皮肤光老化动物模型具体步骤及详细说明
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8-MOP+UVA联合处理组P53, P21WAF-1 及 P16INK-4a蛋白 表达水平明显高于对照组（P值均<0.01），而UVA辐射组相 关蛋白水平也有明显增高（P值均<0.05），8-MOP+UVA联合 处理组及UVA照射组两组间经t检验比较，前者相应蛋白表达水 平均高于后者（P值均<0.05）。
8-oxo-d G阳性核比例（%）
120 100
80 60 40 20
0 对照组
8-MOP组
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UVA组
8-MOP/UVA组
**
*
3. Real-Time PCR检测各组细胞端粒相对长度比较
端粒相对长度
9 8 7 6 5 4 3 2 1 0
对照组
8-MOP组
* **
UVA组
8-MOP/UVA组
1.5
1.0
#
###
0.5
0.0
对照 黄芩苷
UVA UVA+黄芩苷
c-myc
p53
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p16蛋白表达水 平 c-myc蛋白表达水 平
对照 黄芩苷
UVA UVA+黄芩苷
4. 黄芩苷对UVA辐射后细胞p16和c-myc蛋白水平的影响
8
6
4
2
0
对照
黄芩苷
# ##
UVA
UVA+黄芩苷
1.5
1.0
8-MOP+UVA联合处理组端粒相对长度明显短于对照组（2.57±0.05 vs 6.63±0.12，P<0.01）UVA照射组（4.59±0.07 vs 6.63±0.12, ） 8-MOP+UVA联合处理组（2.57±0.05 vs 4.59±0.07）端粒相对长度 经t检验比较均短于对照组（P<0.05） ，后者端粒长度更短。而8-MOP
小白鼠皮肤光老化模型的建立
小白鼠皮肤光老化模型的建立张璃;梁虹【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2005(26)12【摘要】目的应用8-甲氧补骨脂素(8-MOP)/长波紫外线(UVA 320～400 nm)照射小白鼠,快速、简便、可靠地建立皮肤光老化动物模型.方法应用HE染色及弹力纤维染色(Weigert法),对接受8-MOP/UVA照射24 h的小白鼠进行皮肤表皮、真皮组织结构、胶原纤维、弹性纤维进行对比观察.结果小白鼠经8-MOP/UVA照射24h,皮肤增厚,表皮组织增生、伴有角化过度及角化不全.真皮层炎性细胞浸润,弹性纤维增粗、增多,排列紊乱或聚集成团,胶原退行性变明显,甚至可见无定形物质,血管不规则扩张,血管壁增厚,有炎性细胞浸润.结论通过8-MOP/UVA可以快速、简便、可靠地建立小白鼠的皮肤光老化模型,为临床进行皮肤光老化的研究提供了方便.【总页数】2页(P1642-1643)【作者】张璃;梁虹【作者单位】武汉大学人民医院皮肤科,武汉,430060;武汉大学人民医院皮肤科,武汉,430060【正文语种】中文【中图分类】R75【相关文献】1.小白鼠建立铅、砷、氟中毒动物模型造模前血红蛋白测定结果分析 [J], 卢秋琳;张佳亮;梁亮;罗茜元;农克卓;蓝声远;张树球2.反复紫外线照射建立皮肤光老化模型 [J], 石潇;陈炜3.皮肤光老化动物模型的建立和超微结构观察 [J], 邵琼琰;王平;任金平;张小燕;黎军英;戎念杭4.小鼠皮肤光老化动物模型建立方法的改良 [J], 李张军;牛新武;肖生祥;Khan Abidullah;刘彦婷;马慧群;彭振辉5.人源隐孢子虫小白鼠感染模型的建立 [J], 王进产;陈丹;张龙现;宁长申;庞歌;梁楠;董和平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
便秘模型小鼠皮肤老化的观察
便秘模型小鼠皮肤老化的观察目的：观察便秘模型小鼠的皮肤老化,为肺与大肠相表里的归经药物研究提供动物模型。
方法：以空白组和D-半乳糖致衰模型作对照，采用限水（1.5ml/天），叠加复方地芬诺酯(10mg/kg·d)灌胃6周建立便秘模型。
通过小肠墨汁推进率、大肠和皮肤含水率判断便秘模型是否成功，同时进行血清、皮和肺超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)、皮肤组织羟脯氨酸(Hydroproline，HYP)及透明质酸（Hyaluronic acid,HA）含量、皮肤的光镜检测。
结果：与空白组比较，便秘组各项指标显示有显著性差异（P＜0.01）。
小肠推进率明显下降（P＜0.01）；大肠和皮肤含水率下降（P＜0.01）；皮肤明显变薄，胶原纤维数量减少；血清、皮肤及肺组织中SOD活力明显下降（P＜0.01），皮肤组织中HYP含量减少（P ＜0.01）；皮肤组织匀浆中HA含量锐减（P＜0.01）。
与衰老模型组比较，无显著性差异。
结论：便秘可导致皮肤衰老。
抗氧化能力下降与皮肤组织HA含量减少可能是该便秘模型小鼠皮肤菲薄、干燥的病理机制。
标签：便秘；皮肤；衰老；小鼠模型衰老与便秘相关，已为历代医家所论述。
如《论衡》中有“欲得长生，肠中常清；欲得不死，肠中无滓”。
《扁鹊心书·便闭》：“老人气虚，及妇人产后血少，致津液不行，不得通流，故大便常结。
”《医宗必读》云:“老年津液干枯…皆能便结”等。
各种原因引起的便秘，其病位虽在大肠，由于五脏一体观之肺系统中大肠、皮毛与肺互为联络，如《素问·五脏生成》云：“肺之合皮也，其荣毛也”。
《灵枢·本藏》曰: “肺合大肠, 大肠者, 皮其应”。
《灵枢·本输》云：“肺合大肠。
大肠者，传导之官”。
故而大肠的病变常与肺的病变相关联，同时“肺与皮毛相合”，肺与皮肤的病变也常互为影响，所以大肠与皮肤在病理上也有紧密的联系。
实用光老化动物模型建立方法的探讨
龙源期刊网
实用光老化动物模型建立方法的探讨
作者：郭鲁义李春雨张宁杨智荣
来源：《中国美容医学》2008年第02期
[摘要]目的：探讨光老化动物模型造模过程中的各个关键因素，确定实用的造模方法。
方法：用电推剪剃除大鼠背部预定部位的毛，将大鼠置于专用固定器中，每天10min，用SS-
03AB型紫外线光疗仪(UVA:340～400nm；UVB:260～350nm)连续照射60天，第61天处死大鼠，照射部位皮肤组织切片进行HE染色，观察造模效果，并结合实践总结造模经验。
结果：与空白组大鼠皮肤相比较，模型组呈现表皮层厚薄不一，真皮层血管扩张，大量炎性细胞浸润，胶原纤维明显变性等典型光老化特征，造模成功。
结论：本实验中讨论并确定的造模关键因素简便易行，经济可靠，可复制性强，为光老化动物模型的复制建立了一种实用的方法。
[关键词]光老化；动物模型；HE染色。
SKH-1无毛小鼠光老化模型的建立及点阵CO2激光治疗效应观察
SKH-1无毛小鼠光老化模型的建立及点阵CO2激光治疗效应观察作者：孙雯佳吴家强马文涓任捷来源：《中国美容医学》2023年第12期[摘要]目的：確定SKH-1无毛小鼠光老化模型的造模方法，并将该模型用于点阵CO2激光治疗效应观察。
方法：将15只SKH-1无毛小鼠分为空白组、较低剂量紫外线组和较高剂量紫外线组，紫外线照射小鼠背部皮肤，通过观察小鼠背部皮肤外观、HE染色评估小鼠皮肤光老化程度，选定合适的紫外线照射剂量。
10只光老化小鼠随机分为对照组与点阵CO2激光治疗组，治疗前、治疗后即刻、7 d、14 d及28 d检测经皮水分丢失（Trans-epidermal water loss， TEWL），治疗前、治疗后即刻、28 d、56 d行环钻活检取得皮肤组织，进行HE染色、Masson染色、阿新蓝染色及Ⅰ型、Ⅲ型胶原免疫组化染色。
结果：紫外线照射后SKH-1小鼠背部皮肤出现皮肤粗糙，横向皱纹增加，胶原纤维含量显著减少、疏松、断裂，真皮变薄、表皮增厚等光老化表现，紫外线剂量过高可出现日光性角化甚至癌变。
点阵CO2激光治疗即刻皮肤组织内可形成锥形的微小热损伤区，TEWL即刻显著升高7倍，1～2周恢复，逐渐出现胶原新生。
结论：SKH-1无毛小鼠是较理想的光老化动物实验模型，且可用于点阵激光等美容治疗后的生理与组织学研究。
[关键词]无毛小鼠；光老化；动物模型；点阵激光；组织学[中图分类号]R758.1 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2023）12-0056-04Establishment of SKH-1 Hairless Mice Photoaging Model and Its Application in Observing the Effect of Fractional CO2 LaserSUN Wenjia1，WU Jiaqiang2，Ma Wenjuan2，Ren Jie2（1.Department of Dermatology， Shanghai United Family Xincheng Hospital，Shanghai 201206，China; 2.Department of Dermatology，Huashan Hospital of Fudan University，Shanghai 200040，China）Abstract： Objective To determine the method of establishing SKH-1 hairless mouse photoaging model， and to use this model to observe the effect of fractional carbon dioxide laser treatment. Methods Fifteen SKH-1 hairless mice were divided into a blank group， a low-dose-UV group and a high-dose-UV group. The dorsal skin of mice was assessed by observing the appearance and HE staining， and the appropriate UV irradiation dose was selected. Then， 10 photoaged mice were randomized into a control group and a fractional CO2 laser treatment group. Trans-epidermal water loss （TEWL） was measured before ， immediately， 7 d， 14 d and， 28 d after treatment. Punch biopsy was done before and immediately， 28 days， 56 days after treatment， for HE staining，Masson staining， Alcian blue staining and immunohistochemical staining for type I and type III collagen. Results After UV irradiation， the dorsal skin of UV-irradiated SKH-1 mice showed roughness， increased transverse wrinkles， significantly reduced collagen fibers， loose and fractured collagen fibers， thinner dermis and thickened epidermis. Excessive UV dose could cause solar keratosis or even carcinoma. Fractional CO2 laser treatment formed conical microthermal zones， with an immediate 7-fold increase in TEWL and recovery in 1-2 weeks. New collagen emerged gradually. Conclusion SKH-1 hairless mouse is an ideal experimental animal model of photoaging， and can be used for physiological and histological studies of cosmetic laser treatment.Key words： hairless mice; photoaging; animal model; fractional laser; histology随着人民生活水平的提高，对于皮肤抗衰的需求逐年增加。
《天真驻颜丹抗皮肤老化作用的实验研究》
《天真驻颜丹抗皮肤老化作用的实验研究》一、引言随着人类生活质量的提高和人口老龄化现象的加剧，皮肤老化问题越来越受到关注。
作为人们外观美观的重要因素，皮肤老化的延缓及抗衰已成为科学研究的热点领域。
天真驻颜丹作为一款备受关注的中草药产品，其被认为具有显著的抗皮肤老化作用。
本文将就天真驻颜丹的抗皮肤老化作用进行实验研究，以验证其效果及作用机制。
二、材料与方法1. 材料天真驻颜丹、健康成年小鼠、各种皮肤老化模型等。
2. 方法（1）实验设计：本实验采用健康成年小鼠作为研究对象，通过建立不同皮肤老化模型来验证天真驻颜丹的抗皮肤老化作用。
（2）实验步骤：首先建立皮肤老化模型，然后将小鼠随机分为实验组和对照组，实验组给予不同剂量的天真驻颜丹，对照组给予等量安慰剂。
在给药过程中观察并记录小鼠的皮肤状态变化，包括皮肤弹性、色泽、皱纹等指标。
最后，对实验数据进行统计分析，以评估天真驻颜丹的抗皮肤老化效果。
三、实验结果1. 皮肤弹性：实验结果显示，实验组小鼠的皮肤弹性明显优于对照组，随着给药时间的延长，实验组小鼠的皮肤弹性逐渐恢复至年轻水平。
2. 皮肤色泽：与对照组相比，实验组小鼠的皮肤色泽明显改善，变得红润有光泽。
3. 皱纹：在给药过程中，实验组小鼠的皱纹逐渐减少，且深度和宽度均有所减小。
而对照组小鼠的皱纹无明显变化。
4. 统计分析：通过对比实验组和对照组的数据，发现天真驻颜丹在抗皮肤老化方面具有显著效果（P<0.05）。
四、讨论天真驻颜丹之所以具有显著的抗皮肤老化作用，主要得益于其中所含的多种中草药成分。
这些成分具有抗氧化、抗炎、促进胶原蛋白合成等作用，从而有助于改善皮肤状态，延缓皮肤老化。
此外，天真驻颜丹的抗皮肤老化作用还可能与其调节机体内部环境、平衡内分泌等作用有关。
五、结论通过对天真驻颜丹的抗皮肤老化作用进行实验研究，我们发现在不同皮肤老化模型中，天真驻颜丹均具有显著的抗皮肤老化效果。
这主要得益于其中所含的中草药成分具有抗氧化、抗炎、促进胶原蛋白合成等作用。
皮肤光老化小鼠模型的构建及效果评估
Apr. 2021, 41(2)
实验动物与比较更-学 Laboratory Animal and Comparative Medicine
117
皮肤是人体最浅表且最大的器官，在保护人 体免受环境损害和进行物质交换方面挥了重要 作用。皮肤衰老是一个由基因和外界环境因素等 共同导致的复杂过程。皮肤老化分为内源性老化 和外源性老化。内源性老化是指山基因决定的随 着时间推移产生的自然老化。外源性老化是指环 境因素如紫外线辐射、吸烟、毒害化学品等影响 下产生的皮肤损害积累，其中紫外线辐射是导致 外源性老化最主要的因素［1］。因此，外源性老化 又称为皮肤光老化。建立有效的皮肤光老化动物 模烈，是研究及防治人体皮肤光老化的基础。
Correspondence to: GUO Yan, E-mail: qhguoyan@
［Abstract］ Objective To establish a mouse model of skin photoaging induced by ultraviolet B (UVB) radiation, and to provide a reference for the study of skin photoaging. Methods Thirty male KM mice were divided into a control group and a model group. The control group received normal light, while the model group was subcutaneously injected with D-galactose combined with narrow-band UVB daily irradiation for 40 min at a dose of 120 mJ/cm2 for 40 d. The skin appearance of mice with fur on the back being removed was observed. Skin tissue pathology was observed after HE staining and Masson staining. Biochemical indexes of skin tissue homogenate including glutathione peroxidase (GSH-PX), superoxide dismutase (SOD), hydroxyproline (HYP), and malondialdehyde (MDA) were measured by enzymatic analysis. The expressions of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), c-fos, and c-jun were determined by Western blotting. Results The skin of the model group was darker, looser, drier, more rough, and deeper than that of the control group. Pathological observation revealed that the epidermis thickened and the dermis fibers were reduced, broken, and disorderly arranged in the model group. In the model group, the activities of GSH-PX and SOD decreased, the content of MDA increased, the content of HYP decreased, and the expression levels of MMP-1, c-fos and c-jun of the model group increased (all P<0.01). Conclusion The skin damage of mice induced by subcutaneous injection of D-galactose combined with UVB irradiation is consistent with photoaging, so it is an effective mouse model of skin photoaging. ［Key words］ Skin photoaging; Animal model; Ultraviolet radiation B; D-galactose; Mice
建立快速光老化动物模型新方法
效 观察 ［ Ｊ ］ ．四川 中 医 ， ２ ０ １ ４ ， ３ ２ （ ４ ） ： ９ ７ — ９ ８ ．
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，
（ １ ， Ｔ ｈ ｅ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆＤ ｅ ｒ ｍ ａ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｉ ｎ Ｔ ｈ ｅ Ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｆ ｏ Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｐ ｒ ￣ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｋ ｕ ｎ ｍｉ ｎ ｇ ６ ５ ０ ０ ２ １ ； ２ ，Ｔ ｈ ｅ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｆ ｏ Ｏ ｒ ａ ｌ Ｒ ｅ ｈ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ Ｔ ｈ ｅ Ｄ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ，Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｋ ｕ ｎ ｍ ｉ ｎ ｇ ６ ５ ０ １ ０ １ ； ３， Ｋ ｕ ｎ ｍｉ ｎ ｇ Ａ ｎ ｉ ｍ ａ ｌ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｆｔ ｏ ｈ ｅ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ａ ｃ ａ ｄ ｅ ｍ ｙ ，Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ Ｋ ｕ ｎ —
皮肤光老化动物模型具体步骤及详细说明
皮肤光老化动物模型具体步骤及详细说明•原型物种人-来源UVA’UVB紫外导致皮肤老化・模式动物品系SPF级ICR小鼠，健康，雄性，6~8W。
・实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
•实验周期4-6 weeks・建模方法雄性ICR小鼠，年龄约6周。
小鼠在正常温度下（23±2°C ）湿度（55%±10% ）和光照（12小时光照/ 12小时黑暗，无紫外线照射）喂养。
喂养一周，等小鼠适应了环境，用8%硫化钠在小鼠的背部剃出超过2厘米x3厘米的脱毛区。
紫外照射方法：2根UVB灯管和4根UVA灯管（40W ,北京电光源研究所）并列穿插安放至自制福照箱中作为紫外福照光源。
禾I」用紫外照度仪（UV-B紫外辐照计、UV-A紫外辐照计北京师范大学光电仪器厂）测定UVA和UVB的辐射强度。
造模前，UV灯管预热10 min ,待光源稳定后将实验鼠放入自制的鼠笼内（使小鼠间不能相互攀爬、站立），并放入箱照箱内，鼠笼与UV灯管相距30 cm,根据预试所得最小红斑剂量（MED ）及光源强度调节福照时间,照射期间用排气扇降彳氐箱体温度。
第1周按1个MED的剂量进行照射，每周照射3次，往后每周照射剂量比前周递增1个MED,直至第4周4个MED为止，之后保持4个MED直至第8周实验结束。
模型组小鼠背部皮肤出现明显增厚、皱纹粗深、松弛等光老化皮肤表征,说明小鼠皮肤光老化造模硕MED测定方法：对预实验小鼠分别采用30mJ/cm2.60mJ/cm2N 90mJ/cm2s 120mJ/cm2s 150mJ/cm2N 180mJ/cm2 的紫外福照剂量对其背部皮肤进行辐照,照射后24h观察小鼠背部皮肤出现肉眼可见红斑所需剂量为最小红斑剂量（MED）。
•应用n/a模型评价・L最小红斑剂量（MED ）剂量的确定：选用2根UVB灯管和4根UVA 灯管，造模前，UV灯管预热10 min ,鼠笼与UV灯管相距30 cm （此时辐照仪测的UVA的总辐照量是3.25 uW/cm2左右；UVB的总辐照量是0.134 uW/cm2左右；这个值略有波动）。
抵御光老化实验报告
一、实验背景随着社会的发展和生活节奏的加快，光老化问题日益受到人们的关注。
光老化是指皮肤因长期暴露在紫外线、可见光和红外线等能源的作用下，导致皮肤细胞受损，从而出现皮肤老化现象。
为了探究有效抵御光老化的方法，本实验选取了紫外线照射作为主要刺激源，通过对比实验，评估不同护肤品对光老化皮肤的防护效果。
二、实验目的1. 了解光老化对皮肤的影响。
2. 评估不同护肤品对光老化皮肤的防护效果。
3. 为消费者提供有效的光老化防护建议。
三、实验材料1. 实验动物：健康成年小鼠，体重约20克，雌雄各半。
2. 实验仪器：紫外线照射仪、显微镜、皮肤水分测定仪、皮肤弹性测定仪等。
3. 实验试剂：A组：含有抗光老化成分的护肤品；B组：普通护肤品；C组：空白对照组。
4. 实验设备：紫外线照射箱、恒温恒湿箱、显微镜等。
四、实验方法1. 将实验动物随机分为A、B、C三组，每组10只。
2. A组：每天涂抹含有抗光老化成分的护肤品，连续涂抹14天。
3. B组：每天涂抹普通护肤品，连续涂抹14天。
4. C组：不做任何处理，作为空白对照组。
5. 实验期间，所有动物均处于相同的生活环境中，光照、温度、湿度等条件一致。
6. 每天定时对动物进行紫外线照射，照射剂量为2J/cm²，连续照射14天。
7. 实验结束后，对动物进行皮肤水分、皮肤弹性、皮肤色素沉着等指标的测定。
8. 对皮肤组织进行显微镜观察，分析光老化程度。
五、实验结果1. 皮肤水分：A组皮肤水分明显高于B组和C组，说明抗光老化护肤品对皮肤水分的保持有显著效果。
2. 皮肤弹性：A组皮肤弹性明显优于B组和C组，说明抗光老化护肤品对皮肤弹性的提升有显著效果。
3. 皮肤色素沉着：A组皮肤色素沉着程度明显低于B组和C组，说明抗光老化护肤品对抑制皮肤色素沉着有显著效果。
4. 显微镜观察：A组皮肤组织结构相对完整，细胞排列整齐；B组和C组皮肤组织结构受损，细胞排列紊乱。
六、实验结论1. 光老化对皮肤有明显的损伤作用。
紫外线照射实验动物的皮肤光老化模型研究进展
紫外线照射实验动物的皮肤光老化模型研究进展王诗萌;李甜;杨田野;王佳琪【摘要】皮肤像人类其他器官一样,随时间而衰老.但又不同于其他器官,影响皮肤衰老的一项重要的环境因素是紫外线辐射.随着大气臭氧空洞的增加、环境光污染的加重及人们生活水平的提高,大家越来越注重皮肤因光损伤导致的红斑、皱纹、色沉、弹性减弱等问题.对光老化皮肤的治疗方法则更是目前的研究热点,但因自然光老化是一个十分漫长的过程,所以有关光老化的实验大多建立在光老化实验动物模型的基础上.因此,建立一个可靠的更接近于人类皮肤自然光老化的模型具有重要意义.本文就当前光老化的发生机制、光老化模型造模方法、检测标准进展归纳总结如下.【期刊名称】《中国美容医学》【年(卷),期】2018(027)007【总页数】5页(P146-150)【关键词】皮肤衰老;光老化;抗衰老;动物模型;紫外线辐射【作者】王诗萌;李甜;杨田野;王佳琪【作者单位】吉林大学第一医院整形美容外科吉林长春 130000;吉林大学第一医院整形美容外科吉林长春 130000;吉林大学第一医院整形美容外科吉林长春130000;吉林大学第一医院整形美容外科吉林长春 130000【正文语种】中文【中图分类】R339.3+8皮肤是人体最大的器官，并作为人体的第一道防线，保护着人体免受外界理化因素及微生物的侵袭。
但与此同时，它也是最容易受外界环境影响的器官，其中紫外线、寒冷、风吹及化学暴露均可导致皮肤受损及老化，而紫外线是诱发人类皮肤光老化所有因素中最重要的一个[1-2]。
光老化的外观特点是皮肤粗糙，皱纹加深并伴有色素沉着，病理特点是表皮角化不良伴异常增生，真皮变薄、胶原减少、弹性纤维降解等[3]。
而紫外线在诱导光老化的同时，也可以引起多种皮肤病变，甚至是皮肤恶性肿瘤。
所以光老化在当代已经以一种疾病及综合征的姿态而成为研究热点[4-5]。
现今对于抗光老化的治疗研究中，由于存在伦理限制及不便因素，研究者们常常先建立起实验动物光老化模型后，再进行下一步治疗研究。
光老化实验方案
实验方案1.实验动物的分组正常对照组，光老化组，空白赋形剂组，含药凝胶组2.光老化大鼠模型的建立照射光源：40W 紫外线灯管：UVB 灯管5 根（光谱集中在297nm），UVA 灯管2根（光谱集中在365nm），并列穿插安装到自制模拟日光箱中。
照射方式：每只大鼠均用电推剪剪除大鼠背部5.0cm×5.0cm 区域内毛发（实验过程中隔日剃毛一次），除正常组外其它各组大鼠将鼠笼笼盖移除后，放入自制照射箱中，距离光源20cm 处的水平面上。
每次照射前轮换鼠笼位置，灯管预热15min，间隔一段时间进行强度测定。
照射剂量：第1周适应实验室环境，第2周开始每天照射2h，第3-7周每天照射4h，第8-13周每天照射6h，照射以5天为一个周期，间隔2天，再开始下一个周期。
至13周结束后终止UV暴露(UVA 照射强度累计为148.47J/cm2，UVB 辐照强度累计为48.67J/cm2)，继续观察1周。
造模过程中每天观察动物背部皮肤有无水疱或糜烂等情况，如果出现上述症状，立即停止照射2-3天，至上述症状消失后再继续照射，直至造模成功3.给药：在每次照射前，按照一定的剂量涂抹凝胶于照射区域4.取材：第14周实验结束后开始取材。
大鼠经10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射，麻醉后将大鼠固定在手术架上，迅速取背部光老化处全层皮肤（不含皮下脂肪），在冰生理盐水中漂洗，去除血液，滤纸拭干，称重，冻存于-70℃冰箱中待测5.观测指标及检测方法皮肤光老化大鼠体征表现：经过长时间的照射，大鼠背部皮肤出现猪毛征、皮肤增厚，出现宽而深的皱纹。
皮肤光老化大鼠常用指标检测：比色法检测皮肤组织中MDA、H2O2含量以SOD、CAT 、GSH-Px活性。
4.1组织匀浆的制备：取皮肤组织制成10%组织匀浆，以4000rpm 的速度离心10min，取上清液进行各指标测定4.2大鼠皮肤SOD 活性的检测：严格按SOD 试剂盒说明书操作，分光光度计于波长55Onm 处比色，测各管吸光度A 值，代入试剂盒说明书中公式，计算皮肤组织中SOD 活力值。
动物缝合练习皮肤模型安全操作及保养规程
动物缝合练习皮肤模型安全操作及保养规程1. 引言动物缝合练习皮肤模型是医学学生进行手术技能训练的重要工具。
为了确保训练的安全性和有效性，本文将介绍动物缝合练习皮肤模型的安全操作及保养规程。
2. 安全操作规程2.1 穿戴个人防护装备在使用动物缝合练习皮肤模型前，必须正确穿戴个人防护装备。
包括但不限于手套、口罩、防护眼镜等。
确保个人安全的前提下才能进行操作。
2.2 准备工作在开始操作之前，需要进行一系列准备工作：•清洁工作区：确保操作台面干净整洁，清除杂物和不必要的物品。
•消毒处理：在操作前，需要对工作区进行消毒处理，以确保操作环境的卫生与安全。
•准备工具：准备好所需的缝合工具、刀片、针线等，并确保其处于良好状态，避免因工具问题引发意外。
2.3 操作技巧在进行缝合练习时，需要注意以下操作技巧：•手部卫生：在操作前，应洗手并戴上手套，保证手部的卫生和操作的安全。
•注意力集中：在操作过程中，保持注意力的集中，避免分心或受外界干扰。
•操作规范：按照正常手术操作的步骤进行，确保缝合过程的准确性和安全性。
•缓慢而稳定：在缝合过程中，缓慢而稳定地进行，避免过快或过慢导致操作失误或伤害。
2.4 急救准备虽然动物缝合练习皮肤模型是模拟手术的练习工具，但在操作过程中仍可能发生意外情况。
因此，需要做好急救准备工作：•熟悉急救技能：操作人员应熟悉基本的急救技能，如止血、心肺复苏等，以便在需要时能够迅速采取行动。
•准备急救设备：在操作区域附近设立急救设备，并确保其功能正常，以便在紧急情况下使用。
3. 保养规程3.1 清洁保养正确的清洁保养是保持动物缝合练习皮肤模型使用寿命的关键。
•清洁方法：使用温和的清洁剂和清水清洁模型的表面，避免使用过于强烈的清洁剂，以免损坏模型表面。
•定期清洁：每次使用后，应立即进行清洁，避免血液和其他污物在模型表面长时间滞留。
•干燥保养：清洁后，应确保模型充分干燥，避免潮湿环境导致模型变质。
3.2 定期检查定期检查动物缝合练习皮肤模型的状态，有助于保持其正常使用和延长使用寿命。
皮肤光老化小鼠模型的构建
皮肤光老化小鼠模型的构建陈旭;王莹;鞠梅;陈崑;顾恒【摘要】目的:构建昆明鼠皮肤光老化小鼠模型.方法:采用模拟日光组分的紫外线照射昆明小鼠,初始照射剂量为最小红斑量,剂量周递增.然后进行照射组和对照组小鼠皮肤大体形态参数和组织学特征比较,进而从分子水平比较丙二醛产物水平和p53表达水平.结果:照射小鼠皮肤厚度为0.0507±0.0082 cm较对照小鼠皮肤0.0397±0.0063 cm厚(P<0.05);照射组皮肤皱纹评分较对照组增高(P<0.05);组织学特征分析发现照射组小鼠皮肤出现显著的胶原纤维和弹力纤维光老化组织学特征.照射组小鼠皮肤丙二醛水平和p53表达显著升高.结论:皮肤光老化小鼠模型的建立为皮肤光老化的研究提供了可用的模型.【期刊名称】《中国麻风皮肤病杂志》【年(卷),期】2014(030)003【总页数】6页(P131-136)【关键词】光老化;紫外线;小鼠【作者】陈旭;王莹;鞠梅;陈崑;顾恒【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042;天津市儿童医院皮肤科,天津,300074;中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042;中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042;中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042【正文语种】中文慢性反复的紫外线(ultraviolet，UV)辐射可导致皮肤慢性损伤，进而产生皮肤光老化、光致癌以及免疫抑制等。
1－3近年来，皮肤光老化得到了广大研究者的重视。
皮肤光老化模型对于光老化的分子机制和临床防治研究是非常重要的核心因素。
皮肤光老化模型主要包括体外志愿者、动物模型的在体研究模型以及单层培养细胞和3D混合培养的体外模型，2，4－6其中动物模型在光老化的研究中具有很高的价值。
紫外线照射实验动物的皮肤光老化模型研究进展
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皮肤光老化动物模型的建立和超微结构观察
皮肤光老化动物模型的建立和超微结构观察邵琼琰;王平;任金平;张小燕;黎军英;戎念杭【摘要】目的：构建光敏剂结合 UVA 诱导的小鼠皮肤光老化模型。
方法： ICR 小鼠分为3组：模型组外用1％甲氧沙林溶液(8-M。
P)后进行 UVA 照射、单纯UVA 照射组和空白对照组。
照射后观察皮肤外观表现、病理学变化和超微结构特点,确定各组诱导皮肤光老化进程的累积照射剂量和时间。
结果：单纯 UVA 照射组在第45天,UVA 剂量约720 J/ cm2时,肉眼观察皮肤外观、组织病理方面和超微结构都呈现比较典型的光老化表现；模型组(8-M。
P / UVA)小鼠在第3天,UVA 累积剂量约47 J/cm2时,透射电镜下可见角质形成细胞和基底层黑素细胞的显著凋亡(核固缩)；第5天,UVA 累积剂量约78 J/ cm2时,病理示：真皮层部分弹性纤维变性；随着照射剂量的增加,第6天 UVA 累积剂量达95 J/ cm2时,出现典型的光老化表现,透射电镜下可清晰观察到弹性纤维和胶原蛋白束的病理改变。
结论：8-M。
P / UVA 可以快速诱导小鼠皮肤光老化模型的建立。
%Objective: To construct a mice photoaging model induced by photosensitizer combined with ul-traviolet A (UVA). Methods: The ICR mice were divided into three groups: In group one the mice were trea-ted with topical 1% methoxypsoralen (8-MOP) solution plus repeated UVA exposure, (8-MOP / UVA); In group two, only repeated UVA irradiation was used and group three was blank control group. After irradiation, by observing the clinical, pathological and ultrastructural features in different stage, photoaging process were correlated with cumulative radiation dose and time. Results: In group two when the UVA dose was about 720 J/ cm2 at the day 45, the clinical manifestations, pathology and ultrastructure showed typicalmanifestation of photoaging. In group one (8-MOP / UVA group) at the time of the day 3, with UVA dose about 47 J/ cm2 , al-though no clinical changes were found, mild broken and twisted elastic fibers at the superficial dermis and also numerous apoptotic keratinocytes and melanocytes were seen under both light microscope and transmission e-lectron microscope (TEM). Clinical changes occurred at day 5 with accumulated UVA dose about 78 J/ cm2 , presented with dull skin, fine lines, mottled pigmentation, accompanied by obvious degeneration of elastic fi-bers in the dermis. On day 6 with UVA dose about 95 J/cm2 ,typical clinical feature of photoaging with coarse transverse wrinkles, and pathologically large proportion of elastic fibers degenerated were presented, especially under TEM. Conclusion: An animal model for photoaging can be quickly induced by 8-MOP / UVA.【期刊名称】《中国麻风皮肤病杂志》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】5页(P462-466)【关键词】皮肤光老化;动物模型;超微结构【作者】邵琼琰;王平;任金平;张小燕;黎军英;戎念杭【作者单位】浙江中医药大学第二临床学院，杭州，310053;杭州市第三人民医院皮肤科，浙江，310009;浙江中医药大学第二临床学院，杭州，310053;浙江中医药大学第二临床学院，杭州，310053;浙江大学电镜中心生物分中心，310012;浙江大学电镜中心生物分中心，310012【正文语种】中文皮肤光老化是紫外线(尤其是长波紫外线)长期照射引起的慢性光损伤。
小鼠皮肤光老化动物模型建立方法的改良
小鼠皮肤光老化动物模型建立方法的改良李张军;牛新武;肖生祥;Khan Abidullah;刘彦婷;马慧群;彭振辉【摘要】目的改良小鼠皮肤光老化动物模型的建立方法,为临床防治皮肤光老化打下基础.方法设计制作一种构建小鼠皮肤光老化动物模型的装置,利用装置中紫外线(UVA 315～400 nm;UVB 280～315 nm)照射ICR小鼠,3次/周,共12周,累计照射剂量:UVA为151.20 J/cm2,UVB为22.68J/cm2;观察照射部位皮肤的临床表现、组织病理及超微结构的改变情况,测定皮肤中羟脯氨酸含量.结果与正常对照组小鼠皮肤比较,模型组皮肤出现粗糙增厚、弹性丧失、粗深皱纹、毛细血管扩张、脱屑及皮革样外观;组织病理可见表皮不规则增厚,真皮胶原纤维变性,断裂减少,排列紊乱,分布不均;超微结构显示胶原纤维排列紊乱,分布不均,周期性横纹不清,横断面胶原纤维直径增大,粗细不等;皮肤中羟脯氨酸含量显著减少(P＜0.01).提示造模成功.结论利用改良的自制造模装置建立ICR小鼠皮肤光老化动物模型是一种简便易行、经济实用、可复性强的方法.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2016(037)001【总页数】5页(P144-147,156)【关键词】小鼠;皮肤;光老化;动物模型;方法改良【作者】李张军;牛新武;肖生祥;Khan Abidullah;刘彦婷;马慧群;彭振辉【作者单位】西安交通大学第二附属医院皮肤科,陕西西安710004;西安交通大学第二附属医院皮肤科,陕西西安710004;西安交通大学第二附属医院皮肤科,陕西西安710004;西安交通大学第一附属医院烧伤整形科,陕西西安710061;西安交通大学第二附属医院皮肤科,陕西西安710004;西安交通大学第二附属医院皮肤科,陕西西安710004;西安交通大学第二附属医院皮肤科,陕西西安710004【正文语种】中文【中图分类】R751光老化导致皮肤过早出现粗糙、深乱皱纹、色素异常、脆性增加、毛细血管扩张及皮革样外观等损美性症状，严重影响人们的外表[1]。
光老化实验方案
实验方案1.实验动物的分组正常对照组，光老化组，空白赋形剂组，含药凝胶组2.光老化大鼠模型的建立照射光源：40W 紫外线灯管：UVB 灯管5 根（光谱集中在297nm），UVA 灯管2根（光谱集中在365nm），并列穿插安装到自制模拟日光箱中。
照射方式：每只大鼠均用电推剪剪除大鼠背部5.0cm×5.0cm 区域内毛发（实验过程中隔日剃毛一次），除正常组外其它各组大鼠将鼠笼笼盖移除后，放入自制照射箱中，距离光源20cm 处的水平面上。
每次照射前轮换鼠笼位置，灯管预热15min，间隔一段时间进行强度测定。
照射剂量：第1周适应实验室环境，第2周开始每天照射2h，第3-7周每天照射4h，第8-13周每天照射6h，照射以5天为一个周期，间隔2天，再开始下一个周期。
至13周结束后终止UV暴露(UVA 照射强度累计为148.47J/cm2，UVB 辐照强度累计为48.67J/cm2)，继续观察1周。
造模过程中每天观察动物背部皮肤有无水疱或糜烂等情况，如果出现上述症状，立即停止照射2-3天，至上述症状消失后再继续照射，直至造模成功3.给药：在每次照射前，按照一定的剂量涂抹凝胶于照射区域4.取材：第14周实验结束后开始取材。
大鼠经10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射，麻醉后将大鼠固定在手术架上，迅速取背部光老化处全层皮肤（不含皮下脂肪），在冰生理盐水中漂洗，去除血液，滤纸拭干，称重，冻存于-70℃冰箱中待测5.观测指标及检测方法皮肤光老化大鼠体征表现：经过长时间的照射，大鼠背部皮肤出现猪毛征、皮肤增厚，出现宽而深的皱纹。
皮肤光老化大鼠常用指标检测：比色法检测皮肤组织中MDA、H2O2含量以SOD、CAT 、GSH-Px活性。
4.1组织匀浆的制备：取皮肤组织制成10%组织匀浆，以4000rpm 的速度离心10min，取上清液进行各指标测定4.2大鼠皮肤SOD 活性的检测：严格按SOD 试剂盒说明书操作，分光光度计于波长55Onm 处比色，测各管吸光度A 值，代入试剂盒说明书中公式，计算皮肤组织中SOD 活力值。
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皮肤光老化动物模型具体步骤及详细说明
•原型物种人
•来源UVA，UVB紫外导致皮肤老化
•模式动物品系SPF级ICR小鼠，健康，雄性，6~8W。
•实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
•实验周期4-6 weeks
•建模方法雄性ICR小鼠，年龄约6周。
小鼠在正常温度下（23±2℃）湿度（55%±10%）和光照（12小时光照/ 12小时黑暗，无紫外线照射）喂养。
喂养一周，等小鼠适应了环境，用8%硫化钠在小鼠的背部剃出超过2厘米x3厘米的脱毛区。
紫外照射方法：2根UVB灯管和4根UVA灯管（40W，北京电光源研究所）并列穿插安放至自制福照箱中作为紫外福照光源。
利用紫外照度仪（UV-B紫外辐照计、UV-A紫外辐照计北京师范大学光电仪器厂）测定UVA和UVB的辐射强度。
造模前，UV灯管预热10
min，待光源稳定后将实验鼠放入自制的鼠笼内（使小鼠间不能相互攀爬、站立），并放入箱照箱内，鼠笼与UV灯管相距30 cm，根据预试所得最小红斑剂量（MED）及光源强度调节福照时间，照射期间用排气
扇降低箱体温度。
第1周按1个MED的剂量进行照射，每周照射3次，往后每周照射剂量比前周递增1个MED，直至第4周4个MED为止，之后保持4个MED直至第8周实验结束。
模型组小鼠背部皮肤出现明显增厚、皱纹粗深、松弛等光老化皮肤表征，说明小鼠皮肤光老化造模成功。
MED测定方法：对预实验小鼠分别采用30mJ/cm2、60mJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2、180mJ/cm2的紫外福照剂量对其背部皮肤进行辐照，照射后24h观察小鼠背部皮肤出现肉眼可见红斑所需剂量为最小红斑剂量(MED)。
•应用n/a
•
• 1.最小红斑剂量（MED）剂量的确定：选用2根UVB灯管和4根UVA 灯管，造模前，UV灯管预热10 min，鼠笼与UV灯管相距30 cm（此时辐照仪测的 UVA 的总辐照量是3.25 uW/cm2 左右；UVB 的总辐照量是0.134 uW/cm2 左右；这个值略有波动）。
选8只ICR小鼠，用剃毛器将小鼠背部的毛剃掉，再使用8%硫化钠将残留的毛发脱干净，然后设置4个不同辐照的时间点：分别照射10分钟、15分钟、20分钟、30分钟，每个时间点2只小鼠，到辐照时间点，取出小鼠，正常饲养，第2日观察小鼠背部的红斑情况。
辐照10
分钟和15分钟的小鼠，无明显红斑；辐照20分钟的小鼠能看到轻微的红斑，辐照30分钟的小鼠，红斑很明显。
此处选用辐照20分钟，作为预试所得最小红斑剂量（MED）
1个MED=（3.25 uW/cm2+0.134 uW/cm2）*20分钟*60=4
mJ/cm2
2.全鼠背部拍照
于第4周以及第8周取样前，拍摄全鼠背部照片，以确定是否出现光老化特征（皱纹粗深、松弛等）。
3. 免疫指标：脾脏和胸腺指标的测定
小鼠称重并执行颈椎脱位，并立即从小鼠中取出脾脏和胸腺，立即称重。
胸腺和脾脏指数根据下述方程
计算：胸腺或脾脏指数（mg/g）＝胸腺或脾脏重量/体重。
指数（TI）和脾指数（SI）可作为免疫指标。
•
•
组织学分析
在最终紫外照射后的24h内取皮肤标本进行组织化学研究。
小鼠皮肤样
品在4%缓冲中性福尔马林溶液中固定24h，并嵌入石蜡中，连续切
片。
抗氧化指标
1. 皮肤抗氧化指标分析
取小鼠背部皮肤组织（约2厘米×3厘米，平均分为8块，一块加福尔马林固定，用于病理检测；一块加RNA later保存，-80度保存，用于测序；剩余的6块，每2块放在一个管子里面，-80度保存）。
2. 血清中抗氧化活性
实验结束时，小鼠禁食12小时，但允许自由进入水。
血液从眼球中收集到离心管中。
在离心后（7000 g，4℃,15分钟）从血液样品中获得血清，然后冷冻并储存在20℃直到分析
应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显。