皂苷测定方法

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保健食品中总皂苷的测定

保健食品中总皂苷的测定

附件:一、保健食品中大蒜素的测定1 范围本方法适用于以大蒜及其制品为原料的保健食品中大蒜素(三硫二丙烯,C6H10S3)的含量测定。

本方法最低检出浓度为0.0430mg/mL;取100mg试样,提取定容5.0mL时,试样中大蒜素最低检出质量浓度为0.20g/100g。

本方法最佳线性范围: 0.320mg/mL~3.00 mg/mL。

2 原理:根据大蒜素为挥发性油成分,经有机溶剂提取,用气相色谱仪分析,采用外标法定量。

3 试剂除特殊说明,所用试剂均为分析纯。

3.1 无水乙醇3.2 正己烷3.3标准溶液:称取0.1000g标准品,置于10mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,该溶液中含大蒜素浓度为10.0mg/mL。

此溶液可在冰箱中保存七天。

取该溶液1.0mL,置于10mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,此溶液含大蒜素浓度为1.0mg/mL。

4 仪器4.1气相色谱仪:附氢火焰(FID)检测器4.2数据处理机或积分仪4.3分析天平:万分之一4.4超声清洗机4.5离心机:3000r/min5分析方法5.1试样提取5.1.1固体试样:称取试样适量(相当于含大蒜素5mg,精确至0.001g),加无水乙醇适量,密塞,超声70min,取出冷却,加正己烷定容(调节大蒜素含量约为1mg/mL),振摇,静置分层后,取上层溶液进样。

5.1.2液体试样吸取试样适量(相当于含大蒜素5mg,精确至0.001g),置于分液漏斗中,加5mL 正己烷振摇提取1min ,静置(或离心)分层后,取上层溶液进样。

5.2 气相色谱参考条件5.2.1 色谱柱:HP-5(30m×0.25mm)5.2.2 柱箱温度:100℃(3min )min)10(℃200℃150℃/min 20℃/min 10−−−→−−−−→−5.2.3 进样口温度:220℃ 5.2.4 检测器温度:250℃ 5.2.5 载气:氮气(1mL/min )5.2.6 氢气:40mL/min ;空气:400mL/min 5.2.7 进样量:1μL5.3 定性分析:在参考操作条件下,以对照品与试样比较保留时间定性。

紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量

紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量
1
线性范围
反应温度和反应时间的影响
将人参总皂苷2浓
?
仪器和试剂
° 2∞
硫酸在设定的温度下反应 定时取样 测定 型和
⁄ ≅
型紫外 可
∀ 人参总
处的吸光度 ∀ 至吸光度不再升高 即可认为 反 应 已 达 完全 ∀ 结果在
2 3
见分光光度计 超声波清洗器 ⁄ 大孔吸附树脂 天津 骨胶厂 ∀ 装入玻璃层析柱 皂苷和人参 皂 苷 所 对照品 中国药品生物制品检定
3 3 3 4
蒸干 以浓硫酸溶解残渣并定容至
处的吸光度值 扣除空白样

品的吸光度 代入线性方程 计算出样品中的人参总皂 计含量 见表 取 加入

大孔树脂2 ∂ 法也可用于人参蜂王浆 !双宝素等 本方法的原理也适用于分析糖类和苷类 ∀ 我 们
收稿日期
加样回收率考察
粒双宝素胶囊 研匀 精 人参总皂苷 以人参皂苷 次 结果
口服液中人参总皂苷含量测定 ∀ 用此法分析过人参多糖及地黄中梓醇含量 结果满意 ∀
密称取 计 见表
按样品测定方法项下操作 重复测定
和 取已经在
ε 条件下 人参总皂苷彻
底反应所需的时间分别为 稳定性考察 苷反应液定时测其 在 内保持恒定 ∀
2 4

ε 水浴

的人参总皂
正丁醇 !乙醇 !浓硫酸均为分析纯 ∀ 红参 !生晒参均采 自 吉 林 西 洋 参 为 美 国 进 口 三
处的吸光度值 结果 精密称取 红参于 和
七采自云南 双宝素胶囊 正大青春宝药业有限公司 ∀
2 5
即可将人参皂苷提净 ∀ 精密称取约 样品于具塞锥形

加入量
测得量
回收率
平均回收 率

竹节参中皂苷含量测定方法的建立

竹节参中皂苷含量测定方法的建立

竹节参中皂苷含量测定方法的建立
竹节参是一种常用的中药材,含有多种有效成分,具有抗疲劳、降血糖等多种功效。

其中竹节参中的皂苷是其主要活性成分之一,具有多种生理活性。

因此,研究竹节参中皂苷的含量和测定方法是非常重要的。

竹节参中皂苷的含量测定需要一些化学试剂备齐,包括高效液相色谱系统、甲醇、乙腈、正丙醇、乙酸、醋酸、纯化水等。

具体测定方法如下:
1、样品制备
取粉末状竹节参样品5克,加入研钵中,添加30 ml甲醇,并使用超声波设备进行超声提取,超声时间为30 min。

过滤提取液,并将残渣再次提取三次,每次提取20 ml正丙醇,振荡混合5 min,离心收集上清液,将上清液混合并浓缩至5 ml,加入20 ml乙酸,在70℃水浴中加热10 min,离心获取上清液,将上清液重溶于10 ml甲醇中,过0.22 μm 的膜过滤器,待用。

取10 mg/kg、20 mg/kg、30 mg/kg、40 mg/kg、50 mg/kg浓度的竹节参提纯皂苷标准品各1 ml,加入10 ml甲醇中,溶解混合,过0.22 μm的膜过滤器,待用。

3、高效液相色谱分析
将经过上述方法制备好的竹节参样品和竹节参提纯皂苷标准品分别注入高效液相色谱系统中,以CYDN-1 C18色谱柱为分离柱,流动相为甲醇-水(75:25),流速为1.0 ml/min,测定波长为208 nm,通过测定峰面积,计算竹节参样品中皂苷的含量。

通过上述方法,可以测定竹节参中皂苷的含量,并且测定结果准确可靠。

对于竹节参的质量控制和研究开发具有重要的意义。

中国药典 2020版中人参总皂苷含量测定方法

中国药典 2020版中人参总皂苷含量测定方法

【导言】我国药典是国家药典的统称,是指对我国境内生产、流通和使用的药品质量标准的权威性规定,是保障药品质量和使用合理、安全的基本依据。

其中,人参总皂苷含量是人参药材质量的重要评价指标,其测定方法对于保证人参药材的质量具有重要意义。

本文将对我国药典2020版中人参总皂苷含量测定方法进行详细介绍。

【正文】1. 依据依据我国药典是国家药典,是依法规定的药品标准,它规定了符合标准的药品质量要求、规范药品生产、流通和使用。

人参作为一种重要的中药材,在我国药典中有着详细的质量标准,其含有的总皂苷含量是一个至关重要的指标。

2. 人参总皂苷含量的意义总皂苷是人参中的重要有效成分之一,它具有调节免疫功能、提高机体抗氧化能力、增强心肌供血量、预防心绞痛、心肌梗死等保护心脏的作用。

测定人参总皂苷含量不仅有利于评价人参的药用价值,还能为人参的质量控制提供依据。

3. 我国药典2020版中人参总皂苷测定方法我国药典2020版中,人参总皂苷的测定方法主要包括提取、净化、分离和定量测定这几个步骤。

具体操作步骤如下:3.1 溶剂选择:首先选择合适的溶剂,如乙醇、丙酮等,将人参样品粉碎成粉末状,然后用溶剂进行提取,得到提取液。

3.2 净化分离:将提取液进行净化分离,去除杂质,得到待测液。

3.3 定量测定:采用分光光度计或者高效液相色谱仪等仪器,进行人参总皂苷的定量测定,计算出含量结果。

4. 测定方法的操作要点在操作过程中,需严格控制提取温度、时间和溶剂的体积比例,避免提取效果不佳。

净化过程中也需保证分离效果,避免杂质对测定结果的影响。

测定过程中应根据仪器的要求进行参数设置,确保测定结果的准确性。

为了保证人参总皂苷含量的测定结果的可靠性和稳定性,建议重复测定并取平均值。

5. 结论我国药典2020版中的人参总皂苷测定方法,是一种全面、准确的测定方法,可以有效地评价人参药材的质量,并为制定人参制剂的合理使用提供依据。

基于该方法,人们可以对人参药材的质量进行科学评价,保证人参产品的质量和疗效。

三七皂苷含量标准

三七皂苷含量标准

三七皂苷含量标准三七,又称田七、人参三七,是五加科人参属植物,具有丰富的药用价值。

三七皂苷是三七的主要活性成分,具有抗炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。

因此,三七皂苷含量的测定对于评价三七质量具有重要意义。

本文主要对三七皂苷含量的测定方法及其标准进行研究。

一、三七皂苷含量的测定方法1. 液相色谱法(HPLC)液相色谱法是目前最常用的三七皂苷含量测定方法。

该方法具有灵敏度高、分离效果好、重复性好等优点。

常用的检测器有紫外检测器(UV)和蒸发光散射检测器(ELSD)。

根据三七皂苷的化学性质,可以选择适当的色谱柱和流动相进行分离和检测。

2. 薄层色谱法(TLC)薄层色谱法是一种常用的定性分析方法,也可以用于三七皂苷含量的初步测定。

该方法操作简单,但灵敏度和分离效果相对较低。

常用的显色剂有碘化铋钾、香草醛-硫酸等。

3. 毛细管电泳法(HPCE)毛细管电泳法是一种新型的分离分析方法,具有分离效果好、操作简单、运行成本低等优点。

该方法可以用于三七皂苷组分的分离和含量测定,但目前仍处于研究阶段。

二、三七皂苷含量标准三七皂苷含量标准是评价三七质量的重要依据。

目前,国内外尚无统一的三七皂苷含量标准。

不同国家和地区根据当地的气候、土壤、生长条件等因素,制定了相应的质量标准。

例如,中国药典规定三七中人参皂苷Rb1、Rg1和Re的含量分别不低于0.8%、0.5%和0.3%。

三、三七皂苷含量标准的影响因素1. 品种差异:不同品种的三七,其皂苷含量存在显著差异。

例如,云南三七的皂苷含量通常高于云南三七。

因此,在制定三七皂苷含量标准时,需要考虑到品种的差异。

2. 生长环境:生长环境对三七皂苷含量也有显著影响。

例如,土壤肥力、光照时间、降水量等因素都会影响三七的生长和皂苷含量。

因此,在制定三七皂苷含量标准时,需要考虑到生长环境的差异。

3. 采收时间:三七的生长周期较长,不同时间段采收的三七,其皂苷含量存在显著差异。

一般来说,种植后2-3年的三七,其皂苷含量高。

重量法测定总皂苷含量的方法

重量法测定总皂苷含量的方法

重量法测定总皂苷含量的方法
嘿,朋友们!今天咱就来讲讲这超级实用的重量法测定总皂苷含量的方法!这可真是个厉害的家伙呢!
想象一下,你就像个侦探,要找出总皂苷的含量到底有多少!而重量法就是你的秘密武器!
首先呢,你得准备好样品,这就好比战士出征前要整理好自己的装备一样重要!然后,通过一系列的操作,把总皂苷给分离出来哟!哎呀,这过程就像搭积木一样,一步步小心又谨慎。

比如说,你在溶解样品的时候,不就像在给它洗一个舒服的澡嘛!让它舒展开来,好让我们能更准确地找到总皂苷。

接着,进行沉淀呀,这就好像把小珍珠从一堆沙子里挑出来一样!嘿,是不是很神奇?等沉淀完成后,再进行过滤、洗涤、干燥,哇,每一步都不容小觑呢!
你看,这整个过程不就像是一场精彩的冒险嘛!可不是随便就能搞定的哦!“这重量法测定难不难呀?”有人可能会问。

我告诉你呀,只要你认真、
细心,就一点都不难!就像爬山一样,只要一步一个脚印,总能爬到山顶,看到美丽的风景!
经过这么一番折腾,最后就能得出总皂苷的含量啦!哇哦,是不是感觉超有成就感!
所以呀,朋友们,重量法测定总皂苷含量绝对值得一试!它就像一把钥匙,能帮你打开了解物质世界的大门!去试试吧,相信你会爱上这个神奇的方法的!。

总皂苷的测定方法

总皂苷的测定方法

总皂苷的测定方法(分光光度法)本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。

本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。

一、方法提要样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。

二、仪器1.722分光光度计。

2.PT—大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。

3.超声波振荡器。

三、试剂1.甲醇(分析纯)。

2.乙醇(分析纯)。

3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)。

4.5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至l00mL。

5.高氯酸(分析纯)。

6.冰乙酸(分析纯)。

7.人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。

8.重蒸水。

四、测定步骤1.样品处理:(1)固体样品称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL 85%乙醇,超声波振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离。

(2)液体样品含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离。

2.柱层析以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用。

3显色在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣溶解,再加0.8mL高氯酸,混匀后移入l0mL比色管中,塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出,冷却后准确加入冰乙酸5.0mL,摇匀后以1.0cm 比色皿、于560nm处与人参皂苷Re标准管同时比色。

人参中人参皂苷的提取、分离和测定

人参中人参皂苷的提取、分离和测定

人参中人参皂苷的提取、分离和测定一、本文概述二、人参皂苷的提取方法人参皂苷的提取是从人参原材料中分离和纯化目标化合物的重要步骤。

提取方法的选择直接影响皂苷的得率和纯度。

常用的提取方法包括溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法以及超临界流体提取法等。

溶剂提取法:这是最常见且相对简单的方法,主要利用人参皂苷在不同溶剂中的溶解度差异进行提取。

常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮等。

通过浸泡、回流或渗漉等方式,使人参皂苷从原材料中溶解到溶剂中,再通过蒸发溶剂得到粗提物。

微波辅助提取法:微波提取是利用微波对溶剂和原材料的加热作用,提高提取效率和速度。

微波产生的热能可以使细胞壁破裂,加速溶剂对人参皂苷的渗透和溶解,从而缩短提取时间。

超声波辅助提取法:超声波提取是通过超声波产生的空化效应、机械效应和热效应等作用,增加溶剂对原材料的穿透力,提高人参皂苷的提取率。

同时,超声波还可以破坏细胞结构,使皂苷更容易释放到溶剂中。

超临界流体提取法:超临界流体提取是利用超临界状态下的流体(如二氧化碳)作为溶剂,通过调节压力和温度来控制流体的溶解能力,从而实现对人参皂苷的高效提取。

这种方法具有提取效率高、操作温度低、对原料破坏小等优点。

在实际应用中,可以根据人参原材料的性质、目标皂苷的特点以及实验条件等因素,选择最合适的提取方法。

为了提高提取效果,还可以结合使用多种提取方法,如先用溶剂提取法得到粗提物,再用超声波或微波辅助提取法进行进一步的纯化。

三、人参皂苷的分离技术人参皂苷的分离是提取过程后的关键步骤,其主要目标是从复杂的混合物中分离出单一或特定类型的人参皂苷。

这通常涉及到一系列的色谱技术,包括液-液分配色谱、固相萃取、柱色谱、薄层色谱以及高效液相色谱(HPLC)等。

液-液分配色谱,也称为液-液萃取,是基于不同物质在两种不相溶溶剂中的溶解度差异进行分离的。

这种方法对于初步分离人参皂苷和其他杂质非常有效。

固相萃取是一种基于吸附和解吸原理的分离技术。

总皂苷的检测方法

总皂苷的检测方法

1性质 皂甙 (a o i s 又称皂 素, spn n) 是广泛存在 于植物界 的一类特殊 的甙类 , 的 它 水溶液振摇 后可生产 持久 的肥皂样 的泡沫 , 因而得名 。 根据 皂甙水解 后生 成 皂甙元 的结构, 可分 为三 萜皂甙 ( r t r e o d l a o i s 与甾体 皂甙 t i e p n i a s p n n ) ( t r i a s p n n ) 大类 组 成皂甙 的糖 常见 的有 葡 萄糖 、半乳糖 、 s eo d l a o i s 两
强 烈的 促丝 裂剂和 趋 化剂 】 。
出挥 干石 油醚后 , 用 2 O l 7%的乙醇水 溶液浸 提 4 , 转蒸发 回收 乙醇 再 0W 的 0 h旋 相, 水相 k 一 大孔 吸附树 脂柱 (0 m 8 O m 树脂床层 高1 0 m 吸附过夜 , AB 8 3m* Om , 5r ) a 经 多 次水洗 去除糖等 杂质后 , 用乙醇 水溶液洗 脱大豆 皂苷, 回收溶 剂后用 水定容
6m X2 0Il )锍 速 为 1Ol/m n检 测波长 为 17m 柱 温为室 温, m 5 I: pm I5 I I .m i: 9n:
采用 二元梯度洗 脱, 流动相 为 乙腈 一水 。 三七 总皂甙液相 色谱 定量方法 具有较 强 的针对性和 准确性 。三七 总皂甙在 p 值> , 温条件 下, H 4低 比较稳 定, 而在 强 酸高温 下受影 响较大, p 值为 3 总皂甙含 量 降低 约3 . %, 10 ℃下, 在 H 时, 25 在 0 总皂 甙含量降低 约 1 . %。三七 总皂甙在 弱酸弱碱 , 温条 件下, 25 低 比较 稳定 ,
E S - P C 定大豆 皂苷 含量测 定步骤 L D HL 测 称取 大豆胚 芽粉 ( 水分 含量 为8 8 % 2 g 用石 油醚 (0 6  ̄ 脱脂3 , .6 )0 , 3— 0 C) h 取

总皂苷的测定方法

总皂苷的测定方法

总皂苷的测定方法(分光光度法)本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。

本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。

一、方法提要样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。

二、仪器1.722分光光度计。

2.PT—大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。

3.超声波振荡器。

三、试剂1.甲醇(分析纯)。

2.乙醇(分析纯)。

3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)。

4.5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至l00mL。

5.高氯酸(分析纯)。

6.冰乙酸(分析纯)。

7.人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。

8.重蒸水。

四、测定步骤1.样品处理:(1)固体样品称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL 85%乙醇,超声波振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离。

(2)液体样品含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离。

2.柱层析以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用。

3显色在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣溶解,再加0.8mL高氯酸,混匀后移入l0mL比色管中,塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出,冷却后准确加入冰乙酸5.0mL,摇匀后以1.0cm 比色皿、于560nm处与人参皂苷Re标准管同时比色。

分光光度法测定总皂苷含量-实验流程图-李熙灿-XicanLi

分光光度法测定总皂苷含量-实验流程图-李熙灿-XicanLi

【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中,而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。

为了测定这些 皂苷的总含量,便建立了总皂苷的检测方法。

总皂苷的检测多使用分光光度法,并以某种标准品绘制 工作曲线,依该曲线所建立的回归方程,计算其含量。

【检测方法与实验流程图】【文献】 Jian Lin, Xican Li, Lu Han, Fei Li, Wenbiao Lu, Ye Bai, Dongfeng Chen Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16.【溶液配制】1. 香草醛-冰醋酸溶液(测试液)配制:精密称取25mg 香草醛,加冰醋酸定容至5mL 。

即制成5mg/mL 香草醛-冰醋酸测试液。

2. 样品液配制:将待检测的样品用甲醇溶解, 配成约5mg/mL 的样品液。

具体浓度视样品的溶解度而定, 但是必须有精确的数据。

3.齐墩果酸标准品溶液配制: 精密称取齐墩果酸1mg ,加甲醇定容至5mL ,配成0.2mg/mL 齐墩果酸标 准品溶液。

(也可以使用其他的皂苷物质,如人参皂苷 Rg3。

但必须是纯的化合物)4. 高氯酸:分析纯试剂。

5. 冰醋酸:即纯的无水乙酸(分析纯)【标准曲线绘制】(齐墩果酸)取上述齐墩果酸溶液 x g L (x=0,40,80,120,160,200),依“实验流程图”,在70C 水浴15mim 后呈桃红色。

以第一份溶液(x=0)作为空白对照,测 A 540nm 值。

以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量, 为横坐标,A 540nm 值为纵坐标,绘制标准曲线。

以此标准曲线计算,得线性回归方程。

【样品液的测定】将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液,进行实验,并测定其此 A 540nm 代入线性回归方程,即可计算出其总皂苷的含量(以齐墩果酸计) 分光光度法测定总皂苷含量:实验流程图2017.10 A 540nm 值。

人参总皂苷含量测定方法

人参总皂苷含量测定方法

人参总皂苷含量测定方法嘿,咱今儿就来唠唠人参总皂苷含量测定方法这档子事儿!你说人参,那可是好东西呀,从古至今都被人们看重。

那要怎么知道这人参里总皂苷含量有多少呢?这可就有讲究啦!咱先说说常见的一种方法,比色法。

就好像咱挑苹果,得看看它红不红,甜不甜。

比色法就是通过一些特定的试剂和人参提取液反应,然后根据颜色的变化来判断总皂苷的含量。

你想想,这就像给人参做了个特别的“体检”,能让咱清楚知道它里面的宝贝有多少呢!还有高效液相色谱法,这就好比是给人参总皂苷做了个精准的“画像”。

它能把各种不同的皂苷都分得清清楚楚,然后准确地告诉你每种的含量。

就像是把一个大拼图给完整地拼出来了,多厉害呀!再说说香草醛-硫酸法,这就好像是给人参总皂苷来了一场特别的“显色派对”。

通过香草醛和硫酸的作用,让总皂苷显现出来,然后咱就能根据颜色的深浅来判断含量啦。

每种方法都有它的特点和适用情况呢!就像咱出门穿衣服,不同场合得穿不同的衣服。

测定人参总皂苷含量也得根据具体情况选择合适的方法呀!比如说,如果样品比较复杂,那可能高效液相色谱法就更合适;要是想要快速简单地测一下,比色法可能就派上用场啦。

那咱为啥要这么在意人参总皂苷的含量呢?这还用问吗?就像咱买东西得知道它值不值那个价呀!知道了含量,才能更好地了解人参的品质和价值。

这对那些研究人参的科学家们,对那些想用好人参的人来说,可太重要啦!你说要是没有这些测定方法,咱不就像在黑暗中摸索吗?那可不行!这些方法就像是我们了解人参的“眼睛”,让我们能看清人参的真面目。

总之,人参总皂苷含量测定方法可是个大学问呢!咱得好好研究,好好利用,才能让这神奇的人参发挥出它最大的作用呀!你说是不是这个理儿呢?。

皂苷类化合物的5个鉴别反应

皂苷类化合物的5个鉴别反应

皂苷类化合物的5个鉴别反应皂苷类化合物是一类具有特殊化学结构的天然产物,广泛存在于植物中。

它们具有一系列独特的化学性质和生物活性,常被用于药物研究和工业生产中。

本文将介绍皂苷类化合物的五个鉴别反应,以帮助读者更好地了解和识别这类化合物。

一、发泡试验皂苷类化合物是一类具有良好表面活性的化合物,它们能够在水中形成稳定的泡沫。

我们可以将待测物溶解在水中,并搅拌产生气泡,观察气泡的稳定性和持久性。

如果溶液中的气泡能够长时间保持稳定且持久,很可能是皂苷类化合物。

二、胆固醇沉淀试验皂苷类化合物中的一些成员具有与胆固醇结合的能力。

我们可以将待测物溶解在氯仿中,并加入胆固醇溶液,并轻轻摇晃。

观察溶液是否出现白色或乳白色的沉淀,如果有,可能是皂苷类化合物。

三、糖试验皂苷类化合物通常含有糖基团,我们可以通过糖试验来鉴别。

将待测物溶解在水中,加入苯酚和硫酸,轻轻摇晃。

观察溶液是否出现橙红色或红色的沉淀,如果有,可能是皂苷类化合物。

四、脂肪酸酯化试验皂苷类化合物通常是糖基团与脂肪酸基团的酯化产物。

我们可以将待测物溶解在乙醇中,并加入盐酸和醇酸,加热反应。

观察溶液是否出现油脂状的沉淀,如果有,可能是皂苷类化合物。

五、表面张力测定皂苷类化合物具有良好的表面活性,我们可以通过测定其表面张力来鉴别。

将待测物溶解在水中,使用表面张力计测定溶液的表面张力。

如果溶液的表面张力较低,可能是皂苷类化合物。

通过以上五个鉴别反应,我们可以初步判断一个化合物是否是皂苷类化合物。

当然,这些方法只是初步的鉴别方法,如果需要进一步确定化合物的结构和性质,还需要进行更详细的化学分析和实验证实。

总结起来,皂苷类化合物的鉴别反应主要包括发泡试验、胆固醇沉淀试验、糖试验、脂肪酸酯化试验和表面张力测定。

这些反应能够帮助我们初步判断一个化合物是否属于皂苷类,并为进一步的研究提供基础。

对于化学研究人员和药物研发人员来说,了解和掌握这些鉴别方法非常重要,可以为他们的工作提供有力的支持。

柴胡皂苷提取和含量测定方法研究

柴胡皂苷提取和含量测定方法研究

柴胡皂苷提取和含量测定方法研究柴胡皂苷是从中草药柴胡中提取出来的一种生物活性物质,具有广泛的药理活性和广泛的应用前景。

在本文中,我们将讨论柴胡皂苷的提取和含量测定方法的研究进展。

目前,柴胡皂苷的提取方法主要分为水提取和有机溶剂提取两种。

1.水提取法水提取法是目前最常用的柴胡皂苷提取方法之一。

一般情况下,将粉碎的柴胡草加入适量的水中,然后通过不同的温度和时间来提取柴胡皂苷。

这种方法简单方便、成本低廉,但提取效率相对较低。

2.有机溶剂提取法有机溶剂提取法是另一种常用的柴胡皂苷提取方法。

通常使用的有机溶剂如乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮等,其中最常使用的是乙醇提取。

在该方法中,将粉碎的柴胡草加入适量的有机溶剂中,然后进行浸提和过滤等步骤。

这种提取方法可以提高提取效率,但需要考虑到有机溶剂的毒性和环保问题。

柴胡皂苷的含量测定也是研究的一个重要方面,目前主要采用以下几种方法。

1.高效液相色谱法高效液相色谱法是目前最常用的柴胡皂苷含量测定方法之一。

该方法通过分离和检测柴胡皂苷的分子结构,具有高分辨率和精确度。

这种方法的缺点在于需要昂贵的仪器和大量的有机溶剂,成本相对较高。

2.紫外分光光度法紫外分光光度法通过测试柴胡皂苷在特定波长下的吸收光强度,从而测定其含量。

该方法操作简单,成本低廉,适用于快速定量测定柴胡皂苷的含量。

3.荧光光谱法荧光光谱法是一种敏感的柴胡皂苷含量测定方法。

该方法利用柴胡皂苷的固有荧光特性,进行荧光光谱分析,从而测定其含量。

该方法操作简单,可以同时测定多种柴胡皂苷的含量。

总结:综上所述,柴胡皂苷的提取和含量测定方法研究是柴胡草活性成分研究的关键环节,不同的提取和测定方法有其各自的优缺点和适用范围。

因此,在选取和应用柴胡皂苷的提取和含量测定方法时,需要考虑不同的因素,并根据实际情况进行合理的选择。

皂苷测定方法.doc

皂苷测定方法.doc

1 三萜皂苷三萜皂苷主要分布在植物界的石竹科、桔梗科、五加科、豆科中。

桔梗、南沙参、党参、人参、三七、瞿麦、甘草、远志、紫菀、地榆等许多中草药都含有此类皂苷。

不同的中草药其三萜皂苷的皂苷元或活性成分不同,比如人参皂苷的皂苷元为人参皂苷Rg1、Re 和Rb[9];女贞子中三萜皂苷的皂苷元为齐墩果酸[10]。

三萜皂苷的定量测定方法主要有比色法、薄层色谱法、高效液相色谱-紫外检测器法、高效液相色谱-二极管阵列检测器法。

1.1 比色法比色法的原理是:三萜皂苷分子中缺少发色团和助色基,需要某种试剂与其反应形成发色基团后显色,在某个波长下测定其吸光度,再根据吸光度与浓度的关系(标准曲线),计算出样品的浓度,从而计算出样品中总皂苷的含量。

常见的显色剂有香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸体系或浓硫酸。

比如徐睿庸等人利用分光光度法测定青钱柳叶中总三萜皂苷的含量,所采用的显色剂就是0.3mL的50g/L 香草醛一冰醋酸与0.6mL 的高氯酸。

在显色剂与样品中的三萜皂苷反应后,80℃水浴10min,在波长550nm 处测定青钱柳叶中总三萜皂苷的吸光度,从而计算出含量。

其化学反应原理是:强酸使羟基脱水而使其双键数目增加,又经双键位移后与显色剂缩合等反应形成共轭结构,最后在酸作用下形成碳正离子盐而显色[11]。

而杨文志等人则认为显色机理是因为皂苷元中C3 和C12上的羟基与香草醛上的醛基发生反应,形成缩醛,成为新的共轭体系而显色[12]。

孔燕君则采用浓硫酸作为显色剂,分别测定了人参、三七和男壮胶囊中三萜皂苷的含量。

他认为人参皂苷分子上的糖基能被浓硫酸氧化脱水成糠醛衍生物,在60℃水浴2h 后在322nm 处有紫外吸收,测其吸光度,进而计算出人参、三七和男壮胶囊中的三萜皂苷含量[13] [14]。

1.2 薄层扫描法傅强等人依据五加科植物人参三萜皂苷中人参皂苷Rg1 在薄层板上分离效果较好和荧光分光光度法高灵敏度的特点,建立了薄层色谱-荧光分光光度法测定人参中人参皂苷Rg1 薄层色谱法。

皂苷含量测定方法

皂苷含量测定方法

皂苷含量测定方法
1. 高效液相色谱法,这就像在成分的世界里开启了一扇清晰的窗户!比如我们检测人参中的皂苷含量,通过高效液相色谱,就能把那些隐藏的皂苷清晰地找出来。

2. 比色法呀,这可是个神奇的手段!就像你能在一群颜色中精准挑出你想要的那一个。

比如检测植物提取物里的皂苷,能快速知道有多少呢!
3. 薄层色谱法呢,可以想象成是在一张大地图上寻找宝藏的标记!比如说检测某种药材里含有的皂苷,一下子就能确定它们的位置啦。

4. 分光光度法,哇哦,这简直是一把探索皂苷含量的利剑!好比在黑暗中找到闪闪发光的宝物。

像对一些含有皂苷的样品进行检测时,它就能大显身手啦。

5. 重量法,哎呀呀,这个方法就像称一称宝贝有多重一样!就拿确定某种中药里皂苷的含量来说,用重量法不就能知道个大概嘛!
6. 酶联免疫吸附测定法,哈哈,这可是如同侦探寻找线索一样厉害的方法哟!比如说去检测一些生物样本中的皂苷含量,它可在行啦。

7. 气相色谱法呢,它就像是在气流中捕捉那些关键信息!例如检测一些经过特殊处理的样品中的皂苷,靠它就能搞定呀。

8. 近红外光谱法呀,这就像拥有了一双超级眼睛,能迅速看穿皂苷的秘密呢!在快速分析某些复杂样品中的皂苷含量时,可好用了。

9. 质谱法啊,那可是如同超级显微镜一样的存在!想想对那些微量的皂苷进行检测时,它可不就是大功臣嘛!
我的观点结论:这些皂苷含量测定方法都各有其独特之处和适用场景,我们可以根据实际情况灵活选择,以获得最准确的结果。

柴胡皂苷提取与含量测定方法研究

柴胡皂苷提取与含量测定方法研究

柴胡皂苷提取与含量测定方法研究目的:探讨柴胡中有效成分柴胡总皂苷和皂苷d的提取及含量测定方法,并对样品中成分进行含量测定。

方法:以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标,分别采用紫外-可见分光光度法、HPLC法测定样品中柴胡总皂苷及皂苷d的含量。

结果:经过测定,结果显示样品柴胡总皂苷含量均在65%以上,测定波长为536nm;皂苷d含量均在11%以上,最大吸收波长为204nm。

结论:本实验所建立的提取及含量测定方法,操作简便,精密度良好,回收率合格,测定结果准确,可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

标签:柴胡;皂苷;提取;含量测定柴胡是临床常用中药,属和解剂,临床主要用于少阳证,即寒热往来,胸闷口苦等,具清热解表,和解少阳之功,有南北柴胡之分,前者为狭叶柴胡的干燥根,后者是伞形科植物柴胡的干燥根[1]。

有实验研究证明[2],柴胡根中的有效成分为柴胡皂苷,以及含有挥发油、植物甾醇等,相关的实验证实柴胡皂苷具有解热、镇痛、消炎等作用。

因此,提高柴胡制剂中柴胡有效成分的含量对提高临床疗效具有重大的指导意义。

近年来,随着科技的进步,多数实验采用各种新方法进行柴胡皂苷的提取及测定,有文献报道柴胡皂苷的主要组成为皂苷a、d、b1、b2等[3],其中,前两者具有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。

故本文主要以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标,进行柴胡皂苷的提取研究,并采用紫外-可见分光光度法及HPLC法对其含量进行测定,为提高柴胡制剂的有效成分含量及提高临床疗效打下科研基础。

现将研究情况报告如下。

实验材料试药:柴胡:购于安徽省亳州市药材公司,经相关专家鉴定为伞形科植物柴胡的干燥根(北柴胡);柴胡皂苷d对照品:购于中国食品药品鉴定研究院;屈臣氏纯净水;乙腈(色谱纯,Fisher公司);其他试剂为分析纯(甲醇、乙醇、氨水)。

柴胡总皂苷的含量测定:①检测波长:精密吸取200μL上述柴胡皂苷d 对照品溶液置于小试管中,加入100μL的对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液(0.1%),水浴(70℃)反应10min,待自然冷却后,加入4.0mL磷酸,继续反应30min。

总皂苷的含量测定方法

总皂苷的含量测定方法

总皂苷的含量测定方法宝子!今天咱们来唠唠总皂苷含量的测定方法呀。

一种常见的方法就是比色法哦。

这就像是给总皂苷找个颜色伙伴来“衡量”它呢。

通常会利用一些显色剂,让总皂苷发生显色反应。

比如说,有一些试剂和总皂苷反应后会产生特定的颜色,然后通过仪器去检测这个颜色的深浅程度。

就好比我们看东西的颜色深浅来判断它的多少一样。

在这个过程中呢,要特别注意各种反应条件,像温度呀、反应时间呀,这些小细节就像做菜时的火候和时间,掌握不好就可能影响最后的结果哦。

还有重量法呢。

这个方法听起来就很实在,就像称东西一样。

把含有总皂苷的样品经过一系列处理,让总皂苷从混合物里分离出来,然后称一称它的重量。

不过这个方法可有点小麻烦,因为要把总皂苷分离得很干净不容易,就像从沙子里挑出金子一样,得很细心才行。

高效液相色谱法(HPLC)那可是个很厉害的方法哦。

它就像一个超级精密的侦探,可以把总皂苷从复杂的样品里精准地找出来并且测定含量。

它的原理有点复杂啦,简单说就是利用不同物质在流动相和固定相之间的分配系数不同,把总皂苷和其他成分分开,然后通过检测信号来确定总皂苷的含量。

这种方法虽然很精准,但是仪器比较贵,操作也需要一定的技术水平,就像开高级跑车,得有点本事才行呢。

薄层色谱法也能用来测定总皂苷含量。

它就像是把总皂苷和其他小伙伴们放在一个特殊的跑道(薄层板)上赛跑,然后根据它们跑的位置和颜色等特征来判断总皂苷的情况。

这个方法比较直观,但是准确性可能相对前面几种方法会差一点,不过它操作起来比较简单,就像玩一个简单的小游戏一样。

宝子,这些就是总皂苷含量测定的一些常见方法啦,各有各的优缺点,就看具体的需求和条件来选择合适的方法喽。

总皂苷的测定方法

总皂苷的测定方法

A1 总皂苷的测定方法方法来源:《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)保健食品中总皂苷的测定方法(分光光度法)A1.1 试剂Amberlite-XAD-2大孔树脂,Sigma化学公司U.S.A正丁醇分析纯乙醇分析纯中性氧化铝层析用,100-200目人参皂苷Re 购自中国药品生物制品检定所香草醛溶液称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至100ml。

高氯酸分析纯冰乙酸分析纯人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10.0ml,即每毫升含人参皂苷Re2.0mg。

A1.2 仪器比色计、层析柱A1.3 试验步骤A1.3.1 试样处理A1.3.1.1 固体试样:称取1.000g左右的试样(根据试样含人参量定),置于100ml 容量瓶中,加少量水,超声30min,再用水定容至100ml,摇匀,放置,吸取上清液1.0ml进行柱层析。

A1.3.1.2 柱层析:用10mL注射器作层析管,内装3cm Amberlite-XAD-2大孔树脂,上加1cm中性氧化铝。

先用25ml70%乙醇洗柱,弃去洗脱液,再用25ml水洗柱,弃去洗脱液,精确加入1.0ml已处理好的试样溶液(见3.1),用25ml水洗柱,弃去洗脱液,用25m170%乙醇洗脱人参皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,置于60℃水浴挥干。

以此作显色用。

A1.3.1.3 显色:在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2ml5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣都溶解,再加0.8ml高氯酸,混匀后移入5ml比色管中,塞紧盖子于60℃水浴上加热10min,取出,冰浴冷却后,准确加入冰乙酸5.0ml,摇匀后,以1cm 比色池于560nm 波长处与标准管一起进行比色测定。

A1.3.1.4 标准管:吸取人参皂苷Re 标准溶液(2.0mg/ml )100μl 放蒸发皿中,放在水浴挥干(低于60℃),或热风吹干(勿使过热),以下操作从“3.2柱层析……”起,与试样相同。

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1 三萜皂苷三萜皂苷主要分布在植物界的石竹科、桔梗科、五加科、豆科中。

桔梗、南沙参、党参、人参、三七、瞿麦、甘草、远志、紫菀、地榆等许多中草药都含有此类皂苷。

不同的中草药其三萜皂苷的皂苷元或活性成分不同,比如人参皂苷的皂苷元为人参皂苷Rg1、Re 和Rb[9];女贞子中三萜皂苷的皂苷元为齐墩果酸[10]。

三萜皂苷的定量测定方法主要有比色法、薄层色谱法、高效液相色谱-紫外检测器法、高效液相色谱-二极管阵列检测器法。

1.1 比色法比色法的原理是:三萜皂苷分子中缺少发色团和助色基,需要某种试剂与其反应形成发色基团后显色,在某个波长下测定其吸光度,再根据吸光度与浓度的关系(标准曲线),计算出样品的浓度,从而计算出样品中总皂苷的含量。

常见的显色剂有香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸体系或浓硫酸。

比如徐睿庸等人利用分光光度法测定青钱柳叶中总三萜皂苷的含量,所采用的显色剂就是0.3mL的50g/L 香草醛一冰醋酸与0.6mL 的高氯酸。

在显色剂与样品中的三萜皂苷反应后,80℃水浴10min,在波长550nm 处测定青钱柳叶中总三萜皂苷的吸光度,从而计算出含量。

其化学反应原理是:强酸使羟基脱水而使其双键数目增加,又经双键位移后与显色剂缩合等反应形成共轭结构,最后在酸作用下形成碳正离子盐而显色[11]。

而杨文志等人则认为显色机理是因为皂苷元中C3 和C12上的羟基与香草醛上的醛基发生反应,形成缩醛,成为新的共轭体系而显色[12]。

孔燕君则采用浓硫酸作为显色剂,分别测定了人参、三七和男壮胶囊中三萜皂苷的含量。

他认为人参皂苷分子上的糖基能被浓硫酸氧化脱水成糠醛衍生物,在60℃水浴2h 后在322nm 处有紫外吸收,测其吸光度,进而计算出人参、三七和男壮胶囊中的三萜皂苷含量[13] [14]。

1.2 薄层扫描法傅强等人依据五加科植物人参三萜皂苷中人参皂苷Rg1 在薄层板上分离效果较好和荧光分光光度法高灵敏度的特点,建立了薄层色谱-荧光分光光度法测定人参中人参皂苷Rg1 薄层色谱法。

展开剂为氯仿:醋酸乙酯:甲醇:水=16∶2∶11∶12 的下层液体,显色剂为10的硫酸乙醇溶液,喷雾显色,95℃水浴中加热5min,在双波长薄层扫描仪下扫描,激发波长Ex=320nm,发射波长Em=400nm。

实验表明:薄层色谱显色是定量的关键,用10%硫酸乙醇溶液喷雾显色要均匀,否则定量洗脱后测定荧光强度值有较大差异。

在105℃加热5min,效果良好[15]。

1.3 高效液相色谱法近年来,随着高效液相色谱仪的普及,越来越多的皂苷成分开始使用到了这项技术。

由于它能有效处理非挥发性和极性较强的化合物,可以较好分离出主成分峰和杂质峰,能反映样品的真实含量,方法简便、准确、灵敏有利于产品质量的控制,从而使它成为了测定皂苷的一种最有效最常用的方法,但HPLC 仪器昂贵,而且要求有对照品。

1.3.1 高效液相色谱-紫外检测器法该方法是HPLC 中测定有紫外吸收的皂苷常用方法,广泛应用于三萜皂苷如人参皂苷、女贞子中齐墩果酸含量的测定中。

紫外检测器由于对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感,所以还能用于梯度淋洗,但它非通用检测器,它要求被测物质有较强的紫外吸收或本身无紫外吸收但转化后有吸收紫外线的基团。

战佩英等人使用岛津高效液相色谱仪-紫外检测器(SPD-10A UV-V IS)工作站对女贞子药材中的齐墩果酸进行了含量测定。

色谱条件是:C18 色谱柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.05%乙酸胺水溶液(86:14);流速:0.8mL /min;检测波长:220nm;柱温25℃[10]。

1.3.2 高效液相色谱-二极管阵列检测器法戚志华等人采用600 高效液相色谱仪-2996 二极管阵列检测器对不同产地、不同生长期的女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量进行了测定。

其实验色谱条件如下:色谱柱:LichrospherC18(250mm×416mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇-水-磷酸-三乙胺(50∶30∶20∶0;流速:1mL·min-1;检测波长:205nm;柱温:室温;进样量:20μL[16]。

Fang LIU 等人对绞骨蓝皂苷的高效液相色谱技术进行了研究。

他们认为,皂苷的紫外吸收较弱,紫外检测器设置的最大吸收波长一般在203nm 左右,在这个波长范围内,黄酮和色素等杂质也有紫外吸收,从而带来杂峰。

因此,他们选用了二极管阵列检测器作为检测工具[17]。

其色谱条件是:Agilent 1100 系列工作站,G1315A 二极管阵列检测器,AlltimaC18 柱(4.6mm×250mm,5mm),流动相:水:乙腈梯度洗脱(5—100%),流速0.8ml/min,波长203nm,进样量20ml。

Muhammad K.Saeed 等人对中国粗榧提取物进行了高效液相色谱分析,他们为了获得尽可能多的可检测到的强峰,而选用了二极管阵列检测器,这样一来,所有峰的光谱就都可以被检测显示出来。

他们的色谱条件是:HPLC Elite P230 系列工作站,二极管阵列检测器(DAD-230),Kromasil C18 柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相是水-乙腈(1:1),5~40min 内线性洗脱,流速0.7ml/min,波长254nm,进样量10μl[18]。

二极管阵列检测器(diode-array detector,DAD)是先让所有波长的光都通过流动池,然后通过一系列分光技术,使所有波长的光在接受器上被检测。

和普通的紫外—可见分光检测器相比,二极管阵列检测器进入流动池的光不再是单色光。

它具有以下优点:⑴可极为方便地得任意波长的色谱图;⑵可得任意时间的光谱图,相当于与紫外联用;⑶提供组分的定性信息。

也就是说,二极管阵列检测器不仅可用于定量检测,还具有辅助定性、峰纯度评估等功能,可得到立体的光谱-色谱图,对有特征紫外吸收的化合物的定性很有帮助。

1.3.3 高效液相色谱-蒸发光散射检测器法蒸发光散射检测器(evaporative light-scattering detector,ELSD) 是一种基于溶质的光散射性质的通用检测器,由雾化器、加热漂移管(溶剂蒸发室)、激光光源和光检测器(光电转换器)等部件构成。

流动相由热气流使之热气化喷雾,再进入加热管,溶剂在加热管中挥发。

被分析检测的物质颗粒通过一束狭窄的散射光由光电倍增管收集,色谱柱流出液导入雾化器,被载气(压缩空气或氮气)雾化成微细液滴,液滴通过加热漂移管时,流动相中的溶剂被蒸发掉,只留下溶质,激光束照在溶质颗粒上产生光散射,光收集器收集散射光并通过光电倍增管转变成电信号。

ELSD 的响应取决于被分析的质粒的数量和大小,而不依赖于被测物的光学特性。

ELSD 可消除因温度变化引起的基线漂移,即使是在梯度洗脱时也能提供平稳的基线。

和紫外检测器相比,它排除了用UV 检测器时的溶剂干扰,大大地提高了分离效果。

和二极管阵列检测器相比,蒸发光散射检测器基线噪音小,不受梯度影响,能够获得较好的峰形,且仅对不挥发被分析物质产生响应,因此杂质峰较少。

和示差折光检测器相比,它的基线漂移不受温度影响,信噪比,高灵敏度比RID 高二个数量级,且与梯度洗脱兼容。

对无紫外吸收或仅有紫外末端吸收的物质如糖类、皂苷类,蒸发光散射检测器具有良好的稳定性,较高的灵敏度和重现性。

因此,越来越多的中草药中皂苷类成分的测定使用到了蒸发光散射检测器。

王举涛等人用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法对常用中药黄芪中的功效成分黄芪甲苷进行了含量测定。

由于黄芪甲苷仅在200 nm 处有弱的末端吸收,因而操作条件十分严格,噪音对结果影响较大,灵敏度也较差;如果用柱前衍生化高效液相色谱-紫外检测器进行测定,虽可克服黄芪甲苷仅在200nm 处有弱的末端吸收的弱点,但试验结果表明操作繁琐,重现性差。

而高效液相色谱-蒸发光散射检测器进行测定黄芪甲苷,不受流动相溶剂的干扰,不要求被检测组分特定的化学结构,亦可用于不挥发性成分的检测。

试验结果表明分离度好、干扰少、前处理简便。

灵敏度、稳定性及重现性均符合含量测定要求。

其色谱条件如下:色谱柱:ODS 柱(4.6mm×150mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-水(40∶60),流速:1.0ml/min;漂移管温度:105℃,载气流速为2.8 L/min[19]。

2 甾体皂苷甾体皂苷主要存在于薯蓣科、百合科植物中,如各种薯蓣、七叶一枝花、土茯苓、知母、麦冬等。

甾式皂苷因可作为合成甾体激素的原料而有重要意义。

不同的中草药其甾体皂苷的皂苷元或活性成分不同,比如知母、天冬中甾体皂苷的皂苷元主要为菝葜皂苷元[20] [21];黄姜或盾叶薯蓣中甾体皂苷的主要皂苷元则为薯蓣皂苷元[22] [23]。

甾体皂苷的定量测定方法主要有比色法、高效液相色谱-示差折光检测器法、高效液相色谱-蒸发光散射检测器法。

2.1 比色法比色法测定甾体皂苷的含量其原理同三萜皂苷相同,但因其化学结构与三萜皂苷不同,故所选用的显色剂不同。

一般来说,测定总甾体皂苷的显色剂是浓硫酸或香草醛-冰乙酸溶液和高氯酸。

薛小娟等人利用知母中菝葜皂苷元能与浓硫酸发生显色反应的原理,通过测定总皂苷水解产物中菝葜皂苷元的含量来测定知母总皂昔含量[24]。

李敏等人在测定天冬中总皂苷含量时,对不同的显色剂;①0.2ml 香草醛-冰醋酸和0.8ml 高氯酸;②8%香草醛-乙醇液和77%硫酸;③高氯酸;④94%硫酸进行了比较,发现高氯酸的显色效果较好[21]。

总的来说,比色法的特点是:①方法灵敏,但显色试剂的专属性较差,通常用于总皂苷的测定;②要求有特定的显色剂;③要选择合适的对照品。

2.2 高效液相色谱法-二极管阵列检测器法都述虎等人通过采用waters 高效液相色谱仪和996二极管阵列检测器(DAD)对穿龙薯蓣总皂苷中薯蓣皂苷元含量进行测定,建立了反相高效液相色谱法测定穿龙薯蓣总皂苷中薯蓣皂苷元的含量的方法[25]。

色谱条件如下:Bondapak C18 柱,甲醇为流动相,流速1.0ml /min,检测波长208nm。

刘中博等人同样采用高效液相色谱仪,2996 型和二级管阵列检测器,对薯蓣属植物有效成分甾体皂苷中的原薯蓣皂苷进行了定,该方法不仅灵敏度高、专属性强、操作简单易行,而且将质量控制与活性成分相结合。

色谱条件如下:色谱柱为XterraTM ODS(250mm×416mm,5μm),以乙腈-水(27:73)为流动相,体积流量110mL /min,柱温35℃,检测波长203nm[26]。

2.3 高效液相色谱-示差折光检测器法示差折光检测器(differential refractometers detector,RID)是除紫外检测器之外应用最多的检测器。

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