因产品检测芯片基本上能实现： 确定是否是源基因食品、是哪一种源基因食品、 是否是我国已批准的源基因食品。目前研制的芯 片能检测国内外已批准商品化转基因作物物种： 大豆、玉米、油菜、棉花、马铃薯、烟草、西红 柿、木瓜、西葫芦、甜椒等。
是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进 行定性和定量分析的新技术，它利用简单的 杂合、连接、及PCR扩增反应，于单一反应 管内可同时检测40个不同的核苷酸序列的拷 贝数变化 。
中国市场上的转基因食品及鉴别方法
中国市场上的转基因食品及鉴别方法国内市场上的转基因食品清单一、我国转基因作物有哪些?1、已批准安全证书的有棉花、水稻、玉米和番木瓜，只有棉花、番木瓜批准商业化种植“截至目前，我国批准了转基因生产应用安全证书并在有效期内的作物有棉花、水稻、玉米和番木瓜。
”中国农科院植保所副研究员谢家建介绍说。
“目前，转基因水稻和转基因玉米尚未完成种子法规定的审批，没有商业化种植。
” 谢家建表示，“我国已经进行商业化种植的转基因作物只有棉花和番木瓜。
”我国批准进口用作加工原料的转基因作物有大豆、玉米、油菜、棉花和甜菜。
这些食品必须获得我国的安全证书。
2、目前市售圣女果、彩椒、小南瓜、小黄瓜都不是转基因食品网上流传一份转基因食品名单，包括“圣女果、大个儿彩椒、小南瓜、小黄瓜”。
对此专家并不认同。
中国农科院生物所研究员王志兴说，小番茄也叫圣女果、樱桃番茄，是自古就有的番茄品种，只是因为个头小、采摘不便、产量低，最早仅作为观赏用，后来发现食用方便，口味经过改良后逐渐流行。
个头小是天生的基因差异，不是转基因的结果。
中国农科院油料所副研究员吴刚说，小南瓜和小黄瓜也不是转基因食品，仅仅是未充分成熟的南瓜和黄瓜。
如果继续在田间种植，小南瓜和小黄瓜最终会生长成普通的大南瓜和老黄瓜。
关于大个儿彩椒，吴刚表示，大个儿彩椒含有不同类型的花青素，表现为更丰富的颜色。
花青素的变异在植物中很常见，像鲜花同一个品种就有不同颜色，萝卜也有红萝卜、绿萝卜、白萝卜等。
“我国曾经批准过抗病毒甜椒的商业化种植，但与常规甜椒相比，转基因甜椒并没有明显优势，因此被市场自然淘汰。
”3、我国市场转基因食品主要是大豆油和木瓜中国农业大学食品工程与营养科学院院长罗云波介绍，目前中国市场上的转基因食品主要有两种，一种是转基因食用油，就是我们所说的大豆色拉油，来源主要是从美洲，尤其是从美国、阿根廷、巴西等国家进口的大豆所生产出来的食用油。
还有一种就是转基因木瓜，因为木瓜容易得一种农药很难治的病，用基因的技术能够控制，转基因木瓜也是我们能够吃到的转基因食品。
转基因食品鉴别方法
转基因⾷品鉴别⽅法转基因⾷品鉴别⽅法有哪些?转基因⾷品鉴别⽅法汇总1. ⼤⾖⾮转基因⼤⾖：为椭圆形状，有点扁。
肚脐为浅褐⾊。
⾖⼤⼩不⼀。
打出来的⾖浆为乳⽩⾊。
转基因⼤⾖：为圆形，滚圆。
肚脐为黄⾊或黄褐⾊。
⾖⼤⼩差不多。
打出来的⾖浆有点黄，⽤此⾖制作的⾖腐什么的都有点黄⾊。
简单的检验⽅法：转基因⼤⾖不发芽!可以⽤⽔检测!本⼟⼤⾖⽤⽔浸泡三天会发芽! 转基因⼤⾖不会发芽，只不过是个体膨胀⽽已。
从这个发芽试验过程，⼈们可以发现，这些转基因⼤⾖是⼀次性产⽣的果实，它们的胚芽是不具有⽣命本质活性的，因此，就没有延续后代的能⼒。
相当于⼀个⼈可以正常怀孕，但是每⼀次都是死胎，这就意味着⽣命的延续到此为⽌了。
⼈类如果⼤规模的长期⾷⽤各种转基因⾷品，其中危害⼈类的转基因⽚断，必然会潜移默化的影响直⾄改变⼈类本⾝的正常基因，抵抗⼒下降，怪病丛⽣，或者丧失⽣育能⼒都是情理之中的了。
2. 胡萝⼘⾮转基因胡萝⼘：表⾯凸凹不平，⼀般不太直，从头部到尾部是从粗到细的。
且头部是往外凸出来的。
转基因胡萝⼘：表⾯相对较光滑，⼀般是直的，它的尾部有时⽐中间还粗。
且头部是往内凹的。
注：胡萝⼘只有在秋冬季节有，夏季的⼀般是转基因的。
3.⼟⾖⾮转基因⼟⾖：样⼦⽐较难看，⼀般颜⾊⽐较深，表⾯坑坑洼洼的，同时表⽪颜⾊不规则，削⽪之后，其表⾯很快会颜⾊变深，⽪内为⽩⾊。
转基因⼟⾖：表⾯光滑，坑坑洼洼很浅，颜⾊⽐较淡。
削⽪之后，其表⾯⽆明显变化。
检验⽅法：先削⽪后看变化再决定吃不吃。
4.⽟⽶转基因⽟⽶：甜脆、饱满、体形优美、头尾颗粒差不多。
5.⼤⽶在中国取得转基因⼤⽶合法种植权的地区是湖北。
要警惕细长的很亮的⽶。
容易与东北“长粒⾹”混淆。
买的时候⼀定看清原产地。
6.西红柿转基因西红柿：颜⾊鲜红很好看，果实较硬，不易裂果7、其他鉴别⽅法进⼝⽔果的标签。
⼀般来说，在标签的最下⽅印有出⼝国的名称，中间的英⽂字母标明⽔果的名称，最上⽅的英⽂字母标识的是出⼝企业的名称。
食品中转基因成分的检测方法与限量标准研究
食品中转基因成分的检测方法与限量标准研究引言：随着人们对食品安全的关注度不断提高，转基因食品备受争议。
为了保护消费者权益，监管部门一直致力于开发食品中转基因成分的检测方法，并制定相应的限量标准。
本文将对现有的检测方法及限量标准进行研究。
一、食品中转基因成分检测方法1. PCR检测方法PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的检测转基因成分的方法。
通过匹配转基因重要基因的DNA序列，PCR可以检测到极低浓度的转基因成分。
然而，由于PCR方法对样品的处理过程较为繁琐，且存在较高的假阳性率，因此在实际应用中需要进一步改进。
2. 实时荧光PCR检测方法实时荧光PCR是基于PCR技术的一种改进方法。
它可以实时监测PCR过程中的荧光信号，准确判断转基因成分的存在与否。
相比传统PCR方法，实时荧光PCR具有高灵敏度和高特异性的优势，然而其设备和试剂的成本较高，限制了其在实际应用中的推广。
3. 基因测序方法基因测序方法是一种直接检测转基因成分的手段。
通过对食品中所有DNA序列的测序，可以准确判断是否存在转基因成分。
基因测序方法在理论上能够提供最准确的结果，但由于其高昂的费用和时间成本，目前在大规模应用中还存在一定的困难。
二、食品中转基因成分的限量标准1. 限量标准的制定依据食品中转基因成分的限量标准制定依据包括食品安全评估、转基因成分检测方法的可行性和社会公众意见等。
在制定限量标准时，应综合考虑科学研究和实际情况，确保转基因食品不会对人体健康产生不良影响。
2. 不同国家的限量标准差异不同国家对转基因成分的限量标准存在一定的差异。
例如，欧盟规定，食品中转基因成分的含量超过0.9%时，必须标示出来。
而美国则没有明确的限量标准，而是采取了一种“合理衡量”的方式，需要食品生产者自行决定是否标识转基因成分。
3. 限量标准的争议与改进转基因食品的限量标准一直备受争议。
一方面，部分人认为限量标准过于宽松，难以真正保护消费者权益；另一方面，也有人认为限量标准过于严苛，对农业发展造成不利影响。
转基因食品检测技术及其安全性评价
转基因食品检测技术及其安全性评价摘要：随着转基因作物的慢慢推广和转基因食品的日益增加，全方位掌握转基因食品的安全性评定以及检验方式看起来尤其急切和关键。
本节探讨了转遗传基因食品类安全性评定的内容、方式和测试程序。
关键词：转基因；食品检测技术；安全性评价一、转基因食品定义按卫生部《转基因食品环境卫生管理方法》得出的界定转基因食品是指运用遗传基因工程技术更改基因组组成的小动物、绿色植物和微生物菌种生产制造的食品类和食品添加剂。
从目前看来, 转基因微生物菌种关键用于生产制造食品类用酶, 而直接作为食品类的转基因微生物菌种如发醇食品类则市面上还未见;转基因动物因研究花费较高,未直接用以食品类, 关键用以医药层面的研究,目前市面上关键的转基因食品是转基因绿色植物以及生产加工品。
二、转基因食品的检测方法（一）酶联免疫法（ELISA）检测技术酶联免疫力法检验技术是一种自20世纪70年代以来被普遍应用的技术，其基本原理是某些抗原和抗原之间有很高的感染力，可以运用抗原-抗原组成开展判定和定量分析测试。
其基本上过程是：抗原或抗原与固相融合，添加酶标识的抗原，产生酶标识的固相抗原-抗原融合物，并通过商品的色调来检验总体目标蛋清。
不一样的抗原与不一样的抗原融合，因此ELISA检验中的免疫力吸附剂、融合剂和酶底物对不一样的总体目标蛋清具备特异性，造成ELISA检验只有检验一些外界蛋清。
除此之外，尽管该方式比较敏感且便于实行，但它只有适用于生鲜食品类，无法适用于生产加工食品类。
生产加工食品类中的外界蛋白的失活、溶解和损害不可以与检验实验试剂的抗原合理融合，这强化了检验的不明确性，使检验的可反复性很低，也强化了因欠缺新蛋白表述而被遗传基因沉默无言更改的转基因作物总数不可以被检验到。
因而，ELISA方式适用于检验一些转基因原材料食品类。
（二）聚合酶链式反应技术（PCR技术）PCR方式是检验转基因食品的常见测试方式。
PCR方式的理论基本是以半传统的拷贝DNA的方法，将特殊的外界DNA序列扩增到可检验的标值。
食品中的转基因成分检测技术
食品中的转基因成分检测技术随着科学技术的不断发展，转基因食品的出现引起了广泛关注。
作为一种新型食品，转基因食品是否安全成为了公众关注的焦点。
而食品中的转基因成分检测技术则成为了确保食品安全的重要手段。
本文将介绍食品中的转基因成分检测技术及其应用。
一、转基因食品的定义及特点转基因食品是通过人工手段将外源基因导入食品中的生物体，使其具有特定的性质。
转基因技术的出现给食品生产带来了许多优势，如提高产量、抗病虫害等。
然而，由于食品中的转基因成分可能对人体健康产生影响，因此转基因食品的检测成为了食品安全的重要环节。
二、食品中的转基因成分检测技术分类食品中的转基因成分检测技术主要分为两大类：基于DNA的检测技术和基于蛋白质的检测技术。
基于DNA的检测技术主要包括聚合酶链反应（PCR）技术、半定量PCR技术和实时定量PCR技术等。
这些技术可以通过扩增特定基因片段或序列来判断食品中是否存在转基因成分。
而基于蛋白质的检测技术主要包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）等。
这些技术可以通过检测特定蛋白质来判断食品中是否存在转基因成分。
三、食品中的转基因成分检测技术的应用食品中的转基因成分检测技术主要应用于以下几个方面：1.食品安全监管转基因食品作为一种新型食品，其安全性备受关注。
食品安全监管部门可以利用转基因成分检测技术对市场上的食品进行抽检，确保食品中的转基因成分符合规定的标准。
2.产品溯源转基因成分检测技术可以帮助生产企业实现对产品的溯源。
通过对原料和成品中的转基因成分进行检测，可以掌握产品生产过程中是否存在转基因成分，并追溯其来源，为企业的产品质量管理提供参考依据。
3.行业竞争力提升一些国家和地区对转基因食品有着不同的标准和要求。
通过转基因成分检测技术，食品企业可以对产品进行筛选，确保其符合市场要求，提升企业的竞争力。
四、食品中的转基因成分检测技术的挑战与展望尽管食品中的转基因成分检测技术存在许多优势，但也面临着一些挑战。
转基因食品PCR定性检测
评估方法
采用科学的方法和程序，结合国 际标准和国内实际情况，进行综 合评估。
04
转基因食品PCR定性检测的应用
在生产中的应用
原料筛选
在食品生产过程中，对原料进行转基因检测 ，确保原料不含有转基因成分，保证产品的 非转基因属性。
生产过程监控
在生产过程中对产品进行转基因检测，确保产品在 整个生产过程中不受到转基因成分的污染。
转基因食品PCR定性检测的方法
设计特异性引物
根据转基因食品中插入的特定基 因序列，设计特异性引物。
电泳分析
对扩增产物进行凝胶电泳分析， 观察是否有预期大小的DNA片段 出现。
01
02
提取DNA
从转基因食品样品中提取出基因 组DNA。
03
04
扩增反应
将提取的DNA与引物进行PCR扩 增反应。
检测过程中的注意事项
02
PCR定性检测技术概述
PCR技术原理
聚合酶链式反应（PCR）是一 种在体外快速、特异地扩增特 定DNA片段的分子生物学技术。
通过DNA双链复制，在短时 间内将DNA片段数量增加数 百万倍，以便于后续分析。
通常使用一对特定的引物，与 待扩增DNA片段两端的互补序 列结合，在DNA聚合酶的作用
下进行链式反应。
确保样品的代表性
取样应具有代表性，能够反映整体样品的真 实情况。
避免交叉污染
设计的引物应具有高特异性，避免与非目标 序列发生非特异性结合。
引物特异性
在操作过程中，应严格遵守无菌操作原则， 避免交叉污染。
结果解读
对电泳结果进行准确解读，避免假阳性或假 阴性结果的出现。
03
转基因食品的标识与监管
转基因食品的标识规定
食品中转基因成分的检测与评估
食品中转基因成分的检测与评估随着科技的不断进步和人们对食品安全的关注不断增强，食品中转基因成分的检测与评估问题变得日益重要。
转基因技术是一种将外源基因导入食品作物中的技术，以改变其某些性状，提高产量、耐病虫害等。
然而，转基因食品的安全性和对人体健康的影响成为公众关注的焦点。
因此，食品中转基因成分的检测与评估是确保食品安全的重要环节。
食品中转基因成分的检测是为了了解食物中是否存在转基因成分以及其含量。
转基因成分的检测可以通过分子生物学技术和化学分析方法进行。
分子生物学技术可以检测转基因成分的特定DNA序列，常用的方法包括PCR和Southern blotting 等。
化学分析方法则可以检测转基因成分的特定蛋白质或其他化学物质。
这些方法的应用可以帮助监管部门和食品生产商确定食品中是否含有转基因成分，从而保障消费者的饮食安全。
食品中转基因成分的评估则是基于食品安全风险评估的原则进行的。
安全性评估是对转基因食品进行全面评估的过程，以确定其对人体健康的潜在风险。
评估包括转基因成分的遗传毒性、过敏原性和潜在生物活性等方面的研究。
通过动物试验和临床研究等方法，可以评估出转基因成分对人体健康的潜在危害。
此外，评估还需要考虑不同人群的敏感性和暴露程度等因素，以确定转基因食品的安全性。
食品中转基因成分的检测与评估在实践中面临着一些挑战。
首先，转基因成分的检测技术需要不断改进和完善，以提高准确性和敏感性。
其次，转基因食品的评估需要进行长期的临床研究，以获得更准确的结果。
还有，不同国家和地区对转基因食品的监管标准和方法存在差异，这给转基因食品的国际贸易带来了一定的困扰。
然而，尽管存在一些挑战，食品中转基因成分的检测与评估仍然是确保食品安全的必要步骤。
通过检测食品中的转基因成分，可以及时发现违规产品，并采取相应的措施来保护消费者的权益。
同时，通过评估转基因食品的安全性，可以为公众提供可靠的食品选择信息，促进消费者对食品安全的信心和保护人们的健康。
转基因食品和PCR检测转基因食品
转基因食品和PCR检测转基因食品
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转基因食品和PCR检测转基因食品
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转基因食品和PCR检测转基因食品
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➢ 当前我国正式同意投入商业种植转基因作物只 有两种：一是含有自主知识产权抗虫棉，另一 个是延迟成熟番茄，其中抗虫棉种植面积年已 累计到达4000万亩，而番茄则还处于小范围种 植阶段，仅10000亩。
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3.2.3 转基因微生物食品
微生物是转基因最惯用转化材料，所以，转基 因微生物比较轻易培育，应用也最广泛。比如， 生产奶酪凝乳酶，以往只能从杀死小牛胃中才 能取出，现在利用转基因微生物已能够使凝乳 酶在体外大量产生，防止了小食品
转基因食品和PCR检测转基因食品
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▪ 基于转基因食品潜在安全不确定性，世界各国政府 都加强对转基因食品进行管理。主要标准是：一、 执行严格安全评价制度；二、标识制度，即在转基 因食品包装上加贴标识。
▪ 当前我国转基因食品法规主要为《农业转基因生物 标识管理方法》，年3月20日起实施，要求对转基 因产品实施标识制度。第一批标识管理转基因生物 目录是：大豆种子、大豆、大豆粉、大豆油、豆粕、 玉米种子、玉米、玉米油、玉米粉、油菜种子、油 菜籽、油菜籽油、油菜籽粕、棉花种子、番茄种子、 鲜番茄、番茄酱。
➢ 进口转基因食品局限在大豆、玉米、油菜等领 域。我国进口大豆中，70%是转基因大豆，在我 国市场上70%含有大豆成份食物中都有转基因成 份，像大豆油、色拉油、磷脂、酱油、膨化食 品等等。
转基因食品和PCR检测转基因食品
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美国市场上转基因食品：
• 在美国，转基因食品已进入寻常百姓餐桌,转基 因大豆也已用于制作数百种食品，其中包含食 物油、糖果和人造黄油。超出70%食品含有转 基因成份，像饮料、糖果、糕点、冰激凌等， 有3/4奶酪是转基因奶酪。近年来，美国转基因 作物品种越来越多，如转基因玉米约占美国玉 米种植面积二分之一。
转基因食品检测技术
随着转基因技术的快速发展，转基因作物种类的不断增加，社会要求转基因食品的检测技术也要不断的发展，对转基因食品的定性、定量检测方法也在逐步完善。
目前采用的转基因成分检测主要包括核酸水平的检测和蛋白质水平的检测。
1.核酸水平检测转基因食品的核酸水平检测主要是指检测遗传物质中是否含有插入的外源基因(即新引入的外源DNA片段)。
当今核酸水平检测的主要方法有定性PCR、定量PCR、印迹法和基因芯片技术等。
(1)PCR法PCR方法是针对外源基因的启动子、终止子等来设计引物，经PCR反应对待测食品DNA样本进行扩增，经凝胶电泳分析靶标PCR产物的有无，来对食品进行定性判断，改良的PCR方法可以进行定量分析。
PCR方法具有很高的灵敏度，并且与蛋白质具有组织特异性相比，PCR技术不受到材料的限制，又由于核酸的性质比蛋白质稳定，变性之后复性也更为容易，所以通过PCR技术可以检测初加工和深加工的食品，因此在转基因领域PCR技术使用最为广泛。
(2)定量PCR法PCR方法虽然灵敏度高，但是操作繁琐，在操作过程中样本容易受到污染或因样品本身感染相关病毒而呈现假阳性，有的时候还会呈现假阴性。
由于PCR本身的局限性，又为了满足定量分析的需求，为此，研究者们在定性筛选PCR方法的基础上，又发展了不同的定量PCR检测方法。
目前，国外较为成熟的方法主要有定量竞争PCR(Quantitativecompetitive，QC—PCR)和Real—timePCR法。
(3)基因芯片法基因芯片方法又称为DNA微探针阵列法，其实质就是高度集成化的反向斑点杂交技术，是将目前通用的报告基因、抗性基因、启动子和终止子的靶片段固定在载体上，将待测基因扩增、标记后与固定的探针进行杂交，杂交信号由扫描仪扫描后，由计算机对杂交信号进行处理，分析判断得到杂交谱。
基因芯片方法与PCR方法具有相同的优点，但PCR方法检测范围窄、检测效率低，而基因芯片方法能够一次性单独分析样品中大量的、不同种类的GMO，进行筛查、定性、定量。
食品中的转基因成分检测方法
食品中的转基因成分检测方法转基因技术是现代生物技术领域的一项重要技术，通过在食品作物中引入外源基因，可以提高作物的产量、抗病虫害能力以及改善其品质。
然而，随着转基因食品的广泛应用，人们对于食品中是否存在转基因成分的关注与日俱增。
因此，开发准确可靠的转基因成分检测方法成为食品安全监管和消费者权益保护的重要任务之一。
一、PCR方法PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的转基因成分检测方法。
它通过扩增目标DNA片段，然后进行特定基因的检测，以确定食品样品中是否存在转基因成分。
PCR方法的原理是利用DNA聚合酶在模板DNA的引导下，不断扩增目标基因区段，最终可以从食品样品中获得足够数量的转基因 DNA 片段。
PCR方法具有高灵敏度、高特异性、操作简便等优点，因此被广泛应用于转基因食品的检测领域。
二、荧光定量PCR方法荧光定量PCR是PCR方法的一种改进形式。
通过引入特定的荧光探针，可以实现对转基因成分的快速、准确的定量检测。
该方法利用特定荧光探针与目标DNA结合，产生荧光信号，并通过荧光实时监测的方式，定量检测样品中的转基因成分含量。
荧光定量PCR方法具有灵敏度高、准确性强、操作简单快速等优点，被广泛应用于食品安全监管和质量控制。
三、基因芯片技术基因芯片技术是一种高通量、高灵敏度的转基因成分检测方法。
该技术通过将大量的特异性的探针固定在芯片上，可以同时检测多个基因。
食品样品的DNA与芯片上的探针发生特异性的杂交反应，然后通过荧光或其他信号检测出转基因成分的存在和含量。
基因芯片技术具有多重检测、高通量、高灵敏度等特点，能够更全面、准确地检测食品中的转基因成分。
四、下一代测序技术下一代测序技术是近年来快速发展的高通量测序技术。
它可以对DNA样本进行高效、全面的测序，并通过比对分析，检测出其中存在的转基因成分。
相较于传统的PCR方法，下一代测序技术具有高通量、高灵敏度、高分辨率等特点，能够准确检测出转基因成分的存在和含量，对于食品检测具有重要的应用前景。
转基因食品的测试原理是
转基因食品的测试原理是
转基因食品的测试原理是通过检测食品中是否含有转基因成分或转基因标记物来判断食品是否为转基因食品。
常见的转基因食品测试方法包括PCR（聚合酶链式反应）、ELISA（酶联免疫吸附测定法）和DNA芯片等。
PCR方法通过特定引物与转基因植物中的基因序列结合，利用聚合酶链式反应技术扩增目标基因的DNA片段，然后通过凝胶电泳分析扩增产物的大小来确定是否含有特定的转基因成分。
ELISA方法通过特异性抗体与转基因植物中的蛋白质结合，形成复合物，然后利用酶标记的二抗或底物产生颜色反应，通过测量颜色的强度来判断食品中是否存在转基因标记物。
DNA芯片方法使用特定组合的DNA探针固定在芯片上，食品中的DNA与探针特异性结合，形成杂交复合物，通过分析探针与DNA杂交的信号强度来确定是否含有特定的转基因成分。
这些测试方法可以检测食品中极其微量的转基因成分，从而保障食品安全和消费者权益。
食品中转基因成分检验流程与技术研发
食品中转基因成分检验流程与技术研发食品中转基因成分检验流程与技术研发随着生物技术的发展，转基因食品的出现已经成为人们关注的重要话题。
转基因食品是指通过基因工程技术将外源基因导入食品生产中，使得食品植物具有某种特殊功能或者抗性。
然而，由于转基因食品与传统食品在成分上的差异，其安全性与是否符合消费者需求备受争议。
因此，建立一套科学化、标准化的转基因食品检验流程与技术研发显得尤为重要。
一、食品中转基因成分检验流程1. 样品采集：从市场上购买一定数量的食品样品，根据样品特点选择合适的采集方法，确保样品的全面性和代表性。
2. 样品处理：将所采集的样品进行样品预处理，主要包括样品的混匀、分离等工作。
3. DNA提取：利用DNA提取试剂盒或者其他方法，从样品中提取出所需的DNA物质。
4. PCR扩增：利用特定引物和酶，在PCR扩增仪中进行PCR反应，扩增出转基因物质的特异片段。
5. 扩增产物检测：将PCR扩增后的产物通过电泳等方法进行检测，确定是否存在转基因物质。
6. 数据分析：根据扩增产物分析数据，判断样品中是否存在转基因物质，计算其含量及比例。
7. 结果报告：将检测结果编制成报告，以便进一步的科学研究和监管工作。
二、技术研发1. 引物设计：通过分析转基因食品的外源基因序列，设计特异性引物，确保能够准确、快速地检测转基因物质。
2. 标准物质制备：根据转基因物质的特性，合成转基因DNA标准物质，用于标定和校准分析仪器。
3. 验证实验：利用已知含量的转基因物质标准品，对所研发的检测方法进行验证实验，确保方法的准确性和可靠性。
4. 自动化技术：引入自动化技术，提高样品处理和检测效率，减少人为操作错误的可能性。
5. 快速检测方法研发：针对食品中转基因物质的检测需求，研发新的快速检测方法，提高转基因物质的检测效率和准确性。
6. 大规模样品处理技术：研发高通量、自动化的样品处理技术，提高样品处理能力，适应大规模样品检测的需求。
鉴别小米转基因的方法
鉴别小米转基因的方法转基因食品是指通过基因工程技术对食品中的一种或多种基因进行改造，使其具有某种特殊性状或功能。
而小米，作为一种重要的粮食作物，在市场上也有转基因的品种存在。
那么，如何鉴别小米是否转基因呢？下面将介绍几种常用的鉴别方法。
1.基因检测法基因检测法是一种直接检测食品中是否存在转基因成分的方法。
通过提取小米中的DNA，利用PCR(聚合酶链反应)技术进行扩增，再通过凝胶电泳等方法分析扩增产物，就可以确定小米中是否存在转基因成分。
这种方法准确性高，但需要专业实验室设备和技术支持。
2.蛋白质检测法转基因食品中通常会引入外源蛋白质，因此通过检测小米中的蛋白质组成可以初步判断是否转基因。
可以使用蛋白质电泳、质谱等技术，对小米中的蛋白质进行分析和比对，如果发现与已知的转基因品种存在差异，就可以初步判断小米中可能存在转基因成分。
3.表型特征鉴别法转基因小米在外观、生长特性等方面可能与传统小米有所不同。
可以通过观察小米的颜色、大小、形态等特征，以及生长周期、产量等方面的差异，来初步判断是否为转基因小米。
但这种方法只能提供一种初步的判断，不具备确定性。
4.种子鉴别法转基因小米种子通常会有一些特殊的标记或基因。
可以通过种子的形态、颜色、大小等特征来鉴别是否为转基因小米种子。
此外，也可以使用PCR技术对种子DNA进行检测，以确定是否存在转基因成分。
总结起来，鉴别小米是否转基因可以通过基因检测法、蛋白质检测法、表型特征鉴别法和种子鉴别法等多种方法来进行。
其中，基因检测法和蛋白质检测法是较为准确和可靠的方法，但需要专业实验室设备和技术支持。
而表型特征鉴别法和种子鉴别法则可以提供一种初步的判断，但不具备确定性。
综合多种方法的结果，可以更准确地判断小米是否转基因。
食品中转基因成分的快速检测技术
食品中转基因成分的快速检测技术食品作为人类日常生活中必不可少的重要物质，其安全问题一直备受关注。
为了确保食品的安全性和质量，许多国家都制定了严格的法律法规。
其中，关于转基因食品的检测难点较大，因为转基因成分难以被直接观察到。
为了解决这一难题，快速检测转基因食品中转基因成分的方法越来越受到人们的重视和关注。
一、转基因食物简介转基因，即基因工程技术，是指为了改善食品质量、提高作物产量、抗御病虫害等目的而人为对生物的遗传物质进行人工改造。
而转基因食品，也称基因改造食品，是指通过基因工程技术人为改变食材的遗传特性，使得其具有更好的品质、更高的产量或增加耐受病虫害的能力。
转基因食品在全球范围内被广泛种植和使用，例如玉米、大豆、小麦、马铃薯等作物都经过转基因技术改变了其遗传特性。
然而，随着转基因食品的广泛应用，一些人开始关注其安全性问题，有关转基因食品可能带来的健康风险引起了人们的关注。
二、转基因食品的安全性问题转基因食品的安全性问题是指转基因食品对人类健康可能造成的健康风险，这也是制定严格的转基因食品检测标准的重要原因。
转基因食品中会改变食材的遗传特性，可能会引起某些基因的失控，从而出现一些与传统食品不同的物质。
此外，转基因食品中可能存在的抗生素残留和对生态环境的影响等问题也备受关注。
因此，对于转基因食品的检测工作尤为重要。
三、转基因食品的快速检测技术目前，转基因食品的检测主要依靠实验室的手段，这样检测的过程非常复杂，需要耗费大量的时间和资源，以及对食品样品进行提取和处理的技术水平。
因此，快速检测转基因食品中转基因成分的方法越来越受到人们重视。
目前，已经出现了许多快速检测食品中转基因成分的技术。
这些技术大多基于生物技术、化学反应和光学测量等原理。
其中，PCR技术、电化学法技术以及纳米传感器技术等方法都是比较常用的快速检测方法。
(a) PCR技术PCR技术又称聚合酶链反应技术，是一种快速、敏感、简单、可重复的分子生物学技术。
转基因食品检测技术与安全性评价
转基因食品检测技术与安全性评价随着人口的增长和环境的变化，粮食安全问题越来越受到全球关注。
为了解决粮食安全问题和提高农作物的产量和品质，转基因技术应运而生，并被广泛应用于农业生产中。
转基因食品是指通过人工方法将外源基因（来自非亲缘物种）导入到食品中的食品。
虽然转基因技术具有很大的潜力，但是也存在许多安全问题。
因此，转基因食品的安全性评价和检测技术是非常重要的。
1. 食品成分分析食品成分分析是评价转基因食品安全性的基本方法之一。
这种方法通过对转基因食品和非转基因食品成分的比较来确定它们的差异。
如果分析结果表明，转基因食品成分与非转基因食品成分无显著差异，则转基因食品被认为是安全的。
2. 功能基因组分析功能基因组分析是用于评价转基因食品安全性的新方法。
该方法使用基因芯片来检测特定基因的表达方式，以确定转基因食品和非转基因食品之间的差异。
这种分析可以检测到转基因食品中特定基因的表达量是否高于或低于非转基因食品的表达量。
3. 动物实验动物实验是评价食品安全性的传统方法之一。
这种方法通过将转基因食品添加到动物饲料中，并观察动物在不同时间点和不同剂量下的生长、繁殖和器官功能等指标来评价食品的安全性。
4. 人类实验1. PCR技术PCR技术是鉴别转基因食品的主要方法之一。
该技术与特异性引物配对，通过扩增DNA片段的方法，检测转基因物质是否存在于食品中。
这种检测方法具有灵敏度高、特异性强和假阳性率低等特点。
2. 质谱技术质谱技术是一种快速、高效的检测方法。
该技术通过测量食物中特定的化合物或分子之间的质量和电荷比来检测转基因物质。
这种检测方法具有快速、高效、灵敏度高和特异性强等特点。
3. 蛋白质芯片技术蛋白质芯片技术是一种新型的转基因检测方法。
该技术使用蛋白质芯片来检测食品中特定蛋白质的存在。
这种技术可以同时检测多种蛋白质，并且具有快速、高效的特点。
4. 基因测序技术基因测序技术是一种高通量的转基因检测方法。
该技术可以直接测序转基因食品中的DNA序列，比较物种特异性的DNA序列差异来鉴别食品中是否存在转基因物质。
转基因食品成分检测技术研究进展
转基因食品成分检测技术研究进展转基因食品成分检测技术是一种用于确定食品中是否存在转基因成分的分析方法。
转基因食品是指通过现代生物技术手段将外源基因导入食品作物中，使其具有新的特性或优势的食品产品。
转基因食品在食品安全和公众健康方面引起了广泛关注，因此开发准确、快速、可靠的转基因食品成分检测技术非常重要。
目前，转基因食品成分检测技术的研究进展主要包括以下几个方面。
1.PCR法：聚合酶链反应(PCR)法是最常用的转基因食品检测方法之一、它可以特异性地扩增转基因植物中的特定DNA序列，并通过电泳分离和检测扩增产物来确定食品中是否存在转基因成分。
2.即时PCR法：即时PCR法是PCR技术的一种改进，可以在PCR反应过程中实时监测扩增产物的积累。
这种方法具有高灵敏度、高特异性和快速分析的优势，适用于大规模的转基因食品筛查。
3.数字PCR法：数字PCR法是一种新的转基因食品检测方法，可以实现对样品中转基因成分的绝对定量。
与传统PCR方法相比，数字PCR法具有更高的准确性和灵敏度，能够在低转基因成分水平下检测到微量的转基因成分。
4.荧光定量PCR法：荧光定量PCR法是一种利用荧光染料标记的探针对转基因成分进行定量分析的方法。
与传统PCR法相比，这种方法可以减少误判概率，提高检测灵敏度和可靠性。
5.下一代测序技术：下一代测序技术是目前最先进的基因测序技术之一，可以对DNA样品进行高通量的测序分析。
利用这种技术，可以对转基因食品样品中的整个基因组进行测序，并确定是否存在转基因成分。
总体来说，转基因食品成分检测技术在过去几十年取得了显著的进展。
这些技术不断提高着转基因食品检测的效率和准确性，为监管机构和消费者提供了更可靠的食品安全保障。
然而，由于不断涌现的新的转基因食品和转基因成分，还需要进一步研究和改进转基因食品检测技术，以满足市场需求并确保食品安全。
转基因食品检测技术与安全性评价
转基因食品检测技术与安全性评价转基因食品是指通过基因工程技术对植物、动物、微生物等生物体的基因进行改造，并将外源基因导入使其具有特定的功能或性状的食品。
而转基因食品检测技术与安全性评价则是对转基因食品进行检测和评价其对人体健康和环境安全的影响。
近年来，随着转基因食品的广泛应用和食品安全问题的持续受到关注，关于转基因食品检测技术与安全性评价的研究与讨论也愈发重要。
一、转基因食品检测技术转基因食品检测技术是对食品中转基因成分进行定性、定量和鉴定的技术。
其基本原理是通过检测目标序列的特定基因或蛋白质来鉴定食品中是否含有转基因成分。
目前，常用的转基因食品检测技术主要包括基因组DNA检测技术、蛋白质检测技术和PCR技术等。
1.基因组DNA检测技术基因组DNA检测技术是通过提取食品中的DNA，并使用特定的引物对转基因物质进行扩增、分离和检测的技术。
该技术的优点是灵敏度高、能够对多种转基因成分进行检测，但由于DNA提取方法的复杂性和食品工艺的影响，存在一定的检测难度和误差。
2.蛋白质检测技术蛋白质检测技术是通过检测转基因物质中特定蛋白质的存在来判断食品中是否含有转基因成分的技术。
该技术的优点是对加工食品和提取纯化的食品配料有较好的检测效果，但对于高温加工、酸碱处理等条件下转基因物质的蛋白质失活或降解不易检测。
以上所述的转基因食品检测技术是目前主要用于转基因食品检测的技术，但其在实际应用中还存在一些问题，如灵敏度、特异性、稳定性等方面需要进一步改进和完善。
二、安全性评价对转基因食品的安全性评价主要包括对转基因成分对人体健康和环境的影响进行评估。
目前，国际上对转基因食品的安全性评价主要采用了“风险评估-风险管理-风险传播”（Risk Assessment-Risk Management-Risk Communication）的方法，通过对转基因食品的基本特性、化学成分、营养成分、毒理学和过敏原学等方面进行评价。
1.基本特性评价基本特性评价主要是对转基因食品所含转基因成分的来源和作用进行评价，包括转基因成分的来源、功能、表达水平、传递途径等。
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转基因食品的检测方法
曹泽虹! 高明侠
（ 徐州工程学院食品工程系，徐州 ""#$$% ）
! ! 摘! 要：目前，世界各国对转基因食品的检测主要从外源 &’( 和蛋白质两种生物大分子入手，所广泛采 用的方法有聚合酶链式反应（ )*+ ） 、生物芯片技术（ ,-./0-12 ） 、酶联免疫吸附测定（ 3456( ） 和侧流技术 （ 4789:7; <;.=） 等。本文综述了各种方法的原理以及这些方法用于检测转基因食品时的优缺点。 关键词：转基因食品；检测 中图分类号：>6"$?@ A! ! ! ! 文献标识码：(! ! ! ! 文章编号：#$$B C "D#A （ "$$D ） $E C $#$$ C $B
构调整和食品卫生监督管理的重大课题。"$$# 年
9: 引论
"$ 世纪 ?$ 年代以来，随着以基因工程为特 征的现代生物技术的飞速发展，转基因技术在食 品资源改造中得到广泛应用。目前转基因食品中 大多来源于转基因农作物，"$$" 年全球转基因作 物的种植总面积达 D%?$ 万 0M" 。转基因品种具有 抗病虫害、高产、减少劳动投入等优点，给人Байду номын сангаас 带来了巨大的社会经济效益，但由于转基因品种 对于人体影响未经过长期检验，其对于生物多样 性的影响也没有明确的结果，因此转基因产品在 许多国家受到一定的质疑和抵制。为了能够对植 物性转基因食品做出综合评价，建立合适的方法 对转基因作物及食品进行检测非常重要。 对转基因食品食用安全性和营养质量评价是 "# 世纪我国食物资源的开发利用、食品产业的结
《 中国食品添加剂》 W W W W W W W W W 63’&= XHHJ #JJ’+’O%)W W W W W W W W W 1@@LW "HG Y 转化株的基因组 !"# 中是 否 含 有 转 入 的 !"#。 $%&&’&() 等用核酸印迹法杂交判断 *+ 玉米中 ,-./ #0 基因的 1// 02 片段和玉米内源基因 )31 （ 编码 #!4 葡萄糖焦磷酸化酶） 的 1/5 02 片段的存在。 !" !# 外源基因的定量检测 !" !" $# 定量 467 法 尽管采用特异 !"# 片段的定性 467 筛选方 法已广泛应用于 89: 食品的检测，一些国家将 此作为本国有关食品法规的标准检测方法，但是 随着各国 有 关 89: 标 签 法 的 建 立 和 不 断 完 善， 对食品中的 89: 含量的下限已有所规定。定性 筛选 467 本身具有的局限性（ 如因其高敏感性常 伴有假阳性现象，而操作上的误差加上一些反应 抑制因素亦可带来假阴性现象） 显现出来，其最 大的不 足 是 无 法 对 89: 进 行 定 量 分 析。为 此， 研究者们在定性筛选 467 方法的基础上，发展了 不同的定量 89: 的 467 检测方法。研究人员在 实验设计中引入内部参照反应以消除检测时的干 扰，并与已知含量的系列 89: 标准样品的 467 结果进行比较，从而可以半定量地检测待测样品 中的 89: 含量。目前定量检测方法如竞争性定 量 467 方法（ ;6 < 467 ） 和实时定量 467 方法 （ -%=> < +’?% 467 ） 已 被 一 些 国 家 的 政 府 实 验 室 采用。 !" !" $" $# 竞争性定量 467 法 构建理想的内标 是 竞 争 性 定 量 467 法 的 关 键。前提是假定内标具有和靶基因相同的动力学 特点 和 扩 增 效 率， 并 且 要 求 !"# 片 段 大 于 /@@02。目前，内 标 法 构 建 的 方 法 有：靶 基 因 扩 增产物的突变；限制性片段的插入或缺失；含靶 基因引物结合位点的非同源性 !"# 序列等。其中 通过 467 方法构建的探针结合位点核苷酸直接突 变构建内标物是目前应用最多、最方便的方法。 单竞争性 467 因为没有考虑样品分析中可能发生 的 !"# 降解，通常被用来进行半定量测定，适合 于原材料和未加工食品的分析。双竞争性 467 法 则同时考虑了 !"# 的断裂和扩增两个因素，并且 有应用设备成本相对较低的优点。其主要问题是 异源双链核酸分子的构成会改变 467 反应中靶基 因和内标扩增产物的比率，而异源双链核酸分子 有相似的电泳特性也会使随后的扩增产物的电泳 分析复杂化。5 个欧洲食物控制实验室在确认这 万方数据 /@1 些方法时比较了定量 467 检测方法的实验操作特 性。用 ;6 < 467 测定 *+/AB 玉米，平均值偏离真 实值的 < AC D /EC 左右。平均偏离 1C F /@C 。 能够确定大豆 !"# 中 @G 5C D 5BC 7HI&JI2 7%=J. 大豆的含量，7K! 为 1LC 左右。 !" !" $" !# 实时定量 467 法 来自日本、韩国和美国等的 /5 个实验室参加 的 针 对 L 个 品 种 转 基 因 玉 米 *+// 、 M1L 、 9:"E/@ 、8#1/ 、 NO%&+ /AB 和 / 种 转 基 因 大 豆 7HI&JI2 7%=J. 的研究结果显示，实时定量 467 方法能特异定量检测 89:，测定限 *+// 、 M1L 和 9:"E/@ 为 @G LC ， 而 对 8#1/ 、 NO%&+ /AB 和 7HI&JI2 7%=J. 大豆的为 @G /C ；盲样测试结果表 明这种方法可以应用于转基因作物标识制度的实 际检测。P=’+’>’&(H? 9 等应用实时定量 467 方法 可以在 !"# 抽提出 53 后检测出含 12( 的基因修 饰物质或 /( 待测样品中的基因组 !"#，并可以 在已确认的代表性的食物产品中检测出“ 9=Q’?’R S%-” 玉米和“ 7HI&JI2 7%=J. ” 大豆的含量。在 实时定量 467 方法检测 7HI&JI2 7%=J. 大豆加工 食品的实验中，/AT 个含大豆的不同的加工食品 如婴儿食品、减肥食品中有 5@ 个样品检出 89:， 其中 E 个 89: 的含量超过了 /C 。实时定量 467 特异测定 89: 的检测限（ U:; ） ，在实验上达到 了 5@ D L@ 个 目 的 分 子，接 近 理 论 预 期 值。 用 1@@( 植物基因组 !"# 为模板的 467，其测定限 从大米的 @G @1C 到小麦的 @G AC ，主要取决于目 的植物基因组的大小。实时定量 467 方法的主要 缺点是荧光标记探针会在一些食物基质中水解。 另外，操作的仪器较贵。 !" !" $" %# 467 < NUVK# 这是一种将 467 的高效性与 NUVK# 高特异性 结合在一起的检测方法，它利用地高辛或生物素 等标记引物，将 467 扩增产物与固相板上特异的 探针结合，再加入抗地高辛或生物素的酶标抗体 < 辣根过氧化物酶结合物，最后使底物显色，在 酶标仪上读取数值。利用 467 < NUVK# 法对转基 因大豆检测，灵敏度比欧盟推荐的 467 方 法 高 L D /@ 倍C 。它快速方便，避免了有毒物质 N* 的 使用，适合大批量自动检测。 !" !" $" &# 基因芯片（ (%&% ,3’2） 技术 基因芯片，又称 !"# 微阵列，是指将许多特
;: 外源基因的检测
目前对于外源基因的检测主要是通过对转入
作者简介：曹泽虹（ #TBA C ! ） ，女，副教授，研究方向：食品生物技术。
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万方数据
《 中国食品添加剂》 R R R R R R R R R "/01- S’’9 &99040T+.R R R R R R R R R ;<<6R %’J > 的外源基因进行 !"# 扩增，然后进行紫外或荧光 检测。!"# 技术全称“ 聚合酶链反应技术” ，是一 种在体外由引物介导的 $%& 聚合酶催化的聚合反 应，能在短时间内准确地将目的序列大量复制。 在转基因食品检测方面，主要是用于从 $%& 即基 因水平来鉴定被测食品。由于它的快速、灵敏、 费用低、检测仅需微量的 $%& 并且可以同时检测 多个 样 品， 正 成 为 这 一 领 域 日 趋 成 熟 的 方 法 之一。 !" #$ 外源基因的定性检测 !" #" #$ 聚合酶链式反应（ !’()*+,-.+ "/-01 #+-23 40’1 !"#） 目前对于外源基因的检测主要是通过对转入 的外源基因进行 !"# 扩增，然后进行紫外或荧光 检测。!"# 是在 $%& 聚合酶、引物及模板 $%& 存在的条件下对离体 $%& 进行扩增的一种方法。 要进行 !"# 扩 增 必 须 知 道 待 扩 增 $%& 的 序 列。 转基因食品中的外源基因不仅仅包括外源蛋白编 码序列，还包括选择性标记基因和对于外源基因 发挥作用所必须的功能基因。根据所选择的用作 模板的外源基因的不同，!"# 实验可分为不同的 类型。如果所选择的 $%& 序列是广泛存在于转基 因植物中的序列，如 567 启动子和 %87 终止子， 则这种实验将不具有专一性，这种扩增能检测出 多种不同的转基因食品。但如果所选择的扩增靶 序列既包括启动子又包括特定的外源基因，或者 是既包括特定的外源基因又包括终止子则 !"# 实 验将具有专一性。 !" #" !$ 巢式和半巢式 !"# （ 1+.4+9 !"# -19 .+*0 : 1+.4+9 !"#） 巢式 !"# （ 1+.4+9 !"#） 是在普通 !"# 基础 上发展起来的一种 !"# 技术，分子生物学研究和 医学检 测 方 面 研 究 较 多。其 原 理 是 设 计 两 对 引 物，其中一对引物在另一对引物扩增产物的片段 上，通过二次 !"# 反应对某个基因进行检测。通 常第一次采用能扩增较大片段的引物，经过 ;< : 5< 次循环扩增后，将第一次扩增的产物作为模板 进行 第 二 次 扩 增。 半 巢 式 !"# （ .+*0 : 1+.4+9 !"#）的原理与巢式 !"# 基本相同，只是半巢式 !"# 只有 一 对 半 引 物，有 一 个 引 物 被 用 于 二 次 !"# 反应中。这两种方法不但可以减少假阳性的 出现，而且可以使检测的下限下降几个数量级。 万方数据 因此，可以应用于对转基因食品进行 !"# 检测。 巢式 !"# 和半巢式 !"# 以其的特异性和灵 敏性已广泛应用于疾病的检测，以及许多分子生 物学的研究领域。从理论上来说，用巢式和半巢 式 !"# 可以检测到低于 =< : => ? @ !A 的 $%& 模板 量，但实际上由于食品中 $%& 的破坏，可供利 用的有效模板可能会远远低于其通过紫外分光光 度计测定的 $%& 模板量。但这并不影响巢式 !"# 和半巢式 !"# 对转基因食品的扩增。研究结果表 明，在 $%& 受 到 严 重 破 坏 的 大 豆 加 工 品 豆 油、 大豆磷脂以及其它产品中，用普通 !"# 不能完全 检出是否含有大豆成分和转基因大豆的成分，即 使检出，其重复性也不好。而利用巢式 !"# 和半 巢式 !"# 可以克服普通 !"# 的这一缺陷。在用 巢式和半巢式 !"# 对市场的食品原料和深加工食 品进行检测时，可以从大豆油、酱油、面酱、大 豆磷脂、豆腐、豆浆等食品原料和深加工食品的 =B 个品牌的食品中检测出大豆内标基因（ /’C.+3 D++E01? ?+1+ ） A+2401。其中，; 种食品原料和 深 加工食品的 == 个品牌的食品中检测出外源基因 "-FG567 : "H!> 基因片段，说明这些食品中含有 转基因大豆成分，占被检测食品的 BIJ 6K 。 在研究中 还 发 现，不 同 公 司 和 不 同 批 次 的 H-L $%& 聚合酶对普通 !"# 的扩增效率和检测下 限有较大的影响，而对巢式 !"# 和半巢式 !"# 的扩增反应影响相对较小。因此，巢式 !"# 和半 巢式 !"# 技术抗干扰性也是比较好 的。一 般 来 说，巢式 !"# 和半巢式 !"# 具有高度的特异性， 其结果一般不需要再用其他方法来验证 MN"G。 这是巢式 !"# 和半巢式 !"# 用于检测深加工转 基因食品的另一优点。 !" #" %$ 复合扩增 !"# （ FC(40E(+O !"#） 复合扩增 !"# 是在同一反应管中含有一对以 上引物，可 以 同 时 针 对 几 个 靶 位 点 进 行 检 测 的 !"# 技术。该技术不仅效率高，而且因为它是针 对多个靶位点进行同时检测，所以其检测效果较 之普通 !"# 更为可信。陶震、刘光明等人就利用 该方 法 同 时 检 测 待 测 大 豆、 马 铃 薯 等 样 品 的 "-FG567 启动子和 %87 终止子，均取得了满意的 结果。 !" #" &$ 核酸印迹法（ 7’C4/+,1 P(’4） QC 等人用核酸印迹法判断西红柿的假定的 =<=