血清镁Mg二甲苯胺蓝法测定作业指导书

血清镁Mg二甲苯胺蓝法测定作业指导书

1.实验原理

二甲苯胺蓝（Xylidyl Blue）染料结合终点比色法。在碱性条件下，镁离子和二甲苯胺蓝形成紫色络和物。加入GEDTA 和钙形成络和物，使本反应可特异监测镁。紫色深浅和镁浓度呈正比。

pH11.0

Mg2+ + 二甲苯胺蓝-------------﹥紫色复合物

2. 标本采集

2.1 病人准备：无特殊要求。

2.2 类型：血清、血浆、脑脊液或尿液，不可使用EDTA血浆。

3. 标本存放：血清/血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。尿液稳定性：4-25℃保存可稳定3天；-20℃保存可稳定1年。用数滴浓盐酸调节尿液pH值到3～4，然后用蒸馏水作1＋4稀释；检测后结果乘以5。

4. 标本运输：室温条件下运输

5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血的、抗凝剂不合要求的标本不能做测定。

6. 实验材料：

6.1 上海申能镁测定试剂盒（货号：111 4617170 1 试剂：8×70ml）

6.1.1 试剂组成

乙醇胺缓冲液pH11.0 1mol/L

乙二醇醚二胺四乙酸(GEDTA) 60mmol/L

二甲苯胺蓝110mmol/L

表面活性剂适量

6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。

6.1.4 变质指示：当试剂变色或有浊度时，表明已变质或有细菌污染，均不能继续使用。

6.1.5 注意事项：应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动

分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件

6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件

7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪

8. 操作步骤

8.1 项目基本参数：参见AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP 文件

8.2仪器操作步骤：参见AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件

9. 检验结果的判断与分析

10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II 质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法：以TruCal U复合校准品镁校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。

12. 参考值范围[1]

血清/血浆：

新生儿0.48～1.05mmol/L

儿童0.60～0.95mmol/L

女性0.77～1.03mmol/L

男性0.73～1.06mmol/L

尿液：3～5mmol/24h

脑脊液：0.85～1.35mmol/L

（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

13. 临床意义[1,2]：镁缺乏是常见的功能失调，由营养不良、吸收不良、肾损伤和内分泌失调等所致。与镁浓度下降相关的并发症有神经肌肉过度兴奋（如：震颤，癫痫发作）和心脏病症状（例如心动过速，心律失常）。镁浓度下降常伴随着钙和钾水平的下降，低血镁被认为可能是低血钙症的起因。镁浓度升高可见于脱水，肾功能失调和服用大量抗酸剂的患者，并与神经肌肉反应低下和低血压有关。

14. 操作性能

14.1 线性范围：0.02～2.05mmol/L。

14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

批内精密

度

n=20

x

(mmol/L

)

s

(mmol/L

)

CV

(%)

批间精密

度

n=20

x

(mmol/L

)

s

(mmol/L

)

CV

(%)

样品1 0.78 0.008 0.92 样品1 0.76 0.008 1.09 样品20.97 0.008 0.87 样品20.99 0.012 1.12 样品3 1.66 0.012 0.83 样品3 1.70 0.025 1.43 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对81个样品进行Mg检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.01x-0.012mmol/L；r=0.999。

14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.02mmol/L。

14.5 病人结果可报告范围：0.02～2.05mmol/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：1稀释，重

新测定，结果乘以2。

15. 超出范围结果处理：本法线性上限为 2.05mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。

16. 病危报警值的处理当血清镁测定值>3.0mmol/L或<0.5mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。

17. 方法局限性

17.1 本法线性上限为2.05mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。

17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度≤1704μmol/L，胆红素浓度≤684μmol/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L，钙浓度≤6.24 mmol/L时没有观察到干扰。由于红细胞内镁含量很高，故溶血对测定有干扰。

18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。